动物胃提取物及其作为治疗胃病的药物用途
技术领域
本发明涉及一种哺乳动物的胃提取物，特别是单胃型哺乳动物(即排除含有多个胃 的哺乳动物)的胃提取物，以及该提取物在作为胃病治疗药物中的用途。
背景技术
我国约有2亿人患有慢性胃疾，目前常用的中、西胃药不下几十种。许多“老胃病” 几十年来服药无数，仍然不断犯病。究其因，这种“胃病”与“胃药”长期依存，“和 平共处”的尴尬局面之由来是众多胃药“对症不对病”，“治标不治本”所致。而且治疗 后复发率高，回潮很快。临床上甚至有停药三天便复发的病例报道。
萎缩性胃炎(CAG)和胃溃疡(GU)是常见的较为严重的胃疾。它们的发病率都 很高，所不同的是它们的发病机制和症状有很大差别甚至相反。如CAG是饭后不适， 胃酸缺乏；而GU是饭前疼痛和胃酸过多。因此治疗用药常有不同甚至相反。但在临床 上不乏慢性胃炎与消化性溃疡并存的患者，使主治医生颇感棘手。
消化性溃疡愈合过程缓慢，是一种慢性顽固性溃疡，发病机制复杂，患者长期受病 痛折磨，一般身体偏弱，所以对胃药的要求也比较高。理想的胃药希望是益补性的多组 份、多靶点药物，具有双向调节功能、易为病人接受、疗效好、而且副作用极小的药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种哺乳动物的胃提取物以及该提取物作为治疗胃病的药物 用途。
本发明哺乳动物的胃提取物由以下方法制得：
(1) 以单胃哺乳动物(即排除如牛、骆驼、羊等多胃哺乳动物)的胃或粘膜为原 料，将原料绞碎后，加入原料重量0.6～1倍的纯水或生理盐水，用盐酸或药学上允许的 酸性物质及防腐剂，调节浆液至pH达2～5(最佳为2.5～4)，20～50℃下搅拌提取2～6小 时(最佳为30～40℃下搅拌3～5小时)；
(2)缓缓加入食用碱性物料，调整pH6～7，继续搅拌下逐渐降温到8～12℃，过滤 取滤液；
(3)滤液减压浓缩，浓缩物置冷冻干燥机机箱内，经20～36小时冻干为固体；
(4)将固体粉碎、过筛得粉末即得产品(下简称“卫胃”)。
上述步骤(3)可用以下方法代替：滤液中加入有机溶剂甲醇、乙醇、丙酮或异丙 醇使产生沉淀，经老化后，过滤，将沉淀物并置于真空干燥箱或沸腾干燥器中，＜40℃ 下干燥10～24小时得固体，再粉碎成粉末产品。
步骤(1)的原料中可添加单胃哺乳动物除胆、膀胱、大肠外的其它内脏，添加的 比例是整胃重量的0～1倍，或者胃粘膜重量的2.5～5倍。
经蛋白质检测(定性和定量)，卫生学检查，药效学检验后即可按每粒0.5克或0.25 克的规格装填胶囊，或制成其它口服制剂。
本发明“卫胃”是以猪、狗、免等单胃哺乳动物的胃为原料提取的，主要成份是蛋 白质。单胃动物与牛、羊等四胃动物不同，它们的胃与人类胃的构造和功能十分接近。 本发明采用先酸性、后中性的提取工艺，保证了生物活性物质的提取更为完全，不丢失， 所得的提取物“卫胃”富集了这些动物胃粘膜所含的诸多生物活性成份。这些活性成份 与人类的胃具有极好的“同源性”和“生物相容性”，可用于调整胃功能和治疗多种胃 疾。根据生物学原理，选用幼年动物胃作原料，则所得的提取物中含有更高的生物活性。
经检测，本发明单胃哺乳动物的胃提取物“卫胃”中含有多种活性蛋白、多肽、多 糖、酶及细胞生长因子(如EGF)、双歧因子等活性成分，具有治疗胃疾的药物用途。
经动物试验结果表明，本发明“卫胃”具有以下三个方面的功效：
(一)近期功效：促进胃肠蠕动，改善消化功能；增食欲、消酒毒、通便止泻；适 用于各种厌食、积食、消化不良及婴儿吐奶等。老少皆宜，无任何副作用。
(二)中期功效：保护胃、肠粘膜，促进粘膜组织新生。可用于慢性胃炎、慢性肠 炎及慢性肝炎或其它患疾引起的胃肠道功能紊乱，修复并减轻酒精对胃、肠及肝的伤害。
(三)远期功效：含丰富的双岐因子，能促进肠道内有益微生物“双岐杆菌”大量 增殖，呈优势生长。所产生的乳酸等物质抑制肠内杂菌和致病菌，并减少有机胺类、吲 哚、亚硝胺(强致癌物)等物质的产生，消除肠道毒素对人体的慢性毒害，从而延年益 寿。双岐因子调节肠道微生态的能力很强，双岐杆菌的代谢物不但能增加人体对微量元 素，如钙和铁的吸收，还增强机体的免疫抗病能力，抑制各种癌细胞(如小鼠S-180、 Meth-A肿瘤细胞)的生长，故具有广泛的强身健体，防癌和延缓衰老的功效。
本发明单胃哺乳动物的胃提取物“卫胃”作为胃疾治疗药或胃保健用药，给药量为 一日一次，每次06～1.5克(依年龄、体重而异)，每晚睡前服用，这样可保证药物与胃 壁的充分作用，发挥疗效。与现有的胃药通常需要每日服药2～3次相比，“卫胃”服用 方便，疗效更佳。
从小鼠药理模型看，无论是由利血平、盐酸、酒精所造成的胃粘膜损伤，“卫胃” 都能明显抑制或减轻之。其作用与经典西药“雷尼替丁”相当，足见“卫胃”在抗酸、 抗乙醇、保护胃粘膜和促进其修复方面的功能十分显著。但雷尼替丁对人体存在不良的 副作用，必须严格控制服用量，而“卫胃”作用温和。从大鼠药理模型看，“卫胃”对 萎缩性胃炎(CAG)或胃溃疡(GU)大鼠模型的胃肠道激素(如胃泌素)的分泌，具 有双向调节作用，均可向胃功能增强，有利修复和减少恶变的方向演化，是一种多靶点 的药物，具有双向调节功效，既可以用于CAG，也可用于GU，此外本发明之药效试验 还证实了“卫胃”可缓解酒精引起的胃损伤。
综上所述，“卫胃”来源于胃，是治疗慢性胃炎、胃溃疡、酒精性胃炎的天然药物， 是较为理想的多种胃疾的治疗剂，可最大限度地舒缓或消除广大胃病患者的痛苦并改善 其预后，避免萎缩性胃炎(CAG)和胃溃疡(GU)的进一步恶化癌变，作用温和，没 有副作用，充分体现了“食胃补虚”、“以脏养脏”这一传统中医理论。
附图说明
附图表示本发明动物胃提取物“卫胃”的紫外光扫描吸收图谱。
具体实施方式
实施例1 用猪胃粘膜添加猪胰脏为原料制备“卫胃”
取猪胃粘膜1公斤和猪胰脏2公斤，分别绞碎作原料。容器中加水2升，搅拌中分 两次投入原料制成匀浆。用食盐、盐酸调至pH 4，在35℃温度下搅拌提取5小时。然 后用食碱调整料液至pH6～7，并在搅拌下用冷水浴降温至10℃左右。滤布过滤去除滤渣， 所得3升滤液用薄膜浓缩器在30℃浓缩至1.8升。装盘，用冻干机冻干22小时，所得 固体经粉碎、过筛得108克“卫胃”粉末(样品A)。
实例2 用猪胃为原料制备“卫胃”
取仔猪胃1公斤，绞碎后置反应器中加水0.6升，食盐及醋酸少许，将料浆调至 pH3.5，38℃下搅拌提取4小时后，用食碱调整料液至pH6-7。继续搅拌再用冰浴或水浴 降温至12℃。离心过滤得滤液1.1升；滤液搅拌下加食用酒精4升，静置，待分层后离 心收集沉淀。经脱水、压干后移入真空干燥箱干燥10小时，得干燥固体，再粉碎、过 筛得“卫胃”灰白色粉末28克(样品B)。
以上“卫胃”样品A及样品B经紫外光扫描定性检测，所得图谱如附图所示。图中 可见最大紫外光扫描吸收图谱显示其最大吸收峰在257.7±2.5nm处，提示其主要成份 为蛋白质及肽类物质。
以上“卫胃”样品A及样品B经紫外光吸收(定量)测试结果如下：
A 280 1 % = 1.20 ± 0.10 ]]>
实施例3：“卫胃”对小鼠利血平型胃溃疡的治疗效果试验
小鼠60只，分为以下四组，①～③组每组10只，第④组共30只，又分为三小组， 每小组10只。其中②～④各组的每小鼠用利血平灌胃(按10mg/kg剂量)使胃损伤致胃 溃疡造模。
①空白组(10只小鼠)：给予等量蒸馏水灌胃。
②对照组(10只小鼠)：给予等量蒸馏水灌胃。
③雷尼替丁组(10只小鼠)：给予雷尼替丁20mg/kg灌胃。
④“卫胃”组(30只小鼠)：每10只一小组，三小组分别给予0.3、0.1、0.03g/kg 不同剂量的“卫胃”样品A灌胃。
给药小时后，处死小鼠，取胃，注入2mL 1％的甲醛固定。
测试各组小鼠的胃粘膜损伤指数，测试评定方法如下：无损伤粘膜0分；点状损伤 ≥1mm，1点为0.2分，2点为0.4分；条状损伤1条为1分，2条为2分，依次类推； 胃黏膜全无为5分；有部分黏膜，视严重情况定为4、3、2分。评定结果如表1。
附表1“卫胃”、雷尼替丁对小鼠利血平型胃溃疡的作用效果比较
组别 剂量(g/kg) 溃疡评分 T检验 ①空白 ②对照 ③雷尼替丁 ④“卫胃” 0.02 0.3 0.1 0.03 0.50±0.101 8.24±0.888 4.70±0.529 3.96±0.713 5.16±0.358 6.68±0.415 0.00011 0.00002 0.00005 0.00370
实施例4“卫胃”对小鼠盐酸型胃溃疡的治疗效果试验
与实施例3相同的方法将60只小鼠分为①～④四组，不同的是②～④各组的小鼠用 0.6mol/L盐酸灌胃(0.10ml/只)使胃损伤致胃溃疡。其余试验过程与实施例3相同。然 后用同样方法测试各组小鼠的胃粘膜损伤指数，结果如表2。
附表2“卫胃”、雷尼替丁对小鼠盐酸型胃溃疡的作用效果比较
组别 剂量(g/kg) 溃疡评分 T检验 ①空白 ②对照 ③雷尼替丁 ④“卫胃” 0.02 0.3 0.1 0.03 0.02±0.002 8.24±0.888 4.70±0.529 3.96±0.713 5.16±0.358 6.68±0.415 0.00254 0.00021 0.00012 0.00318
利血平型溃疡的产生是与迷走神经兴奋及胃酸分泌增加有关的。从实施例3的测试 结果(表1)可见，“卫胃”能明显缩小利血平引起的溃疡面积，说明它具有促进溃疡愈 合的作用。实施例4的测试结果(表2)表明，“卫胃”不仅能防止由于胃酸分泌增多(利 血平型)引起的胃溃疡(表1)，还能对外加酸性刺激物(盐酸)所致溃疡的发生起到抑 制作用。
实施例5“卫胃”对小鼠无水乙醇型胃溃疡的治疗效果试验
按上两实施例方法将小鼠分为①～④组，其中③～④各组的每小鼠用0.15ml无水乙醇 造模并测定损伤指数.空白组①及对照组②给予等量蒸馏水，其它③组和④组用药量按上 两例不变。用同样方法测试各组小鼠的胃粘膜损伤指数，结果如表3。
表3“卫胃”与雷尼替丁对小鼠无水乙醇型胃溃疡的作用效果
组别 剂量(g/kg) 溃疡评分 T检验 ①空白组 ②对照组 ③雷尼替丁组 ④“卫胃”组 0.02 0.3 0.1 0.03 0.118±0.009 7.686±0.886 4.200±1.327 3.486±1.677 4.486±1.160 6.200±1.007 0.00004 0.00006 0.00004 0.00629
实施例6
将60只小鼠分为6组，每组10只，其中1组为对照组，给予蒸馏水，其余5组为“卫 胃”组，给予“卫胃”0.3g/kg灌胃。“卫胃”组小鼠于给药后0.5、1、2、3、4h后用 0.15ml无水乙醇灌胃。0.5小时后同上法测试胃粘膜损伤指数(即溃疡评分)，见表4。
表4“卫胃”对小鼠无水乙醇型胃溃疡的持续抑制作用
组别 时间(h) 溃疡评分 T检验 对照组 “卫胃”组 0.5 0.5 1 2 3 4 5.857±1.305 2.767±1.148 3.650±0.446 3.700±0.438 4.080±0.593 5.471±1.335 0.00046 0.00118 0.00136 0.00916 0.29732
表4显示，胃黏膜保护作用随“卫胃”给药后时间长短而不同，给药0.5h后溃疡抑 制率最高，但在给药3h后，仍保持一定效果。可见“卫胃”维持黏膜保护作用时间为 3h，大于一般药物经小鼠胃排空的时间。
目前对于胃溃疡的病因、病机的认识仍处于发展阶段。公认的病理机制好似攻击因 子和防御因子平衡失调学说，即多因素发病机制。本发明的实验选择了利血平、盐酸、 无水乙醇所致小鼠胃溃疡模型，直接反映了本发明“卫胃”的抗酸及增加黏膜保护作用 的能力。
通过多个实验性溃疡模型研究证实，“卫胃”不仅能防止由胃酸分泌增多(利血平型) 及外加酸性刺激物(盐酸)所致溃疡的发生，还能对非胃酸分泌刺激条件下溃疡(无水 乙醇所致溃疡)的形成起抑制作用，效果比对照药雷尼替丁更好。初步药效学实验性溃 疡模型包括了胃黏膜攻击因子增强及防御因子减弱两个方面。对比“卫胃”均呈现明显 的药效，说明该药是一种较好的多靶点抗消化性溃疡药物。
实例7“卫胃”对实验性大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)的治疗效果
人体内的胃动素对胃肠道的运动和电活动都有强烈的影响，能刺激胃蛋白酶的分 泌，它通过诱发十二指肠发生消化间期综合肌电III相，使食道下段收缩，胃运动增加， 但减慢胃的排空。此外，人体的胃泌素最主要作用是刺激胃酸分泌，同时还可促进细胞 的分裂增殖，使DNA和RNA合成率增高，粘膜血流量增加，胃及十二指肠粘膜肥厚， 壁细胞数增多。故胃泌素分泌减少乃至缺乏，可造成胃粘膜营养障碍，或加重腺体的萎 缩。而胃泌素水平过高，使胃酸过度分泌，可破坏胃粘膜保护屏障，引发溃疡或减慢溃 疡的愈合速度。
本实施例将四组大鼠中三组分别用2％水杨酸钠水溶液灌胃造模，第九周起，“卫胃” 组给予“卫胃”样品B(0.03g/kg)灌胃，阳性药组给予丽珠得乐2ml/只灌胃，空白组 及对照组给予等量蒸馏水灌胃。12周后，处死，取血，采用放射免疫分析法(RIA法) 检测胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)。结果如表5。
表5“卫胃”对CAG大鼠血浆MTL水平的影响(pg/ml)
组别 大鼠数(只) X±SD 空白组 10 72.54±9.8 CAG自然恢复组 9 105.88±5.4** 阳性药组(丽珠得乐) 9 103.89±13.4** “卫胃”组 10 71.2±7.50##
**：与空白组比较P＜0.05；##：与自然恢复组比较P＜0.05。
表6“卫胃”对CAG大鼠血清Gas水平的影响(Pg/ml)
组别 大鼠数(只) X±SD 空白组 10 137.9±12.5 CAG自然恢复组 9 89.7±19.1** 阳性药组(丽珠得乐) 9 118.1±14.3## “卫胃”组 10 124.7±9.3##
**：与空白组比较P＜0.05；##：与自然恢复组比较P＜0.05。
表5结果显示，“卫胃”能显著降低血浆胃动素水平，提高血清胃泌素水平，效果 优于阳性药丽珠得乐。“卫胃”可以通过降低CAG模型大鼠的血浆胃动素水平，加快胃 的排空，减少食物及胃液在胃内的停留，促进食物的消化吸收，避免胃酸在胃内停留时 间过长而导致溃疡。表6显示“卫胃”可升高CAG大鼠的血清胃泌素水平，促进胃酸 的分泌，促进DNA和RNA的合成，增加粘膜血流量，发挥其对胃粘膜的营养作用，促 进修复。