技术领域
本发明涉及包含一种或多种阿维菌素(avermectin)的稳定乳液的制备方法。本发明还涉及由此获得的乳液，特别是用于治疗皮肤病症例如红斑痤疮的所述乳液。
背景技术
阿维菌素是具有强效抗蠕虫和杀昆虫性质的大环内酯，其通过一种土壤放线菌阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)的发酵获得。在阿维菌素中，可以提到的是伊维菌素(ivermectin)、司拉克丁(selamectin)、多拉克丁(doramectin)和阿巴克丁(abamectin)。伊维菌素本身是两种化合物、即5-O-去甲基-22,23-二氢阿维菌素A1a和5-O-去甲基-22,23-二氢阿维菌素A1b的混合物。它们也在商品名22,23-二氢阿维菌素B1a和22,23-二氢阿维菌素B1b下为人所知。伊维菌素包含至少80％的22,23-二氢阿维菌素B1a和少于20％的22,23-二氢阿维菌素B1b。
在20世纪80年代中期，伊维菌素作为一种用于兽医用途的广谱抗寄生虫药物出现，因为它有效对抗大多数常见肠道蠕虫(除了绦虫之外)、大多数螨虫和几种虱。在人类中，伊维菌素更具体地作为抗蠕虫药用于治疗由盘尾丝虫(Onchocerca volvulus)造成的盘尾丝虫病、胃肠类圆线虫病(鳗形线虫病(anguillulosis))和人类疥疮。更近些时候，已提出将伊维菌素用于治疗皮肤病症例如红斑痤疮(WO2004/093886)。一种包含1％伊维菌素的霜剂已被FDA批准用于红斑痤疮的炎性病变的表面治疗
在伊维菌素被配制用于表面施用的情况下，有利的是将它掺入到可以容易地在皮肤上涂抹的乳液中。然而，伊维菌素在存在水的情况下不稳定，水可以造成所述活性成分的化学不稳定性和/或引起最初溶解的活性成分的结晶。这可能进而不利地影响含有伊维菌素的组合物的总体稳定性，包括它们的粘度和外观。为了减少或阻止这种现象，已经提出了将伊维菌素溶解在丙二醇中，然后再将它与水相和油相混合，形成用聚合乳化剂稳定化的水包油乳液(FR 2 867 684)。另一种解决方案提供在US-8,287,891中，其由将伊维菌素配制在反相乳液中构成，在所述反相乳液中相当一部分的水相被二醇代替，以便获得油包二醇乳液。在US-8,080,530中提出了伊维菌素的另一种稳定乳液。这种乳液通过以下过程来制备：首先在高温(70℃)和搅拌下用油相乳化水相，然后将得到的乳液冷却到40℃，随后在其中引入包含溶解在丙二醇中的伊维菌素的活性相，然后允许所述乳液冷却到30℃。
尽管这些现有尝试允许将伊维菌素配制在即使温度和/或pH变化也仍然稳定的乳液中，但已发现，某些含有伊维菌素的乳液例如在US-8,080,530中描述的乳液的粘度在它们被制造后的一周期间倾向于提高30至60％，并且在最坏情况下直至150％。不受这一理论限制，推测这种粘度的提高是由于在水相和油相被带到一起并冷却后，最初存在于油相中的非离子型表面活性剂和脂肪醇所形成的层状结构在水中的膨胀而造成的。因此，为了确保能保持在一定水平上的产品质量，必需在这个熟化时间内保留所述组合物，直至粘度变得恒定，然后放出成品。当然，这种保持时间不利地影响所述制造过程的经济学。
鉴于上述情况，对于在制造后数周内粘度基本上不演变的包含至少一种阿维菌素的稳定乳液，仍存在着需求。
发明内容
申请人现在惊喜地发现，通过在将包含至少一种阿维菌素的活性相引入到乳液中之后控制所述乳液的冷却速率，可以获得包含所述阿维菌素的稳定乳液。
因此，本发明涉及一种用于制备乳液形式的组合物的方法，所述乳液包含至少一种阿维菌素，所述方法包括以下连续步骤：
(a)制备油相和水相，
(b)在60至75℃的温度下乳化所述油相和水相，
(c)将得到的乳液冷却到48至55℃的温度，
(d)向所述乳液添加活性相，所述活性相含有溶解在包含至少一种二醇的介质中的至少一种阿维菌素，以及
(e)将所述乳液冷却到30至40℃的目标温度，
其特征在于在步骤(e)中，将所述乳液受控冷却到所述目标温度。
根据第一个实施方式，将所述乳液以0.5℃至1.5℃/5min、优选地0.8至1.5℃/5min、更优选地1℃/5min的冷却速率冷却。
根据第二个实施方式，所述受控冷却包括将所述乳液冷却到42至47℃之间的温度平台，然后维持温度平台优选地10至20分钟，并将所述乳液进一步冷却到所述目标温度。
本发明还涉及一种乳液形式的组合物，所述乳液包含至少一种阿维菌素，所述组合物的特征在于当在制造后立即在室温下储存7天时，所述组合物的布氏粘度(Brookfield viscosity)与在制造后立即测量的粘度相比变化不超过10％，优选地不超过5％。
本发明还涉及上述组合物，其用于治疗皮肤病症例如红斑痤疮、特应性皮炎、手部湿疹、寻常痤疮、脂溢性皮炎、口周皮炎、痤疮样皮疹、暂时性棘层松解性皮肤病和栗粒性坏死性痤疮，优选为红斑痤疮。
本发明还涉及一种提高包含至少一种阿维菌素的乳液的稳定性的方法，所述乳液按照包括以下连续步骤的方法来制备：
(a)制备油相和水相，
(b)在60至75℃的温度下乳化所述油相和水相，
(c)将得到的乳液在48至55℃的温度下冷却，
(d)向所述乳液添加活性相，所述活性相含有溶解在包含至少一种二醇的介质中的至少一种阿维菌素，以及
(e)将所述乳液冷却到30至40℃的目标温度，
其特征在于所述方法包括在步骤(e)中，将所述乳液受控冷却到所述目标温度。
详细描述
本发明的制造方法包括制备油相和水相的第一步骤。该第一步骤优选地在60至75℃的温度下进行。
相对于所述组合物的总重量，所述水相可以包含30至95重量％、优选地60至80重量％的水。此外，它可以包括至少一种下述物质：胶凝剂，例如羧基乙烯基聚合物(卡波姆)，纤维素衍生物，多糖树胶，丙烯酰胺、丙烯酸烷基酯、丙烯酸和/或2-丙烯酰氨基-2-甲基丙磺酸(AMPS)的均聚物和共聚物，粘土和天然或改性淀粉；多元醇例如甘油；螯合剂；pH调节剂；及其混合物。优选地，所述水相内包含至少一种胶凝剂。
所述油相可以包含至少一种油，其可以选自植物油、矿物油、动物油和/或合成油，例如烷基酯、硅油、石蜡油及其混合物。此外，所述油相可以包含至少一种增稠剂，其可以选自直链脂肪醇例如硬脂醇和/或鲸蜡醇、直链脂肪酸、植物蜡、硅橡胶及其混合物。优选地，所述油相内包含至少一种包含12至20个碳原子的直链脂肪醇。所述油相的成分可以由本领域技术人员以不同方式选择，以便制备具有所需性质例如稠度或质地的组合物。相对于所述组合物的总重量，所述油相可以占3至50重量％、优选地10至20重量％。
所述水相和/或油相还可以包含至少一种下述物质：防腐剂，例如对羟基苯甲酸烷基酯(尼泊金)、苯氧乙醇及其混合物；抗氧化剂；乳化剂，例如脱水山梨糖醇酯、脂肪醇的聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、甘油酯；及其混合物。优选地，所述油相内包含至少一种非离子型表面活性剂。
在本发明的方法的第二步骤中，通过在搅拌下将所述油相引入到所述水相中，将所述油相和水相在60至75℃的温度下乳化。优选地，在混合之前将所述水相和油相两者均加热到所述温度。这种预加热步骤可以在所述水相和油相制备期间的任何阶段开始。对于专业技术人员来说，哪些组分应该在加热之前添加以及哪些组分应该只在加热之后添加，将是显而易见的。这个步骤优选地在60至70℃的温度下，优选地65℃±2℃的温度下进行。然后将得到的水包油乳液冷却到48至55℃、优选地50℃±2℃的温度。
然后，将活性相引入到所述乳液中，所述活性相含有溶解在包含至少一种二醇的介质中的至少一种阿维菌素。所述活性相在引入到乳液中之前，优选被加热到与所述乳液相同的温度。这个预加热步骤可以在所述活性相制备期间的任何阶段开始，优选地在将所述阿维菌素添加到其中之前开始。
所述活性相通常可以含有0.01至3％，优选地0.1至2.5％，更优选地0.1至2％，更优选地0.5至1％。
根据本发明的优选实施方式，相对于所述组合物的总重量，所述活性相优选地含有1重量％的阿维菌素。
根据本发明，有用的阿维菌素的实例包括：invermectin，伊维菌素，阿维菌素，阿巴克丁，多拉克丁，依立诺克丁(eprinomectin)，司拉克丁及其光学异构体。根据本发明的优选实施方式，所述阿维菌素选自伊维菌素及其光学异构体。相对于所述组合物的总重量，所述二醇可以占0.5至15重量％，优选地1至8重量％。二醇的实例是(C1-C6)亚烷基二醇和聚(C1-C6)亚烷基二醇，例如乙二醇、丙二醇、聚乙二醇、聚丙二醇、丁二醇、戊二醇和己二醇以及它们的混合物。优选的二醇是丙二醇。所述二醇可以与一种或多种一元醇混合，所述一元醇选自C1-C6一元醇例如乙醇、异丙醇和丁醇，C12至C32直链不饱和或支链饱和一元醇例如油醇或格尔伯特(Guerbet)醇，除二醇之外的多元醇例如甘油；及其混合物。根据本发明的实施方式，所述活性相包含重量比为1:4至4:1，优选为1:1的丙二醇与油醇的混合物。根据实施方式，所述活性相占所述组合物的总重量的1至18％。
由此获得乳液，然后在本发明的方法的下一个步骤中，通过将所述乳液受控冷却到目标温度，将其冷却到30至40℃、优选地35℃±2℃的所述目标温度。
根据第一个实施方式，所述受控冷却包括通常使用温度调控系统以0.5至1.5℃/5min、优选地0.8至1.5℃/5min、更优选地1℃/5min的冷却速率冷却所述乳液，或者优选地由上述操作构成。这个冷却步骤通过随时间线性且规则地降低温度来控制。例如，使所述乳液经历0.5至1.5℃/5min、优选地0.8至1.5℃/5min、更优选地1℃/5min的冷却速率。这个特定冷却步骤在下面的描述和实施例中被称为“匀变冷却(cooling ramp)”。
根据第二个实施方式，所述受控冷却包括将所述乳液冷却到42至47℃之间、优选地45℃的温度，然后维持温度平台优选地10至20分钟，并将所述乳液进一步冷却到所述目标温度，或者优选地由上述操作构成。这个冷却步骤通过优选地在10至20分钟的时间内维持42至47℃之间的温度(也被称为温度平台)来控制。例如，首先将所述乳液在42至47℃之间的温度下冷却，然后优选地在10至20分钟内维持在该温度平台处。这个特定冷却步骤在下面的描述和实施例中将被称为“平台冷却(cooling plateau)”。
本发明的这些实施方式允许提高所述组合物的稳定性，特别是避免在制造后立即发生大的粘度变化。不受这种理论限制，推测这种粘度提高是因为在水相和油相被带到一起并冷却后，最初存在于油相中的非离子型表面活性剂和脂肪醇所形成的层状结构在水中的膨胀而造成的。
所述冷却步骤优选地在搅拌所述乳液的同时进行。
然后可以在任选地向所述乳液添加中和剂例如碱(在胶凝剂带有酸性基团的情况下，例如在使用卡波姆时，可能需要此步骤)之后，将得到的乳液进一步冷却到室温，即20至25℃。
如上所述的方法增强了包含至少一种阿维菌素的组合物的物理稳定性，并且更具体来说在制造后维持基本上恒定的粘度。
因此，当在室温下储存7天时，可以按照上述方法获得的组合物的粘度与在制造后立即测量的粘度相比，变化不超过10％，优选地不超过5％。这种粘度可以在室温(20-25℃)下通过装备有以6rpm旋转的#34转子(spindle)的布氏(Brookfield)粘度计RV DVII来测量。
此外，在本发明的某些实施方式中，所述组合物可以进一步是化学上稳定的，使得观察不到阿维菌素的重结晶。
这种组合物可用于治疗皮肤病症例如红斑痤疮、特应性皮炎、手部湿疹、寻常痤疮、脂溢性皮炎、口周皮炎、痤疮样皮疹、暂时性棘层松解性皮肤病和栗粒性坏死性痤疮，优选为红斑痤疮。
附图说明
图1A：通过方法A在1kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品A和B)在11天内的粘度演变。
图1B：通过方法A在50kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品C)在11天内的粘度演变。
图2：通过方法A在1kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品B)在室温下12个月内的粘度演变。
图3：通过方法B在1kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品D)在7天内的粘度演变。
图4A：通过方法B在2000kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品E、F、G和H)在11天内的粘度演变。
图4B：通过方法B在1000kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品I和J)在15天内的粘度演变。
图5：通过方法A在1000kg规模下获得的1％伊维菌素霜剂(样品K)在30天内的粘度演变。
实施例
根据下面的实施例，本发明将被更好地理解，提供所述实施例仅仅是为了说明的目的，并不打算限制由权利要求书定义的本发明的范围。在下面的实施例中，包括受控冷却步骤的本发明的方法被称为方法A。实施例2的方法、即没有受控冷却步骤的方法，被称为方法B。
实施例1：通过方法A获得的含有1％伊维菌素的霜剂的制备
通过方法A制备了在下面的表1中描述的组合物。
表1：
a)三种相的制备：
通过将胶凝剂在剪切下分散在第一个罐中的水中直至获得均匀凝胶来制造所述水相。在60℃至75℃之间、优选地65℃±2℃的温度下加热之后，添加甘油和所述水相的剩余组成成分。
通过将成分在第二个罐中混合，并在60℃至75℃之间、优选地65℃±2℃的温度和搅拌下加热直至混合物均匀，来分开地制造所述油相。
通过将溶剂引入到第三个罐中，在50℃下加热并均化来制造所述活性相。将伊维菌素在称舟中称重，然后添加到该罐，随后搅拌直至伊维菌素完全溶解。
b)乳化步骤：
当所述油相和水相处于相同加热温度、优选为65℃左右时，将两相在剪切下混合10min。允许由此形成的乳液冷却到50℃，然后在剪切下向其添加所述活性相。
然后进行从50℃至35℃的受控冷却步骤，其中使用15分钟的45℃的温度平台(“平台冷却”步骤)或在恒定的剪切速率下使用1℃/5min的冷却速率(“匀变冷却”步骤)。
然后在35℃下添加中和剂，直至pH在6.0至6.6之间，并将所述组合物进一步冷却到室温。由此获得白色至浅黄色霜剂。
上述方法在实验室规模上在1kg批量的组合物(样品A和B)上进行，在中试规模上在50kg批量的组合物(样品C)上进行，并且在工业规模上在1000kg批量的组合物(样品K)上进行。
实施例2：通过方法B获得的含有1％伊维菌素的霜剂的制备
按照与实施例1中所进行的相似的方法，在实验室规模上(1kg批量，样品D)和工业规模上(1000kg，样品I和J；2000kg，样品E、F、G和H)制备与表1中所描述的相同的组合物，所述方法的区别在于：
-将所述水相和油相在72℃下预加热，并且在该温度下进行乳化，
-通过静置在室温下(实验室规模)或通过使用没有任何温度控制的水夹套冷却，将所述乳液在10至45分钟内从50℃冷却到35℃，因此冷却速率为2至8℃/5min。
与实施例1的方法的显著区别在于所述乳液不经历平均冷却速率低于2℃/5min的受控冷却步骤。
实施例3：通过方法A或方法B获得的组合物的比较性稳定性测试
使用装备有以6rpm旋转的#34转子的布氏粘度计RV DVII，评估按照实施例1(方法A)和2(方法B)制备的批料的粘度变化。
如图1A(包含“平台冷却”步骤的方法A)和1B(包含“匀变冷却”步骤的方法A)上所示，在制造后的第一周期间，在实验室规模和中试规模两者上，按照本发明的方法制备的霜剂的粘度变化不超过10％，更准确来说不超过5％。
如图2(包含“平台冷却”步骤的方法A)上所示，按照本发明的方法制备的实验室样品的粘度在前200天中甚至不变，然后在接下来的200天内仅仅观察到轻微变化。
如图5(包含“匀变冷却步骤”的方法A)上所示，按照本发明的方法制备的工业样品的粘度在制造后的第一周期间变化不超过10％，并且在制造后的第二和第一周期间变化不超过5％。
相反，如图3、4A和4B上所示，按照不包括受控冷却步骤的方法B制备的批料的粘度在制造后的第一周期间分别变化30％(在实验室规模上)、高达50％(在2000kg工业规模上)和高达150％(在1000kg工业规模上)。
这些实施例证实，与比较性方法(方法B)相反，本发明的方法(方法A)允许制造随时间具有稳定粘度的霜剂，并且在所述时间内没有熟化。
因此，本发明的方法允许更好地控制制造后的粘度，这保证了产品质量并积极地影响制造过程的经济学。
此外，按照实施例1中所描述的本发明的制造方法，可以将乳化温度降低到65℃而不损害粘度稳定性，这也改善了过程的经济学。
此外，已经检查了当将按照本发明获得的组合物在40℃储存6个月和在室温下储存12个月时，伊维菌素也是化学稳定的。