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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710914788.0 (22)申请日 2017.09.30 (71)申请人 深圳靶向基因技术有限公司 地址 518000 广东省深圳市龙岗区平湖街 道华南大道一号华南国际皮革皮具原 辅料物流区 （二期） 6层6G013-6G017号 (72)发明人 乌林奇 (74)专利代理机构 北京高沃律师事务所 11569 代理人 刘奇 (51)Int.Cl. A61K 33/26(2006.01) A61K 33/06(2006.01) A61K 33/30(2006.01) A61。
2、K 33/04(2006.01) A61K 33/32(2006.01) A61K 33/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 31/7048(2006.01) (54)发明名称 一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合 物 (57)摘要 本发明涉及一种靶向提高p53抑癌基因表达 的活性复合物， 所述活性复合物由包括以下组分 的原料螯合获得： 花青苷和金属离子； 所述金属 离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+。 从花青苷对有害自由基消除、 参与酶 催化反应的多种矿物元素离子及维生素。
3、辅助因 子(Cofacter(s)、 P53作用靶标基质金属蛋白酶 MMP、 缺氧诱导因子HIF、 MDM2锌指蛋白(结构易被 重金属离子篡改)、 miRNA切割酶Dicer的调控入 手， 对P53基因进行 “围靶” (Encircle Target)调 节， 达到控制癌细胞发展， 诱导癌细胞衰老和死 亡。 权利要求书1页 说明书10页 CN 107569514 A 2018.01.12 CN 107569514 A 1.一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物， 其特征在于， 所述活性复合物由包括 以下组分的原料螯合获得： 花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2。
4、+、 Se2+、 Mg2 +、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 2.一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述活性复合物溶 液的溶剂为水， 溶质包括花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 3.根据权利要求2所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述花青苷在活性复合物溶液 中的浓度为1100mg/ml。 4.根据权利要求2或3所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述花青苷为植物提取花 青苷， 所述植物包括紫甘薯、 葡萄。
5、、 血橙、 红球甘蓝、 蓝莓、 茄子、 樱桃、 红莓、 草莓、 桑葚、 山楂 和牵牛花中的一种或几种。 5.根据权利要求4所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述植物提取花青苷中花青苷 的质量含量为350。 6.根据权利要求2所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述金属离子在活性复合物溶 液中的浓度如下： Fe2+的浓度为0.10.4mg/ml， Ca2+的浓度为0.220mg/ml， Zn2+的浓度为 0.040.38mg/ml， Se2+的浓度为0.00010.004mg/ml， Mg2+的浓度为0.47mg/ml， Mn2+的浓 度为0.00040.06mg/ml， Mo2+的浓度为。
6、0.00020.007mg/ml， K+的浓度为0.4112.5mg/ ml， Rb+的浓度为0.00040.0952mg/ml， Li+的浓度为0.00040.012mg/ml。 7.根据权利要求6所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述金属离子在活性复合物溶 液中的浓度如下： Fe2+的浓度为0.20.3mg/ml， Ca2+的浓度为0.515mg/ml， Zn2+的浓度为 0.150.28mg/ml， Se2+的浓度为0.00020.003mg/ml， Mg2+的浓度为1.56mg/ml， Mn2+的浓 度为0.010.05mg/ml， Mo2+的浓度为0.00080.006mg/ml。
7、， K+的浓度为5100mg/ml， Rb+的 浓度为0.0020.08mg/ml， Li+的浓度为0.0010.012mg/ml。 8.根据权利要求2所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述金属离子来源于以矿物质 提纯的活性离子水。 9.根据权利要求2所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述金属离子来源于富含金属 离子的植物提取物， 包括Fe2+提取物、 Ca2+提取物、 Zn2+提取物、 Se2+提取物、 Mg2+提取物、 Mn2+ 提取物、 Mo2+提取物、 K+提取物、 Rb+提取物和Li+提取物。 10.根据权利要求9所述的活性复合物溶液， 其特征在于， 所述Fe2+提取物为樱桃。
8、提取 物， 所述Ca2+提取物包括质量比为(0.91.1)： (0.91.1)海带提取物和芹菜提取物； 所述 Zn2+提取物包括质量比(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)的黄秋葵提取物、 蓝莓提取物 和雄蚕蛾提取物； 所述Se2+提取物、 Rb+提取物为海藻提取物； 所述Mg2+提取物包括质量比 (0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)的榛子提取物、 绿豆提取物和百里香提取物； 所述Mn2+ 提取物包括质量比(0.91.1)： (0.91.1)的紫锥菊提取物和绿茶提取物； 所述Mo2+提取物 为大豆提取物； 所述K+提取物包括质量比(0.91.1)： (0.。
9、91.1)： (0.91.1)： (0.9 1.1)的海带提取物、 香蕉提取物、 薄荷叶提取物和冬瓜提取物； 所述Li+提取物为罗布麻木 茶提取物。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 107569514 A 2 一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物 技术领域 0001 本发明涉及靶向抑癌药物技术领域， 具体涉及一种靶向提高p53抑癌基因表达的 活性复合物。 背景技术 0002 癌症是一种基因病， 是在外环境因素作用下， 人体细胞内在多种前癌基因被激活 和抑癌基因失活的多阶段长期演变的过程。 在精准医疗技术成熟之前， 癌症的主要治疗手 段是放疗、 化疗和手术， 尽管医学家们不断完善。
10、这三大治疗手段， 但许多癌症患者仍然难以 得到治愈。 其中一个重要原因是基因突变的微环境没有得到根本干预。 随着基因测序技术 的成熟， 特别是酶活性控制、 DNA生化机制的清晰化， 基因靶向干预成为精准医疗的重要发 展方向。 0003 据 科学 杂志2017年8月发表的一份研究表明， 有17种癌症的基因表达有很大的 重叠。 这意味着对于一些患者来说， 他们的基因表达有可能会更加贴近于其他类型的癌症， 而不是本身所患的癌症。 0004 p53是一种肿瘤抑制基因(Tumor suppressorgene)， 由这种基因编码的蛋白质 (protein)是一种转录因子(transcriptional 。
11、factor)， 其控制着细胞周期的启动。 p53基 因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因， 引起肿瘤形成或细胞转化的p53蛋白是p53基 因突变的产物， 是一种肿瘤促进因子， 它可以消除正常p53的功能。 在50以上的恶性肿瘤 患者(包括肝癌、 乳腺癌、 膀胱癌、 胃癌、 结肠癌、 前列腺癌、 软组织肉瘤、 卵巢癌、 脑瘤、 淋巴 细胞肿瘤、 食道癌、 肺癌、 成骨肉瘤等)体内会出现p53基因的突变。 对P53这个在各癌种中相 关性、 重叠率最高的基因表达进行有效调节， 对于靶向治疗具有一定的指导意义。 0005 目前对于p53靶向治疗的药物研究较少， 针对p53基因尚没有一种有效、 多位。
12、点靶 向干预的药物。 发明内容 0006 本发明的目的在于提供一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物。 0007 本发明提供了一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物， 所述活性复合物由 包括以下组分的原料螯合获得： 花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 0008 本发明还提供了一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物溶液， 所述活性复 合物溶液的溶剂为水， 溶质包括花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn。
13、2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 0009 优选的， 所述花青苷在活性复合物溶液中的浓度为1100mg/ml。 0010 优选的， 所述花青苷为植物提取花青苷， 所述植物包括紫甘薯、 葡萄、 血橙、 红球甘 蓝、 蓝莓、 茄子、 樱桃、 红莓、 草莓、 桑葚、 山楂和牵牛花中的一种或几种。 0011 优选的， 所述植物提取花青苷中花青苷的质量含量为350。 说 明 书 1/10 页 3 CN 107569514 A 3 0012 优选的， 所述金属离子在活性复合物溶液中的浓度如下： Fe2+的浓度为0.1 0.4mg/ml， Ca2+的浓度为0.220mg/ml， Z。
14、n2+的浓度为0.040.38mg/ml， Se2+的浓度为 0.00010.004mg/ml， Mg2+的浓度为0.47mg/ml， Mn2+的浓度为0.00040.06mg/ml， Mo2+的 浓度为0.00020.007mg/ml， K+的浓度为0.4112.5mg/ml， Rb+的浓度为0.0004 0.0952mg/ml， Li+的浓度为0.00040.012mg/ml。 0013 优选的， 所述金属离子在活性复合物溶液中的浓度如下： Fe2+的浓度为0.2 0.3mg/ml， Ca2+的浓度为0.515mg/ml， Zn2+的浓度为0.150.28mg/ml， Se2+的浓度为 0。
15、.00020.003mg/ml， Mg2+的浓度为1.56mg/ml， Mn2+的浓度为0.010.05mg/ml， Mo2+的浓 度为0.00080.006mg/ml， K+的浓度为5100mg/ml， Rb+的浓度为0.0020.08mg/ml， Li+的 浓度为0.0010.012mg/ml。 0014 优选的， 所述金属离子来源于以矿物质提纯的活性离子水。 0015 优选的， 所述金属离子来源于富含金属离子的植物提取物， 包括Fe2+提取物、 Ca2+ 提取物、 Zn2+提取物、 Se2+提取物、 Mg2+提取物、 Mn2+提取物、 Mo2+提取物、 K+提取物、 Rb+提取物 和Li。
16、+提取物。 0016 优选的， 所述Fe2+提取物为樱桃提取物， 所述Ca2+提取物包括质量比为(0.9 1.1)： (0.91.1)海带提取物和芹菜提取物； 所述Zn2+提取物包括质量比(0.91.1)： (0.9 1.1)： (0.91.1)的黄秋葵提取物、 蓝莓提取物和雄蚕蛾提取物； 所述Se2+提取物、 Rb+提 取物为海藻提取物； 所述Mg2+提取物包括质量比(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)的榛 子提取物、 绿豆提取物和百里香提取物； 所述Mn2+提取物包括质量比(0.91.1)： (0.9 1.1)的紫锥菊提取物和绿茶提取物； 所述Mo2+提取物为大豆提取物。
17、； 所述K+提取物包括质量 比(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)的海带提取物、 香蕉提取物、 薄荷叶提 取物和冬瓜提取物； 所述Li+提取物为罗布麻木茶提取物。 0017 本发明的有益效果： 所述活性复合物由由包括以下组分的原料螯合获得： 花青苷 和金属离子， 所述螯合物的存在形式使所述活性复合物中的金属离子能够顺利完成包括穿 越血脑屏障在内的体内微循环运输。 本发明从以下几个方面的调控入手， 包括： 1)花青苷对 有害自由基消除； 2)参与酶催化反应的多种金属离子及维生素辅助因子(Cofacter(s)； 3) P53作用靶标基质金属蛋白酶MMP； 。
18、4)缺氧诱导因子HIF； 5)MDM2锌指蛋白(结构易被重金属 离子篡改)； 6)miRNA切割酶Dicer， 对P53基因进行 “围靶” (Encircle Target)调节， 逆转DNA 甲基化激活肿瘤细胞中被抑制的p53活性， 随着花青苷与金属离子浓度的增加和服用时间 的增加， p53蛋白表达均显著增加， p53基因甲基化情况显著降低。 根据实施例记载， 通过三 甲医院的临床干预效果检验对照， 超过65位患者服用本发明所述的活性复合物后， 血液关 键免疫指标、 肿瘤标志物指标得到明显控制或完全恢复正常。 具体实施方式 0018 本发明提供了一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物， 。
19、所述活性复合物由 包括以下组分的原料螯合获得： 花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 0019 本发明还提供了一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物溶液， 所述活性复 合物溶液的溶剂为水， 溶质包括花青苷和金属离子； 所述金属离子包括Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 说 明 书 2/10 页 4 CN 107569514 A 4 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+和Li+中的一种或几种。 0020 在本发明中， 所述花青苷优选来源于植物提取。
20、物， 所述植物包括紫甘薯、 葡萄、 血 橙、 红球甘蓝、 蓝莓、 茄子、 樱桃、 红莓、 草莓、 桑葚、 山楂和牵牛花中的一种或几种。 本发明对 所述花青苷的提取方法没有特殊限定， 采用本领域常规的提取花青苷的技术方案即可。 在 本发明具体实施过程中所述花青苷委托大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司制备 获得。 在本发明中所述植物提取花青苷中花青苷的质量含量优选的为350， 更优选的为 1030。 0021 在本发明中， 所述活性复合物溶液中花青苷的浓度优选的为1100mg/ml， 更优选 的为260mg/ml， 最优选的为310mg/ml。 在本发明中， 所述花青苷的作用为： 作为羟基供 。
21、体， 其酚类结构使其具有抗氧化功能， 通过清除活性氧族(ROS)， 如氧自由基(O2-)、 单线态氧 (O2)、 过氧化物(ROO-)、 过氧化氢(H2O2)和羟自由基(OH-)等氧化反应的活跃中介物质， 诱导 P53表达。 0022 在本发明中， 花青苷优选的作为载体与金属离子相结合， 形成螯合物， 所述螯合物 的存在形式使所述金属离子能够顺利快速完成包括穿越血脑屏障在内的体内微循环运输。 所述螯合物的状态并不影响所述花青苷作用的发挥， 所述螯合状态以花青苷为载体有利于 促进金属离子在体内的快速运输和吸收； 所述金属离子以螯合物状态进入体内后， 根据需 要进行相应的解离或重新结合到花青苷上。。
22、 0023 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Fe2+， 优选的所述的Fe2+来源于以 含铁的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Fe2+的植物提取物， 所述含铁的矿物质提 纯的活性离子水优选的委托青岛伸东矿液有限公司制备； 所述Fe2+提取物为樱桃提取物。 本 发明中所述活性复合物溶液中， Fe2+浓度优选的为0.10.4mg/ml， 更优选的为0.20.3mg/ ml。 本发明中所述Fe2+作用为： 补充血红蛋白亚铁离子， 增加血红蛋白合成， 激活加氧酶的活 性， 增强血氧浓度； 近而辅助性增强p53对缺氧诱导因子HIF的抑制； 氧离子的增强， 也有助 于泛素蛋白酶体保持活力， 。
23、使HIF-l 亚基保持较低水平。 0024 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Ca2+， 优选的所述的Ca2+来源于以 含钙的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Ca2+的植物提取物， 所述Ca2+提取物为海 带提取物和芹菜提取物。 所述Ca2+提取物中海带提取物和芹菜提取物的质量比优选的为 (0.91.1)： (0.91.1)， 更优选的为1:1； 本发明中所述活性复合物溶液中， Ca2+浓度优选 的为0.220mg/ml， 更优选的为0.515mg/ml。 本发明中所述Ca2+作用为： 激活纤溶酶与激 肽释放酶,消解提高纤溶活性， 降低血浆中纤维蛋白含量， 减少癌栓生成和组织纤维。
24、化风 险。 0025 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Zn2+， 优选的所述的Zn2+来源于以 含锌的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Zn2+的植物提取物， 所述Zn2+提取物包括 黄秋葵提取物、 蓝莓提取物和雄蚕蛾提取物； 所述黄秋葵提取物、 蓝莓提取物和雄蚕蛾提取 物的质量比(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)， 更优选的为1:1:1。 本发明中所述活性复 合物溶液中， Zn2+浓度优选的为0.040.38mg/ml， 更优选的为0.150.28mg/ml。 本发明中 所述Zn2+作用为： 置换篡改锌指蛋白结构中Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2。
25、+， 同时抑制金属离子Cd2+、 Hg2 +、 Co2+、 Cu2+的吸收与酶促反应活性。 0026 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Se2+， 优选的所述的Se2+来源于以 说 明 书 3/10 页 5 CN 107569514 A 5 含硒的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Se2+的植物提取物， 所述Se2+提取物为海 藻提取物。 本发明中所述活性复合物溶液中， Se2+浓度优选的为0.00010.004mg/ml， 更优 选的为0.00020.003mg/ml。 本发明中所述Se2+作为： 置换篡改锌指蛋白结构中Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2+， 同时抑制金属。
26、离子Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2+的吸收与酶促反应活性。 0027 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Mg2+， 优选的所述的Mg2+来源于以 含镁的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Mg2+的植物提取物， 所述Mg2+提取物包括 榛子提取物、 绿豆提取物和百里香提取物， 所述榛子提取物、 绿豆提取物和百里香提取物的 质量比优选的为(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)， 更优选的为1:1:1。 本发明中所述活 性复合物溶液中， Mg2+浓度优选的为0.47mg/ml， 更优选的为1.56mg/ml。 本发明中所述 Mg2+作用包括结合Dicer酶催。
27、化中心的保守氨基酸残基位点， 使Dicer结合到dsRNA， 引发大 量的切割mRNA反应， 得到miRNA前体； p53直接作用靶标miRNA， 诱导凋亡、 衰老和细胞周期停 滞。 所述Mg2+作用还包括与Mn2+， K+和Rb+共同作用激活丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)， 在糖酵解系统里， 它是催化形成第二个ATP反应的酶。 在ATP与Mg2+参与下， 6-磷酸果糖激酶1 (6-phosphofructokinase1， PFK1)在糖酵解途径中， 催化6-磷酸果糖生成1， 6-二磷酸果糖 (Fructosel， 6bisphosphate， F-1， 6-BP)， 加。
28、速糖酵解途径的第二次磷酸化反应， 提高活性 氧含量， 使癌细胞发生凋亡的机制。 0028 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Mn2+， 优选的所述的Mn2+来源于以 含锰的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Mn2+的植物提取物， 所述Mn2+提取物包括 紫锥菊提取物和绿茶提取物， 所述紫锥菊提取物和绿茶提取物的质量比优选的为(0.9 1.1)： (0.91.1)， 更优选的为1:1。 本发明中所述活性复合物溶液中， Mn2+浓度优选的为 0.00040.06mg/ml， 更优选的为0.010.05mg/ml。 本发明中所述Mn2+作用包括结合Dicer 酶催化中心的保守氨基酸残基位。
29、点， 使Dicer结合到dsRNA， 引发大量的切割mRNA反应， 得到 miRNA前体； p53直接作用靶标miRNA， 诱导凋亡、 衰老和细胞周期停滞。 所述Mn2+作用还包括 与Mg2+， K+和Rb+共同作用激活丙酮酸激酶(pyruvate kinase， PK)， 在糖酵解系统里， 它是催 化形成第二个ATP反应的酶。 提高活性氧含量， 使癌细胞发生凋亡的机制。 所述Mn2+作用还包 括通过补充Mn2+摄入， 补充线粒体内的锰， 增加血红蛋白合成， 激活加氧酶的活性， 增强血氧 浓度； 近而辅助性增强p53对缺氧诱导因子HIF的抑制； 氧离子的增强， 也有助于泛素蛋白酶 体保持活力，。
30、 使HIF-l 亚基保持较低水平。 0029 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Mo2+， 优选的所述的Mo2+来源于以 含钼的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Mo2+的植物提取物， 所述Mo2+提取物为大 豆提取物。 本发明中所述活性复合物溶液中， Mo2+浓度优选的为0.00020.007mg/ml， 更优 选的为0.00080.006mg/ml。 本发明中所述Mo2+作用包括通过Mo2+平衡和抑制Cu2+的活性和 吸收， 抑制LOX对p53的羟基化， 所述Mo2+作用还包括置换篡改锌指蛋白结构中Cd2+、 Hg2+、 Co2 +、 Cu2+， 同时抑制金属离子Cd2+、 H。
31、g2+、 Co2+、 Cu2+的吸收与酶促反应活性。 0030 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子K+， 优选的所述的K+来源于以含钾 的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含K+的植物提取物， 所述K+提取物包括海带提取 物、 香蕉提取物、 薄荷叶提取物和冬瓜提取物， 所述海带提取物、 香蕉提取物、 薄荷叶提取物 和冬瓜提取物的质量比优选的为(0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)： (0.91.1)， 更优 选的为1:1： 1:1。 本发明中所述活性复合物溶液中K+浓度优选的为0.4112.5mg/ml， 更优 说 明 书 4/10 页 6 CN 107569514。
32、 A 6 选的为5100mg/ml。 本发明中所述K+作用为通过补充K+、 Li+和Ca2+激活纤溶酶与激肽释放 酶， 消解提高纤溶活性， 降低血浆中纤维蛋白含量， 减少癌栓生成和组织纤维化风险。 0031 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Rb+， 优选的所述的Rb+来源于以含 铷的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Rb+的植物提取物， 所述Rb+提取物为海藻提 取物。 本发明中所述活性复合物溶液中， Rb+浓度优选的为0.00040.0952mg/ml， 更优选的 为0.0020.08mg/ml。 本发明中所述Rb+作用为与Mg2+， Mn2+和K+共同作用激活丙酮酸激酶 (p。
33、yruvate kinase， PK)， 在糖酵解系统里， 它是催化形成第二个ATP反应的酶。 在ATP与Mg2+ 参与下， 6-磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1， PFK1)在糖酵解途径中， 催化6-磷酸 果糖生成1， 6-二磷酸果糖(Fructosel， 6bisphosphate， F-1， 6-BP)， 加速糖酵解途径的第二 次磷酸化反应， 提高活性氧含量， 使癌细胞发生凋亡的机制。 0032 在本发明中， 所述活性复合物溶液包括金属离子Li+， 优选的所述的Li+来源于以含 锂的矿物质提纯的活性离子水或者来源于富含Li+的植物提取物， 所述Li+提取物为罗。
34、布麻 木茶提取物。 本发明中所述活性复合物溶液中， Li+浓度优选的为0.00040.012mg/ml， 更 优选的为0.0010.012mg/ml。 本发明中所述Li+作用为通过补充Li+激活纤溶酶与激肽释放 酶， 消解提高纤溶活性， 降低血浆中纤维蛋白含量， 减少癌栓生成和组织纤维化风险。 0033 在本发明中， 上述金属离子优选的来源于同时含有Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+、 Li+的矿物质提纯活性离子水， 所述包含上述金属离子的矿物质提纯活性离子 水优选的委托矿业公司加工生产， 在本发明具体实施过程中委托青岛伸东矿液有。
35、限公司。 0034 本发明对上述植物源提取得到金属离子的方法没有特殊限定， 采用本领域常规提 取方法即可， 具体的在本发明实施过程中， 委托大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公 司加工。 0035 在本发明中所述活性复合物的制备方法为将花青苷提取物与金属离子混合溶于 水中形成螯合物。 本发明所述活性复合物制备过程中花青苷的浓度和金属离子的浓度参见 上述活性复合物溶液中花青苷和金属离子的浓度， 在此不再赘述。 0036 在本发明中， 针对p53基因表达的蛋白主要分布于细胞核浆， 能与DNA特异结合， 其 活性受磷酸化、 乙酰化、 甲基化、 泛素化等翻译后修饰调控等特性， 从花青苷对有害自由基 消。
36、除、 参与酶催化反应的多种矿物元素离子及维生素辅助因子Cofacter(s)、 P53作用靶标 基质金属蛋白酶MMP、 缺氧诱导因子HIF、 MDM2锌指蛋白(结构易被重金属离子篡改)、 miRNA 切割酶Dicer的调控入手， 提出 “围靶” (Encircle Target)理论与P53表达干预方案。 本发明 所述活性复合物的主要生化作用机制包括为： 0037 miRNA是生物体内源性的非编码RNA， miRNA具有抑制肿瘤形成的功能。 miR-34家族 成员(包括miR-34a和miR-34b/c)是p53的直接作用靶标， 这种作用可诱导衰老、 凋亡和细胞 周期停滞。 miRNA前体经D。
37、icer酶切割得到。 Dicer结合到dsRNA， 可引发大量的切割mRNA反 应。 Dicer酶每一个催化中心里都有一组保守的氨基酸残基位点， 它们都能够结合一个镁离 子。 在Dicer蛋白里， 每一个RNaseIII结构域活性位点中的四个保守的氨基酸位点都会与两 个金属离子(Mg2+或Mn2+)相结合， Dicer蛋白会利用 “双金属离子” 机制(two-metal- ionmechanism)来催化RNA降解反应。 0038 p53通过对TIGAR(TP53诱导糖酵解和凋亡调节因子)的表达负性调节， 使细胞中糖 酵解过多， 胞内活性氧水平上升而使癌细胞发生凋亡的机制， 通过补充二价金属离。
38、子(Mg2+ 说 明 书 5/10 页 7 CN 107569514 A 7 和Mn2+)和一价金属离子(K+， Rb+)， 激活丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)， 在糖酵解系统 里， 它是催化形成第二个ATP反应的酶。 在ATP与Mg 2+参与下， 6-磷酸果糖激酶1(6- phosphofructokinase1， PFK1)在糖酵解途径中， 催化6-磷酸果糖生成1， 6-二磷酸果糖 (Fructosel， 6bisphosphate， F-1， 6-BP)， 加速糖酵解途径的第二次磷酸化反应。 0039 p53蛋白一个重要作用机制是通过抑制缺氧诱导因子(hypoxia 。
39、inducible factor， HIF)和血管内皮生长因子、 成纤维生长因子的形成， 阻止肿瘤血管生成的作用机 制。 在含氧量正常的情况下， HIF-l 亚基由于受泛素蛋白酶体的降解作用而保持较低的水 平， 而在缺氧的情况下， 泛素蛋白酶体的作用受到抑制， HIF-l 亚基保持较高的水平， 并进 入细胞核与HIF-1 亚基结合， 形成有活性的HIF， 激活其下游靶基因(如VEGF、 bFGF)， 介导形 成一系列适应缺氧的生理反应， 促进血管生成； 当原癌基因激活时， p53蛋白可以直接与 HIF-1 亚基结合， 导致HIF-1 蛋白被降解， 从而抑制了血管再生。 0040 通过长期观察，。
40、 实体肿瘤多发于组织缺氧区， 很多肿瘤患者均不同程度表现血红 蛋白下降的症状， 细胞携氧不足， 会加剧HIF活性， 促进肿瘤血管生长速度。 因此本发明组合 物补充Fe2+、 Mn2+摄入， 主要是通过补充血红蛋白亚铁离子和线粒体内的锰， 增加血红蛋白 合成， 激活加氧酶的活性， 增强血氧浓度。 近而辅助性增强p53对缺氧诱导因子HIF的抑制。 氧离子的增强， 也有助于泛素蛋白酶体保持活力， 使HIF-l 亚基保持较低水平。 0041 p53可以激活胶原蛋白的脯氨酰羟化酶(prolyl hydroxylase， PHDs)， 该酶有抗血 管生成特性， 抑制血管再生。 脯氨酰羟化酶的催化反应需要F。
41、e2+和ascorbate(维生素C)的参 与。 0042 赖氨酸羟化酶可使p53羟基化并阻止其乙酰化作用， 抑制其转录活性。 赖氨酸羟化 酶(LOX)是铜依赖单胺氧化酶， 促进弹性蛋白及胶原纤维中共价交联的形成， 使肿瘤细胞外 基质僵化变硬， 阻止肿瘤细胞向周围组织的侵袭和远处转移。 也有研究表明， LOX的高表达 是乳腺癌早期肿瘤间质反应， 分泌的LOX作用于胶原， 刺激肿瘤细胞伸展伪足突起增加肌动 蛋白聚合、 粘连， 提高肌球-肌动蛋白交联， 促进肌丝收缩， 从而作为肿瘤细胞迁移的 “高速 公路” 。 本发明的解决方案是通过Mo2+平衡和抑制Cu2+的活性和吸收， 抑制LOX对p53的羟。
42、基 化。 通过补充K+、 Li+和Ca2+激活纤溶酶与激肽释放酶,消解提高纤溶活性， 降低血浆中纤维 蛋白含量， 减少癌栓生成和组织纤维化风险。 0043 MDM2癌基因与p53结合， 会降低P53的表达。 mdm2参与p53负反馈环调节。 增加mdm2 的表达导致p53从核内输出和泛醌蛋白裂解途径的降解增加。 在某些p53阳性癌症可以发现 有mdm2扩增和过表达。 0044 MDM2癌基因指状结构锌指蛋白， Zn2+被Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2+所替代， 篡改锌指 结构,形成如Cd5Zn2-MT混合金属蛋白,近而调高MDM2的扩增和过表达,这也解释重金属离 子可以导致基因突变。
43、致癌的原理， 也可以解释恶性肿瘤中心位点Cd2+、 Hg2+浓度增加， Cu/Zn 比值较正常组织显著增加的原因。 在活性组合物加入Zn2+、 Se2+、 Mo2+， 主要是置换篡改锌指 蛋白结构中Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2+， 同时抑制金属离子Cd2+、 Hg2+、 Co2+、 Cu2+的吸收与酶促反应 活性。 0045 下面结合具体实施例对本发明所述的一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合 物做进一步详细的介绍， 本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。 0046 实施例1 说 明 书 6/10 页 8 CN 107569514 A 8 0047 一种靶向提高p53抑癌基。
44、因表达的活性复合物溶液， 所述活性复合物的成分和含 量见表1. 0048 表1靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物的组成 0049 成分元素符号每100ml离子浓度(mg/ml) 蓝莓花青苷 300mg3 铁Fe5mg0.05 钙Ca3mg0.03 锌Zn2mg0.02 硒Se10ug0.0001 镁Mg12mg0.12 锰Mn45ug0.00045 钼Mo10ug0.0001 钾K20mg0.2 铷Rb20ug0.0002 锂Li20ug0.0002 0050 其中蓝莓花青苷委托大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司加工， 所述蓝莓 花青苷为粉末状， 其中花青苷的质量含量为45。 其中金属。
45、离子来源于同时含有Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+、 Li+的矿物质提纯活性离子水， 委托青岛伸东矿液有限公 司制备。 0051 本实施例在使用过程中， 将蓝莓花青苷粉末溶解于矿物质提纯活性离子水中， 花 青苷与金属离子螯合形成活性复合物。 0052 实施例2 0053 一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物溶液， 所述活性复合物的成分和含 量见表2. 0054 表2靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物的组成 0055 成分元素符号每100ml离子浓度(mg/ml) 蓝莓花青苷 1g10 铁Fe10mg0.1 钙Ca30m。
46、g0.3 锌Zn4mg0.04 硒Se100ug0.001 镁Mg25mg0.25 锰Mn50ug0.0005 钼Mo20ug0.0002 钾K40mg0.4 铷Rb20ug0.0002 锂Li20ug0.0002 说 明 书 7/10 页 9 CN 107569514 A 9 0056 其中蓝莓花青苷委托大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司加工， 所述蓝莓 花青苷为粉末状， 其中花青苷的质量含量为30。 其中金属离子来源于同时含有Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+、 Li+的矿物质提纯活性离子水， 委托青岛伸东矿液有限公 司制。
47、备。 0057 本实施例在使用过程中， 将蓝莓花青苷粉末溶解于矿物质提纯活性离子水中， 花 青苷与金属离子螯合形成活性复合物。 0058 实施例3 0059 一种靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物溶液， 所述活性复合物的成分和含 量见表3。 0060 表3靶向提高p53抑癌基因表达的活性复合物的组成 0061 成分元素符号每100ml离子浓度(mg/ml) 蓝莓花青苷 1g10 铁Fe20mg0.2 钙Ca500mg5 锌Zn10mg0.1 硒Se200ug0.002 镁Mg100mg1 锰Mn1mg0.01 钼Mo200ug0.002 钾K100mg1 铷Rb500ug0.005 锂Li。
48、100ug0.001 0062 其中蓝莓花青苷委托大兴安岭林格贝寒带生物科技股份有限公司加工， 所述蓝莓 花青苷为粉末状， 其中花青苷的质量含量为5。 其中金属离子来源于同时含有Fe2+、 Ca2+、 Zn2+、 Se2+、 Mg2+、 Mn2+、 Mo2+、 K+、 Rb+、 Li+的矿物质提纯活性离子水， 委托青岛伸东矿液有限公 司制备。 0063 本实施例在使用过程中， 将蓝莓花青苷粉末溶解于矿物质提纯活性离子水中， 花 青苷与金属离子螯合形成活性复合物。 0064 实施例4 0065 实施例1中的活性复合物干预康复病例。 0066 傅先生， 74岁， 安徽人， 2016年8月在安徽省市。
49、医院确诊为前列腺癌， PET-CT显示全 身多发骨转移。 疼痛异常， 行走不便， 靠轮椅移动。 2016年8月， 经血液检查， 总前列腺特异性 抗原已经大于10028.229ng/ml， 游离前列腺特异性抗原28.229ng/ml。 由于病人年势以高， 无更好的治疗方案， 建议放弃治疗， 做临终关怀。 在深圳工作的儿子经朋友介绍， 同意接受 让父亲尝试性服用本发明实施例1中的活性复合物进行干预。 每天服用一次， 每次50ml。 经 过15天试用， 再次到阜阳市人民医院检验， 惊喜地发现总前列腺特异性抗原恢复阴性， 为 0.181。 于是， 持服用本发明实施例1中的活性复合物2个月， 至2017年1月25日， 在太和县进 行全身。