技术领域
本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种治疗宫颈炎的药物组合物及其制备方法。
背景技术
宫颈炎为妇科常见的妇科疾病，多发生于生育年龄的妇女。老年人也有随阴道炎而发病的。宫颈炎主要表现为白带增多，呈脓性，或有异常出血如经间期出血、性交后出血等，常伴有腰酸及下腹部不适。有急性和慢性两种，急性宫颈炎常与急性子宫内膜炎或急性阴道炎同时存在，但以慢性宫颈炎多见。宫颈炎的发生与性生活有关系，自然或人工流产，诊断性刮宫以及分娩都可造成子宫颈损伤而导致炎症。治疗策略主要为抗生素药物治疗。对于获得病原体者，针对病原体选择敏感抗生素。经验性治疗应包括针对各种可能的病原微生物的治疗，需包括需氧菌、厌氧菌、衣原体(和或淋菌)、支原体等，但抗生素治疗，时间长副作用大，因此急需研发一种副作用小疗效显著的药物。
本发明人为了解决上述问题，研发了一种新药。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗宫颈炎的药物组合物。
本发明的另一目的是提供一种治疗宫颈炎的药物组合物的制备方法。
本发明提供一种治疗宫颈炎的药物组合物，该药物组合物由以下重量份的药物制成：青风藤5-30份、昆布10-50份、罗布麻叶10-50份、使君子15-70份、佩兰15-70份、金钱白花蛇10-60份、泽泻10-60份、降香15-75份、细辛10-30份、枳壳10-50份、升麻10-50份、火硝5-18份、甘草10-50份。
优选地，本发明提供的药物组合物由以下重量份的药物制成：青风藤8-28份、昆布15-45份、罗布麻叶15-45份、使君子20-65份、佩兰20-65份、金钱白花蛇15-55份、泽泻15-55份、降香20-70份、细辛12-28份、枳壳15-45份、升麻15-45份、火硝7-16份、甘草15-45份。
进一步优选地，本发明提供的药物组合物由以下重量份的药物制成：青风藤10-25份、昆布20-40份、罗布麻叶20-40份、使君子25-60份、佩兰25-60份、金钱白花蛇20-50份、泽泻20-50份、降香25-65份、细辛15-25份、枳壳20-40份、升麻20-40份、火硝10-14份、甘草20-40份。
更进一步优选地，本发明提供的药物组合物由以下重量份的药物制成：青风藤13-22份、昆布25-35份、罗布麻叶25-35份、使君子30-55份、佩兰30-55份、金钱白花蛇25-45份、泽泻25-45份、降香30-60份、细辛17-22份、枳壳25-35份、升麻25-35份、火硝11-13份、甘草25-35份。
更进一步优选地，本发明提供的药物组合物由以下重量份的药物制成：青风藤18份、昆布30份、罗布麻叶30份、使君子40份、佩兰40份、金钱白花蛇32份、泽泻32份、降香45份、细辛20份、枳壳30份、升麻30份、火硝12份、甘草30份。
本发明所述的该药物组合物还含有药学上可接受的载体或稀释剂。
本发明所述药物组合物为固体制剂或液体制剂，所述固体制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂；所述液体制剂为口服液。
本发明所述的药物组合物的制备方法包括以下步骤：青风藤、昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、金钱白花蛇、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草粉碎过筛，与药学上可接受的载体或稀释剂混合均匀，制备成制剂。
本发明所述药物组合物的制备方法包括以下步骤：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡5-10天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒15-30分钟，趁热粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入2-5倍量的65-85％的乙醇，回流提取2-5次，每次1-3小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入药学上可接受的载体或稀释剂混合均匀，制成制剂。
优选地本发明所述药物组合物的制备方法包括以下步骤：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入药学上可接受的载体或稀释剂混合均匀，制成制剂。
所述重量份数可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位。
倍量的含义是指药材的重量比。
所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。
其中所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；
所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；
所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠；
所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、二氧化硅、滑石粉或硬脂酸镁；
所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等；
所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素或糖精钠。
本发明提供的治疗宫颈炎的药物组合物具有以下优点：
本发明通过药效学试验资料显示：本发明实施例9具清热燥湿、祛腐生肌的作用，药效学试验显示：对二甲苯致小鼠耳肿胀具有抗炎作用，药物组合物三个剂量均能不同程度地降低醋酸致痛小鼠的扭体次数，对金葡菌所致实验性大鼠宫颈炎病理形态学有显著性的改善作用，通过药效试验证明本发明对宫颈炎患者具有一定的抑菌、抗炎、止痛的作用，上述研究为本发明临床治疗急、慢性宫颈炎症提供了实验参考。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
组方：青风藤5g、昆布10g、罗布麻叶10g、使君子15g、佩兰15g、金钱白花蛇10g、泽泻10g、降香15g、细辛10g、枳壳10g、升麻10g、火硝5g、甘草10g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡5天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒15分钟，趁热粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入2倍量的65％的乙醇，回流提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，装入胶囊，制成胶囊剂。
实施例2
组方：青风藤30g、昆布50g、罗布麻叶50g、使君子70g、佩兰70g、金钱白花蛇60g、泽泻60g、降香75g、细辛30g、枳壳50g、升麻50g、火硝18g、甘草50g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡10天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒30分钟，趁热粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入5倍量的85％的乙醇，回流提取5次，每次3小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，装入胶囊，制成胶囊剂。
实施例3
组方：青风藤8g、昆布15g、罗布麻叶15g、使君子20g、佩兰20g、金钱白花蛇15g、泽泻15g、降香20g、细辛12g、枳壳15g、升麻15g、火硝7g、甘草15g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡7天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒18分钟，趁热粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的70％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，干燥，压片，即得本申请的片剂。
实施例4
组方：青风藤28g、昆布45g、罗布麻叶45g、使君子65g、佩兰65g、金钱白花蛇55g、泽泻55g、降香70g、细辛28g、枳壳45g、升麻45g、火硝16g、甘草45g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒25分钟，趁热粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入4倍量的80％的乙醇，回流提取4次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，混匀，制粒，干燥，整粒，得到本申请的颗粒剂。
实施例5
组方：青风藤10g、昆布20g、罗布麻叶20g、使君子25g、佩兰25g、金钱白花蛇20g、泽泻20g、降香25g、细辛15g、枳壳20g、升麻20g、火硝10g、甘草20g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，干燥，压片，即得本申请的片剂。
实施例6
组方：青风藤25g、昆布40g、罗布麻叶40g、使君子60g、佩兰60g、金钱白花蛇50g、泽泻50g、降香65g、细辛25g、枳壳40g、升麻40g、火硝14g、甘草40g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，干燥，压片，即得本申请的片剂。
实施例7
组方：青风藤13g、昆布25g、罗布麻叶25g、使君子30g、佩兰30g、金钱白花蛇25g、泽泻25g、降香30g、细辛17g、枳壳25g、升麻25g、火硝11g、甘草25g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，干燥，压片，即得本申请的片剂。
实施例8
组方：青风藤22g、昆布35g、罗布麻叶35g、使君子55g、佩兰55g、金钱白花蛇45g、泽泻45g、降香60g、细辛22g、枳壳35g、升麻35g、火硝13g、甘草35g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，干燥，压片，即得本申请的片剂。
实施例9
组方：青风藤18g、昆布30g、罗布麻叶30g、使君子40g、佩兰40g、金钱白花蛇32g、泽泻32g、降香45g、细辛20g、枳壳30g、升麻30g、火硝12g、甘草30g。
制备方法：
1)称取重量份的药物备用；
2)将青风藤、金钱白花蛇加白酒浸泡8天，过滤、滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，备用；滤渣用文火炒22分钟，粉碎成细粉，备用；
3)将昆布、罗布麻叶、使君子、佩兰、泽泻、降香、细辛、枳壳、升麻、火硝、甘草加入3倍量的75％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩干燥，粉碎成细粉，备用；
4)将步骤2)、3)备用的细粉混合均匀，加入占混合均匀细粉重量1/5的淀粉，装入胶囊，制成胶囊剂。
发明人为了进一步简述本发明的有益效果，进行了药效学试验，具体如下：
1、材料与试剂
1.1受试药物及药品本发明实施例9药物组合物；阿司匹林；米可定阴道泡腾片。
1.2菌株金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、大肠杆菌(ATCC25922)、铜绿假单胞菌(ATCC25783)、白念珠菌(ATCC76615)、甲链球菌，均为标准株。
1.3动物昆明小鼠，雌雄各半，体重16～20g，清洁级；Wistar大鼠，雄性，清洁级动物。
2、方法与结果
2.1体外抗菌试验
测试菌的准备：在已分纯的待测菌平板(营养琼脂培养基或血营养琼脂培养基)上挑取4～5个直径约1mm左右的菌落种到3～5ml营养肉汤或血清肉汤培养基，35℃培养15h～18h。增菌后的对数生长期菌液用3～5ml生理盐水校正浓度至0.5麦氏比浊标准，制备好的菌液应在15min内接种。试验方法：含被检测样品琼脂制备：取融化后并在60℃水浴中平衡0.5h以上的MH琼脂加入不同量的样品，充分混合后倾注平板，冷却后放37℃烘10min后使用。
接种：取1μl菌液接种于上述平板上，形成约5～10mm大小的菌液圈。最后接种不含样品的生长对照平板。将试管置35℃孵育24h后观察结果。菌落生长被完全抑制的最低样品浓度为该样品对检测菌的MIC。
结果：本发明实施例9对体外金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白念珠菌均有一定的抑制作用，但对甲链球菌作用不明显。
表1本发明实施例9药物组合物对各种细菌的MIC
2.2对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用
取昆明小鼠50只，随机分为5组，每组10只。各组按表2所示的剂量灌胃给药，每天1次，连续3天，模型组灌胃等体积蒸馏水。末次给药后45min，小鼠右耳两面涂二甲苯0.05ml/只，左耳不涂。45min后处死小鼠，分别在双耳相同部位打下圆片，称重，计算肿胀度(＝右耳重量-左耳重量)、肿胀抑制率[＝(模型组肿胀度均值-给药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100％]。结果详见表2。
表2对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用(n＝20)
组别 剂量(g/kg) 耳廓肿胀度(mg) 肿胀抑制率(％) 模型 - 0.0191±0.0052 - 阿司匹林 0.6 0.0062±0.0033*** 62.30 实施例9高剂量 8 0.0071±0.0053** 62.82 实施例9中剂量 4 0.0102±0.0052* 46.59 实施例9低剂量 2 0.0123±0.0041 35.60
注：与模型组比较：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
从表2可以看出，本发明药物三个剂量均能不同程度地降低二甲苯引起的小鼠耳肿胀，其中，实施例9中、高剂量的作用明显，与模型组比较，有显著性或极显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。
2.3对醋酸致小鼠疼痛的影响
取昆明小鼠50只，随机分为5组，每组10只。各组按表3所示的剂量灌胃给药，模型组灌胃等体积蒸馏水。给药后45min，腹腔注射0.6％醋酸溶液0.1ml/10g，观察注射后15min出现的扭体反应次数(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)，计算镇痛百分率[＝(模型组扭体次数均值-给药组扭体次数均值)/模型组扭体次数均值×100％]。结果详见表3。
表3对醋酸致小鼠疼痛的影响(n＝20)
组别 剂量(g/kg) 扭体次数 镇痛百分率(％) 模型 - 36.5±6.2 - 盐酸曲马多 0.133 21.6±10.5* 40.82 实施例9高剂量 8 22.8±10.3 37.53 实施例9中剂量 4 25.2±9.5 30.96 实施例9低剂量 2 26.2±10.5 28.22
注：与模型组比较：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
从表3可以看出，本发明药物组合物三个剂量均能不同程度地降低醋酸致痛小鼠的扭体次数。
2.4对实验性大鼠宫颈炎病理形态学的影响
将200g左右大鼠按性别、体重均衡后，随机分为：阴性对照组(蒸馏水)、阳性对照组(米可定0.2ml/kg)、本发明实施例9低剂量组2g/kg)本发明实施例9中剂量组(4g/kg)和高剂量组(8g/kg)，每组10只动物。
各组动物将金葡菌液(20亿/ml)用注射器(针尖磨平)从阴道插入至宫颈处(子宫分角处)，来回几次轻轻摩擦后注入，每只大鼠0.2ml。当日用同样方法和剂量再造模一次。造模后第3d用注射器(针尖磨平)从阴道插入至宫颈处给药，每日一次，按剂量连续10d。给药后第11d，处死各组动物，解剖取出阴道至子宫分角处组织，置20％福尔马林溶液中固定，做常规石蜡切片，HE染色，镜下观察阴道至子宫组织形态学变化及黏膜、黏膜下间质形态学的炎症改变程度。
显微形态学观察：造模组阴道黏膜鳞状上皮层次增厚，宫颈鳞柱交界处可见有柱状上皮鳞状化生，上皮糜烂。有个别见黏膜溃疡，黏膜下层毛细血管扩张充血，间质水肿。从黏膜至间质均可见大量炎细胞浸润。本发明实施例9与造模组相应部位比较，病变均明显减轻，其炎症程度也有所减轻，炎症下炎细胞浸润明显减少，结果见表4
表4本发明实施例9对实验性大鼠宫颈形态学影响
炎症程度的评定标准：
炎细胞浸润：
- 无炎细胞浸润现象
+ 仅见黏膜及黏膜下浅层有少量炎细胞浸润
++ 黏膜及黏膜下间质有中等量炎细胞浸润
+++ 黏膜及黏膜下间质内深层均见大量炎细胞浸润
脱落：- 无脱落现象
+ 鳞状上皮明显脱落现象
糜烂：- 无糜烂现象
+ 鳞状上皮均见糜烂现象
结果表明，本发明实施例9对金葡菌所致实验性大鼠宫颈炎病理形态学有显著性的改善作用。
3、讨论
本发明实施例9具清热燥湿、祛腐生肌的作用。本研究结果表明，对二甲苯致小鼠耳肿胀具有抗炎作用，药物组合物三个剂量均能不同程度地降低醋酸致痛小鼠的扭体次数，对金葡菌所致实验性大鼠宫颈炎病理形态学有显著性的改善作用，通过药效试验证明本发明对宫颈炎患者具有一定的抑菌、抗炎、止痛的作用，上述研究为本发明临床治疗急、慢性宫颈炎症提供了实验参考。
4、安全性分析及评价
本品通过急性毒性试验，长期毒性试验结果显示：在本实验条件下无明显的毒性反应。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。