利用谷壳粉生产兴达酶的方法 本发明涉及一种生产纤维素酶和蛋白酶的方法。
近年来，酶制剂已广泛应用于畜牧业，能提高畜禽对饲料的利用率和生产性能。但生产酶制剂的底物多为昂贵的豆粕、玉米等原料，成本较高，很难被饲料行业接受，而我国南方极为丰富的稻谷副产品资源——稻壳，却因粗纤维含量高而不能直接用作单胃动物饲料。
本发明的目的在于提供一种利用稻壳等低成本原料生产酶制剂的方法。
本发明的任务是通过以下方式实现的：利用谷壳粉生产兴达酶的方法分三级培养而成，
a、一级种培养(所用原料为重量单位)
豆粕64～80％ 淀粉9～18％
琼脂9～18％ 硫酸镁0.15～0.6％
硫酸铵0.15～0.6％ 磷酸二氢钾0.15～0.6％
先将豆粕置于容器中，加入10倍(重量)的水，煮沸15～25分钟过滤，在滤液中加入琼脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸镁、硫酸铵和磷酸二氢钾混溶，加热20～40分钟，加热至沸，再添加10倍(重量)豆粕量的水，搅匀后分装试管，每支盛装5～10毫升，在1.5Kg/cm2压力下蒸汽灭菌30分钟，将试管摆成与竖直方向夹15～20度角备用，在无菌条件下接入黄曲霉柱头变种(Asperglllus flavus var coluranarls)和温特曲霉(Asperglllus wentll)菌种，在30～37℃的温度下培养5～8天，等菌种长满全管时为止。
b、二级种培养(所用原料为重量单位)
麦夫60～90％
饼粕粉或淀粉10～40％
将上述原料按1∶0.6(重量)的比例加水拌匀，装入三角烧瓶或罐头瓶中，每瓶装料15～20克，料厚0.8～1.2cm，塞上棉塞，将口扎紧，在1～1.5Kg/cm2的压力下蒸汽灭菌30分钟，降压后取出摇散，冷至室温后，每瓶加入0.3克一级培养物，用接种铲拌匀，在30～35℃的温度下培养24～48小时，当菌丝充分生长形成饼状后，扣瓶，将瓶横放，继续保温培养3～4天至黄绿色孢子充分长满曲料为止。
c、三级种培养(所用原料为重量单位)
谷壳粉50～70％
玉米粉20～40％
豆饼粉5～15％
先将上述原料粉碎过80目筛，按1∶1的重量比加水拌匀，装在耐压的塑料袋或布袋中，在1～1.5Kg/cm2的压力下蒸汽灭菌30分钟，降压后趁热倒在垫有纸的木盒中，冷却至30℃以下，按0.5～1％(重量)的比例接种二级培养物，拌匀，盖上纸，在30～35℃的温度下培养24～48小时，当白色菌丝充分生长，形成饼状后，扣盘，将结块地原料捏碎，再保温培养2～5天，至开始产生多量的黄绿色粉状物为止，最后将该三级培养物在40℃下干燥，得到成品。
本发明以稻壳为主要原料，余为玉米并加入少量豆粕，成本低廉，每公斤兴达酶成本为1～1.5元人民币。
经检测，兴达酶的蛋白酶活性为6052单位/分·克，纤维素酶32.98单位/分·克，高于国内同类产品。
用本发明的兴达酶进行饲喂肉鸡试验，按0.2％的比例将兴达酶加入基础料(代诱导能2.9～3兆卡/公斤，粗蛋白21～19％)中，饲喂肉用仔鸡，结果40目龄鸡日增重35.81克，比不添加兴达酶的对照组提高了7.57％，饲料增重比2∶12∶1，比对照组饲料报酬提高6.13％，成活率100％，比对照组提高2.5％，经济效益非常显著。
下面结合实施例对本发明作更为详细的描述。
实施例1：
a、一级种培养
豆粕65克 淀粉18克
琼脂16克 硫酸镁0.3克
硫酸铵0.3克 磷酸二氢钾0.4克
先将豆粕置于容器中，加入650克水，煮沸18分钟，过滤，在滤液中加入琼脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸镁、硫酸铵和磷酸二氢钾混溶，加热25分钟，至沸，再添加650克水，搅匀后分装试管，每支盛装10毫升，在1.5Kg/cm2压力下蒸汽灭菌30分钟，将试管摆成与竖直方向夹15度角备用，在无菌条件下接入黄曲霉柱头变种(Asperglllus flavus var coluranaris)和温特曲霉(Asperglllus wentll)菌种，在32±1℃的温度下培养8天，等菌种长满全管时为止。
b、二级种培养
麦夫170克 玉米粉30克
在上述原料中加入333克水拌匀，装入三角烧瓶中，每瓶装15克料，料厚0.8cm，塞上棉塞，将口扎紧，在1.5Kg/cm2的压力下蒸汽灭菌30分钟，降压后取出摇散，冷至室温后，每瓶加入0.3克一级培养物，用接种铲拌匀，在30℃的温度下培养30小时，当菌丝充分生长形成饼状后，扣瓶，将瓶横放，继续保温培养3天至黄绿色孢子充分长满曲料为止。
c、三级种培养
谷壳粉60公斤 玉米粉25公斤
豆饼粉15公斤
先将上述原料粉碎过80目筛，加入100公斤水拌匀，装在布袋中，在1.5Kg/cm2的压力下蒸汽灭菌30分钟，降压后趁热倒在垫有纸的木盒中，冷却至25℃，按1％(重量)的比例接种二级培养物，拌匀，盖上纸，在31±1℃的温度下培养36小时，当白色菌丝充分生长，形成饼状后，扣盘，将结块的原料捏碎，再保温培养3天，至开始产生大量的黄绿色粉状物为止，最后将该三级培养物在35±2℃下干燥，得到成品。
实施例2：
该兴达酚分三级培养而成：
a、一级种培养
豆粕76克 淀粉12克
琼脂10.5克 硫酸镁0.6克
硫酸铵0.5克 磷酸二氢钾0.4克
先将豆粕置于容器中，加入760克水，煮沸25分钟，过滤，在滤液中加琼脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸镁、硫酸铵和磷酸二氢钾混溶，加热35分钟至沸，再添加760克水，搅匀后分装试管，每支盛装8毫升，在1.5Kg/cm2压力下蒸汽灭菌30分钟，将试管摆成与竖直方向夹20度角备用，在无菌条件下接入黄曲霉柱头变种(Aspergll1us flavus var coluranaris)和温特曲霉(Asperglllus Wentll)菌种，在35±1℃的温度下培养6天，等菌种长满全管为止。
b、二级种培养
麦夫130克 面粉70克
将上述原料混合，加入333克水拌匀，装入罐头瓶中，每瓶装20克料，料厚1.1cm，塞上棉塞，将口扎紧，在1Kg/cm2的压力下蒸汽灭菌30分钟，降压后取出摇散，冷至室温后，每瓶加入0.3克一级培养物，用接种铲拌匀，在32±1℃的温度下培养40小时，当菌丝充分生长形成饼状后，扣瓶，将瓶横放，继续保温培养4天，至黄绿色孢子充分长满曲料为止。
c、三级种培养
谷壳粉70公斤 玉米粉20公斤
豆饼粉10公斤
先将上述原料粉碎过80目筛，加入100公斤水拌匀，装在塑料袋中，在1Kg/cm2的压力下蒸汽灭30分钟，降压后趁热倒在垫有纸的木盒中，冷却至20℃，按1％(重量)的比例接种二级培养物，拌匀，盖上纸，在33±1℃的温度下培养28小时，当白色菌丝充分生长，形成饼状后，扣盘，将结块的原料捏碎，再保温培养5天，至开始产生多量的黄绿色粉状物为止，最后将该三级培养物在30±2℃下干燥，得到兴达酶成品。