技术领域
本发明涉及中药组方，特别涉及一种用于防治脂溢性脱发的祛脂生发方及其制备方法。
背景技术
据权威机构统计，中国25岁～35岁男子患男性型脱发的比例高达40％，总人数已经超 过1.5亿；脱发正呈现出年轻化的趋势，84.8％被确诊为脂溢性脱发。
美国FDA(Food and Drug Administration，食品和药物管理局)批准唯一用于临床治疗 本病的5a-还原酶抑制剂-保法止(非那雄胺)，能降低血清和毛囊二氢睾酮水平。
在实现本发明的过程中，发明人发现现有技术至少存在以下问题：使用现有的方法不良 反应有轻度肝功能异常、性功能障碍、中重度抑郁、情绪紊乱、睡眠及饮食习惯异常等，停 药后易复发，难以维持疗效。
发明内容
本发明实施例的目的是针对上述现有技术的缺陷，提供一种疗效确切、毒副作用小的用 于防治脂溢性脱发的祛脂生发方。
本发明实施例的目的另一目的在于提供中药组方的制备方法。
为了实现上述目的本发明采取的技术方案是：
一种用于防治脂溢性脱发的祛脂生发方，包括以下重量份的药物：
干姜1～50重量份、川椒1～50重量份、川芎1～50重量份、红花1～50重量份，蔓荆 子1～50重量份、防风1～50重量份、黄芩1～50重量份、当归1～50重量份。
本发明提供优选的技术方案是：一种用于防治脂溢性脱发的祛脂生发方，包括以下重量 份的药物：
干姜10～40重量份、川椒10～40重量份、川芎10～40重量份、红花10～40重量份， 蔓荆子5～30重量份、防风5～30重量份、黄芩5～30重量份、当归10～40重量份。
本发明提供更优选的技术方案是：一种用于防治脂溢性脱发的祛脂生发方，包括以下重 量份的药物：
干姜30重量份、川椒30重量份、川芎20重量份、红花20重量份，蔓荆子10重量份、 防风10重量份、黄芩10重量份、当归10重量份。
本发明还提供一种中药组方，含有有效剂量的上述祛脂生发方及药用载体。
本发明的中药组方的制备方法包括以下步骤：
按重量份称取干姜、川椒、川芎、红花，蔓荆子、防风、黄芩和当归，加入70％乙醇浸 泡20-40min，再加热回流提取2.5-3.5小时，温度控制在75-85℃，保持提取液微沸，常温过 滤，静置10-12小时，取上清液离心15-25min，加入辅料或赋形剂，制成各种外用剂型。
所述各种外用剂型选自洗剂、软膏剂、油剂、霜剂、糊剂、搽剂或涂膜剂。
本发明洗剂的制备方法是：取以上八味中药，加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提 取3小时，温度控制在80-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min， 加水至1400ml，用柠檬酸调整pH至6.5-7.0，过滤，加防腐剂，即得洗剂。
本发明软膏剂的制备方法是：取以上八味中药，加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流 提取3小时，温度控制在80-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min 后，浓缩至相对密度为1.20，加入羊毛脂，凡士林，羟基苯甲酸乙脂，混匀即得软膏。
本发明油剂的制备方法是：取以上八味中药，加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提 取3小时，温度控制在80-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min， 溶于适量热甘油中，不断搅拌，加甘油至1400ml，充分混匀，即得油剂。
本发明霜剂的制备方法是：
制备中药提取物：按重量份称取干姜、川椒、川芎、红花，蔓荆子、防风、黄芩和当归， 加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提取3小时，温度控制在75-85℃，保持提取液微沸， 常温过滤，静置12h，取上清液离心20min后，水浴100℃蒸成稠膏；
将水相组成物和油相组成物分别置于容器中，水相组成物加热至85-95℃，油相组成物加 热至熔化，在恒温下，将油相组成物缓缓加入水相组成物中，按同一方向不停搅拌混合，待 温度降至45℃，搅至冷凝，即得霜剂；
所述水相组成物为：中药提取物10.0重量份，氮酮6.0重量份，甘油21重量份，丙二醇 6.0重量份，吐温-60 1.5毫升份，月桂醇硫酸钠0.5毫升份，蒸馏水加至100毫升份；
所述油相组成物为：十八醇6.5重量份，白油6.0重量份，单硬脂酸甘油酯4.0重量份， 棕榈酸异丙酯3.0重量份，凡士林7.0重量份，尼泊金甲酯0.15毫升份，尼泊金丙酯0.05毫 升份，卡松0.05毫升份。
本发明糊剂的制备方法是：取以上八味中药，加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提 取3小时，温度控制在75-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min 后，60℃浓缩至稠膏，用乙醇稀释至140ml。加入淀粉，加热搅拌成糊状，即得糊剂。
本发明搽剂/酊剂的制备方法是：取以上八味，加70％乙醇浸泡30min，加热回流提取3 小时，温度75-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min后，加入 适量防腐剂，加70％乙醇溶液至1400ml，即得搽剂/酊剂。
本发明硬膏剂的制备方法是：取以上八味中药，每味中药酌予碎断，每味中药与胡麻油 500-600重量份置铁锅中加热至50-80℃后，进行煎熬，煎熬时间：3-8小时，待诸药外表呈 深褐色内部焦黄色时，过滤得滤液，滤液中再加入红丹粉1400-1500重量份，搅匀后收膏， 将药膏在冷水中浸泡3-7天，每日换水3-5次，最后将药膏摊在裱背材料上，粘上膏面覆盖 物，制成硬膏。
本发明涂膜剂的制备方法是：取以上八味，加70％乙醇浸泡30min，加热回流提取3小 时，温度75-85℃，保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min，取上清， 60℃浓缩成稠膏约140ml。基质制备：取聚乙烯醇17-88 50g用适量纯化水胀溶过夜，使其充 分膨胀，置水浴加热溶解，作基质备用。向基质中加入中药提取物及甘油适量，搅匀，添加蒸馏 水至1400ml。趁热过滤，100℃灭菌30分钟，即得涂膜剂。
本发明外用散剂的制备方法是：取以上八味中药粉碎成细粉，过筛，加入淀粉至1400g， 混匀，分装备用，即得外用散剂。
本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：组方符合中医药理论，疗效确切，安 全性高。
本发明祛脂生发中药组方由干姜、川椒、川芎、红花，蔓荆子、防风、黄芩、当归组成， 与现有市场销售的产品的处方均不相同。本发明中药组方本着滋补肝肾，理气活血的治法治 则。中药组方中，干姜和川椒抗菌止痒红花辛而甘温苦，具有活血通络、去瘀止痛功效，凉 血生发；蔓荆子益气，令人光泽脂致，能长髭发；防风、黄芩清泻湿热解毒行气疏风活络； 当归、川芎养血活血、祛瘀，均可扩张毛细血管，加速微循环，改善头发的营养状况；本发 明的中药组方可共同起到促进皮肤气血运行，疏通经络，促进毛发生长的作用。
本发明中药组方对毛发生长有明显的促生长作用，并优于各单味中药和拆方组方来，本 发明中药组方符合中医药理论，八药相使配伍，对防治脂溢性脱发具有较好的协同增效作用， 具有全方位、多环节和多靶点的优势。
附图说明
图1为中药生发液对小鼠毛发生长过程的影响图；
图2为中药生发液对小鼠脱毛区体毛生长重量的影响图；
图3为中药生发液对小鼠脱毛区体毛生长长度的影响图；
图4为祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠毛发生长过程的影响图；
图5为祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛生长重量的影响图；
图6为祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛生长长度的影响图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进 一步地详细描述。
实施例1
按照下列重量称取原料(g)：
干姜30g、川椒30g、川芎20g、红花20g、蔓荆子10g、防风10g、黄芩10g、当归10g。
本发明洗剂的制备方法：
取干姜30g、川椒30g、川芎20g、红花20g、蔓荆子10g、防风10g、黄芩10g、当归10g， 加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提取3小时，温度控制在80℃，保持提取液微沸。常 温过滤，静置12h，取上清液离心20min，加水至1400ml，用柠檬酸调整pH至6.5-7.5，过 滤，加尼泊金甲酯0.15g，尼泊金丙酯0.15g，即得洗剂。
实施例2
按照下列重量称取原料(g)：
干姜10g、川椒40g、川芎10g、红花40g、蔓荆子5g、防风30g、黄芩5g、当归40g。
本发明软膏剂的制备：
取干姜10g、川椒40g、川芎10g、红花40g、蔓荆子5g、防风30g、黄芩5g、当归40g， 加入70％乙醇浸泡40min，再加热回流提取2.5小时，温度控制在85℃，保持提取液微沸。 常温过滤，静置12h，取上清液离心15min后，浓缩至相对密度为1.20，加入羊毛脂200g， 凡士林100g，羟基苯甲酸乙脂1g，混匀即得软膏。
实施例3
按照下列重量称取原料(g)：
干姜40g、川椒10g、川芎40g、红花10g、蔓荆子30g、防风5g、黄芩30g、当归10g。
本发明油剂的制备：
取干姜40g、川椒10g、川芎40g、红花10g、蔓荆子30g、防风5g、黄芩30g、当归10g， 加入70％乙醇浸泡20min，再加热回流提取3.5小时，温度控制在75℃，保持提取液微沸。 常温过滤，静置10h，取上清液离心25min，溶于适量热甘油中，不断搅拌，加甘油至1400ml， 充分混匀，即得油剂。
实施例4
按照下列重量称取原料(g)：
干姜20g、川椒20g、川芎15g、红花35g、蔓荆子10g、防风15g、黄芩10g、当归20g。
本发明霜剂的制备：
中药提取物制备：取干姜20g、川椒20g、川芎15g、红花35g、蔓荆子10g、防风15g、 黄芩10g、当归20g，加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提取3小时，温度控制在75-85℃， 保持提取液微沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min后，水浴100℃蒸成稠膏。
水相组成物质：中药提取物10.0g，氮酮6.0g，甘油21.0g，丙二醇6.0g，吐温-60 1.5ml， 月桂醇硫酸钠0.5ml，蒸馏水加至100ml。
油相组成物质：十八醇6.5g，白油6.0g，单硬脂酸甘油酯4.0g，棕榈酸异丙酯3.0g，凡 士林7.0g，尼泊金甲酯0.15ml，尼泊金丙酯0.05ml，卡松0.05ml。
将水相组成物质和油相组成物质分别置于容器中，水相组成物质加热至90℃，油相组成 物质加热至熔化，在恒温下，将油相组成物质缓缓加入水相组成物质中，按同一方向不停搅 拌混合，待温度降至45℃，搅至冷凝，即得霜剂。
实施例5
按照下列重量称取原料(g)：
干姜30g、川椒35g、川芎30g、红花20g、蔓荆子15g、防风20g、黄芩20g、当归30g。
本发明糊剂的制备：
取干姜30g、川椒35g、川芎30g、红花20g，蔓荆子15g、防风20g、黄芩20g、当归30g， 加入70％乙醇浸泡30min，再加热回流提取3小时，温度控制在80℃，保持提取液微沸。常 温过滤，静置12h，取上清液离心20min后，60℃浓缩至稠膏，用乙醇稀释至140ml。加入淀 粉350g，加热搅拌成糊状，即得糊剂。
实施例6
按照下列重量称取原料(g)：
干姜25g、川椒15g、川芎20g、红花15g，蔓荆子20g、防风10g、黄芩15g、当归25g。
本发明搽剂的制备：
取干姜25g、川椒15g、川芎20g、红花15g，蔓荆子20g、防风10g、黄芩15g、当归25g， 加70％乙醇浸泡30min，加热回流提取3小时，温度80-85℃，保持提取液微沸。常温过滤， 静置12h，取上清液离心20min后，加入防腐剂羟基苯甲酸乙脂1g，加70％乙醇溶液至1400ml， 即得搽剂。
实施例7
按照下列重量称取原料(g)：
干姜50g、川椒45g、川芎20g、红花50g，蔓荆子45g、防风5g、黄芩45g、当归50g。
本发明硬膏剂的制备：
取干姜50g、川椒45g、川芎20g、红花50g，蔓荆子45g、防风5g、黄芩45g、当归50g， 每味中药酌予碎断，与胡麻油560g置铁锅中加热至50-80℃后，进行煎熬，煎熬5小时，待 诸药外表呈深褐色内部焦黄色时，去渣，过滤得滤液，炼至滴水成珠时，再加入红丹粉1450g， 搅匀后收膏，将药膏在冷水中浸泡3-7天，每日换水3-5次，除去火毒，最后将药膏摊在裱 背材料上，粘上膏面覆盖物，制成硬膏。
实施例8
按照下列重量称取原料(g)：
干姜50g、川椒35g、川芎50g、红花50g、蔓荆子15g、防风20g、黄芩20g、当归1g。
本发明涂膜剂的制备：
中药提取物：干姜50g、川椒35g、川芎50g、红花50g、蔓荆子15g、防风20g、黄芩 20g、当归1g，加70％乙醇浸泡30min，加热回流提取3小时，温度80-85℃，保持提取液微 沸。常温过滤，静置12h，取上清液离心20min，取上清，60℃浓缩成稠膏约140ml。
基质制备：取聚乙烯醇17-88 50g用适量纯化水胀溶过夜，使其充分膨胀，置水浴加热溶 解，作基质备用。
制备工艺：向基质中加入中药提取物及甘油50g，搅匀，添加蒸馏水至1400ml。趁热过 滤，100℃灭菌30分钟，即得涂膜剂。
实施例9
按照下列重量称取原料(g)：
干姜25g、川椒50g、川芎1g、红花1g，蔓荆子20g、防风50g、黄芩15g、当归25g。
本发明外用散剂的制备：
将干姜25g、川椒50g、川芎1g、红花1g，蔓荆子20g、防风50g、黄芩15g、当归25g 八味中药粉碎成细粉，过筛，加入淀粉至1400g，混匀，分装备用，即得外用散剂。
本发明具有以下药理作用：能显著促进小鼠脱毛区新生毛发生长；提高小鼠脱毛区毛发 生长密度，增加毛发重量；显著增加小鼠脱毛区毛发生长长度。以上药理作用为其临床用于 防治脂溢性脱发提供了实验依据。
下面结合一些试验进一步来说明本发明的效果：
实验一、祛脂生发中药组方的筛选实验
1.1实验目的
通过祛脂生发方处方I、II、III、IV对脱毛小鼠毛发生长状况的实验研究，筛选出防治脂 溢性脱发最有效的祛脂生发方。
1.2实验材料
1.2.1受试药物
祛脂生发方处方I、II、III、IV，含生药0.1g/ml，①祛脂生发方处方I：干姜、川椒各30g、 川芎、红花各20g，蔓荆子、防风、黄芩、当归各10g；②祛脂生发方处方II：白鲜皮、苦参、 蔓荆子各30g，川椒15g，防风、川芎、黄芩、当归各10g；③中药生发液处方III：侧柏叶、 当归、干姜30g，川椒15g，丹参、蔓荆子、防风、川芎各10g，黄芩5g；④祛脂生发方处方 IV：人参、何首乌、黄芪各30g，蔓荆子、川椒各20g，当归15g，防风、川芎、黄芩各10g。
1.2.2阳性对照药
章光101育发剂，浙江章光101集团，批号：20091101。
1.2.3实验材料及试剂
75％乙醇(天津市富学精细化工有限公司，批号：090707)、苦味酸(广州化学试剂厂， 批号：20080401-1)、6％硫化钠脱毛剂(广州市番禺力强化工厂，批号：20090512)；移液枪 (Dragon-med)、十万分之一分析天平(DENVER TB-215D)、14mm打孔器，游标卡尺(Tricle Brand)。
1.2.4实验动物
昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半(SPF级，由广州中医药大学实验动物中心提供， 合格证号：SCXK(粤)2008-0020)。
1.3实验方法
1.3.1造模方法
取昆明种小鼠30只，背部毛剪短，将脱毛剂(6％Na2S)涂于小鼠背部约2-3分钟后，用温 水洗净，以小鼠背部光滑，无伤无残毛为净，脱毛面积约3×4cm2。
1.3.2实验分组
脱毛次日，将小鼠随机分6组，每组10只，分别为：①空白组：涂抹75％乙醇；②阳性 对照组：涂抹101育发剂；③实验组(处方I)：涂抹处方I的中药提取液；④实验组(处方 II)：涂抹处方II的中药提取液；⑤实验组(处方III)：涂抹处方III的中药提取液；⑥实验 组(处方IV)：涂抹处方IV的中药提取液。
1.3.3给药方法
局部皮肤使用移液枪定量涂抹给药，每天2次，每次给药量为0.1ml/12cm2。上午、下午 给动物喂食前给药，连续给药10天。
1.3.4观察指标
新生毛生长状况：每2日对每鼠脱毛区新毛生长状况评分；评分标准见表1：
新生毛重：实验第11日脱颈处死小鼠，将背部脱毛区毛皮剪下，用14mm打孔器于每鼠 脱毛区相同位置取一圆形皮片，用手术刀刮下皮片上所有体毛，十万分之一分析天平称重；
新生毛长：每鼠脱毛区打孔后的剩余皮肤上，在相同位置用放大镜和镊子取最长毛10根， 放大镜下用游标卡尺测量新生毛长度。
记录各组小鼠新生毛生长状况评分结果、新生毛重、新生毛长测量值。
表1小鼠新生毛生长状况评分标准
评分值 小鼠新生毛生长状况 0分 无毛生长 1分 浅毛长满脱毛区 2分 新生毛长度及密度约为未脱毛区的一半 3分 新生毛长与未脱毛区无差别20 备注 出现不规则毛生长的小鼠按面积比率计算
1.4实验结果
表2 中药生发液对小鼠脱毛区体毛生长“评分”结果
注：*P＜0.05与乙醇组相比
表2和图1结果显示：与空白组比较，101育发剂从涂药后第2d到第10d，一直保持有 明显的促小鼠毛发生长的作用(P＜0.05)，提示造模成功；与空白组比较，处方I组在第2d 开始有明显的促小鼠毛发生长的作用(P＜0.05)，处方III组在第4d开始有明显促毛发生长作 用(P＜0.05)，显效较晚；与空白组比较，处方II组、处方IV组有促小鼠毛发生长作用，但促 毛发生长效果不显著以及不稳定(P＞0.05)。
表3 祛脂生发方对小鼠脱毛区体毛生长重量的影响
注：*P＜0.05，**P＜0.01与乙醇组相比
表3、图2结果显示：与空白组比较，101育发液能显著增加脱毛区体毛重量(P＜0.05)， 提示造模成功；与空白组比较，处方I组、处方III组能显著增加小鼠毛重(P＜0.05)，提示处 方I、处方III对毛发生长有显著的促进效果；与101育发剂组比较、处方I组、处方III组没有 显著性差异(P＞0.05)，提示101育发剂与处方I、处方III育发效果基本一致；处方II组、处 方IV组与空白组比较，没有显著性差异(P＞0.05)，提示处方II组、处方IV组育发效果不明显。
表4 祛脂生发方对小鼠脱毛区体毛生长长度的影响
注：*P＜0.05与乙醇组相比
表4、图3结果显示：与空白组比较，101育发液能显著增长小鼠脱毛区体毛长度(P＜0.05)， 提示造模成功；与空白组比较，处方I能显著增长小鼠脱毛区体毛长度(P＜0.05)，处方II组、 处方III组、处方IV组没有显著性差异(P＞0.05)；处方I组与101育发剂组相比较则无显著性 差异(P＞0.05)；提示处方I组能显著增加小鼠脱毛区新生毛长度，与101育发剂效果基本一 致。
1.5讨论
本实验将6％Na2S小鼠脱毛，以101育发液为阳性对照，综合新生毛生长状况、新生毛 重、新生毛长三个测量指标结果，对中药生发液的处方进行筛选。实验结果表明：中药生发 液处方I、处方II、处方III、处方IV组对毛发生长都有促进作用；处方I、处方III可显著增 加毛发生长重量；处方I能显著增加毛发生长的长度；总体认为，处方I促毛发生长效果优 于处方II、处方III、处方IV。
实验二、祛脂生发方全方及其拆方促小鼠毛发生长试验
摘要：通过建立6％Na2S致小鼠脱毛模型，综合新生毛重、新生毛长的测量指标结果， 对祛脂生发方的全方及其拆方进行效果评价。
1.实验材料
1.1实验动物
昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半(SPF级，由广州中医药大学实验动物中心提供， 合格证号：SCXK(粤)2008-0020)
1.2受试药物
(一)整方中药提取液：含生药1g/ml。
制备方法：取干姜30g、川椒30g，川芎20g、红花20g，蔓荆子10g、防风10g、黄芩 10g、当归10g八味中药，洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药材 总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至140ml 备用。
(二)混合中药提取液：
(1)蔓荆子、防风、黄芩、当归混合提取液：含蔓荆子、防风、黄芩、当归各0.07g/ml。
制备方法：取蔓荆子10g、防风10g、黄芩10g、当归10g洗净，加75％乙醇浸泡30分 钟，加热回流提取2次，第一次加药材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇 1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至140ml备用。
(2)干姜、川椒混合提取液：含干姜、川椒各0.21g/ml。
制备方法：取干姜30g、川椒30g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第 一次加药材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇1.5h/次，温度85℃，滤液 浓缩至140ml备用。
(3)川芎、红花混合提取液：含川芎、红花各0.14g/ml。
制备方法：取川芎20g、红花20g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第 一次加药材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液 浓缩至140ml备用。
(三)单味中药提取液：
(1)红花提取液：含红花0.14g/ml。
制备方法：取红花20g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加 药材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(2)川芎提取液：含川芎0.14g/ml。
制备方法：取川芎20g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(3)干姜提取液：含干姜0.21g/ml
制备方法：取干姜30g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(4)川椒提取液：含川椒0.21g/ml
制备方法：取川椒30g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(5)蔓荆子提取液：含蔓荆子0.07g/ml
制备方法：取蔓荆子10g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加 药材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85摄氏度，滤液 浓缩至140ml备用。
(6)防风提取液：含防风0.07g/ml。
制备方法：取防风10g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(7)黄芩提取液：含黄芩0.07g/ml。
制备方法：取黄芩10g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
(8)当归提取液：含当归0.07g/ml。
制备方法：取当归10g洗净，加75％乙醇浸泡30分钟，加热回流提取2次，第一次加药 材总量8倍量的75％乙醇，第二次为6倍量的75％乙醇，1.5h/次，温度85℃，滤液浓缩至 140ml备用。
1.3试剂
75％乙醇(天津市富学精细化工有限公司，批号：090707)、苦味酸(广州化学试剂厂， 批号：20080401-1)、6％硫化钠脱毛剂(广州市番禺力强化工厂，批号：20090512)。
1.4仪器
移液枪(赛默飞世尔(上海)仪器有限公司，型号：FP Freshman 20-200μL Serial No.ZY24816)；移液枪(赛默飞世尔(上海)仪器有限公司，型号：FP Freshman 100-1000μ L Serial No.ZY10462)；移液枪(赛默飞世尔(上海)仪器有限公司，型号：FP Freshman 100-1000 μL Serial No.ZY10460)；十万分之一分析天平(广州市正一科技有限公司，型号：CP225D Max220g d＝0.01mg(220g))；14mm打孔器；游标卡尺(广州工具厂，型号：Tricle Brand)。
2.实验方法
2.1造模方法
取昆明种小鼠130只，背部毛剪短，将脱毛剂(6％Na2S)涂于小鼠背部约2-3分钟后，用 温水洗净，以小鼠背部光滑，无伤无残毛为净，脱毛面积约3×4cm2。
2.2实验分组
脱毛次日，将小鼠随机分13组，每组10只，分别为：(1)空白组：涂抹75％乙醇；(2) 实验组(全方组)：涂抹全方的中药提取液；(3)实验组(蔓荆子、当归、防风、黄芩组)： 涂抹蔓荆子、当归、防风、黄芩的复方中药提取液；(4)实验组(干姜、川椒组)：涂抹干姜、 川椒的复方中药提取液；(5)实验组(红花、川芎组)：涂抹红花、川芎的复方中药提取液； (6)实验组(红花组)：涂抹红花的中药提取液；(7)实验组(川芎组)：涂抹川芎的中药提 取液；(8)实验组(干姜组)：涂抹干姜的中药提取液；(9)实验组(川椒组)：涂抹川椒的 中药提取液；(10)实验组(蔓荆子组)：涂抹蔓荆子的中药提取液；(11)实验组(当归组)： 涂抹当归的中药提取液；(12)实验组(防风组)：涂抹防风的中药提取液；(13)实验组(黄 芩组)：涂抹黄芩的中药提取液。
2.3给药方法
局部皮肤使用移液枪定量涂抹给药，每天2次，每次给药量为0.1ml/12cm2。上午、下午 给动物喂食前给药，连续给药10天。
2.4观察指标
新生毛生长状况：每2天对每鼠脱毛区新毛生长状况评分，2名实验人员同时评分，取 平均值；评分标准见表1：
新生毛重：实验第11天脱颈处死小鼠，将背部脱毛区毛皮剪下，用14mm打孔器于每鼠 脱毛区相同位置取一圆形皮片，用手术刀刮下皮片上所有体毛，十万分之一分析天平称重， 计算出各组小鼠毛重均值；
新生毛长：每鼠脱毛区打孔后的剩余皮肤上，在相同位置用放大镜和镊子取最长毛10根， 放大镜下用游标卡尺测量新生毛长度，并计算每组小鼠毛长均值。
2.5统计学分析
各组数据采用SPSS 18.0统计软件进行单因素方差分析(ANOVA)进行统计，实验结果以 表示。
3实验结果
3.1祛脂生发方全方及其拆方对小鼠脱毛区体毛生长评分实验结果见表5、图4：
表5 祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛生长“评分”结果
注：*P＜0.05与空白组相比，#P＜0.05与全方组相比
表5，图4结果显示：与空白组比较，祛脂生发方全方及其大部分拆方(除单味中药提 取液：黄芩、川椒)都有促小鼠脱毛区新生毛发生长的作用(P＜0.05)，提示造模成功；从第 2d开始，全方组与空白组、防风组、黄芩组、当归组、干姜组和川椒组比较，小鼠脱毛区毛 发生长情况都有显著差异(P＜0.05)；从第4d开始，全方组与蔓荆子组、复方干姜、川椒组、 川芎组、红花组和复方川芎、红花组比较，小鼠脱毛区毛发生长情况都有显著差异(P＜0.05)； 从第6d开始，全方组与复方蔓荆子、防风、黄芩、当归组比较，显著促进小鼠脱毛区毛发生 长情况(P＜0.05)。提示，中药提取液有促进小鼠毛发生长的作用，祛脂生发方全方的促小鼠 毛发生长效果最显著。
3.2祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠新生毛发重量影响结果见表6、图5：
表6 祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛生长重量的影响
注：*P＜0.05与空白组相比，#P＜0.05与全方组相比
表6、图5结果显示：与空白组比较，祛脂生发方全方及部分拆方(单味中药提取液：蔓 荆子、当归、干姜、川芎、红花；蔓荆子、防风、黄芩、当归的混合中药提取液，干姜、川 椒的混合中药提取液，红花、川芎的混合中药提取液)能显著增加小鼠脱毛区毛发重量 (P＜0.05)；全方组与各拆方组比较，能显著促进小鼠脱毛区毛发生长情况，增加脱毛区毛发 重量(P＜0.05)。提示，祛脂生发方全方对增加小鼠脱毛区毛发重量优于各拆方。
3.3祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛长度的影响
表7 祛脂生发方全方及其拆方各组对小鼠脱毛区体毛生长长度的影响
注：*P＜0.05与空白组相比，#P＜0.05与全方组相比
表7、图6结果显示：与空白组比较，祛脂生发方全方及其拆方均有促小鼠脱毛区新生毛 发生长的作用，显著增加其新生体毛长度(P＜0.05)；全方组与黄芩组、防风组比较，能显著 促进小鼠脱毛区毛发生长情况，增加脱毛区新生体毛长度(P＜0.05)。
4、小结：
本实验通过建立6％Na2S致小鼠脱毛模型，将祛脂生发方处方拆分成若干单方和复方， 综合新生毛生长状况、新生毛重、新生毛长三个测量指标结果比较祛脂生发方的全方与其拆 方药效，对祛脂生发方的全方及其拆方进行效果评价。
实验结果表明：与空白组比较，祛脂生发方全方及其拆方都有促小鼠脱毛区新生毛发生 长的作用；全方与其各拆方比较，能显著促进小鼠脱毛区毛发生长情况，增加脱毛区毛发重 量和新生体毛长度(P＜0.05)。总体认为，祛脂生发方全方对小鼠毛发生长的效果优于各拆方。
实验讨论
中药复方具有疗效确切、毒副作用小等优点。在中医理论指导下，从整体出发，调节机 体的阴阳平衡，标本兼治，已取得较好的临床疗效。本发明对毛发生长有明显的促生长作用， 并优于各单味中药和拆方组，本发明组方符合中医药理论，八药相使配伍，对防治脂溢性脱 发具有较好的协同增效作用，具有全方位、多环节和多靶点的优势。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之 内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。