技术领域
本发明涉及包含孕激素的药物组合物和哺乳动物的治疗性或预防性治疗，所述治 疗包括这样的药物组合物的肠胃外给药。根据本发明的组合物特别适于治疗中枢神经系统 的创伤性损伤。
背景技术
创伤性脑损伤(TBI)是外来机械力对脑的非退行性的、非先天性的损伤，可能导致 认知功能、躯体功能和心理社会功能的永久性或暂时性损伤，伴有减少的或改变的意识状 态(Brown,A.W.,等人,2008,Arch.Phys.Med.Rehabil.,89(增刊1),S3-8)。TBI是全世界的 死亡和残疾的一个主要原因。据估计，每年有超过150万美国人发生TBI，而且TBI在其它工 业化国家的发生率与美国相当(TraumaticBrainInjury:MethodsforClinical andForensicNeuropsychiatricAssessment,第2页,Granacher编,CRCPress2003)。例 如，在欧洲，每年有大约66,000例归因于TBI的死亡(Socin,D.M.,等人(1995).JAMA273 (22),1778-80)。作为TBI的后果，一些患者长期或终生需要帮助来完成日常活动。
尽管TBI造成的问题非常严重，但是目前没有经批准的、被证实可有效地改善死亡 率或改善TBI以后的结果的药物。但是，两项新近的临床试验已经证明了类固醇激素孕酮对 TBI的成功治疗(Xiao等人,2008,Crit.Care,12:R61;Wright等人Ann.Emerg.Med.2007,49: 391-402)。这两项研究表明，孕酮在TBI患者中是安全的且被良好耐受，并且向TBI患者的给 药孕酮会导致降低的死亡率。
此外，专利申请WO2006/102644、WO2006102596和WO2008/039898描述了通过肠胃 外给药孕激素来治疗TBI的方法。
孕激素（诸如孕酮）的最有效的给药途径是通过肠胃外给药或静脉内给药。但是， 孕酮分子的疏水性质以及因此它在水中的差溶解度形成了制剂限制。水溶液不会提供能够 将有效治疗剂量的孕酮递送给患者的制剂。但是，孕酮是充分亲脂的，使得能够在疏水溶剂 （诸如甘油三酯系溶剂）中制备治疗有效浓度。
通过静脉内输注水包油乳液来递送疏水药物是本领域已知的。实例包括和（它们是为了静脉内给药而设计的化疗药物紫杉醇的纳米制剂）以及（它是由APPpharmaceuticals,IL,USA销售的麻醉剂丙泊酚的脂质乳液制剂）。以前也已经描述了使用水包油乳液来静脉内给药孕酮(WrightDW等人，同上;Trotter等人,JournalofClin.Endocrinol.&Metab.(1999)Vol.84,第4531页)。
ProTECT研究(Wright等人,Ann.Emerg.Med.2007,49:391-402)使用双组分系统，其中首先将孕酮溶解在醇溶液中(第一组分)，随后将该孕酮醇溶液注射进商购可得的脂质乳液20%(FreseniusKabi,Sweden)(第二组分)中，并再手工地混合(诸如通过振摇)，此后不久静脉内给药醇溶液/乳液混合物。使用该制备方法存在多个缺点。
首先，向TBI患者给药醇溶液是不合宜的。其次，尽管醇的存在会辅助孕酮的增溶， 但是低剪切的手工混合不会使所有孕酮都进入油相中。所以，这样的乳液仅能够溶解有限 量的孕酮，因此，为了实现希望的血清孕酮水平，必须给药大量脂质。但是，向患者给药大体 积的乳液和/或大量脂质可能会产生严重的后果，诸如诱发高脂血症或水肿。
结果，患者被暴露于不希望的脂质和/或液体负荷，且处于不良反应的风险中。
此外，未溶解的孕酮易于结晶，随后在水相中氧化，因而不仅造成高水平的微粒状物质蓄积在组合物中，而且造成高水平的活性成分降解产物。实际上，已经证实，当将孕酮的醇溶液注射进商业的脂质乳液制剂(诸如20%)中时，发现一部分激素为晶体形式，而不是溶解在所述乳液中。据报道，此未溶解的孕酮吸附在输注袋和输液管的表面上。并非所有孕酮都进入这些双组分乳液的油相中的发现，导致对于在最终组合物中获得的孕酮浓度和该激素的生物利用度的不确定性。
最后，由于稳定性问题，双组分系统的孕酮-脂质混合物必须在给药之前的仅数小 时内制备(即在使用前的数小时内，将第一组分加入第二组分中并混合)，因为得到的混合 物不能在室温贮存。在需要时再制备这种混合物对医学从业人员而言既耗时又不方便，而 且在TBI治疗（这时迅速治疗对患者的后果是重要的）的情况下特别令人不满意的。
用于制备含有激素的乳液的替代方法描述了在制备脂质乳液的过程中将激素直 接掺入油中。
WO96/10991描述了用于经粘膜给药与黄体酮相组合的雌二醇的药物组合物。
WO01/28555描述了用于递送多功能活性成分的水包油乳液系统。所述乳液除了 包含活性成分以外，还包含极性调节剂，所述极性调节剂能够通过充当减少多功能活性成 分和油之间的极性间隙的桥梁来调节所述活性成分和所述油相之间的相互作用。
US2007/0071777描述了制备包含孕酮的20%脂质乳液的方法，所述20%脂质乳液 用作用于制备(通过稀释)适合给药的5%脂质乳液的储备溶液。
CN101152186描述了表面活性剂SolutolS15或泊洛沙姆188在制备可注射的孕酮 制剂中的用途。尽管这些表面活性剂的使用实现了高孕酮溶解度，但是高浓度的这些表面 活性剂的静脉内给药与不希望的副作用有关，所述副作用包括组胺释放的中等升高、荨麻 疹和过敏性反应(瘙痒、红斑)。
本领域已知的另一种增加孕酮在脂质乳液中的溶解度的方法是使用有机溶剂。孕 酮高度可溶于苯甲酸或其衍生物中。例如，JP60-258110描述了苯甲酸苄酯用于增加孕酮 在脂质乳液中的溶解度的用途。但是，由于苯甲醇和苯甲酸苄酯通常是有毒的，且已知会引 起变态反应，所以认为将它们包括在用于肠胃外给药的组合物中是非常危险的。
从该知识可见，本领域技术人员面临乳液固有的几个问题。例如，在大多数条件 下，乳液在热力学上是不稳定的，因为微滴自发地附聚，最终导致完全相分离。附聚和相分 离的趋势带来贮存和操作的问题，并增加下述可能性：最初适当地制备的药物乳液在最终 给药于患者时处于次于最佳、效力减小且难以表征的状态。疏水的活性剂（诸如孕酮）在乳 液中的存在进一步加重这些问题，因为所述药物本身会使所述乳液不稳定。因此，仍然非常 难以制备这样的乳液：其是可热灭菌的且贮存稳定的，能够递送治疗上有用的足够高剂量 的孕激素，同时还可安全地肠胃外、特别是静脉内给药。
迄今为止已知的制剂都不能提供这样的适于肠胃外给药的药物组合物：其递送足 够高浓度的孕激素，同时将患者暴露于最小的脂质负荷和/或体积负荷。迄今为止已知的制 剂都不能提供这样的适于肠胃外给药的药物组合物：其表现出足够的物理和/或化学稳定 性，使所述乳液能够热灭菌和长期贮存。
仍然需要这样的孕激素制剂：它们具有足够的化学和物理稳定性，使得它们可通 过高压灭菌来灭菌，并可在使用之前，优选地在室温下长期贮存。此外，仍然需要这样的低 油制剂：其在单位脂质体积内递送更高剂量的孕激素，使得可以将治疗有效浓度的孕激素 递送给个体，同时使患者暴露于尽可能低的脂质负荷。
发明目的
本发明的一个目的是提供适于肠胃外给药的、包含孕激素的低油药物乳液组合 物。
本发明的一个目的是提供具有提高的安全性特性的、包含孕激素的低油药物乳液 组合物。
本发明的另一个目的是提供可热灭菌的、包含孕激素的水包油乳液。
本发明的另一个目的是提供具有提高的贮存稳定性的、包含孕激素的水包油乳 液，以便所述乳液可以即用的形式提供并在使用之前长期贮存。
本发明的另一个目的是提供适于肠胃外给药的、改进的药物乳液组合物，所述组 合物能够在给药的单位油内递送高剂量的孕激素。
本发明的另一个目的是提供节省成本、用于安全、有效且方便地向个体肠胃外给 药孕激素的组合物。更具体地，本发明的一个目的是提供用于肠胃外给药的组合物，所述组 合物提供其中含有的孕激素的提高的利用度(例如，良好的药代动力学和生物利用度，诸如 可以反映在血清激素水平和/或血浆浓度方面)，同时使给药所述组合物的个体暴露于比现 有技术组合物更低的脂质负荷和/或更低的体积负荷。
本发明的另一个目的是提供用于治疗具有TBI的个体的方法。
本发明的一个目的是提供制备包含孕激素的水包油乳液的方法。
发明概述
本发明提供包含孕激素（诸如孕酮）的药物组合物，其中所述组合物是包含水相、 油和表面活性剂的乳液的形式。本发明的组合物有利地具有低油含量，是即用的、可热灭菌 的、贮存稳定的，且注射给药安全。
本发明还提供肠胃外给药本发明的药物组合物的方法。这样的方法有利地使给药 所述药物组合物的个体暴露于比现有技术组合物更低的脂质水平。本发明的组合物有利地 能够在单位油和/或体积内递送更高浓度的孕激素给有此需要的个体。
本发明还涉及使用本发明的组合物治疗中枢神经系统病症、特别是创伤性脑损伤 的方法，和制备本发明的药物组合物的方法。
发明详述
本发明提供包含孕激素的药物组合物，其中所述组合物是包含水相、油相和一种 或多种表面活性剂的乳液的形式。
本发明的一个实施方案提供用于肠胃外给药的、无菌的、即用的水包油乳液药物 组合物，所述组合物包含：
·0.015-0.5重量/体积%的孕酮；
·0.5-10重量/体积%的油，其中所述油包含至少85重量/重量%的甘油三酯；
·0.0425-4.1重量/体积%、优选0.064-3.4重量/体积%的磷脂；
·80-99.4重量/体积%的含水介质；
其中所述组合物的重量克分子渗透浓度为200-1000mOsm/kg。本发明的这个具体 实施方案在本文中称作“孕酮实施方案”。
本发明的另一个实施方案提供用于肠胃外给药的、无菌的水包油乳液药物组合 物，所述组合物包含：
·油；
·水相；
·孕激素，优选孕酮；
其中孕激素:油（重量/重量）之比大于1:32，且其中所述组合物含有小于2.5重量/ 体积%的苯甲酸苄酯，且优选地含有小于1.5重量/重量%的聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯。该第 二个实施方案在本文中称作“孕激素/油实施方案”。
定义
本文使用的术语“油”可容易地与“脂质”和“脂肪”互换，并指这样的亲脂的高沸点 有机化合物：其在体温(例如约37℃)下为液体，且在注射剂中是药理学上可接受的。本发明 的油包括甘油酯、偏甘油酯、脂肪酸残余物和非甘油酯(例如胆固醇)以及它们的混合物。本 文使用的术语“油”不包括磷脂，除非另有说明。
本文使用的术语“水包油乳液”指这样的胶体分散系：其中液体油以小微滴(不连 续相)形式分散在含水介质(连续相)中。
本文使用的英文单数形式“a”、“an”和“the”表示单数和复数，除非明确地说明仅 表示单数。
本文使用的短语“治疗有效量”表示这样的药物剂量：其在需要这种治疗的个体中 提供特定的药理学应答（为此而给药所述药物）。应当强调的是，药物的治疗有效量或治疗 水平不是总能有效地治疗本文所述的病症/疾病，即使本领域技术人员认为这样的剂量是 治疗有效量。仅仅为了方便，下面参照成年个体提供示例性的剂量、药物递送量、治疗有效 量和治疗水平。本领域技术人员可以视需要根据标准实践调节这样的量，以治疗特定的个 体和/或病症/疾病。
本文使用的术语“磷脂”是指甘油与一个或两个脂肪酸以及一个磷酸根离子形成 的酯。除了甘油衍生的磷脂以外，本文使用的术语“磷脂”也包括鞘磷脂。
本文使用的术语“含水介质”指含有水的液体。
本文使用的术语“低油”指具有小于或等于10%的总脂质含量（重量/体积）的组合 物。
本文使用的术语“高油”指具有大于10%的总脂质含量（重量/体积）的组合物。
除非另外指出，每当在本文中提及“单位体积的重量百分比”或“重量/体积%”时， 这些术语描述组分在每100mL含有所述组分的组合物中的质量（以g计）。
除非另外指出，每当在本文中提及“单位重量的重量百分比”或“重量/重量%”时， 这些术语表示组分的质量相对于含有所述组分的组合物的质量的百分比。
每当在本文中提及“>5μm的脂肪的体积加权百分比”或“PFAT5”时，所表示的是，具 有超过5μm的直径的分散的脂肪的体积加权百分比，所述直径是使用Accusizer (780AutomaticParticleSizer)，根据在美国药典第<729>章方法II中描述的方法测得 的。
每当在本文中提及“PCS”或(光子相关光谱法)时，所表示的是，使用Zetasizer 1000HSA(MalvernInstruments)，根据在美国药典第<729>章方法I中描述的方法测得的 PCS。
每当在本文中提及“D[4,3]”(基于体积的中位直径)或d(0,5)(基于体积的平均直 径)时，所表示的是，使用具有HydroS色散部件的Mastersizer2000(Malvern Instruments)，根据在美国药典<429>(粒度的光衍射测量)中描述的方法测得的D[4,3]或d (0,5)。
每当在本文中提及“ζ电位”时，所表示的是，使用Zetasizer1000HAS(Malvern Instruments)实验测得的胶体系统的动电电位。
每当在本文中使用术语“不含结晶固体”时，是指本发明的乳液满足关于注射液的 微粒大小和计数的标准(USP788,方法2-微观颗粒计数试验)。
根据本发明的组合物适于肠胃外给药，特别是静脉内给药。因此，本发明的乳液用 于肠胃外给药的用途是本发明的另一个实施方案。本发明提供通过向个体给药治疗有效量 的所述包含孕激素的乳液治疗创伤性CNS损伤（更具体地，为创伤性脑损伤（TBI））的方法。 也包括到其它CNS病症的治疗和它们的征状的缓解，这在下文中进一步讨论。
本发明另外提供用于制备包含孕激素的水包油型组合物的方法。
根据本发明的乳液组合物有利地具有低油含量，使得每单位体积向个体递送更少 的脂质，并且可以避免不利的副作用，诸如高脂血症。根据本发明的乳液组合物有利地可以 通过在121℃高压灭菌15min来热灭菌，且不会损害所述乳液的物理或化学完整性。通过高 压灭菌进行灭菌不仅在微生物学安全性方面是有益的，而且在经济性方面更节省成本。
根据本发明的乳液组合物有利地以无菌的、即用的形式提供，且在室温下具有1或 2年的贮存期限。
在一个实施方案中，本发明的乳液组合物有利地实现孕激素在油中的提高的溶解 度，同时维持或提高所述乳液的化学稳定性和/或物理稳定性。在其它实施方案中，根据本 发明的乳液组合物有利地具有高孕激素:油之比，使得在给药最小量的油的情况下可以达 到希望的血清孕激素水平。
此外，本发明的乳液组合物受益于胜过现有技术的安全性优点，因为，例如，a)在 给药每单位孕激素以后，TBI个体暴露于更少的脂质，b)所述乳液满足关于注射液的颗粒大 小和计数的标准（USP788,方法2），和/或包含更低水平的孕激素晶体，所述乳液组合物c) 具有低PFAT5值，d)含有更低水平的化学杂质，e)可以使用微生物学安全性方面的金标准方 法进行高压灭菌，f)不包含醇或潜在的有毒有机溶剂，和/或g)所述组合物可以在不损害所 述乳液的物理稳定性的情况下进行贮存。
与现有技术的组合物相比，给药本发明的组合物有利地提高服药的一致性。这如 下实现：优化所述乳液的孕激素:油:磷脂之比，使得所述孕激素完全溶解在油相中，并因而 是完全可生物利用的。
与现有技术的乳液相比，给药本发明的药物组合物能够在每单位体积和/或每单 位油内给药更大剂量的孕激素，因此，与给药现有技术的组合物相比，可以实现更高的血清 孕激素水平，且可以实现更低的血浆甘油三酯水平。
组合物的组分
在“孕激素/油实施方案”中采用的孕激素
根据本发明的上述实施方案的组合物包含孕激素作为活性药物成分(API)。本文 使用的“孕激素”包括天然的孕酮和合成的孕激素。一般而言，所述孕激素具有通式I，其中 X1和X2独立地选自COCH3、OCOC5H11、OH、C≡CH、OCOCH3、H、CH2C≡N；其中X3选自H、CH3或Cl；其 中X4选自H、OH或CH3；且其中X5选自CH3或CH2CH3。所述孕激素可以含有具有一个或多个双键 的环结构，所述双键例如在碳3和碳4之间、碳4和碳5之间、碳5和碳6之间、碳6和碳7之间、碳 5和碳10之间、碳10和碳9之间和/或碳15和碳16之间。
式I
这样的孕激素包括，例如，孕酮和孕酮衍生物，诸如5-α-二氢孕酮、6-脱氢-逆孕酮(地屈孕酮)、己酸羟孕酮、左炔诺孕酮、炔诺酮、醋酸炔诺酮；异炔诺酮、炔诺孕酮、甲羟孕酮、氯地孕酮和甲地孕酮。本发明的孕激素也包括、但不限于：生成孕酮的17α-OH酯的修饰，以及将6-α-甲基、6-甲基、6-烯和6-氯取代基引入孕酮和/或19-去甲孕酮上的修饰。此外，合成孕激素的非限制性实例包括：炔诺酮炔诺孕酮左炔诺孕酮(与炔雌醇一起；)、孕二烯酮、醋酸甲羟孕酮普美孕酮、醋酸诺美孕酮、利奈孕酮和地诺孕素。
在一个实施方案中，所述孕激素选自：孕酮、异炔诺酮、醋酸炔诺酮、甲羟孕酮、17- 醋酸甲羟孕酮、左炔诺孕酮、地屈孕酮、己酸羟孕酮、炔诺酮、孕二烯酮、醋酸诺美孕酮、普美 孕酮、地诺孕素、氯地孕酮、甲地孕酮、醋酸甲地孕酮和/或它们的混合物。
在一个优选的实施方案中，所述孕激素选自：5-α-二氢孕酮、甲羟孕酮、地屈孕酮、 孕酮和/或它们的混合物。
在一个高度优选的实施方案中，所述孕激素是孕酮。
孕酮
本文使用的术语“孕酮”表示具有下述式II结构的孕激素家族的成员：
式II
孕酮也称作D4-孕烯-3,20-二酮；δ-4-孕烯-3,20-二酮；或孕-4-烯-3,20-二酮。在 一个甚至更优选的实施方案中，所述孕酮是微粉化的。Proquina(Mexico)是微粉化的孕酮 的一个供应商。
孕激素(包括孕酮)
本发明的孕激素可以是药学上可接受的盐的形式。
根据“孕激素/油实施方案”的组合物适当地包含至少0.015%且不超过0.5重量/体 积%的量的孕激素。
优选地，根据“孕激素/油实施方案”和“孕酮实施方案”的组合物包含至少0.03%、 更优选至少0.05%、甚至更优选至少0.1%、最优选至少0.16%(重量/总体积(重量/体积))的 量的孕激素/孕酮。
根据本发明的组合物优选地包含小于或等于0.4%、更优选小于或等于0.3%、甚至 更优选小于或等于0.25%（重量/体积）的量的孕激素/孕酮。
在一个特别优选的实施方案中，根据本发明的组合物包含0.2%(重量/总体积)的 孕酮，优选微粉化的孕酮。
其它药物活性成分
根据本发明的组合物可以包含一种或多种其它治疗成分(API)，诸如其它神经营 养剂和/或神经保护剂。这样的药剂包括，例如，减轻谷氨酸盐兴奋性中毒和增强神经元再 生的化合物。这样的药剂可以选自、但不限于生长因子。“生长因子”是指刺激细胞生长或增 殖的细胞外信号转导分子。在一个实施方案中，所述组合物另外包含维生素D作为第二治疗 剂，优选地其量足以提供200-1000IU/天的剂量。例如，在某些实施方案中，所述组合物可以 包含下述浓度的维生素D：0.1IU/ml-5IU/ml，优选0.5IU/ml-3IU/ml。
在其它实施方案中，本发明的组合物不含有任何其它活性药物成分。在一个特别 优选的实施方案中，本发明的组合物不含有雌二醇，更优选地，所述组合物不包含雌激素。
油相
本发明的组合物是水包油乳液。根据本发明的组合物的疏水相(或油相)是或包含 油。
甘油三酯是优选的油。优选地，所述疏水相/油相包含具有下述熔点的甘油三酯： 小于30℃，更优选小于20℃，最优选小于10℃。
根据“孕激素/油实施方案”的组合物适当地含有包含至少75重量/重量%的甘油三 酯、更优选至少85重量/重量%的甘油三酯的油。
在“孕激素/油实施方案”和“孕酮实施方案”的高度优选的实施方案中，所述疏水 相是油，所述油包含至少90重量/重量%的甘油三酯、最优选至少95重量/重量%的甘油三酯。 在一个优选的实施方案中，所述油相包含下述量的“长链甘油三酯”(LCT)：占总油的至少45 重量/重量%、优选至少65重量/重量%、更优选至少75重量/重量%、最优选至少90重量/重 量%。
在某些实施方案中，本发明乳液的优选油是或包含植物油。“植物油”是指得自植 物种子或坚果的油。植物油通常是“长链甘油三酯”(LCT)，其在3个脂肪酸(取决于油的来 源，通常长度为14-22碳，具有不同数目和位置的不饱和键)与甘油上的3个羟基形成酯键时 形成。在某些实施方案中，使用高纯级(也称作“特级精制”)的植物油，以确保所述水包油乳 液的安全性和稳定性。在某些实施方案中，在本发明中可以使用氢化植物油，其通过植物油 的受控氢化而生成。
示例性的植物油包括、但不限于：扁桃仁油、巴巴苏仁油(babassuoil)、黑加仑籽 油(blackcurrantseedoil)、琉璃苣油、芥花油、蓖麻油、椰子油、玉米油、棉籽油、橄榄 油、花生油、棕榈油、棕榈仁油、油菜籽油、红花油、大豆油、葵花子油和芝麻油。还可以使用 这些油的氢化和/或部分氢化形式。优选的油是红花油、芝麻油、玉米油、橄榄油和/或大豆 油。最优选的油是红花油和/或大豆油。
其中油相是大豆油的组合物是最优选的。在特别优选的实施方案中，所述大豆油 可以具有：9-13%的棕榈酸含量，2.5%-5%的硬脂酸含量，17%-30%的油酸含量，48%-58%的亚 油酸含量，和5%-11%的亚麻酸含量。
在一个优选的实施方案中，所述乳液组合物包含不超过3重量/重量%、更优选小于 2重量/重量%、且最优选小于1重量/重量%的结构甘油三酯。本文使用的“结构甘油三酯”是 这样的甘油三酯：其包含具有至少一个碳链长度为6-12个碳原子的脂肪酸基团和至少一个 碳链长度超过12个碳单元的脂肪酸基团的甘油三酯或甘油三酯混合物。
在另一个实施方案中，所述乳液组合物包含下述量(表示为总油相的重量/重量%) 的结构甘油三酯：不超过30%，优选不超过20%，更优选不超过10%，最优选不超过5%。
在某些实施方案中，本文所述的水包油乳液组合物的油可以额外地或替代地包含 中链甘油三酯。“中链甘油三酯”(MCT)是可以天然地得到或合成的另一类甘油三酯油。MCT 由6-10个碳长度的脂肪酸形成。MCT被广泛地用于注射乳液中，作为卡路里源。这样的油是 商购可得的，例如Miglyol812(SASOLGmbH德国)或CRODAMOLGTCC-PN(CrodaInc,新泽 西)。其它低熔点中链油也可以用于本发明中。在某些实施方案中，在本发明中使用植物油 和MCT油的组合。在优选的实施方案中，在本发明的组合物中含有的油包含小于或等于35重 量/重量%的中链甘油三酯(MCT)、优选小于或等于25重量/重量%的MCT、更优选小于或等于 10重量/重量%的MCT、最优选小于或等于5重量/重量%的MCT。
在另一个实施方案中，所述油相包含动物脂肪。“动物脂肪”是指得自动物来源的 油。动物脂肪也包含甘油三酯，但是3个脂肪酸链的长度和其中的不饱和键不同于植物油。
如果需要的话，可以加工来自在室温下为固体的来源的动物脂肪，以使它们为液 体。在室温固有地为液体的其它类型的动物脂肪包括海洋生物油，诸如鱼油。鱼油甘油三酯 通常包含具有12-22个碳原子的脂肪酸。示例性的鱼油包括，例如，高纯度的鱼油浓缩物。
在某些实施方案中，所述油相是LCT油和/或MCT油和/或海洋来源油中的一种或多 种的混合物。尽管据报道，MCT与更低极性的LCT相比能够更好地增溶活性成分，但是大量 MCT在注射乳液中的存在与不利的代谢效应有关，且因而可能导致安全性和稳定性问题。此 外，已知MCT的水解产物（诸如辛酸酯）具有有害的神经学副作用。因此，在优选的实施方案 中，本发明的组合物包含不超过3重量/重量%的MCT、优选不超过2重量/重量%的MCT、最优选 不超过1重量/重量%的MCT。在优选的实施方案中，本发明的乳液不含有MCT油。
在一个实施方案中，所述乳液含有不超过0.9重量/重量%、优选不超过0.8重量/重 量%、更优选不超过0.5重量/重量%的极性调节剂，所述极性调节剂选自甘油单酯、甘油二 酯、乙酰化的甘油单酯、乙酰化的甘油二酯和/或它们的混合物。在另一个实施方案中，所述 乳液含有不超过0.9重量/重量%、优选不超过0.8重量/重量%、更优选地不超过0.5重量/重 量%的甘油单酯。
换言之，所述乳液优选地含有不超过30%、更优选不超过20%、甚至更优选不超过 10%、且最优选不超过5%（以磷脂的重量计）的极性调节剂，所述极性调节剂选自甘油单酯、 甘油二酯、乙酰化的甘油单酯、乙酰化的甘油二酯和/或它们的混合物。据信，与乳液的磷脂 含量相比，以高浓度使用极性调节剂对磷脂的稳定化性质具有不良作用。
在另一个实施方案中，所述组合物包含选自甘油单酯、甘油二酯、乙酰化的甘油单 酯、乙酰化的甘油二酯和/或它们的混合物的极性调节剂，其量（表示为总油相的%重量/重 量）小于20%、优选小于10%、更优选小于5%、最优选小于2%。
在另一个实施方案中，所述油相包含的甘油单酯和/或乙酰化的甘油单酯小于或 等于总油的10%重量/重量。
根据本发明的“孕激素/油实施方案”的组合物的总油含量（重量/体积）是至少 0.5%且不超过10%（重量/体积）。
根据“孕酮实施方案”和“孕激素/油实施方案”的组合物的总油含量优选地是至少 1%、更优选至少2%、甚至更优选至少4%、最优选至少5%（重量/体积）。本发明的乳液的总油组 分优选地小于或等于9重量/体积%、甚至更优选小于或等于8重量/体积%、且最优选地小于 或等于7重量/体积%。在高度优选的实施方案中，本发明的组合物包含6重量/体积%的油，优 选大豆油。优选的大豆油可以具有大于48%的亚油酸含量和大于17%的油酸含量。具有这些 性质的大豆油的实例是由FreseniusKabi(Sweden)生产的精制大豆油。
在某些实施方案中，大部分孕激素被包含在所述水包油乳液的油微滴内。在某些 实施方案中，超过80%的所述孕激素被溶解且保留在所述油微滴内。在某些实施方案中，大 于85%、90%、92%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或99.5%的所述孕激素被溶解在所述油相中。
含水介质
本发明的水包油乳液另外包含含水介质。“含水介质”或“水相”指含有水的液体。 在优选的实施方案中，所述含水介质是水和/或含水缓冲溶液。根据本发明的“孕激素/油实 施方案”的组合物适当地包含80-99.4重量/体积%的含水介质。优选地，根据“孕激素/油实 施方案”和“孕酮实施方案”的组合物包含90-97重量/体积%的含水介质。
根据本发明的组合物还任选地包含0-4mM的生理上相容的缓冲剂。
磷脂
本发明的组合物另外包含一种或多种乳化剂/表面活性剂，包括磷脂。在本发明中 使用的乳化剂优选地是天然来源的。天然存在的乳化剂包括大豆卵磷脂、蛋卵磷脂(egg lecithin)、葵花子油卵磷脂、鞘氨醇、神经节苷脂和植物鞘氨醇及其组合。在本发明中还可 以使用氢化卵磷脂，即卵磷脂的受控氢化产物。
根据本发明的“孕激素/油实施方案”的组合物适当地包含0.0425重量/体积%-4.1 重量/体积%、优选0.064重量/体积%-3.4重量/体积%的磷脂。
可用于本发明中的示例性磷脂包括，但不限于：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂 酰甘油、磷脂酸及其混合物。这些通常具有4-22个碳原子、更通常具有10-18个碳原子和不 同的饱和度。所述水包油乳液的磷脂组分可以是单一磷脂或几种磷脂的混合物。采用的磷 脂可以是天然的或合成的，但是应当是肠胃外给药、特别是静脉内给药可接受的。
下面列出了合适的磷脂的非穷尽性列表：
磷脂酸，包括1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷脂酸钠盐(DMPA,Na),1,2-二棕榈 酰基-sn-甘油-3-磷脂酸钠盐(DPPA,Na),1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷脂酸钠盐(DSPA, Na)；磷酸胆碱，包括1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC),1,2-二肉豆蔻酰基-sn- 甘油-3-磷酸胆碱(DMPC),1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC),1,2-二硬脂酰基- sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)；磷酸乙醇胺，包括1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺 (DLPE),1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE),1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3- 磷酸乙醇胺(DPPE),1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DSPE)；磷酸甘油，包括1,2- 二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸甘油钠盐(DLPG，Na),1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸甘 油钠盐(DMPG，Na),1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-sn-1-甘油铵盐(DMP-sn-1-GNH4), 1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸甘油钠盐(DPPG，Na),1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸 甘油钠盐(DSPG，Na),1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸-sn-1-甘油钠盐(DSP-sn-1G，Na)； 磷酸丝氨酸，包括1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸-L-丝氨酸钠盐(DPPS,Na)；混合链磷 脂，包括1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC),1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘 油-3-磷酸甘油钠盐(POPG，Na),1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸甘油铵盐(POPG， NH4)；溶血磷脂，包括1-棕榈酰基-2-溶血-sn-甘油-3-磷酸胆碱(P-溶血-PC),1-硬脂酰基- 2-溶血-sn-甘油-3-磷酸胆碱(S-溶血-PC)；聚乙二醇化的磷脂，包括N-(羰基-甲氧基聚乙 二醇2000)-MPEG-2000-DPPE钠盐,N-(羰基-甲氧基聚乙二醇5000)-MPEG-5000-DSPE钠盐, N-(羰基-甲氧基聚乙二醇5000)-MPEG-5000-DPPE钠盐,N-(羰基-甲氧基聚乙二醇750)- MPEG-750-DSPE钠盐,N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-MPEG-2000-DSPE钠盐。
在一个优选的实施方案中，在根据本发明的组合物中的磷脂的量（以基于所述组 合物总体积的重量（重量/体积）计）为至少0.064%、优选至少0.085%、更优选至少0.25%、甚 至更优选至少0.3%、甚至更优选至少0.35%、最优选至少0.5%。
在另一个优选的实施方案中，在根据本发明的组合物中的磷脂的量（以基于所述 组合物总体积的重量（重量/体积）计）为小于或等于3.4%、优选小于或等于3.3%、更优选小 于或等于2.6%、甚至更优选小于或等于2.3%、甚至更优选小于或等于2.2%、最优选小于或等 于2.1%。
最高度优选的组合物包含量为0.7%-2.0%、优选1.0%-1.3%、最优选1.02%（重量/体 积）的磷脂。包含在这些限度内的磷脂的组合物在贮存期间表现出优良的物理稳定性和pH 稳定性。
在一个高度优选的实施方案中，所述磷脂组分包括磷脂的混合物，诸如79%磷脂酰 胆碱、18%磷脂酰乙醇胺、2%鞘磷脂和1%溶血磷脂酰胆碱。
在一个优选的实施方案中，本发明的磷脂乳化剂的来源是卵磷脂，优选蛋卵磷脂。 根据美国药典(USP)，卵磷脂是描述不溶于丙酮的磷脂的复杂混合物的非专有名称，所述混 合物主要由下述物质组成：磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇，它们 与不同量的其它物质（诸如甘油三酯、脂肪酸和碳水化合物）相组合。
大豆卵磷脂和蛋卵磷脂(包括这些化合物的氢化形式)在生物系统中具有悠久的 安全史，具有组合的乳化和增溶性质，且倾向于比大多数合成的表面活性剂更快速地在体 内代谢成无害物质。商购可得的大豆卵磷脂/磷脂是：Centrophase和Centrolex产品 (CentralSoya),Phospholipon(PhospholipidGmbH,德国),Lipoid(LipoidGmbH,德国), EPIKURON(Degussa)和PL90(FreseniusKabi,Sweden)。在高度优选的实施方案中，所述磷 脂的来源是蛋卵磷脂。
在某些实施方案中，在本发明的组合物中的乳化剂（包括磷脂）的总量（以基于所 述组合物总体积的重量（重量/体积）计）是0.05%-4.8%。
在优选的实施方案中，根据本发明的卵磷脂的量（重量/体积）为：小于或等于 4.2%、优选小于或等于3.4%、更优选小于或等于2.9%、甚至更优选小于或等于2.6%、甚至更 优选小于或等于2.5%、最优选小于或等于2.0%。
在某些实施方案中，卵磷脂、特别是蛋卵磷脂的总量（重量/体积）为：大于或等于 0.08%、更优选大于或等于0.1%、甚至更优选大于或等于0.15%、更优选大于或等于0.2%、甚 至更优选大于或等于0.3%、甚至更优选大于或等于0.35%、最优选大于或等于0.6%，
最高度优选的组合物包含的蛋卵磷脂的量（重量/体积）为0.8%-2.3%、优选0.9%- 1.5%、更优选1.0%-1.3%范围内、甚至更优选1.2%。
在一个实施方案中，所述蛋卵磷脂包含60-80重量/重量%、优选67重量/重量%的磷 脂酰胆碱；10-20重量/重量%、优选15重量/重量%磷脂酰乙醇胺；≤3重量/重量%、优选2重 量/重量%的鞘磷脂；和≤3重量/重量%、优选1重量/重量%的溶血磷脂酰胆碱。“蛋卵磷脂 PL90”(FreseniusKabiAB)是具有这样的磷脂含量的蛋卵磷脂的一个实例。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含不超过1.5重量/重量%、优选不超过1.2 重量/重量%、更优选不超过0.8重量/重量%、且最优选不超过0.4重量/重量%的聚乙二醇15- 羟基硬脂酸酯。在另一个实施方案中，本发明的组合物包含不超过1.5重量/重量%、优选不 超过1.2重量/重量%、更优选不超过0.8重量/重量%、最优选不超过0.4重量/重量%的聚乙二 醇酯和/或聚乙二醇-丙二醇。
助表面活性剂
根据本发明的组合物任选地包含助表面活性剂。不受理论的约束，助表面活性剂 被认为在乳液形成过程中稳定脂质微滴，从而影响最终的乳液组合物的乳液微滴大小和稳 定性。适用于本发明组合物的助表面活性剂是阻止脂质乳液的絮凝和/或聚并的那些。示例 性的助表面活性剂包括、但不限于：胆固醇、油酸、油酸盐、吐温80(PEG-脱水山梨糖醇单油 酸酯)、HCO-60、SolutolH15(聚氧乙烯-660-羟基硬脂酸酯)、PEG-400(聚乙二醇)、 PluronicF68(BASF)、CremophorEL(聚氧乙烯-35-蓖麻油酸酯)或胆汁酸（诸如脱氧胆酸） 的盐。在其它实施方案中，所述助表面活性剂选自C12-C22脂肪酸、其盐和/或它们的混合物， 优选地选自C16-C20脂肪酸、其盐和/或它们的混合物，最优选地选自C18脂肪酸、其盐和/或它 们的混合物。在高度优选的实施方案中，所述脂肪酸是单不饱和的。
在一些实施方案中，所述助表面活性剂可以以下述量（重量/体积）存在于本发明 的组合物中：大于或等于0.005%，优选大于或等于0.01%，更优选大于或等于0.02%。在其它 实施方案中，所述助表面活性剂可以以下述量（重量/体积）存在于本发明的组合物中：小于 或等于4%，优选小于或等于1%，更优选小于或等于0.04%。在一个优选的实施方案中，所述助 表面活性剂选自长链脂肪酸（诸如棕榈酸、油酸或硬脂酸）或它们的碱金属盐。高度优选的 助表面活性剂是油酸盐和/或油酸，特别是油酸钠。
在某些其中所述助表面活性剂是油酸盐和/或油酸的实施方案中，所述助表面活 性剂以等于或大于0.005%、优选等于或大于0.01%、甚至更优选等于或大于0.02%的量（重 量/体积）存在。在某些其中所述助表面活性剂是油酸盐和/或油酸的实施方案中，所述助表 面活性剂以小于或等于0.5%、优选小于或等于0.2%、更优选小于或等于0.1%、最优选小于或 等于0.05%的量（重量/体积）存在。
在一个高度优选的实施方案中，所述助表面活性剂是油酸钠，且以0.03重量/体 积%的量存在。
本发明的组合物优选地适于长期肠胃外输注、优选静脉内输注。典型的给药持续 时间可以是例如3-7天。在优选的实施方案中，某些助表面活性剂的浓度因此必须保持最 小，以防止副作用诸如刺激、细胞色素P450抑制等。在一个优选的实施方案中，Pluronic F68(聚(乙二醇)-13-聚(丙二醇共聚丙二醇)以小于0.7重量/重量%、优选小于0.5重量/重 量%的量存在。在另一个优选的实施方案中，Solutol-HS(聚乙二醇-15-羟基硬脂酸酯)以小 于1.2重量/重量%、优选小于1重量/重量%的量存在。
渗透剂
根据本发明的“孕激素/油实施方案”的组合物适当地包含渗透剂和/或张度调节 剂。优选地，后一种组合物的重量克分子渗透浓度为200-1000mOsm/kg。
根据“孕激素/油实施方案”和“孕酮实施方案”的一个优选的实施方案，根据本发 明的组合物是等张的和等渗的。本发明的组合物有利地具有220-600mOsm/kg、最优选230- 360mOsm/kg的重量克分子渗透浓度。
合适的渗透压调节剂和/或张度调节剂包括氯化钾或氯化钠、海藻糖、蔗糖、山梨 醇、甘油、葡萄糖、木糖醇、甘露醇、聚乙二醇、丙二醇、白蛋白、氨基酸及其混合物。在某些实 施方案中，使用也增加渗透压的试剂（诸如甘油、右旋糖、乳糖、山梨醇或蔗糖）实现270- 330mOsm/kg、优选280-300mOsm/kg的重量克分子渗透浓度。
在一个优选的实施方案中，所述渗透剂是生理上可接受的多元醇，诸如甘油、山梨 醇或木糖醇。在一个优选的实施方案中，所述渗透剂是甘油。
本发明组合物的渗透剂和/或张度调节剂通常以不具有不利的生物学效应的浓度 使用。终产物优选地是等张的，从而允许通过中心或周围静脉导管来输注所述乳液。
在其中甘油是渗透剂的优选的实施方案中，甘油以大于1%、优选大于2%、更优选大 于2.3%的浓度（重量/体积）存在。在其它优选的实施方案中，甘油以小于5%、优选小于3%、更 优选小于2.7%的浓度（重量/体积）存在。在一个高度优选的实施方案中，本发明的乳液包含 2.5%的甘油。
pH调节剂
根据本发明的组合物的pH为pH6.0-pH9.0，优选pH6.5-pH8.5，最优选pH7.0- 8.0。所述组合物的pH可以通过本领域已知的方法来调节，例如通过使用适当的碱（所述碱 中和脂肪酸上的负电荷），通过使用适当的缓冲剂，或它们的组合。多种碱和缓冲剂适合与 本发明的乳液一起使用。本领域技术人员会明白，将缓冲剂加入乳液中不仅会影响最终的 pH，而且会影响乳液的离子强度。高离子强度缓冲剂可以负面地影响乳液的ζ电位，并因此 不是合乎需要的。在一个优选的实施方案中，通过加入1N氢氧化钠将pH调节至希望的值。
任选存在的添加剂
根据本发明的组合物任选地包含一种或多种药学上可接受的添加剂，诸如酸化 剂、碱化剂、粘合剂、螯合剂、络合剂、增溶剂、杀菌剂、防腐剂(包括抗微生物剂和抗氧化 剂)、助悬剂、稳定剂、润湿剂、粘度调节剂、溶剂、冷冻保护剂、稀释剂、润滑剂或其它生物相 容的物质。在某些实施方案中，这样的添加剂有助于稳定胶体分散系，或使得本发明的制剂 是生物相容的。
在一个实施方案中，本发明的组合物不包含维生素E。在另一个实施方案中，本发 明的组合物不包含维生素C。在另一个实施方案中，本发明的组合物不包含植酸六钠盐 （hexasodiumphytate）。在一个优选的实施方案中，本发明的组合物不含有或基本上不含 有醇。在一个实施方案中，本发明的组合物不含有或基本上不含有乙醇。在另一个实施方案 中，本发明的组合物额外地或替代地不含有有机溶剂。
优选地，根据本发明的“孕酮实施方案”的组合物包含小于2.5重量/体积%的苯甲 酸苄酯。
根据“孕酮实施方案”的组合物和根据“孕激素/油实施方案”的组合物都优选地包 含小于1重量/体积%的苯甲酸苄酯。甚至更优选地，所述组合物包含小于1重量/体积%的苯 甲醇和/或其衍生物。
在优选的实施方案中，本发明的组合物不含有苯甲酸苄酯，且在高度优选的实施 方案中，不含有苯甲醇和/或其衍生物。在一个优选的实施方案中，本发明的组合物不含有 环糊精。
乳液组分的比例
尽管上文阐述了可以包含在本发明组合物中的不同组分的示例量，本发明的其它 方面涉及如下文所讨论的特定组分的比例。
孕激素:油之比
如上文所指出的，本发明的组合物有利地具有低油含量，使得给药的每单位体积 的组合物向个体递送最少的脂质，从而可以避免不利的副作用，诸如高脂血症。此外，在一 些实施方案中，所述组合物实现了孕激素在油中的提高的溶解度，同时维持或提高所述乳 液的化学稳定性和/或物理稳定性，使得每单位油可以向个体递送更高剂量的孕激素。
根据“孕酮实施方案”的组合物通常含有的孕酮和油的孕酮与总油组分之比（重 量/重量）为至少1:35、更优选至少1:33、甚至更优选至少1:32。
根据“孕激素/油实施方案”和“孕酮实施方案”的特别优选的实施方案，所述孕激 素与总油组分之比（重量/重量）为至少1:31。通常，后者的比例不超过1:22,更优选地，它不 超过1:23,更优选地它不超过1:24,更优选地它不超过1:25,更优选地它不超过1:26,更优 选地它不超过1:27,甚至更优选地它不超过1:28、且最优选地它不超过1:29。在一个实施方 案中，所述孕激素与油组分之比是1:32-1:25（重量/重量），甚至更优选1:31-1:29（重量/重 量）。
在优选的实施方案中，本发明的组合物包含孕激素，优选孕酮，其量（表示为所述 油的重量/重量%）为：大于1%、优选大于1.5%、更优选大于或等于2%、特别是大于或等于 2.2%。在甚至更优选的实施方案中，所述孕激素以大于所述油的2.5%、甚至更优选大于所述 油的3%、最优选大于所述油的3.2重量/重量%的量存在。
磷脂:油之比
已经发现，在水包油组合物中的存在过量磷脂可以导致在高压灭菌和/或贮存以 后磷脂降解产物的增加，从而造成pH下降，这继而不利地影响乳液稳定性。此外，过量的磷 脂可以导致组合物中的大型无脂肪胶束的数目的增加，并因此导致不希望的PFAT5值增加。 另一方面，磷脂水平太低的组合物不会表现出足以耐受通过高压灭菌来灭菌和贮存的乳液 微滴稳定性。本发明的组合物具有优化水平的油和磷脂，从而实现最适粒度分布和优越的 物理稳定性，同时在热灭菌和贮存期间维持pH在希望的范围内。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含的磷脂的量（表示为所述油的重量/重 量%）为：大于或等于6.8%、优选大于或等于8.4%、更优选大于或等于12%、甚至更优选大于或 等于14%、最优选大于或等于15%。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含的磷脂的量（表示为所述油的重量/重 量%）为：小于或等于43%、优选小于或等于42.5%、更优选小于或等于26%、甚至更优选小于或 等于25%、最优选小于或等于22%。
在一个高度优选的实施方案中，所述磷脂以所述油的16-18重量/重量%的量存在。
在另一个实施方案中，本发明的组合物包含卵磷脂，优选蛋卵磷脂，其量（表示为 所述油的重量/重量%）为：大于或等于8%、优选大于或等于10%、更优选大于或等于13%、甚至 更优选大于或等于15%、最优选大于或等于18%。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含卵磷脂，优选蛋卵磷脂，其量(表示为所 述油的重量/重量%）为：小于或等于50%、优选小于或等于48%、更优选小于或等于40%、甚至 更优选小于或等于33%、最优选小于或等于31%。
在一个高度优选的实施方案中，蛋卵磷脂以在所述油的19-21重量/重量%的量存 在。
助表面活性剂:油之比
在本发明的某些实施方案中，所述组合物包含助表面活性剂，优选油酸盐或油酸。 在一个实施方案中，所述助表面活性剂以大于所述油的0.02重量/重量%的量存在。优选地， 在所述组合物中含有的助表面活性剂的浓度（以表示为所述油的重量/重量%的量计）为：大 于或等于0.08%、优选大于或等于0.1%、甚至更优选大于或等于0.3%。在另一个优选的实施 方案中，在所述组合物中含有的助表面活性剂的浓度（以表示为所述油的重量/重量%的量 计）为：小于或等于2%、优选小于或等于0.9%、甚至更优选小于或等于0.7%。
在一个高度优选的实施方案中，所述助表面活性剂是油酸盐或油酸，且以所述油 的0.5重量/重量%的量存在。
助表面活性剂:磷脂之比
在本发明的一个实施方案中，所述组合物包含磷脂，和助表面活性剂、优选油酸 盐。在该实施方案中，所述助表面活性剂和所述磷脂优选地以下述助表面活性剂与磷脂之 比（重量/重量）存在：大于或等于1:85、优选大于或等于1:82、更优选大于或等于1:68、甚至 更优选大于或等于1:51、最优选大于或等于2:85。在该实施方案中，所述助表面活性剂和所 述磷脂优选地以下述助表面活性剂与磷脂之比（重量/重量）存在：小于或等于1:12、优选小 于或等于1:17、更优选小于或等于1:20、甚至更优选小于或等于1:26、最优选小于或等于1: 34。
在其中所述助表面活性剂是油酸盐的一个优选的实施方案中，所述助表面活性剂 与磷脂之比（重量/重量）是1:51-1:30、优选1:51-1:34。
在本发明的另一个实施方案中，所述组合物包含卵磷脂，和助表面活性剂、优选油 酸盐。在该实施方案中，所述助表面活性剂和所述卵磷脂优选地以下述助表面活性剂与卵 磷脂之比（重量/重量）存在：大于或等于1:100、优选大于或等于1:80、更优选大于或等于1: 70、甚至更优选大于或等于1:60、最优选大于或等于1:50。在该实施方案中，所述助表面活 性剂和所述卵磷脂优选地以下述比例（重量/重量）存在：小于或等于1:15、优选小于或等于 1:20、更优选小于或等于3:70、甚至更优选小于或等于1:30、最优选小于或等于1:40。
在其中所述助表面活性剂是油酸盐的一个优选的实施方案中，所述卵磷脂是蛋卵 磷脂，所述助表面活性剂与卵磷脂之比（重量/重量）是1:60-1:30、优选1:60-1:35。
孕激素:磷脂之比
在一个实施方案中，所述孕激素以小于所述磷脂的58%重量/重量、优选小于所述 磷脂的29%重量/重量的量存在。优选地，在根据本发明的组合物的另一个实施方案中，所述 孕激素是孕酮，所述孕酮以下述量（表示为所述磷脂的重量/重量%）存在：大于7.8%、优选大 于9.8%、更优选大于13%、甚至更优选大于15%。
优选地，在根据本发明的组合物的另一个实施方案中，所述孕激素是孕酮，所述孕 酮以下述量(表示为所述磷脂的重量/重量%）存在：小于47%、优选小于39%、更优选小于26%、 甚至更优选小于20%。
在根据本发明的组合物的一个实施方案中，所述孕激素是孕酮，且磷脂由卵磷脂 提供，且所述孕酮和卵磷脂以下述重量/重量比存在：1:15-2:5，优选1:12-1:3，更优选1:9- 2:9，甚至更优选2:15-1:6。在一个优选的实施方案中，所述孕酮与卵磷脂之比（重量/重量） 小于1:2,优选小于1:4。
孕激素:助表面活性剂之比
在一个实施方案中，助表面活性剂以下述量存在于根据本发明的组合物中：大于 2.5%（以所述孕激素的重量计），优选大于5%（以所述孕激素的重量计）。
包装
本发明的组合物优选地是即用的。本文使用的“即用的”是指不需要其它操作，诸 如稀释或将多个组分混合到一起。
本发明的组合物可以提供在密闭包装中。所述包装应当适合与脂质制剂和孕激素 一起使用。不适合包装脂质制剂的材料的实例包括PVC和DEHP。与脂质制剂相容的合适包装 包括、但不限于：基于聚丙烯的袋和玻璃瓶。常规的玻璃是本发明组合物的优选包装。在一 个优选的实施方案中，所述组合物被包装在密闭容器中。所述容器可以具有外包装，以保护 免于物理环境损害。在一个实施方案中，所述组合物被包装在具有250ml容积的密闭容器 中。在一个实施方案中，所述组合物被包装在密闭容器中，在惰性气体顶空下。
在其它实施方案中，所述组合物被包装在惰性容器中。在一个实施方案中，所述惰 性容器是不透光的。在另一个实施方案中，所述容器包含双层壁，且在优选的实施方案中， 在两层之间的区域填充了惰性气体以防止氧化。
为了长期贮存，所述包装材料需要阻止氧从环境空气向本发明的组合物的扩散， 以防止在所述组合物内形成氧降解物。
在另一个实施方案中，所述组合物被包装在单位剂量中。单位剂量会提供的组合 物足够向个体给药孕激素单次剂量（bolusdose），或足够在治疗的前1小时、优选前2小时、 更优选前4小时内给药所述组合物。所述单位剂量使得能够在紧急情况下迅速且方便地给 药所述组合物，例如由救护车中的急救医士给药，或由在发生损伤/事件的地方的急救员/ 医士给药。单位剂量形式的非限制性实例是注射剂、预充注射器、玻璃小瓶和/或密封袋。
在其它实施方案中，所述组合物被包装在与胰岛素泵装置类似的装置内（所述装 置用于施用连续输注治疗），或被包装在设计成与这样的装置一起使用的药筒中。示例性的 胰岛素泵是由MiniMed和Disetronic销售的那些。这样的泵可以包括例如插管，其中贮存有 组合物的泵贮器或筒，可以用电池做电源的泵，以及允许使用者控制被递送的活性剂的精 确量的装置，例如，计算机芯片。
高度优选的实施方案
在根据本发明的组合物的一个高度优选的实施方案中，所述组合物包含0.15- 0.25重量/体积%的孕酮；5.0-7.0重量/体积%的油；1.0-1.4重量/体积%的蛋卵磷脂；80- 98.9重量/体积%的水；且具有6.0-9.0的pH。根据该高度优选的实施方案的组合物代表每单 位体积液体递送最希望量的孕激素、每单位油递送最希望量的孕激素、所述乳液的物理稳 定性和给药所述乳液的安全性的折中。
所述乳液的性质
根据本发明的组合物具有乳白色外观，且作为视觉上均质的乳液存在。
PFAT5值
美国药典(USP)设定了在可注射的脂质乳液中的小球体尺寸分布的限度(USP 729-Pharm.Forum.2005;3:1448-1453)。在注射乳液中的直径>5μm的脂肪小球的限度（表示 为>5μm的脂肪的体积加权百分比）不超过0.05%，或PFAT5不超过0.05%。具有大于0.05%的 PFAT5值的组合物被认为就静脉内给药而言是不安全的。乳液的PFAT5值可以受多种因素的 影响，所述因素包括：所述乳液的总油含量，助表面活性剂的选择，助表面活性剂与油之比， 乳液微滴在聚并和/或絮凝方面的稳定性。
根据本发明的组合物具有小于或等于0.05%、优选小于或等于0.04%、甚至更优选 小于或等于0.02%、最优选小于或等于0.01%的PFAT5值。
在一个实施方案中，本发明组合物的100%的乳液微滴具有小于或等于5μm的直径， 且98%的微滴、优选99%的微滴具有小于或等于1.5μm的直径。通过Coulter计数器(Coulter MultisizerIII)测定直径大于1μm的微滴的粒度分布。
PCS
在一个实施方案中，直径小于或等于1μm的微滴具有350nm的最大z-平均值和/或 不超过0.25的多分散性值。在一个优选的实施方案中，直径小于或等于1μm的微滴具有 250nm的最大z-平均值和/或不超过0.20的多分散性值。在一个甚至更优选的实施方案中， 直径小于或等于1μm的微滴具有220nm的最大z-平均值和/或不超过0.15的多分散性值。
中位微滴尺寸
乳液微滴尺寸是决定乳液失稳的动力学的关键参数，因为微滴尺寸直接影响诸如 聚并、乳状液分层、絮凝、奥斯特瓦尔德熟化和最终的相分离等现象的速率。因此，乳液微滴 尺寸指示乳液稳定性。多种参数影响乳液微滴尺寸，包括例如油的类型、表面活性剂和助表 面活性剂的类型、活性成分的存在、油的量、油与表面活性剂之比和油与助表面活性剂之 比。
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的乳液微滴粒子(dropletparticle)具 有下述的基于体积的中位直径或D[4,3]：≤300nm，优选≤230nm，更优选≤200nm，甚至更优 选≤185nm，最优选≤180nm。
在一个高度优选的实施方案中，在于121℃进行1次、优选2次、甚至更优选3次持续 15min的高压灭菌以后，和/或在于60℃贮存3周、优选4周以后，根据本发明的组合物维持下 述基于体积的中位直径或D[4,3]：≤300nm，优选≤230nm，更优选≤200nm，甚至更优选≤ 185nm，最优选≤180nm。
平均微滴尺寸
在一个实施方案中，根据本发明的组合物的乳液微滴粒子具有下述的基于体积的 平均直径或d(0,5)：≤300nm，优选≤250nm，更优选≤200nm，甚至更优选≤185nm，且最优选 ≤180nm。
在一个高度优选的实施方案中，在于121℃进行1次、优选2次、甚至更优选3次持续 15min的高压灭菌以后，和/或在于60℃贮存3周、优选4周以后，根据本发明的组合物维持下 述基于体积的平均直径或d(0,5)：≤300nm，优选≤250nm，更优选≤200nm，甚至更优选≤ 185nm，且最优选≤180nm。
跨距
Mastersizer“跨距”值是粒度分布曲线的宽度或展宽的量度，且通过公式(d(v， 0.9)-d(v，0.1))/d(v，0.5)来计算，以Mastersizer单位计。在一个特定的实施方案中，本发 明组合物具有≤2400诸如≤2100的跨距。
ζ电位
ζ电位与乳液的稳定性有关。具有高ζ电位的乳液在电学上是稳定的，而具有低ζ电 位的那些倾向于凝结或絮凝。乳液的ζ电位受到例如下述因素的影响：表面活性剂和助表面 活性剂的选择和量，所述乳液的pH，以及水溶液的离子强度。
在一个实施方案中，本发明组合物的ζ电位为：-30mV至-70mV，优选-40mV至-65mV， 优选-51mV至-60mV。另外，本发明的乳液组合物的ζ电位可以是-30mV、-35mV、-40mV、- 45mV、-50mV、-55mV、-60mV、-65mV或-70mV或更高。
微粒状物质
在某些实施方案中，所述组合物在环境温度(例如，在选自4℃、2℃-8℃、或20℃- 25℃的一个或多个温度)下不含结晶固体。所述制剂含有0-12个等于或大于10μm的颗粒/ ml、和0-2个等于或大于25μm的颗粒/ml。
乳液的稳定性
物理稳定性
根据本发明的组合物令人惊讶地是可热灭菌的。本文使用的“可热灭菌的”是指， 在于121℃高压灭菌15min以后，所述组合物维持它们的物理稳定性，即不会相分离或表现 出微滴絮凝和/或聚并的征象。
根据本发明的组合物令人惊讶地是贮存稳定的。本文使用的“贮存稳定的”是指， 在于60℃贮存3周、优选4周以后，所述组合物维持它们的物理稳定性，即不会相分离或表现 出微滴絮凝和/或聚并的征象。
在一个高度优选的实施方案中，在于121℃高压灭菌15min以后，和/或在于60℃贮 存3周、优选4周以后，根据本发明的组合物具有小于0.05%、优选小于或等于0.03%、甚至更 优选小于或等于0.02%、最优选小于或等于0.01%的PFAT5值。
在通过于121℃高压灭菌15min进行灭菌以后，和/或于60℃贮存3周、优选4周以 后，本发明的组合物通常不会表现出变色的任何征象。
在另一个高度优选的实施方案中，在于121℃高压灭菌15min以后，和/或在于60℃ 贮存3周、优选4周以后，根据本发明的组合物的乳液微滴表现出下述的基于体积的平均直 径或d(0,5)的增加：不大于2%，优选不大于1.5%，甚至更优选不大于1%。
在另一个实施方案中，在于121℃高压灭菌15min以后，和/或在于60℃贮存3周、优 选4周以后，根据本发明的组合物的乳液微滴表现出下述的基于体积的中位直径或D[4,3] 的增加：不大于2.5%，优选不大于2%，甚至更优选不大于1.5%。
化学稳定性
在一个实施方案中，在于121℃进行1次、优选2次、甚至更优选3次持续15min的高 压灭菌以后，和/或在于60℃贮存3周、优选4周以后，本发明的组合物的孕激素含量减少不 超过孕激素重量的10%，优选不超过孕激素重量的5%，甚至更优选不超过孕激素重量的2%。
在另一个实施方案中，在于121℃进行1次、优选2次、甚至更优选3次持续15min的 高压灭菌以后，和/或在于60℃贮存3周、优选4周以后，在本发明的组合物中的孕激素衍生 的降解/氧化产物的量（就任何单一化学物质而言）不超过孕激素重量的1%、不超过孕激素 重量的0.7%，且孕激素衍生的降解/氧化产物的总和不超过孕激素重量的3%。
在其中所述孕激素是孕酮的一个特别优选的实施方案中，在于121℃进行1次、优 选2次、甚至更优选3次持续15min的高压灭菌以后，和/或在于60℃贮存3周、优选4周以后， 6-酮孕酮、6-羟基孕酮和20-羟基孕酮(α-和β-)或δ-6-孕酮各自的水平不超过孕酮重量的 1%、优选不超过孕酮重量的0.7%，且孕酮降解产物的总和不超过孕酮重量的3%。
孕激素和孕激素降解/氧化产物可以通过HPLC来定量。
乳液组分本身也会发生化学不稳定性。例如磷脂在贮存过程中会分解为未酯化的 脂肪酸(NEFA)。这在热应激（诸如高压灭菌和/或长期贮存）过程中尤其是问题。
NEFA的积累不利地影响乳液的pH和ζ电位。因为这些原因，应当限制在本发明组合 物中的NEFA水平。
优选地，在高压灭菌之前或之后，和/或在于60℃贮存3周或4周之前或之后，组合 物的未酯化的脂肪酸(NEFA)水平为≤12mEq/L,优选≤8mEq/L。
无菌度
在一个优选的实施方案中，根据本发明的组合物是无菌的。本文使用的“无菌的” 表示通过美国药典第<71>章的无菌度实验的组合物。优选的实施方案是这样的组合物：其 满足美国药典第<85>章“细菌内毒素试验”的要求，且优选地满足美国药典第<151>章“热原 试验”的要求。
方法
本发明的另一个方面涉及制备上文定义的水包油乳液组合物的方法，所述方法包 括下述步骤：
a)混合水、磷脂和任选存在的渗透剂，以制备含水组合物；
b)混合孕激素和油，以制备含油组合物；和
c)混合所述含水组合物和所述含油组合物，随后均质化，以形成均质的水包油乳 液。
根据一个特别优选的实施方案，在将所述含水组合物与所述含油组合物混合之 前，将所述含水组合物均质化，以制备均质的悬浮液。在另一个有利的实施方案中，将所述 孕激素加入到温度为至少40℃的油中，以促进所述孕激素的稀释。优选地，在将所述含油组 合物与所述含水组合物混合之前，过滤所述含油组合物。
所述制备方法的一个特别优选的实施方案包括下述步骤：
A)将渗透剂溶解在含水介质中，并搅拌；
B)加入表面活性剂，优选蛋卵磷脂，并搅拌；
C)任选地，加入助表面活性剂和pH调节剂，并混合；
D)将孕激素溶解在油中，以形成油相；
E)过滤所述油相，随后将过滤的油相加入所述水相中，并混合；
F)均质化，以形成均质的乳液；
G)任选地，加入水；
H)任选地，加入足够的1NNaOH，以调节pH至pH8.0-8.8；
I)任选地，加入足够的含水介质，以达到终体积。
在一个特别优选的实施方案中，在大于或等于350巴、优选大于或等于370巴下进 行所述均质化。
在特别优选的实施方案中，所述制备本发明的乳液的方法包括下述步骤：将蛋卵 磷脂溶解在含水介质中(而不是油中)，将油相加入水相中(而不是反之)，并在大于或等于 350巴下均质化。我们相信这些步骤会产生具有在粒度和乳液稳定性方面的有利性质的乳 液。
在另一个优选的实施方案中，将所述乳液包装在密闭容器中，并灭菌，优选地通过 加热到至少121℃(例如121℃-123℃)持续最少15分钟的保持时间来灭菌。所述高压灭菌程 序优选地是旋转周期（rotarycycle）。
下面提供了制备方法的详细实施例。本领域技术人员会容易地理解，可以做出多 种改变和变化，且仍然在本发明的范围内。
预制乳液的制备
向干净容器(容器A)中装入占总体积的约15%的含水介质。将所述含水介质的温度 调节至约55-60℃，并用氮将所述含水介质脱气，直到其残余氧含量≤0.1mg/L。在整个乳液 制备过程期间，将所述含水介质保持在氮气氛下，使残余氧含量≤0.1mg/L。将渗透剂加入 所述含水介质中，并用磁搅拌器以约50Hz搅拌约3-5分钟。将卵磷脂加入含水混合物中。任 选地加入助表面活性剂和pH调节剂，并用高剪切混合器(例如，UltraTurrax)以约50Hz搅拌 所述混合物，直到得到在水相表面上看不到表面活性剂的均质悬浮液。
油相：将油加入另一个容器(容器B)中，并调节温度至约60℃。然后将孕激素溶解 在加热的油中，用磁搅拌器以约50Hz搅拌约10min±5min。
通过0.2μm过滤器，过滤来自容器B的油相，并缓慢地转移进在容器A内的水相中。 如下得到所述预制乳液：用高剪切混合器(例如，UltraTurrax)以约50Hz不断搅拌约 15min，直到得到视觉上均质的预制乳液。
乳液的制备
所述预制乳液然后进行约4次均质化。每次均质化包括：第一步，其中使所述预制 乳液在约50-80℃的温度(在热交换以后)接受约400±30巴的压力，和第二步，其中使所述 预制乳液在约55-80℃的温度(在热交换以后)接受约100±30巴压力。
通过10μm过滤器，将所述乳液滤入干净的装有足够的含水介质的贮存罐中，以得 到等于终体积的约90%的乳液体积。用氮将所述含水介质脱气，直到残余氧达到≤0.1mg/L， 并维持在氮层下。将所述乳液冷却至约25-30℃。任选地加入pH调节剂，以达到8.0-8.8的 pH。可以加入其它含水介质，以使所述乳液达到终浓度。
灌装
将所述乳液转移至灌装机，在其中将所述乳液包装并密封在诸如玻璃瓶中。用氮 冲洗灌装装置，并保藏在氮下。在灌装之前和在灌装过程中，将氮流吹入包装中，使得包装 中的氧含量保持≤0.1mg/l。在一个优选的实施方案中，将约255±1.5ml乳液加入每个包装 单位中。然后，灌装的包装经历抽空。在一个优选的实施方案中，所述包装经历4次空气抽 空，每次包括：0.5秒的空气抽空，继之以0.5秒的除氮，并达到0.60巴(0.40绝对巴)的最终 真空值。给所述包装加塞子，优选橡皮塞(例如StelmiRG6720卤化丁基橡胶塞)。
在最大约16小时的保持时间内(即，在灌装后约16小时内)，通过高压灭菌，将包装 的乳液灭菌。所述高压灭菌过程包括：加热至约121℃(约121℃-约123℃)，持续最少约15分 钟的保持时间。所述高压灭菌程序优选地是旋转周期。所述高压灭菌过程可以进行1-3次。 在灭菌以后，目检瓶子的游离脂肪微滴的征象。将所述乳液贮存在约15℃-约25℃。
治疗方法
本发明的药物乳液可以肠胃外、优选静脉内或动脉内给药于个体，用于治疗或预 防用途。在一个优选的实施方案中，所述个体是哺乳动物，更优选地人。
所述制剂具有神经保护和/或神经再生性质。所述制剂可用于治疗或预防神经系 统病症或病患。示例性的病症和病患包括、但不限于：中枢神经系统(CNS)病症或病患、脊髓 损伤、创伤性脑损伤、轻度头损伤（包括特征在于脑功能暂时丧失的脑震荡）、儿科脑损伤、 CNS的变性性病症（诸如帕金森病）、痴呆（包括阿尔茨海默氏病）、脱髓鞘病症（诸如多发性 硬化）和慢性糖尿病性周围神经病。
其它示例性的病症和病患包括：缺血性神经病（诸如缺血性CNS损伤）、中风（包括 缺血性中风、出血性中风和短暂脑缺血发作）和由心脏外科手术过程中的心肺转流术导致 的神经认知损害（例如灌注后综合征）。其它实例包括：失语症、睡眠障碍和焦虑障碍诸如创 伤后应激障碍。
所述制剂也可用于缓解与上述病症有关的征状，诸如恢复认知功能、恢复睡眠模 式、使情绪障碍正常化等。本发明的制剂也可用于治疗创伤后应激障碍。
在一个实施方案中，本发明涉及治疗具有创伤性CNS损伤（更具体地为创伤性脑损 伤(TBI)）的哺乳动物个体的方法。所述方法包括：通过向有此需要的哺乳动物个体给药根 据本发明的药物组合物，从而递送治疗有效浓度的孕激素，来治疗所述个体的TBI。在一个 优选的实施方案中，所述哺乳动物个体是人。本发明的方法包括：向具有创伤性CNS损伤（更 具体地为TBI）的个体肠胃外给药本发明的包含孕激素的药物组合物。根据本发明的方法， 所述药物组合物用于促进针对创伤性CNS损伤的积极治疗应答。
TBI是暂时性地或永久性地损害脑功能的、对脑组织的物理损伤。诊断是在临床上 可疑的，且可以通过成像(主要是CT)来确认。临床表现会在严重性和后果方面显著不同。损 伤通常分为开放型或闭合型。开放型损伤包括头皮和头骨的穿透。当头受打击、碰到物体或 剧烈摇动（造成快速的脑加速和减速）时，通常发生闭合型损伤。因此，本发明的组合物可以 用于治疗TBI，包括钝伤(即闭合型损伤)以及穿透伤。“治疗”是指，具有创伤性CNS损伤的个 体的任何改善，包括改善的形态学恢复(即，增强的组织存活)和/或行为恢复。所述改善可 以表征为：在创伤性CNS损伤以后，行为和解剖学恢复的速度和/或程度的增加。因此，“积极 治疗应答”包括完全应答和部分应答。在专利申请WO2006/102644、WO2006102596和WO2008/ 039898中详细讨论了测定是否已经发生完全或部分治疗应答的各种方法。
“治疗有效量”是指，足以产生治疗效力的孕激素浓度。
因而，在给药的根据本发明的剂量单位中的孕激素浓度可有效地治疗或预防在 CNS的创伤性损伤以后发生的神经元损伤，并因此产生神经保护效力。神经变性是中枢神经 系统中的神经元的进行性丧失。本文使用的“神经保护”是阻止和/或逆转在创伤性CNS损伤 以后的神经变性的进展。治疗有效量取决于多种因素，包括例如孕激素的比活、创伤性损伤 的严重性和模式、产生的神经元损伤、患者的应答性、患者的体重、以及个体内变异性、给药 模式和/或方法、使用的孕激素制剂等其他因素。
本发明的包含孕激素的乳液组合物可以使用本领域已知的任何可接受的方法给 药，包括静脉内(IV)注射、肌肉内(IM)注射或皮下(SC)注射。在本发明的特定实施方案中， 通过IV注射给药所述包含孕激素的药物组合物。当静脉内给药时，可以在1-144小时的时段 内，通过输注来给药所述包含孕激素的药物组合物。在一些实施方案中，孕激素输注发生在 24-72小时的时段内、在48-96小时的时段内、或在24-144小时的时段内。在一个优选的实施 方案中，所述孕激素输注发生在96-120小时的时段内。
在本发明的一个实施方案中，通过肠胃外给药、优选静脉内给药所述组合物，其总 剂量为：0.1ng-100g/kg体重、10ng-50g/kg体重、100ng-1g/kg体重、1μg-100mg/kg体重、 1mg-90mg/kg体重、2mg-80mg/kg体重和3mg-70mg/kg体重。或者，为了达到治疗有效剂量而 给药的孕激素的量是：0.1ng、1ng、10ng、100ng、1μg、10μg、100μg、1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、 6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、 70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、500mg/kg体重或更大。在一个优选的实施方案 中，以50mg-90mg/kg体重的总剂量静脉内给药孕激素。
孕激素可以每天给药1次或几次。治疗的持续时间可以是每天1次，持续1、2、3、4、 5、6、7天或更久的时段。日剂量可以如下给予：以单个剂量单位或几个更小的剂量单位的形 式单次给药，或以一定的间隔多次给药分次剂量。在初次给药以后的任意时间，可以给药以 后的剂量单位，从而实现治疗效力。例如，可以给药额外的剂量单位，以保护个体免于可能 发生在损伤后的前几天的第二波水肿。在一个优选的实施方案中，初次剂量单位的给药不 晚于损伤后8小时。
在本发明的特定实施方案中，以恒定的给药方案给药孕激素。“恒定给药方案”是 指，在治疗过程中，以恒定的每小时孕激素总输注剂量给药孕激素。在本发明的其它实施方 案中，以“二水平给药方案”施予治疗。“二水平给药方案”是指，在两个给药时间段内给药组 合物。在一个实施方案中，在所述二水平给药方案的第一时间段内给药的每小时孕激素总 剂量高于在所述二水平给药方案的第二时间段内给药的每小时孕激素总输注剂量。在一个 特定的实施方案中，在所述二水平孕激素给药方案的第一时间段内静脉内给药0.71mg/kg/ h的连续剂量，并在所述二水平孕激素给药方案的第二时间段内给药0.5mg/kg/h的剂量。在 一个非常特别的实施方案中，所述二水平给药方案的第一时间段具有1小时的持续时间，且 所述第二时间段具有120小时的总持续时间。
本发明的治疗方法通常在个体中实现下述的最终孕激素血清水平：100ng/ml- 1000ng/ml、1100ng/ml-1450ng/ml、100ng/ml-250ng/ml、200ng/ml-350ng/ml、300ng/ml- 450ng/ml、350ng/ml-450ng/ml、400ng/ml-550ng/ml、500ng/ml-650ng/ml、600ng/ml- 750ng/ml、700ng/ml-850ng/ml、800ng/ml-950ng/ml、900ng/ml-1050ng/ml、1000ng/ml- 1150ng/ml、1100ng/ml-1250ng/ml、1200ng/ml-1350ng/ml、1300ng/ml-1500ng/ml。在特定 的实施方案中,所述孕激素血清水平包括100ng/ml、250ng/ml、300ng/ml、350ng/ml、360ng/ ml、370ng/ml、380ng/ml、390ng/ml、400ng/ml、410ng/ml、420ng/ml、430ng/ml、440ng/ml、 450ng/ml、500ng/ml、750ng/ml、900ng/ml、1200ng/ml、1400ng/ml或1600ng/ml。如在 WO2006102596中所述，在向个体静脉内给药参照组合物以后，通过计算随着时间的曲线下 面积(AUC)，可以测定所述孕激素血清浓度。
在本发明的其它实施方案中，可以将至少一种额外的神经保护剂与所述孕激素组 合(作为同一组合物的一部分，或在单独的组合物中)，以增强在创伤性CNS损伤以后的神经 保护。这样的药剂包括例如维生素D，和/或减轻谷氨酸盐兴奋性中毒和增强神经元再生的 化合物。这样的药剂可以选自、但不限于生长因子。“生长因子”是指刺激细胞生长或增殖的 细胞外信号转导分子。当与其它药学活性剂(即，其它神经保护剂)结合地给药所述孕激素 时，较低浓度的孕激素可以是治疗上有效的。
现在已经一般性地描述了本发明，通过参考某些具体实施例会更好地理解本发 明，所述具体实施例包括在本文中仅仅是出于例证的目的，而无意限制本发明，除非指出。
实施例
实施例1-优选的实施方案
实施例1的制剂是6%油乳液组合物，其包含0.2%孕酮和1.2%蛋卵磷脂。所述磷脂以 占油的17重量/重量%的量存在，且孕酮与油之比是1:30（重量/重量）
表I
如下制备表I的乳液。除非另外指出，否则将组分、混合物和完成的乳液都保持在 氮气和55-60℃的温度下。
将180L注射用水(w.f.i)加入第一容器中，温热至58℃，同时以50Hz混合，并用氮 脱气，直到得到≤0.1mg/L的残余氧浓度。将9.98kg甘油(无水甘油,Axelis,Austria)加入 水中，并以50Hz混合5分钟。将23.97kg大豆油(FreseniusKabi,Sweden)加入第二容器中， 以50Hz搅拌，并温热至58℃。在恒定搅拌下，将0.81kg孕酮(微粉化的孕酮，Proquina, Mexico)加入加热的大豆油中。将4.77kg蛋卵磷脂(PL90,FreseniusKabi,Sweden)加入温 热的水-甘油混合物中，随后加入0.12kg油酸(MerckKGaA)和470mlNaOH1M(Merck KGaA)。用UltraTorrax(UT)以50Hz搅拌第一容器的内容物，直到得到均质的悬浮液(约15 分钟)。
当第二容器中的油相已经达到56℃的温度且孕酮完全溶解时，将混合物搅拌另外 15分钟。通过0.2μm过滤器过滤油相，并缓慢地转移进第一容器中(在约18分钟的时段内)。 使用两个5L体积的注射用水（温热至58℃）冲洗第二容器，然后将它们加入第一容器中。加 入另外110mLNaOH1M，使pH达到pH8.0。用UT以50Hz搅拌预制乳液15分钟，得到视觉上均质 的预制乳液。
然后对预制乳液进行4次均质化，每次持续约70分钟，且每次由2个均质化步骤组 成。第1次由在418巴下的第一步和在108巴下的第二步组成。第2次由在407巴下的第一步和 在103巴下的第二步组成。第3次由在411巴下的第一步和在102巴下的第二步组成。最后一 次由在410巴下的第一步和在101巴下的第二步组成。预制乳液的温度是50℃-67℃，包括其 中的任意值。
将150L注射用水加入贮存罐中，加热至27.9℃，并用氮气脱气，以达到≤0.1mg/L 的残余氧浓度。通过10μm过滤器，将乳液滤入装有注射用水的贮存罐中。将乳液冷却至27 ℃，取样，并加入足够的水(23L)，使乳液达到终浓度。将最终的乳液脱气至残余氧含量≤ 0.1mg/L，并在在氮气下在27℃贮存11小时，然后将乳液灌装进瓶子中。将乳液装入玻璃瓶 中，密封，得到约250ml包装的单位剂量。通过在灌装之前用氮对瓶子进行除气，并在灌装过 程中对乳液和瓶子进行除气，使乳液中的氧量在整个灌装过程中保持在≤0.1mg/L的水平。
通过以旋转周期在121℃高压灭菌15分钟的保持时间(装有样品的篮子以4rpm旋 转)，将瓶子灭菌。
在下表中，显示了在灭菌之前、通过在121℃高压灭菌15min进行灭菌以后、以及在 于60℃贮存高压灭菌的乳液3周和4周以后，实施例1的乳液的物理和化学特征的数据。
实施例1的乳液具有代表给药组合物的稳定性和安全性的粒度分布。Accusizer值 表明，PFAT5值恰当地在<0.05%的限度内。mastersizer数据表明，乳液具有低平均粒度值(d (0,5))和中位粒度值(D[4,3])，它们也代表稳定的乳液。
此外，在热灭菌以后或在于60℃贮存3或4周以后，粒度值没有表现出任何显著增 加。实施例1的乳液组合物在灭菌和贮存以后也表现出在规范内的NEFA、LPC和pH值。
比较例2-含有孕酮的水包油乳液
表II的制剂是20%油乳液组合物，其中磷脂以占油的6重量/重量%的量存在，孕酮 以占油的3重量/重量%的量存在。用盐水或水进一步稀释表II的20%乳液制剂，以制备5%油 乳液，其包含0.26%的磷脂和0.15%的孕酮。用盐水制备的5%乳液是非均质的(即它们是相分 离的)，用水制备的5%乳液具有非常低的重量克分子渗透浓度。因此，实施例2的制剂在本发 明的权利要求的范围之外。
表II
A.通过下述方法，制备表II的20%油乳液制剂(实施例2A)。在容器中将400g大豆油 加热至约70℃。将12g孕酮加入大豆油中，并使用磁搅拌器搅拌混合物。将400ml水放入单独 的容器中，并加热至约70℃。将50g甘油加入水相中，并通过高剪切混合进行溶解。在高剪切 混合下，将24g蛋卵磷脂加入甘油溶液中。
在恒定的高剪切混合下，将油相缓慢地加入水相中。加入0.6g油酸钠，并进一步混 合溶液。对得到的预制乳液在400巴下进行4次均质化(Minilab匀浆器)。放置乳液冷却至25 ℃，将终体积调至100%(2L)，并搅拌乳液。通过5μm过滤器过滤乳液，并灌装进50ml玻璃瓶 中。通过在121℃高压灭菌持续15分钟的保持时间将瓶子灭菌。
B.通过用1500mL0.9%NaCl稀释500ml未高压灭菌的实施例2A的乳液，制备实施例 2B的5%油乳液。在用0.9%NaCl稀释以后，所述乳液相分离。
C.通过用1500mL注射用水稀释500ml未高压灭菌的实施例2A的乳液，制备实施例 2C的乳液。通过5μm过滤器过滤乳液。将乳液灌装进50ml玻璃瓶中。通过在121℃高压灭菌持 续15分钟的保持时间，将瓶子灭菌，并在60℃保藏3周。
所述20%乳液(2A)组合物具有超过美国药典第<729>章设定的限度的PFAT5值。此 外，所述20%组合物具有比本发明组合物更大的D[4,3]和d(0,5)值，这些值在高压灭菌后增 加，这指示物理不稳定性。
用0.9%NaCl稀释实施例2A的20%油乳液，造成得到的乳液(2B)发生相分离。用水稀 释实施例2A的20%油乳液，得到5%油乳液(2C)，产生白色的均质的乳液，其具有非常低的重 量克分子渗透浓度。乳液2C的生理化学性质分析表明，它们具有远远超过美国药典第<729> 章设定的最大值的PFAT5值。此外，中位粒度值和平均粒度值都大于观察到的本发明的乳液 的相应值，且它们在高压灭菌后增加，这指示物理稳定性差。
比较例3-含有孕酮和雌二醇的水包油乳液
表III的制剂是20%油乳液组合物，其中磷脂以占油的6重量/重量%的量存在，孕酮 以占油的3重量/重量%的量存在。所述制剂另外含有0.066%的雌二醇半水合物。用盐水或水 进一步稀释表III的20%乳液制剂，以制备5%油乳液，其包含0.26%的磷脂和0.15%的孕酮。实 施例3的制剂在本发明的权利要求的范围之外。
表III
A.通过下述方法，制备实施例3A的乳液。在容器中将400g大豆油加热至约70℃。将 12g孕酮和1.32g雌二醇半水合物加入大豆油中，并使用磁搅拌器搅拌混合物。将400ml水放 入单独的容器中，并加热至约70℃。将50g甘油加入水相中，并通过高剪切混合进行溶解。在 高剪切混合下，将24g蛋卵磷脂加入甘油溶液中。在恒定的高剪切混合下，将油相缓慢地加 入水相中。加入0.6g油酸钠，并进一步混合溶液。对得到的预制乳液进行4次在400巴下的均 质化(Minilab匀浆器)。
将乳液放置冷却至25℃，将终体积调至100%(2L)，并搅拌乳液。通过5μm过滤器过 滤乳液。将乳液灌装进50ml玻璃瓶中。通过在121℃高压灭菌持续15分钟的保持时间将瓶子 灭菌。
B.通过用1500mL0.9%NaCl稀释500ml未高压灭菌的实施例3A的乳液并搅拌，制备 实施例3B的乳液。在用0.9%NaCl稀释以后，所述乳液相分离。
C.通过用1500mL注射用水稀释500ml未高压灭菌的实施例3A的乳液并搅拌，制备 实施例3C的乳液。通过5μm过滤器过滤乳液。将乳液灌装进50ml玻璃瓶中。通过在121℃高压 灭菌持续15分钟的保持时间将一些瓶子灭菌，随后在60℃贮存3或4周。
所述20%乳液组合物具有超过美国药典第<729>章设定的限度的PFAT5值。此外，所 述20%组合物具有比本发明组合物更大的D[4,3]和d(0,5)值，这些值在高压灭菌后增加，这 指示物理不稳定性。
用0.9%NaCl稀释实施例3A的20%油乳液，造成得到的乳液(3B)发生相分离。
用水稀释实施例3A的20%油乳液，得到5%油乳液(3C)，会产生白色的均质的乳液， 其具有非常低的渗透压。
乳液3C的生理化学性质分析表明，它们具有远远超过美国药典第<729>章设定的 最大值的PFAT5值。此外，中位粒度值和平均粒度值都大于观察到的本发明的乳液的相应 值。
实施例4-磷脂的影响
下述实施例证实了改变乳液组合物的磷脂含量对乳液性质的影响。通过下述的方 法制备表IV的6%油乳液。所述乳液含有0.2%孕酮以及1.8%、1.5%、0.9%或0.6%卵磷脂。
表IV
通过下述方法制备实施例4A-D的乳液。将600g大豆油(FreseniusKabi,Sweden) 加入容器中，并温热至58℃。
将所述油保持在氮气气氛下，同时将20g孕酮(微粉化的孕酮，Proquina,Mexico) 加入大豆油中，并通过用磁搅拌器混合进行溶解。将注射用水放入第二容器中，并加热至58 ℃。将250g甘油(无水甘油,Axelis,Austria)加入水相中，并通过高剪切混合进行溶解。将 所示量的蛋卵磷脂(PL90，FreseniusKabi,Sweden)和3g油酸钠(MerckKGaA)加入水相中。
在恒定的高剪切混合下，将油相缓慢地加入水相中。将9mlNaOH加入混合物中，并 通过高剪切混合进行搅拌。
对预制乳液进行4次均质化，每次包括2个阶段。第一阶段由400±30巴组成，第二 阶段由100±30巴组成。将乳液冷却至20℃，加入足够的注射用水，使乳液的终体积达到 100%，并通过高剪切混合搅拌所述乳液。在必要时，加入足够的NaOH(1M)，以调节乳液的pH (例如乳液A:3mlNaOH)。通过10μm过滤器过滤乳液，并灌装进50ml玻璃瓶中。以旋转周期将 瓶子在121℃灭菌15min。再重复灭菌2次。随后将瓶子在60℃贮存3或4周。
组合物A-D形成白色、均质的乳液，其粒度参数代表给药安全的、热和贮存稳定的 乳液。PFAT5值恰当地在可接受的范围内(≤0.05%)。随着卵磷脂含量的降低，观察到明显的 跨距、D[4,3]和d(0,5)值增加的趋势，这指示乳液的物理稳定性降低。
具体地，与在更高卵磷脂的乳液制剂中相比，在0.6%卵磷脂乳液(制剂4D)中观察 到粒度(D[4,3],d(0,5))的更大增加。
实施例5-助表面活性剂的影响
下述实施例证实了乳液组合物的助表面活性剂含量的缺失如何影响乳液的性质。 通过下述的方法制备了表V的6%油乳液。
表V
通过下述方法制备实施例5的乳液。将60g大豆油(FreseniusKabi,Sweden)加入 容器中，并温热至72℃。将油保持在氮气气氛下，同时将2g孕酮(微粉化的孕酮，Proquina, Mexico)加入大豆油中，并通过用磁搅拌器混合进行溶解。将注射用水放入第二容器中，并 加热至65℃。将25g甘油(无水甘油,Axelis,Austria)加入水相中，并通过高剪切混合进行 溶解。将12g蛋卵磷脂(PL90，FreseniusKabi,Sweden)加入水相中。在恒定的高剪切混合 下，将油相缓慢地加入水相中。对预制乳液进行5次在600巴下的均质化。将乳液冷却至20 ℃，加入足够的注射用水，使乳液的终体积达到100%，并通过高剪切混合搅拌乳液。
将500μlNaOH加入混合物中，以调节乳液的pH。通过10μm过滤器过滤乳液，并灌装 进50ml玻璃瓶中。以旋转周期将瓶子在121℃灭菌15min。对于进行稳定性试验的样品，再重 复灭菌2次。
不含助表面活性剂的乳液组合物制备了可行的乳液。与含有助表面活性剂的乳液 (实施例1)相比，粒度参数D[4,3]、d(0,5)、跨距和PFAT5值稍微升高。