技术领域
本发明涉及化合物Fluevirosines A的新用途，尤其涉及Fluevirosines A在制备治疗 抗结核菌药物中的应用。
背景技术
近年来全球结核病的发病呈增高趋势，然而由于结核病患者的治疗管理尚不十分规范， 不规则化疗，滥用抗结核药物，使结核病耐药情况日益严重，且耐药性的变化更趋向于多种 药物同时耐药，这给结核病的防治工作造成极大困难。因此寻找新的抗结核药物，尤其是抗 多药耐药性的抗结核药物对保护人民身体健康，具有重要意义。
本发明涉及的化合物Fluevirosines A是一个2012年发表（Hua Zhang，et al., Fluevirosines A-C:A Biogenesis Inspired Example in the Discovery of New Bioactive Scaffolds from Flueggea virosa.Organic Letters，2013，15（1）：120–123.）的新 化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，目前的用途仅仅对白血病和肺癌细胞有一定的细胞 毒性（Hua Zhang，et al.,Fluevirosines A-C:A Biogenesis Inspired Example in the Discovery of New Bioactive Scaffolds from Flueggea virosa.Organic Letters，2013， 15（1）：120–123.），本发明涉及的Fluevirosines A在制备治疗抗结核菌药物中的用途属 于首次公开。
发明内容
本发明的目的在于根据现有Fluevirosines A研究中未发现其具有抗抗结核菌活性的报 道的现状，提供了Fluevirosines A在制备抗抗结核菌药物中的应用。
所述化合物Fluevirosines A结构如式（Ⅰ）所示：
式（Ⅰ）
发明人先用卡介苗做应试菌株，采用纸片扩散法对Fluevirosines A的抗结核菌活性进 行初步试验，根据初步试验的结果，本发明再用固体培养基稀释法测定了该化合物对卡介苗、 结核分枝杆菌标准株H37Rv株和耐多药结核分枝杆菌（MDR MTB）三种结核菌的最小抑菌浓 度，实验结果证实Fluevirosines A具有很强的抗结核菌和抗耐药性结核菌活性，可作为治 疗结核菌感染疾病的先导化合物，也可用于制备治疗结核病药物。本发明涉及的 Fluevirosines A在制备治疗抗结核菌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新 的骨架类型，而且其对于结核菌抑制活性强，具备突出的实质性特点，同时用于结核菌感染 的防治显然具有显著的进步。
具体实施方式
本发明所涉及化合物Fluevirosines A的制备方法参见文献（Hua Zhang，et al., Fluevirosines A-C:A Biogenesis Inspired Example in the Discovery of New Bioactive Scaffolds from Flueggea virosa.Organic Letters，2013，15（1）：120–123.）
以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的 任何限制，而是由权利要求加以限定。
实施例1：本发明所涉及化合物Fluevirosines A片剂的制备：
取5克化合物Fluevirosines A，加入糊精195克，混匀，常规压片制成1000片。
实施例2：本发明所涉及化合物Fluevirosines A胶囊剂的制备：
取5克化合物Fluevirosines A，加入淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。
实验例1：固体培养基稀释法测定Fluevirosines A抗卡介苗（BCG）绝对浓度
从斜面上刮取卡介苗培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培养基中，加入少量玻 璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管（MacFarlandNo.1） 比浊，即配成1mg/ml的卡介苗（BCG）菌悬液。
将Fluevirosines A用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀释原 液至所需浓度，将稀释好的Fluevirosines A按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼脂 培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含 Fluevirosines A，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml， 1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。
将浓度为1mg/ml的卡介苗（BCG）菌悬液用接种环蘸取数环，分别接种于含 Fluevirosines A系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8周，观察 实验结果，结果如表1所示。
本实施例中所用Middlebrook7H9肉汤培养基和Middlebrook7H11琼脂培养基为本领域 技术人员进行结核菌培养时的常用培养基，其配方采用常规配方即可。
实验例2固体培养基稀释法测定Fluevirosines A抗结核分枝杆菌标准株H37Rv株绝对 浓度
从斜面上刮取结核分枝杆菌标准株H37Rv株培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培 养基中，加入少量玻璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管 （MacFarland No.1）比浊，即配成1mg/ml的H37Rv株菌悬液。
将Fluevirosines A分别用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀 释原液至所需浓度，将稀释好的Fluevirosines A按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼 脂培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含 Fluevirosines A，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml， 1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。
将浓度为1mg/ml的H37Rv株菌悬液用接种环蘸取数环，分别接种于含Fluevirosines A 系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8周，观察实验结果，结果如 表1所示。
实验例3固体培养基稀释法测定Fluevirosines A抗结核分支杆菌临床分离耐ISRE MTB 株绝对浓度
从斜面上刮取结核分枝杆菌临床分离耐ISRE MTB株（耐异烟肼、链霉素、利福平、乙 胺丁醇结核分枝杆菌临床分离柱）培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培养基中，加 入少量玻璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管（MacFarland No.1）比浊，即配成1mg/ml的菌悬液。
将Fluevirosines A分别用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀 释原液至所需浓度，将稀释好的Fluevirosines A按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼 脂培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含 Fluevirosines A，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml， 1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。
将浓度为1mg/ml的结核分枝杆菌临床分离耐ISRE MTB株菌悬液用接种环蘸取数环，分 别接种于含Fluevirosines A系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8 周，观察实验结果，结果如表1所示。
表1固体培养基稀释法测定Fluevirosines A抗结核菌绝对浓度结果
结论：Fluevirosines A具有很强的抗结核菌和抗耐药性结核菌活性，可作为治疗结 核菌感染疾病的先导化合物，也可用于制备治疗结核病药物。