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1、(10)申请公布号 CN 103169942 A (43)申请公布日 2013.06.26 CN 103169942 A *CN103169942A* (21)申请号 201110438488.2 (22)申请日 2011.12.24 A61K 38/01(2006.01) A61P 1/14(2006.01) A23L 1/29(2006.01) A61K 35/32(2006.01) A61K 38/39(2006.01) (71)申请人 栾清杨 地址 116011 辽宁省大连市西岗区双兴街 25 号 311 室 (72)发明人 魏强 王宇菲 (54) 发明名称 一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解。
2、方法 (57) 摘要 一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解方法， 取新鲜 的鹿茸加入缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 调 pH 值 为 6.0-8.0， 将溶液的温度调至 20 -35， 加入 复合的生物催化剂进行水解， 然后离心或硅藻土 过滤， 得到澄清金黄色的鹿茸水解液。 得到的产品 可应用于制药、 保健品、 食品的诸多方面， 应用极 其方便， 同时利用本技术对鹿茸产品进行开发可 衍生很多新的开发途径， 得到系列新产品。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布号 CN 10316。
3、9942 A CN 103169942 A *CN103169942A* 1/1 页 2 1. 一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解方法， 其特征在于 ： 包括以下步骤完成的 ： （1） 取新鲜的鹿茸加入缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 调溶液的 PH 值为 6.0-8.0， 按鹿茸 重量的 0.005 0.01 加入一种或多种生物催化剂， 同时加入一种或多种酶激活剂 ；（2） 在 温度 2060， PH6.0PH8.0 条件下进行水解反应 2 小时5 小时 ；（3） 然后离心或硅 藻土过滤， 得到澄清金黄色的鹿茸水解液， 水解率在 60%-70%。 2. 根据权利要求 1 所述的生物催化剂， 其特征在于 。
4、： 包括共有胃蛋白酶、 HAP 碱性蛋白 酶、 木瓜蛋白酶、 胰蛋白酶、 碱性内切蛋白酶、 风味酶中的一种或多种。 权 利 要 求 书 CN 103169942 A 2 1/2 页 3 一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解方法 技术领域 0001 本发明涉及一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解方法， 属于中药有效成分提取技术领 域。 背景技术 0002 鹿茸是鹿科动物梅花鹿 （Cervus nippon Temminck）或马鹿 （Cervus elaphus Linnaeus） 的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角， 始载于 神农本草经 。 本草纲目 谓鹿茸能够 “生精补髓， 养血益阳， 强筋健骨， 治一切虚损、 耳聋、。
5、 目暗、 眩晕虚痢” 。鹿茸中的化学成分比 较复杂， 含氨基酸、 磷脂、 脂肪酸、 蛋白多肽类、 激素样物质、 核酸以及各种无机元素等。 通过 对多种品系的鹿茸中的化学成分分析表明， 粗蛋白质的含量都占干重的 50% 以上， 而胶原 蛋白是鹿茸中含量最高的蛋白质。药理研究表明， 鹿茸胶原对大鼠成骨细胞具有明显的促 贴壁和增殖作用， 对去势雌性大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用。 0003 虽然鹿茸有较好的医用价值和较强的保健作用， 但由于鹿茸的组织结构独特一通 过鹿茸组织结构研究表明， 鹿茸 （除茸皮外） 从项部到基部是由发育程度不同的骨组织构 成 ； 因此鹿茸中含有大量构成骨及前骨的材料硫酸软。
6、骨素和胶原纤维， 因此对鹿茸并没 有好的利用方法 ； 在传统的中医医疗中， 鹿茸作为中药配伍的一部分， 只能进行水煎， 在利 用过程中利用率只有 2% 左右， 绝大部分都废弃 ； 而作为传统的补品， 一般只能用于泡酒等， 利用率则更低。因此， 传统鹿茸的利用方式， 对鹿茸资源是很大的浪费。 0004 因此， 本发明提供一种酶解法制备鹿茸胶原蛋白， 充分利用宝贵的鹿茸资源， 更好 的发挥鹿茸的药用价值。 发明内容 0005 本发明提供一种制备鹿茸胶原蛋白的酶解方法， 充分利用宝贵的鹿茸资源， 更好 的发挥鹿茸的药用价值。 0006 本发明的技术解决方案包括以下步骤 ： （1） 取新鲜的鹿茸加入缓。
7、冲液， 用组织绞碎机绞碎， 调溶液的 pH 值为 6.0-8.0， 按鹿茸 重量的 0.005 0.01 加入一种或多种生物催化剂， 同时加入一种或多种酶激活剂 ； （2） 在温度 2060， Ph6.0pH8.0 条件下进行水解反应 2 小时5 小时 ； （3） 然后离心或硅藻土过滤， 得到澄清金黄色的鹿茸水解液， 水解率在 60%-70%。 0007 缓冲液包括 ： 磷酸盐、 柠檬酸盐、 乳酸盐缓冲液。 0008 生物催化剂包括 ： 胰蛋白酶、 胃蛋白酶、 HAP 碱性蛋白酶、 木瓜蛋白酶、 碱性内切蛋 白酶、 风味酶。 0009 激活剂包括 ： 磷酸氢二钠， 磷酸二氢钠， 硫酸钠和 Ca。
8、2+、 M 克 2+、 Zn2+ 等氯化物。 0010 水解液中含有多种有效物质 ： 经过分析， 鹿茸水解后的溶液中含有大量的小分子 多肽、 脂类 （主要有磷脂、 体化合物、 脂肪酸、 中性脂和前列腺素等） 、 游离氨基酸、 微量元素、 糖类等多种有效成分。 说 明 书 CN 103169942 A 3 2/2 页 4 0011 本发明的积极效果在于 ： 鲜鹿茸经过水解方法处理后， 其平均水解率达 70% 左右 （水解率根据鲜鹿茸的质量不同在 6075% 之间） ； 水解后的残余物为鹿茸钙化的部分及部 分皮毛， 所有的有机质基本都变成溶液状态， 鹿茸中几乎所有的有效成分都变成了易于人 体吸收的。
9、溶液状态。 得到的产品可应用于制药、 保健品、 食品的诸多方面， 应用极其方便， 同 时利用本技术对鹿茸产品进行开发可衍生很多新的开发途径， 得到系列新产品。 具体实施方式 0012 鹿茸的前处理， 将新鲜的鹿茸去皮后， 切成 12 cm3的小块， 用流水冲洗至无血 色， 再用蒸馏水冲洗干净， 置 -20冰箱中保存。 0013 实施例 1 取一定量新鲜的鹿茸l千克， 加入3000毫升乳酸盐的缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 加入 生物催化剂 ： 木瓜蛋白酶 1 克， 加入激活剂 ： 磷酸氢二钠 0.1 克， 调 pH 值为 8.0， 将溶液的温 度调至 52， 放入反应罐反应 3 小时， 离心去残。
10、渣， 收集透明澄清的液体 3080 毫升。 0014 实施例 2 ： 取一定量新鲜的鹿茸l千克， 加入3000毫升柠檬酸盐的缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 加 入生物催化剂 ： 木瓜蛋白酶 8 克， 加入激活剂 ： 氯化钙 0.1 克， 调 pH 值为 7.0， 将溶液的温度 调至 37， 放入反应罐反应 5 小时， 离心去残渣， 收集透明澄清的液体 3300 毫升。 0015 实施例 3 取一定量新鲜的鹿茸l千克， 加入3000毫升乳酸盐的缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 加入 生物催化剂 ： 胰蛋白酶 1 克， 加入激活剂 ： 氯化锰 0.1 克， 调 pH 值为 8.0， 将溶液的温度调至 5。
11、2， 放入反应罐反应 3 小时， 离心去残渣， 收集透明澄清的液体 3340 毫升。 0016 实施例 4 取一定量新鲜的鹿茸l千克， 加入3000毫升磷酸盐的缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 加入 生物催化剂 ： 胃蛋白酶 l 克， 加入激活剂 ： 氯化锌 0.l 克， 调 pH 值为 6.0， 将溶液的温度调至 25， 放入反应罐反应 4 小时， 离心去残渣， 收集透明澄清的液体 3200 毫升。 0017 实施例 5 取一定量新鲜的鹿茸l千克， 加入3000毫升柠檬酸盐的缓冲液， 用组织绞碎机绞碎， 加 入生物催化剂 ： 碱性内切蛋白酶0.5克、 风味酶0.5克， 加入激活剂 ： 氯化锌0.l克， 调pH值 为6.0， 将溶液的温度调至25， 放入反应罐反应4小时， 离心去残渣， 收集透明澄清的液体 3200 毫升。 说 明 书 CN 103169942 A 4 。