《一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法.pdf（6页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)授权公告号 CN 102145013 B (45)授权公告日 2012.11.28 CN 102145013 B *CN102145013B* (21)申请号 201110095162.4 (22)申请日 2011.04.15 A61K 35/28(2006.01) A61K 9/127(2006.01) A61K 9/08(2006.01) A61P 37/04(2006.01) A61P 31/14(2006.01) A61P 31/22(2006.01) (73)专利权人 天津农学院 地址 300384 天津市西青区津静公路 22 号 (72)发明人 李富桂 张文生 王志龙 常蕊。
2、 (74)专利代理机构 天津市鼎和专利商标代理有 限公司 12101 代理人 郑乘澄 CN 101904870 A,2010.12.08, CN 101301465 A,2008.11.12, CN 101314032 A,2008.12.03, 汤靖等 . 用中空纤维透析器提取转移因 子 .中国医药工业杂志 .1991, 第 22 卷 ( 第 6 期 ), 第 247-248 页 . (54) 发明名称 一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法 (57) 摘要 本发明涉及一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液 的制备方法。本发明属于口服制剂技术领域。肉 鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 工艺步骤 ： 。
3、1、 鸡转移因子的制备 ： 清理， 脾脏和水用组织捣 碎机粉碎， 反复冻融 3 8 次 ； 冻融处理的脾组织 装入透析袋中， 密封后放入装有甲醛溶液的生理 盐水的容器内， 磁力搅拌透析获取肉鸡脾转移因 子 ； 2、 脂质体的制备 ： 卵磷脂和胆固醇放入蒸发 瓶中， 加入维生素 E， 再加入氯仿 ； 溶解后进行减 压旋转蒸发， 在旋转瓶形成脂质体 ； 3、 转移因子 脂质体的制备 ： 鸡转移因子与脂质体混合， 用匀 浆机将其匀浆制得纳米肉鸡脾转移因子脂质体。 本发明具有工艺简单， 经济实用， 产品性能稳定， 临床效果好， 应用范围广等优点。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 冯超。
4、 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 1 页 1/1 页 2 1. 一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 肉鸡脾转移因子脂质体溶 液制备工艺步骤为， 1） 鸡转移因子的制备 清理 ： 肉鸡脾脏清洗， 去除脂肪和被膜 ； 粉碎 ： 按重量比 0.5-3:1 脾脏和水混合， 用组织捣碎机粉碎 ； 反复冻融 ： 在 -15至 -30温度下冷却 10hr 以上， 然后快速溶解 ； 如此反复冻融 3 8 次 ； 透析 ： 冻融处理的脾组织装入透析袋中， 密封后放入装有甲醛溶液。
5、的生理盐水的容器 内， 磁力搅拌透析获取肉鸡脾转移因子 ； 2） 脂质体的制备 卵磷脂和胆固醇重量比例为59:1， 放入蒸发瓶中， 加入37 的维生素E， 再加入 重量比例为1519%的氯仿 ； 溶解后进行减压旋转蒸发， 直至氯仿完全蒸发， 在旋转瓶形成 一层白色薄膜， 该物质为脂质体 ； 3） 鸡转移因子脂质体的制备 鸡转移因子与脂质体混合， 用匀浆机将其匀浆制得纳米肉鸡脾转移因子脂质体。 2. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 清理时， 肉鸡脾脏用生理盐水清洗， 用剪刀去除脂肪和被膜。 3. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方。
6、法， 其特征是 ： 粉碎时， 组织捣碎机 8000 至 15000RPM 粉碎 3 10min。 4. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 反复冻 融时， 装入塑料容器中， 在 18至 -25条件下冷却 12 16hr， 用自来水冲洗溶解并震 荡 , 如此反复冻融 3-5 次。 5. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 透析时， 冻融处理的脾组织装入分子截流量800012000的透析袋中， 密封后加入体积比为2 ： 1 3 含 0.1% 0.4% 甲醛的生理盐水， 在 2 6条件下磁力搅拌透析 24-48hrs。 。
7、6. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 鸡转 移因子与脂质体混合的重量比例为鸡转移因子水溶液 ： 脂质体 550 650 ： 1， 混合时间 10 30min。 7. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 制得纳 米肉鸡脾转移因子脂质体时， 匀浆机匀浆 5 30 min。 8. 按照权利要求 1 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 脂质体 的制备时， 溶解在旋转蒸发瓶中进行， 水温为 30。 权 利 要 求 书 CN 102145013 B 2 1/3 页 3 一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制。
8、备方法 技术领域 0001 本发明属于口服制剂技术领域， 特别是涉及一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制 备方法。 背景技术 0002 目前， 鸡转移因子 （Chicken Transfer Factor， 简称CTF） 是用以肉鸡脾脏为原料, 经加工、 制备而成的一种由低聚核苷酸和多肽组成的不含蛋白质的一种可溶性、 可透析、 可 超滤的小分子物质。淋巴细胞转移试验和血清学试验监测结果表明 : 鸡转移因子能极显 著提高细胞免疫水平 （t 2.878, P 0.01 , 显著提高体液免疫水平 （t 2.101, P 0.05 ； 单独使用 CTF 注射液对新城疫， 法氏囊病和马立克氏病都有明显的治疗。
9、作用 , 可降低发病鸡死亡率27.5-40%,降低马立克氏病发病鸡死亡率5%。 现有的肉鸡脾转移因子 制备方法过程复杂， 产品质量不稳定， 临床使用次数多。 发明内容 0003 本发明为解决公知技术中存在的技术问题而提供一种肉鸡脾转移因子脂质体溶 液的制备方法。 0004 本发明的目的是提供一种具有工艺简单， 经济实用， 产品性能稳定， 临床效果好， 应用范围广等特点的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法。 0005 本发明肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法为解决公知技术中存在的技术问 题所采取的技术方案是 ： 0006 肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 肉鸡脾转移因子脂质体溶。
10、液 制备工艺步骤为， 0007 1） 鸡转移因子的制备 0008 清理 ： 肉鸡脾脏清洗， 去除脂肪和被膜 ； 0009 粉碎 ： 按重量比 0.5-3:1 脾脏和水混合， 用组织捣碎机粉碎 ； 0010 反复冻融 ： 在 -15至 -30温度下冷却 10hr 以上， 然后快速溶解 ； 如此反复冻融 3 8 次 ； 0011 透析 ： 冻融处理的脾组织装入透析袋中， 密封后放入装有甲醛溶液的生理盐水的 容器内， 磁力搅拌透析获取肉鸡脾转移因子 ； 0012 2） 脂质体的制备 0013 卵磷脂和胆固醇重量比例为59:1， 放入蒸发瓶中， 加入37 的维生素E， 再 加入重量比例为1519%的氯。
11、仿 ； 溶解后进行减压旋转蒸发， 直至氯仿完全蒸发， 在旋转瓶 形成一层白色薄膜， 该物质为脂质体 ； 0014 3） 转移因子脂质体的制备 0015 鸡转移因子水溶液与脂质体混合， 用匀浆机将其匀浆制得纳米肉鸡脾转移因子脂 质体。 说 明 书 CN 102145013 B 3 2/3 页 4 0016 本发明肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法还可以采用如下技术方案 ： 0017 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 按照权利要求 1 所述 的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特征是 ： 清理时， 肉鸡脾脏用生理盐水清洗， 用剪刀去除脂肪和被膜。 0018 所述的肉鸡。
12、脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 粉碎时， 组织捣碎机 8000 至 15000RPM 粉碎 3 10min。 0019 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 反复冻融时， 装入塑料 容器中， 在 18至 -25条件下冷却 12 16hr， 用自来水冲洗溶解并震荡 , 如此反复冻 融 3-5 次。 0020 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 透析时， 冻融处理的脾 组织装入分子截流量 8000 12000 的透析袋中， 密封后加入体积比为 2 ： 1 3 含 0.1% 0.4% 甲醛的生理盐水， 在 2 6条件下磁力搅拌透析 24-48。
13、hrs。 0021 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 鸡转移因子与脂质体 混合的重量比例为鸡转移因子水溶液 ： 脂质体 550 650 ： 1， 混合时间 10 30min。 0022 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 制得纳米肉鸡脾转移 因子脂质体时， 匀浆机匀浆 5 30 min。 0023 所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 其特点是 ： 脂质体的制备时， 溶解 在旋转蒸发瓶中进行， 水温为 30。 0024 本发明具有的优点和积极效果是 ： 0025 肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法由于采用了本发明全新的技术方案， 与现 有技术。
14、相比， 肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 简化了生产工艺， 除去离心 （确保组 织粉碎的细度） 和超滤 （由于放入甲醛起到了杀毒和杀菌的作用） 两个步骤 - 生产口服 溶液。本发明具有工艺简单， 经济实用， 产品性能稳定， 临床效果好， 应用范围广等优点。 附图说明 0026 图 1 是本发明的工艺流程结构示意图。 具体实施方式 0027 为能进一步了解本发明的技术内容、 特点及功效， 兹例举以下实施例， 并配合附图 详细说明如下 ： 0028 实施例 1 0029 参阅附图 1。 0030 肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法， 包括以下工艺步骤 ： 0031 1高浓度鸡转移因子的制备 0。
15、032 将肉鸡脾脏用生理盐水洗净后， 用弯剪刀去除脂肪和被膜。按 2 ： 1 将脾脏和生理 盐水混合后用高速组织捣碎机以 10000rpm 匀浆 1 分钟， 装入塑料瓶， 放入 -20冰箱中冻 结。自来水冲洗快速溶解。如此反复冻融 3 次。将冻融处理后的脾组织装入分子截流量为 10000 的透析袋中， 密封后放入白瓷罐或白瓷盘内， 容器内同时放入同等体积的含 0.2% 甲 醛溶液的生理盐水， 在4冰箱内磁力搅拌透析24-48hrs， 获取高浓度鸡转移因子， 可10倍 说 明 书 CN 102145013 B 4 3/3 页 5 以上稀释后应用于临床 ； 该透析外液不需要再进行超滤除菌等。 00。
16、33 2脂质体的制备 0034 精确称取卵磷脂和胆固醇 0.17g， 其比例为 7:1， 放入蒸发瓶中， 加入 5 左右的 维生素 E， 再加入 3ml 氯仿。在旋转蒸发瓶中溶解， 水温为 30； 待全部溶解后， 将蒸发瓶与 真空泵接通， 进行减压旋转蒸发， 直至氯仿完全蒸发， 在旋转瓶形成一层白色薄膜， 该物质 为脂质体。脂质体制备过程采用薄膜分散法， 以维生素 E 为稳定剂。 0035 3转移因子脂质体的制备 0036 将高浓度鸡转移因子 ( 作为水相 )100mL 加入到旋转瓶 （瓶内脂质体作为油相） 内， 摇转瓶约 20 分钟， 直至液体呈乳白色均质状。混合后用高速匀浆机将其高速匀浆 10 分钟， 得到 CTF 纳米脂质体。 说 明 书 CN 102145013 B 5 1/1 页 6 图 1 说 明 书 附 图 CN 102145013 B 6 。