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1、(10)授权公告号 CN 101810651 B (45)授权公告日 2011.08.17 CN 101810651 B *CN101810651B* (21)申请号 201010132551.5 (22)申请日 2010.03.25 A61K 36/185(2006.01) A61K 9/19(2006.01) A61K 9/16(2006.01) A61K 9/48(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 131/00(2006.01) (73)专利权人 赵正福 地址 200060 上海市普陀区常德路 1158 弄 10 号 1303 室 (72)发明人 赵正福。
2、 (74)专利代理机构 上海泰能知识产权代理事务 所 31233 代理人 黄志达 谢文凯 CN 1237452 A,1999.12.08, 权利要求 1. CN 1957773 A,2007.05.09, 权利要求 1. CN 1895302 A,2007.01.17, 实施例 1-3. CN 1785057 A,2006.06.14, 权利要求 2. (54) 发明名称 具有抑制肿瘤作用的猕猴桃冷冻干燥果素制 品的制备方法 (57) 摘要 本发明涉及一种具有抑制肿瘤作用的猕猴桃 冷冻干燥果素制品的制备方法， 包括 ： (1) 将中华 猕猴桃果或秦美猕猴桃果去皮， 打成浆， 果汁浆 经冷冻、 。
3、升华、 干燥后， 制得冻干粉 ； (2) 猕猴桃果 皮水煎二次， 合并二次煎液， 过滤， 滤液浓缩至比 重 1.15-1.8， 加乙醇至含醇量 75-80， 滤取沉 淀， 抽干， 洗涤， 真空干燥， 粉碎， 即得猕猴桃多糖 ； (3) 将猕猴桃果汁冻干粉和多糖填充胶囊制得胶 囊剂或加入可溶性麦芽糊精制成颗粒剂即可。该 制备方法在低温真空下操作， 保留了猕猴桃果汁 内的全面营养和活性成分， 制成颗粒和胶囊， 浓缩 了猕猴桃的应用活性成分， 服用剂量小， 抑制肿瘤 细胞作用明显， 为广大肿瘤患者提供优良便利的 抗癌辅助治疗保健品。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 康旭亮 (19)。
4、中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 5 页 CN 101810651 B1/1 页 2 1. 一种具有抑制肿瘤作用的猕猴桃冷冻干燥果素制品的制备方法， 包括 ： (1) 猕猴桃果汁冻干粉 将中华猕猴桃果或秦美猕猴桃果去皮， 打成浆， 果汁浆预冻至 -40 -45， 2-3 小时， 真空度达 0.1mmHg， 关闭冷冻机， 升华干燥时保持真空， 干燥升温至 -20 -15， 控制时间 为 18-24 小时， 再干燥升温至 20 25， 保持 2 3 小时， 即得冻干粉 ； (2) 猕猴桃多糖 猕猴桃果皮水煎二次， 第一次 2-3 小时， 第二次 1-2 小。
5、时， 合并二次煎液， 过滤， 滤液浓 缩至比重 1.15-1.8， 加乙醇至含醇量 75-80 (v/v)， 滤取沉淀， 抽干， 用乙醇洗涤一次， 真 空干燥， 粉碎， 即得 ； (3) 制剂 颗粒剂 ： 猕猴桃果汁冻干粉 600-1000g 猕猴桃多糖 400-600g 可溶性麦芽糊精 1400-2000g 用法 ： 3g/ 袋， 每次一包， 40的温开水冲服， 一日二次 ； 胶囊剂 ： 猕猴桃果汁冻干粉 300g 猕猴桃多糖 200g 混匀， 填充 1000 粒胶囊， 每粒 500mg ； 用法 ： 每次 3 粒， 口服， 一日二次。 权 利 要 求 书 CN 101810651 B1/5。
6、 页 3 具有抑制肿瘤作用的猕猴桃冷冻干燥果素制品的制备方法 技术领域 0001 本发明属猕猴桃冷冻干燥果素制剂的制备领域， 特别是涉及一种具有抑制肿瘤作 用的猕猴桃冷冻干燥果素制品的制备方法。 背景技术 0002 猕猴桃 ( 中华猕猴桃、 秦美猕猴桃等 )， 是公认的保健佳果， 猕猴桃是一种藤本果 树， 别名有刺梨、 毛梨、 奇异果等， 种类繁多。猕猴桃原产于中国， 常用的是中华猕猴桃和秦 美猕猴桃等品种， 明代药学家李时珍认为它 “其形如梨， 其色如桃， 而猕猴喜食” 。 猕猴桃， 其 味甘甜， 清香多汁， 是营养颇高的保健水果。猕猴桃中含有较强的抗体内自由基氧化物质， 能阻断致癌物 N-。
7、 亚硝基码啉的形成， 还能增强 NK 细胞和促进巨噬细胞吞噬的功能。 0003 直至目前， 对猕猴桃作为保健食品的加工研究， 已有很多的方法和产品。如 ： CN02129262.0 的专利 “一种猕猴桃抗衰老口服液” 、 CN96120910.0 的专利 “防癌野生猕猴桃 维他命饮品及其制备工艺方法” 等， 都是将猕猴桃果汁与其他的营养物质维生素等调配而 成， 但对猕猴桃本身的营养活性物质保鲜及功能的研究不足， 不便于保存、 携带和服用， 难 以达到更好的保健功能。 发明内容 0004 本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抑制肿瘤作用的猕猴桃冷冻干燥果 素制品的制备方法， 该制备方法采用先进。
8、的技术， 在低温真空下， 将果汁内的水分升华干 燥， 保留了猕猴桃果汁内的全面营养和活性成分， 同时将猕猴桃果皮提取活性的多糖成分， 制成颗粒和胶囊， 浓缩了猕猴桃的应用活性成分， 服用剂量小， 抑制肿瘤细胞作用明显， 为 广大肿瘤患者提供优良便利的抗癌辅助治疗保健品。 0005 本发明的一种具有抑制肿瘤作用的猕猴桃冷冻干燥果素制品的制备方法， 包括 ： 0006 (1) 猕猴桃果汁冻干粉 0007 将中华猕猴桃果或秦美猕猴桃果去皮， 打成浆， 果汁浆预冻至-40-45， 2-3小 时， 真空度达0.1mmHg， 关闭冷冻机， 升华干燥时保持真空， 干燥升温至-20-15， 控制时 间为 18。
9、-24 小时， 再干燥升温至 20 25， 保持 2 3 小时， 即得冻干粉 ； 0008 (2) 猕猴桃多糖 0009 猕猴桃果皮水煎二次， 第一次 2-3 小时， 第二次 1-2 小时， 合并二次煎液， 过滤， 滤 液浓缩至比重 1.15-1.8， 加乙醇至含醇量 75-80 (v/v)， 滤取沉淀， 抽干， 用乙醇洗涤一 次， 真空干燥， 粉碎， 即得 ； 0010 (3) 制剂 0011 颗粒剂 ： 0012 猕猴桃果汁冻干粉 600-1000g 0013 猕猴桃多糖 400-600g 0014 可溶性麦芽糊精 1400-2000g 说 明 书 CN 101810651 B2/5 页 。
10、4 0015 用法 ： 3g/ 袋， 每次一包， 40的温开水冲服， 一日二次 ； 0016 胶囊剂 ： 0017 猕猴桃果汁冻干粉 300g 0018 猕猴桃多糖 200g 0019 混匀， 填充 1000 粒胶囊， 每粒 500mg ； 0020 用法 ： 每次 3 粒， 口服， 一日二次。 0021 有益效果 0022 本发明的制备方法采用先进的技术， 在低温真空下， 将果汁内的水分升华干燥， 保 留了猕猴桃果汁内的全面营养和活性成分， 同时将猕猴桃果皮提取活性的多糖成分， 制成 颗粒和胶囊， 浓缩了猕猴桃的应用活性成分， 服用剂量小， 抑制肿瘤细胞作用明显， 为广大 肿瘤患者提供优良便。
11、利的抗癌辅助治疗保健品。 具体实施方式 0023 下面结合具体实施例， 进一步阐述本发明。 应理解， 这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。 此外应理解， 在阅读了本发明讲授的内容之后， 本领域技术人 员可以对本发明作各种改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。 0024 实施例 1 0025 (1) 猕猴桃果汁冻干粉 0026 将 50kg 的中华猕猴桃果 ( 市售 ) 去皮， 打成浆， 果汁浆预冻至 -40， 2 小时， 开启 真空泵， 真空度达 0.1mmHg， 关闭冷冻机， 升华干燥时保持真空， 干燥室缓缓升温至 -20， 约 24 小时 。
12、； 再干燥时升温至 25， 保持 2 小时， 冷冻干燥物， 粉碎， 即得。 0027 (2) 猕猴桃多糖 0028 猕猴桃果皮水煎二次， 第一次 2 小时， 第二次 1.5 小时， 合并二次煎液， 过滤， 滤液 浓缩至比重 1.15， 加乙醇至含醇量 75 (v/v)， 滤取沉淀， 抽干， 用乙醇洗涤一次， 真空干 燥， 粉碎， 即得。 0029 实施例 2 0030 (1) 猕猴桃果汁冻干粉 0031 将 50kg 的秦美猕猴桃果 ( 市售 ) 去皮， 打成浆， 果汁浆预冻至 -45， 3 小时， 开启 真空泵， 真空度达 0.1mmHg， 关闭冷冻机， 升华干燥时保持真空， 干燥室缓缓升温。
13、至 -15， 约 18 小时 ； 再干燥时升温至 20， 保持 3 小时， 冷冻干燥物， 粉碎， 即得。 0032 (2) 猕猴桃多糖 0033 猕猴桃果皮水煎二次， 第一次 3 小时， 第二次 2 小时， 合并二次煎液， 过滤， 滤液浓 缩至比重 1.8， 加乙醇至含醇量 80 (v/v)， 滤取沉淀， 抽干， 用乙醇洗涤一次， 真空干燥， 粉 碎， 即得。 0034 实施例 3 0035 颗粒剂制法 0036 配方 ： 0037 猕猴桃果汁冻干粉 1000g( 实施例 1 制备 ) 说 明 书 CN 101810651 B3/5 页 5 0038 猕猴桃皮多糖 600g( 实施例 1 制备。
14、 ) 0039 可溶性麦芽糊精 1400g 0040 取可溶性麦芽糊精 20g， 制成糊浆， 余下糊精和其他物料充分混匀， 用糊浆制粒， 真 空干燥 ( 低于 40 )， 整粒， 分装 3g/ 袋。 0041 用法 ： 每次一包， 温开水 (40左右 ) 冲服， 一日二次。 0042 胶囊剂制法 0043 猕猴桃果汁冻干粉 300g( 实施例 1 制备 ) 0044 猕猴桃皮多糖 200g( 实施例 1 制备 ) 0045 以上物料充分混匀， 填充 1000 粒胶囊， 每粒 500mg。 0046 用法 ： 每次 3 粒， 口服， 一日二次。 0047 实施例 4 0048 颗粒剂制法 004。
15、9 配方 ： 0050 猕猴桃果汁冻干粉 600g( 实施例 2 制备 ) 0051 猕猴桃皮多糖 400g( 实施例 2 制备 ) 0052 可溶性麦芽糊精 2000g 0053 取可溶性麦芽糊精 20g， 制成糊浆， 余下糊精和其他物料充分混匀， 用糊浆制粒， 真 空干燥 ( 低于 40 )， 整粒， 分装 3g/ 袋。 0054 用法 ： 每次一包， 温开水 (40左右 ) 冲服， 一日二次。 0055 胶囊剂制法 0056 猕猴桃果汁冻干粉 300g( 实施例 2 制备 ) 0057 猕猴桃皮多糖 200g( 实施例 2 制备 ) 0058 以上物料充分混匀， 填充 1000 粒胶囊，。
16、 每粒 500mg。 0059 用法 ： 每次 3 粒， 口服， 一日二次。 0060 实施例 5 0061 猕猴桃果素样品对淋转、 NK 自然杀伤细胞的影响 0062 1. 实验目的 ： 体外测定猕猴桃果素对淋转、 NK 细胞的影响 0063 2. 实验动物 ： C57BL/6 小鼠 0064 3. 实验样品 ： (1) 猕猴桃果冻干粉 (2) 猕猴桃皮多糖 (3) 猕猴桃冻干粉 3 份 + 猕 猴桃皮多糖 2 份的混合物 0065 4. 实验指标 ： (1) 小鼠淋巴细胞增殖 ( 淋转 )， (2)NK 自然杀伤 0066 5. 样品浓度 ： 0.001mg/ml， 0.01mg/ml， 。
17、0.1mg/ml， 1mg/ml 用培养基稀释 0067 6. 实验结果 ： 见表 1， 表 2。 0068 表 1 猕猴桃果素对淋巴细胞增殖的影响(Xsd) 0069 果汁冻干粉 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 SI 25184800.95 3127568 1.18 4012557* 1.52 4145670* 1.57 说 明 书 CN 101810651 B4/5 页 6 皮多糖 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 SI 2406142 0.91 2804148 1.07 270577。
18、 1.02 353574* 1.33 混合粉 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 SI 2616124 0.99 2839501 1.07 3357966 1.27 3523205* 1.33 对照组 CPM 值 2648170 0070 与对照组比较 ： *P 0.05 ；*P 0.01 0071 表 2 猕猴桃果素对 NK 活性的影响(Xsd) 0072 果汁粉 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 PI( ) 11730343 119801313 10646425 9522675 0.99 。
19、多糖 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 PI( ) 9936703 80861033 15.92 75411161* 21.57 86501056 10.06 混合物 0.001mg/ml 0.01mg/ml 0.1mg/ml 1mg/ml CPM 值 PI( ) 9975994 95241222 8555247* 11.04 8810592 8.39 0073 注 ： (1)SI 样品 CPM 值 / 对照组 CPM 值， SI 值 1 表明对小鼠淋巴细胞增殖为 指标的细胞免疫有促进作用， SI 值 1 为抑制作用 ； 0074 (2)PI。
20、 表示 NK 细胞活性， PI( ) ( 对照组掺入 CPM 值 - 样品掺入 CPM 值 )/ 对 照组掺入 CPM 值。 0075 实施例 5 0076 猕猴桃果素对 C57BL/6 小鼠抗 Lewis 肺癌的作用研究 0077 1. 实验目的 ： 观察猕猴桃果素不同剂量对小鼠 C57BL/6Lewis 肺癌抗肿瘤作用。 0078 2. 受试药物 ： 猕猴桃果素 0079 3. 实验动物 ： 0080 来源和种属 ： C57BL/6， 由上海斯莱克动物责任有限公司提供。 0081 合格证号 ： SCXK( 沪 )2003-003 0082 体重 ： 18-20 克 0083 性别 ： 雌性。
21、 说 明 书 CN 101810651 B5/5 页 7 0084 4. 临床剂量设计 ： 0085 (1) 猕猴桃果素低剂量为 50mg/kg， 高剂量为 150mg/kg。 0086 5. 给药途径及容量 ： 口服， 0.5ml/20g。 0087 6. 移植性肿瘤 ： Lewis 肺癌操作规范传代维持 0088 7. 实验步骤和方法 0089 在超净实验条件下取生长良好的 Lewis 肺癌， 用生理盐水按 1 6 稀释， 制备成细 胞匀浆悬液， 每只小鼠右侧腋皮下接种 0.2ml， 随机分组， 每组 10 只， 设猕猴桃果素高、 低二 个剂量组， 环磷酰胺(CTX， ip2)对照组， 次。
22、日起给予不同药物， 连续灌胃7天， 停药后第二 天脱颈处死动物， 解剖取瘤块， 比较各剂量组瘤重。肿瘤抑制率公式如下 ： 0090 肿瘤抑制率 ( ) ( 对照组平均瘤重 - 给药组平均瘤重 )/ 给药组平均瘤 重 100 0091 8. 实验结果 ： 0092 猕猴桃果素 ： 低剂量抑瘤率为 37.20 ； 高剂量为 51.22。 0093 表 3 藤梨根提取物对小鼠 Lewis 肺癌的抑瘤作用 0094 组别 剂量 (g/kg) 动物数 始终 瘤重 (g) (XSD) 抑瘤率 ( ) 空白对照 10 10 1.640.53 猕猴桃果素 L 0.05 10 10 1.030.43* 37.20 猕猴桃果素 H 0.15 10 10 0.800.49* 51.22 CTX 0.1 10 10 0.180.07* 89.02 0095 实施例 6 0096 猕猴桃果素体外抗肿瘤研究 0097 表 4 对各细胞株的体外增殖抑制作用 0098 说 明 书 。