书签分享收藏举报版权申诉 / 11

立即下载加入VIP,免费下载

当前位置：首页 > > 一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法.pdf

一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法.pdf

上传人：a3

文档编号：8299462

上传时间：2020-03-30

格式：PDF

页数：11

大小：585.65KB

《一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法.pdf（11页完整版）》请在专利查询网上搜索。

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711056099.7 (22)申请日 2017.10.31 (71)申请人广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司地址 510000 广东省广州市海珠区广州国际生物岛螺旋四路一号生产区第五层 502单元 (72)发明人葛啸虎陈海佳王一飞王小燕 (74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人郝传鑫 (51)Int.Cl. A61K 8/99(2017.01) A61K 8/9789(2017.01) A61Q 19/00(2006.01)。

2、 A61Q 19/02(2006.01) A61Q 19/08(2006.01) (54)发明名称一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法 (57)摘要本发明公开了一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.013、柠檬提取物 0.12、玫瑰提取物0.11.5和香橙提取物 0.55。同时，本发明还公开了所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法。本发明提供的美白补水护肤品含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，。

3、使肌肤亮白、水润、细腻有弹性，具有很好的美白补水和抗氧化功效。权利要求书1页说明书9页 CN 107648173 A 2018.02.02 CN 107648173 A 1.一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.013、柠檬提取物0.12、玫瑰提取物0.11.5和香橙提取物0.55。 2.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.052.5、柠檬提取物0.51.5、玫瑰提取物0.31.0和香橙提取物1.53.5。 3.根。

4、据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5、柠檬提取物1.2、玫瑰提取物1和香橙提取物2.5。 4.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1、柠檬提取物0.8、玫瑰提取物0.8和香橙提取物1.5。 5.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.03、柠檬提取物0.4、玫瑰提取物0.5和香橙提取物1。 6.根据权利要求1所述的含山竹干细。

5、胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2、柠檬提取物1.5、玫瑰提取物1.2和香橙提取物4。 7.根据权利要求16任一项所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀； (2)将步骤(1)中的混合物缓慢加入由护肤品领域可接受的其他辅料制成的护肤品基质中，搅拌均匀，保温30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中在温度不超过4。

6、0的条件下将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中。 9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述护肤品包括面膜、面霜、眼霜、乳液、爽肤水或精华液。权利要求书 1/1 页 2 CN 107648173 A 2 一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法技术领域 0001 本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法。背景技术 0002 山竹(Garcinia mangostana)又称莽吉柿、凤果、倒稔子，属藤黄科藤黄属，具有极高的营养价值，果实中碳水化合物的含量约为4.315.6，柠檬酸含。

7、量为0.63，还含维生素、多种氨基酸、蛋白质、脂肪和丰富的矿物质，其磷、镁、硫、钙、锌、铜、铁和锰等有益元素与氧杂蒽酮、 -谷甾醇、芦丁含量也很高，中医认为有清热降火、美容肌肤的功效。 0003 植物干细胞又称为分生组织，是相对于植物体内已经分化成熟的成熟组织而言的。植物分生组织根据其位置可以分为顶端分生组织和侧生分生组织两大类。其中顶端分生组织包括茎尖分生组织和根尖分生组织。侧生分生组织包括维管形成层和木栓形成层。山竹干细胞包含有关于山竹发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是山竹生命力的根源。 0004 干细胞美容技术及相关产品近两。

8、年受到了美容界专家及业内人士的广泛关注，通过从多种植物中分离并大量生产植物干细胞，积极开发天然护肤原料，在化妆品产业中正不断发展和壮大。但目前山竹干细胞在护肤品中的应用以及相关功效却未有研究。发明内容 0005 基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其由山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物复配而成，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，使肌肤亮白、水润、细腻有弹性。 0006 为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的美白补水护。

9、肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.013、柠檬提取物0.1 2、玫瑰提取物0.11.5和香橙提取物0.55。 0007 优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.052.5、柠檬提取物0.51.5、玫瑰提取物0.31.0和香橙提取物1.53.5。 0008 优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5、柠檬提取物1.2、玫瑰提取物1和香橙提取物2.5。 0009 优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：。

10、山竹干细胞提取物0.03、柠檬提取物0.4、玫瑰提取物0.5和香橙提取物1。 0010 优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1、柠檬提取物0.8、玫瑰提取物0.8和香橙提取物1.5。 0011 优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原说明书 1/9 页 3 CN 107648173 A 3 料：山竹干细胞提取物2、柠檬提取物1.5、玫瑰提取物1.2和香橙提取物4。 0012 本申请发明人经过大量的研究发现，将山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物作为原料复配制备。

11、护肤品，各原料之间产生很好的协同作用，具有显著的美白补水和抗氧化功效。原料的配伍量是发明人经过大量的研究统计分析得来的，在该用量范围内各原料可发挥很好的协同作用，同时不产生任何副作用。 0013 本发明的另一目的，在于提供所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法。 0014 为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 0015 (1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀； 0016 (2)将步骤(1)中的混合物缓慢加入由护肤品领域可接受的其。

12、他辅料制成的护肤品基质中，搅拌均匀，保温30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。 0017 优选地，所述步骤(2)中在温度不超过40的条件下将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中。 0018 优选地，所述护肤品基质由护肤品领域可接受的其他辅料制成，根据护肤品领域常规技术制备而成。 0019 优选地，所述护肤品包括面膜、面霜、眼霜、乳液、爽肤水或精华液。 0020 优选地，所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤： (1)收集山竹新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/L的L-抗坏血酸中浸泡8min；放入75乙醇溶液浸泡8min后用无。

13、菌水冲洗；然后放入30的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。 (2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/L NAA、 3mg/L BA和1.5mg/L水解酪蛋白的MS固体培养基上暗培养，培养温度为28，培养湿度为75，培养时间为20d。 (3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/L 2,4-D、 2mg/L BA、 2mg/L水解酪蛋白和2mg/L活性炭的MS液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30，培养转速120r/min，培养时间为20d， MS液体培养基中可加入玻璃珠。 (4)将继代培养的细胞系以1104/mL的接种密度移入气升。

14、式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。 (5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25 放置10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75乙醇，于30 搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。 0021 所述MS培养基是一种常用的植物培养基，可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养； NAA是萘乙酸的简称，萘乙酸是一种常见的植物生长素、能。

15、促进细胞的分裂与扩大； BA是苄氨基腺嘌呤的缩写，苄氨基腺嘌呤是一种细胞分裂素，其中6-BA比较常见；水解酪蛋白对细胞的增殖有明显的促进作用。 0022 优选地，所述柠檬提取物为柠檬水提取物，由以下方法制备得到：称取柠檬片，加如入其重量10倍体积的水提取2次，每次1.5小时，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。 0023 优选地，所述玫瑰提取物为玫瑰花醇提取物，由以下方法制备得到：称取玫瑰花说明书 2/9 页 4 CN 107648173 A 4 朵，粉碎得到粗粉，加入粗粉重量15倍体积的质量分数为70的乙醇，浸泡2h后于80回流提取2。

16、次，每次1.5h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，干燥即得。 0024 优选地，所述香橙提取物为香橙果水提取物，由以下方法制备得到：称取香橙果，粉碎得到粗粉，加入相当于粗粉重量10倍体积的水，于80条件下浸提3次，每次2h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。 0025 相对于现有技术，本发明的有益效果为：本发明提供的美白补水护肤品含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，使肌肤亮白、水润、细腻有弹性，具有很好的美白补水和抗氧化功效。具体。

17、实施方式 0026 为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。应当说明的是，本发明中原料的百分数皆为质量百分数。 0027 实施例1 0028 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01、柠檬提取物0.1、玫瑰提取物0.1和香橙提取物 0.5，余量为护肤品基质。 0029 所述护肤品基质配方为：甘油5、丙二醇4、丁二醇4、透明质酸0.03、香精 0.2和防腐剂0.5、余量为去离子水。 0030 实施例2 0031 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的。

18、一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物3、柠檬提取物2、玫瑰提取物1.5和香橙提取物5，余量为护肤品基质。 0032 所述护肤品基质配方同实施例1。 0033 实施例3 0034 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.03、柠檬提取物0.4、玫瑰提取物0.5和香橙提取物 1，余量为护肤品基质。 0035 所述护肤品基质配方同实施例1。 0036 实施例4 0037 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1、柠檬提取物0.8。

19、、玫瑰提取物0.8和香橙提取物 1.5，余量为护肤品基质。 0038 所述护肤品基质配方同实施例1。 0039 实施例5 0040 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2、柠檬提取物1.5、玫瑰提取物1.2和香橙提取物 4，余量为护肤品基质。 0041 所述护肤品基质配方同实施例1。说明书 3/9 页 5 CN 107648173 A 5 0042 实施例6 0043 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5、柠檬提取物1.2、玫瑰提取物。

20、1和香橙提取物 2.5，余量为护肤品基质。 0044 所述护肤品基质配方同实施例1。 0045 实施例7 0046 本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品制备方法的一种实施例，包括以下步骤： 0047 (1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀； (2)在40条件下，将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中，搅拌均匀，保温 30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。 0048 所述护肤品基质配方同实施例1，根据护肤品领域常用的制备方法制备而成。 0049 所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤： (1)收集山竹。

21、新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/L的L-抗坏血酸中浸泡8min；放入75乙醇溶液浸泡8min后用无菌水冲洗；然后放入30的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。 (2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/L NAA、 3mg/L BA和1.5mg/L水解酪蛋白的MS固体培养基上暗培养，培养温度为28，培养湿度为75，培养时间为20d。 (3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/L 2,4-D、 2mg/L BA、 2mg/L水解酪蛋白和2mg/L活性炭的MS液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30，培养转速120r/min，。

22、培养时间为20d， MS液体培养基中可加入玻璃珠。 (4)将继代培养的细胞系以1104/mL的接种密度移入气升式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。 (5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25放置 10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75乙醇，于30搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。 0050 所述柠檬提取物为柠檬水提取物，由以下方法制备得到。

23、：称取柠檬片，加如入其重量10倍体积的水提取2次，每次1.5小时，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。 0051 所述玫瑰提取物为玫瑰花醇提取物，由以下方法制备得到：称取玫瑰花朵，粉碎得到粗粉，加入粗粉重量15倍体积的质量分数为70的乙醇，浸泡2h后于85回流提取2次，每次1.5h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，干燥即得。 0052 所述香橙提取物为香橙果水提取物，由以下方法制备得到：称取香橙果，粉碎得到粗粉，加入相当于粗粉重量10倍体积的水，于80条件下浸提3次，每次2h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。。

24、 0053 实施例8 0054 本实施例对实施例16中护肤品的效果进行测试。 0055 (一)测试方法 0056 1、选取300例健康女性受试者，年龄介于3055岁之间。将所有受试者随机分成6 个测试组，分别使用实施例16中的护肤品。所有测试组的受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩23min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护说明书 4/9 页 6 CN 107648173 A 6 肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行美白和补水效果的检测和记录。 0057 2、利用清除DPPH自由基实验对护肤品的抗氧化能力进行测试:分别取2mL实。

25、验组1 6中的护肤品及2mL 20mmol/L DPPH溶液，混匀后反应30min，迅速测定各实验组反应液在 517nm波长处的吸光度，对照溶剂用无水乙醇代替。按下式计算清除率：清除率1-(A1 A2)/A3100。其中， A1为2mL DPPH溶液与2mL实验组16护肤品组成的反应液的吸光度； A2为2mL实验组16护肤品与2mL无水乙醇组成的反应液的吸光度； A3为2mL DPPH溶液与 2mL无水乙醇组成的反应液的吸光度。 0058 (二)效果评价标准 0059 1、利用皮肤黑色素含量和光亮度的变化率来评价本发明护肤品的美白效果，具体方法如下： 0060 (1)皮肤黑色。

26、素含量：使用日本美能达CD-2600分光光度计分析受试者面部肌肤的黑色素含量变化情况。其采用Lab颜色系统，收集与皮肤表面垂直的反射光，其测量参数中的b反映从黄到蓝的颜色变化范围(值变化范围： +60黄色-60蓝色)，与皮肤黑素含量呈正相关，这与黑色素反射黄光有关。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的黑色素含量进行检测，并记录；试验3周后，再次对每一位受试者肌肤的黑色素进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的黑色素下降率：黑色素下降率(试验前数值-试验后数值)/试验前数值 100。黑色素含量下降率越大，表明美白效果越好。 0061 (2)皮肤光亮度：。

27、利用皮肤测试系统(VISIA)测量皮肤的光亮度，皮肤越光亮则值越高，而皮肤越暗淡则值越低。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的光亮度的变化率：光亮度变化率(试验后数值-试验前数值)/试验前数值 100。光亮度上升率越大，表明美白效果越好。 0062 2、利用皮肤水分含量的变化率来评价本发明护肤品的补水效果，具体方法如下： 0063 (1)皮肤水分含量：利用德国CK公司的皮肤水份测试仪(Corneometer CM825)测定受试者面部肌肤的水分含量。。

28、试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的水分含量进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的水分含量进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤水分含量的上升率：水分含量上升率(试验后数值-试验前数值)/试验前数值100。水分含量上升率越大，表明补水效果越好。 0064 3、利用DPPH自由基清除率来评价本发明护肤品的抗氧化效果，清除率越高，表明抗氧化效果越好。 0065 4、本发明安全性的评价标准如表1所示： 0066 表1本发明安全性的评价标准说明书 5/9 页 7 CN 107648173 A 7 0067 0068 (三)测试结果 0069 一个。

29、月后，对所有受试者的使用效果进行统计，结果如表2所示。 0070 表2本发明护肤品效果测试结果 0071 0072 由表2可知，本发明实施例16中护肤品均具有非常好的美白补水和抗氧化效果，黑色素含量下降率可高达38，同时水分含量上升65以上，对DPPH自由基清除率高达 96。受试者反应使用本发明护肤品以后，肌肤变得白皙水嫩有弹性、色斑减少、皱纹明显消失。且所有受试者在使用过程中均未出现过敏、泛红、瘙痒或长痘等现象，安全无刺激。其中，实施例6中的护肤品美白补水和抗氧化效果最好。 0073 实施例9 0074 本发明护肤品包含山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫。

30、瑰提取物和香橙提取物。为研究4种组分的选择对美白补水和抗氧化效果的影响，本实施例对护肤品的原料选择进行了实验。 0075 (一)实验设计 0076 为探讨原料的选择对本发明护肤品效果的影响，设计实验组1和对照组14，具体说明书 6/9 页 8 CN 107648173 A 8 如表3所示。实验组1和对照组14中各原料的用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。 0077 表3实验组设计 0078 实验组护肤品原料组成实验组1山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组1柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组2山竹干细胞提取。

31、物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组3山竹干细胞提取物、柠檬提取物和香橙提取物对照组4山竹干细胞提取物、柠檬提取物和玫瑰提取物 0079 (二)实验方法 0080 1、护肤品美白效果测试： L-酪氨酸酶活性抑制试验 0081 酪氨酸酶是黑色素形成过程中主要的限速酶，该酶的活性大小决定着黑色素形成的数量，其活性越高，则产物黑色素生成越多。因此，抑制酪氨酸酶活性是有效减少黑色素生成的一种途径。 L-酪氨酸酶与其底物L-酪氨酸可以发生催化反应，当在反应体系中添加有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂后，对催化反应可以产生抑制作用，通过测定添加有L- 酪氨酸酶活性抑制作用的试剂。

32、前后475nm处吸光度值的变化，来评价该有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂对L-酪氨酸酶活性的抑制率，抑制率越高，美白效果越好。 0082 试验方法为：依次向试管中加入PBS、待测试样品溶液和酪氨酸溶液，于35水浴 10min，然后加入L-酪氨酸酶液，混匀，再于35下孵育30min，迅速测定反应液在475mm处的吸光值。试验中对照组加入与待测样品溶液等体积的蒸馏水，所述待测试样品溶液为实验组1和对照组14制备得到的护肤品，加入体积为0.5mL。抑制率由以下公式计算得到：抑制率(对照组吸光值-样品组吸光值)/对照组吸光值100。 0083 2、护肤品补水效果。

33、测试 0084 选取200例女性健康受试者，年龄介于3055岁之间。将所有受试者随机分成5个组，分别使用表3中原料制备的护肤品。所有受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩23min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行补水效果的检测和记录。 0085 3、护肤品的抗氧化能力进行测试 0086 同实施例8。 0087 (三)实验结果 0088 对表3不同原料制备得到的护肤品的效果进行评价，补水效果评价标准同实施例 8，结果如表4所示： 0089 表4不同原料制备得到的护肤品使用效果检测结果说明书。

34、7/9 页 9 CN 107648173 A 9 0090 0091 由上述实验结果可知，本发明护肤品4种原料同时使用时能取得最好的美白补水和抗氧化效果(实验组1)。本发明护肤品的组成是发明人经过大量研究获得的，各组分间可产生很好的协同作用。缺少任何一种原料，其效果都会显著下降(对照组14)。尤其是缺少山竹干细胞提取物时(对照组1)，护肤品的使用效果下降最严重。其他缺少两种或三种原料的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。 0092 实施例10 0093 本发明美白补水护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01 3、柠檬提取物0.12、玫瑰提。

35、取物0.11.5和香橙提取物0.55。为研究本发明护肤品原料配伍量对效果的影响，本实施例对护肤品各原料的使用量进行了研究。 0094 (一)实验设计 0095 本实施例以山竹干细胞提取物的使用量为例，为探讨山竹干细胞提取物的使用量对本发明护肤品使用效果的影响，设计实验组24以及对照组56，具体如表5所示。各组其他原料的使用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。 0096 表5实验组设计 0097 实验组山竹干细胞提取物的使用量/质量百分含量实验组20.01 实验组33 实验组42.5 对照组50.009 对照组63.1 0098 (二)实验方法 00。

36、99 本实施例实验方法同实施例9。 0100 (三)实验结果 0101 对各组原料制备得到的护肤品的效果进行评价，评价标准同实施例9，结果如表6 说明书 8/9 页 10 CN 107648173 A 10 所示： 0102 表6实验结果 0103 0104 由上述实验结果可知，本发明护肤品山竹干细胞提取物的使用量在0.013质量百分含量之间(实验组24)时可以取得很好的美白补水和抗氧化效果，不在此范围内的使用量(对照组56)均会影响护肤品的使用效果。本发明护肤品各原料的使用量是发明人经过大量实验统计出的最优比例，各原料的使用量在本发明质量百分含量范围内可以保证护肤品取。

37、得很好的使用效果，任何一个原料使用量的增加或减少都会影响原料间的协同效应，从而影响护肤品的功效。如对照组6增加了山竹干细胞提取物的使用量，但是其使用效果并没有相应变好，反而有所下降。柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物使用量的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。 0105 最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。说明书 9/9 页 11 CN 107648173 A 11 。

摘要
申请专利号：	CN201711056099.7	申请日：	20171031
公开号：	CN107648173A	公开日：	20180202
当前法律状态：		有效性：	审查中
法律详情：
IPC分类号：	A61K8/99,A61K8/9789,A61Q19/00,A61Q19/02,A61Q19/08	主分类号：	A61K8/99,A61K8/9789,A61Q19/00,A61Q19/02,A61Q19/08
申请人：	广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
发明人：	葛啸虎,陈海佳,王一飞,王小燕
地址：	510000 广东省广州市海珠区广州国际生物岛螺旋四路一号生产区第五层502单元
优先权：	CN201711056099A
专利代理机构：	广州三环专利商标代理有限公司	代理人：	郝传鑫
PDF完整版下载：	PDF下载

内容摘要

本发明公开了一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01～3％、柠檬提取物0.1～2％、玫瑰提取物0.1～1.5％和香橙提取物0.5～5％。同时，本发明还公开了所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法。本发明提供的美白补水护肤品含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，使肌肤亮白、水润、细腻有弹性，具有很好的美白补水和抗氧化功效。

权利要求书

1.一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01～3％、柠檬提取物0.1～2％、玫瑰提取物0.1～1.5％和香橙提取物0.5～5％。 2.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.05～2.5％、柠檬提取物0.5～1.5％、玫瑰提取物0.3～1.0％和香橙提取物1.5～3.5％。 3.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5％、柠檬提取物1.2％、玫瑰提取物1％和香橙提取物2.5％。 4.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1％、柠檬提取物0.8％、玫瑰提取物0.8％和香橙提取物1.5％。 5.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.03％、柠檬提取物0.4％、玫瑰提取物0.5％和香橙提取物1％。 6.根据权利要求1所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其特征在于，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2％、柠檬提取物1.5％、玫瑰提取物1.2％和香橙提取物4％。 7.根据权利要求1～6任一项所述的含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀；(2)将步骤(1)中的混合物缓慢加入由护肤品领域可接受的其他辅料制成的护肤品基质中，搅拌均匀，保温30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中在温度不超过40℃的条件下将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中。 9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述护肤品包括面膜、面霜、眼霜、乳液、爽肤水或精华液。

说明书

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品及其制备方法。

背景技术

山竹(Garcinia mangostana)又称莽吉柿、凤果、倒稔子，属藤黄科藤黄属，具有极高的营养价值，果实中碳水化合物的含量约为4.3％～15.6％，柠檬酸含量为0.63％，还含维生素、多种氨基酸、蛋白质、脂肪和丰富的矿物质，其磷、镁、硫、钙、锌、铜、铁和锰等有益元素与氧杂蒽酮、β-谷甾醇、芦丁含量也很高，中医认为有清热降火、美容肌肤的功效。

植物干细胞又称为分生组织，是相对于植物体内已经分化成熟的成熟组织而言的。植物分生组织根据其位置可以分为顶端分生组织和侧生分生组织两大类。其中顶端分生组织包括茎尖分生组织和根尖分生组织。侧生分生组织包括维管形成层和木栓形成层。山竹干细胞包含有关于山竹发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是山竹生命力的根源。

干细胞美容技术及相关产品近两年受到了美容界专家及业内人士的广泛关注，通过从多种植物中分离并大量生产植物干细胞，积极开发天然护肤原料，在化妆品产业中正不断发展和壮大。但目前山竹干细胞在护肤品中的应用以及相关功效却未有研究。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，其由山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物复配而成，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，使肌肤亮白、水润、细腻有弹性。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01～3％、柠檬提取物0.1～2％、玫瑰提取物0.1～1.5％和香橙提取物0.5～5％。

优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.05～2.5％、柠檬提取物0.5～1.5％、玫瑰提取物0.3～1.0％和香橙提取物1.5～3.5％。

优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5％、柠檬提取物1.2％、玫瑰提取物1％和香橙提取物2.5％。

优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.03％、柠檬提取物0.4％、玫瑰提取物0.5％和香橙提取物1％。

优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1％、柠檬提取物0.8％、玫瑰提取物0.8％和香橙提取物1.5％。

优选地，所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2％、柠檬提取物1.5％、玫瑰提取物1.2％和香橙提取物4％。

本申请发明人经过大量的研究发现，将山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物作为原料复配制备护肤品，各原料之间产生很好的协同作用，具有显著的美白补水和抗氧化功效。原料的配伍量是发明人经过大量的研究统计分析得来的，在该用量范围内各原料可发挥很好的协同作用，同时不产生任何副作用。

本发明的另一目的，在于提供所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀；

(2)将步骤(1)中的混合物缓慢加入由护肤品领域可接受的其他辅料制成的护肤品基质中，搅拌均匀，保温30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。

优选地，所述步骤(2)中在温度不超过40℃的条件下将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中。

优选地，所述护肤品基质由护肤品领域可接受的其他辅料制成，根据护肤品领域常规技术制备而成。

优选地，所述护肤品包括面膜、面霜、眼霜、乳液、爽肤水或精华液。

优选地，所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：(1)收集山竹新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/L的L-抗坏血酸中浸泡8min；放入75％乙醇溶液浸泡8min后用无菌水冲洗；然后放入30％的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。(2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/L NAA、3mg/L BA和1.5mg/L水解酪蛋白的MS固体培养基上暗培养，培养温度为28℃，培养湿度为75％，培养时间为20d。(3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/L 2,4-D、2mg/L BA、2mg/L水解酪蛋白和2mg/L活性炭的MS液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30℃，培养转速120r/min，培养时间为20d，MS液体培养基中可加入玻璃珠。(4)将继代培养的细胞系以1×104/mL的接种密度移入气升式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。(5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30℃预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25℃放置10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75％乙醇，于30℃搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。

所述MS培养基是一种常用的植物培养基，可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养；NAA是萘乙酸的简称，萘乙酸是一种常见的植物生长素、能促进细胞的分裂与扩大；BA是苄氨基腺嘌呤的缩写，苄氨基腺嘌呤是一种细胞分裂素，其中6-BA比较常见；水解酪蛋白对细胞的增殖有明显的促进作用。

优选地，所述柠檬提取物为柠檬水提取物，由以下方法制备得到：称取柠檬片，加如入其重量10倍体积的水提取2次，每次1.5小时，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。

优选地，所述玫瑰提取物为玫瑰花醇提取物，由以下方法制备得到：称取玫瑰花朵，粉碎得到粗粉，加入粗粉重量15倍体积的质量分数为70％的乙醇，浸泡2h后于80℃回流提取2次，每次1.5h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，干燥即得。

优选地，所述香橙提取物为香橙果水提取物，由以下方法制备得到：称取香橙果，粉碎得到粗粉，加入相当于粗粉重量10倍体积的水，于80℃条件下浸提3次，每次2h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。

相对于现有技术，本发明的有益效果为：本发明提供的美白补水护肤品含有山竹干细胞提取物及天然植物护肤提取物，安全无刺激，易于被皮肤吸收，能有效改善肌肤暗淡无光、色素沉积、干燥和衰老等问题，使肌肤亮白、水润、细腻有弹性，具有很好的美白补水和抗氧化功效。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。应当说明的是，本发明中原料的百分数皆为质量百分数。

实施例1

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01％、柠檬提取物0.1％、玫瑰提取物0.1％和香橙提取物0.5％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方为：甘油5％、丙二醇4％、丁二醇4％、透明质酸0.03％、香精0.2％和防腐剂0.5％、余量为去离子水。

实施例2

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物3％、柠檬提取物2％、玫瑰提取物1.5％和香橙提取物5％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方同实施例1。

实施例3

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.03％、柠檬提取物0.4％、玫瑰提取物0.5％和香橙提取物1％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方同实施例1。

实施例4

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1％、柠檬提取物0.8％、玫瑰提取物0.8％和香橙提取物1.5％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方同实施例1。

实施例5

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物2％、柠檬提取物1.5％、玫瑰提取物1.2％和香橙提取物4％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方同实施例1。

实施例6

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品的一种实施例，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物1.5％、柠檬提取物1.2％、玫瑰提取物1％和香橙提取物2.5％，余量为护肤品基质。

所述护肤品基质配方同实施例1。

实施例7

本发明含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品制备方法的一种实施例，包括以下步骤：

(1)按比例称取所述的山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物，混匀；(2)在40℃条件下，将步骤(1)中的混合物缓慢加入护肤品基质中，搅拌均匀，保温30min，即得所述含山竹干细胞提取物的美白补水护肤品。

所述护肤品基质配方同实施例1，根据护肤品领域常用的制备方法制备而成。

所述山竹干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：(1)收集山竹新生枝条，清洗，切成6cm，于80mg/L的L-抗坏血酸中浸泡8min；放入75％乙醇溶液浸泡8min后用无菌水冲洗；然后放入30％的过氧化氢水溶液中浸泡20min，再用无菌水冲洗15min。(2)取下山竹离体材料韧皮部，放入含1mg/L NAA、3mg/L BA和1.5mg/L水解酪蛋白的MS固体培养基上暗培养，培养温度为28℃，培养湿度为75％，培养时间为20d。(3)继代培养：将形成层细胞接种于含1.5mg/L 2,4-D、2mg/L BA、2mg/L水解酪蛋白和2mg/L活性炭的MS液体培养基中摇床暗培养，培养温度为30℃，培养转速120r/min，培养时间为20d，MS液体培养基中可加入玻璃珠。(4)将继代培养的细胞系以1×104/mL的接种密度移入气升式生物反应器中扩大培养，培养期间温度与转速与继代培养时保持一致，培养时间为10d。(5)收集扩大培养得到的山竹干细胞，于-30℃预冻3小时后于液氮中速冻2小时；然后解冻30分钟；反复2次后于25℃放置10min。然后粉碎至能过60目筛，加入干细胞重量5倍体积的质量分数为75％乙醇，于30℃搅拌提取10h，然后放入超声波分离提取机内进行强超声粉碎细胞质，超声提取液过滤，收集滤液，浓缩、干燥即得。

所述柠檬提取物为柠檬水提取物，由以下方法制备得到：称取柠檬片，加如入其重量10倍体积的水提取2次，每次1.5小时，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。

所述玫瑰提取物为玫瑰花醇提取物，由以下方法制备得到：称取玫瑰花朵，粉碎得到粗粉，加入粗粉重量15倍体积的质量分数为70％的乙醇，浸泡2h后于85℃回流提取2次，每次1.5h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩至无乙醇，干燥即得。

所述香橙提取物为香橙果水提取物，由以下方法制备得到：称取香橙果，粉碎得到粗粉，加入相当于粗粉重量10倍体积的水，于80℃条件下浸提3次，每次2h，提取液过滤，合并滤液，减压浓缩，干燥即得。

实施例8

本实施例对实施例1～6中护肤品的效果进行测试。

(一)测试方法

1、选取300例健康女性受试者，年龄介于30～55岁之间。将所有受试者随机分成6个测试组，分别使用实施例1～6中的护肤品。所有测试组的受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩2～3min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行美白和补水效果的检测和记录。

2、利用清除DPPH自由基实验对护肤品的抗氧化能力进行测试:分别取2mL实验组1～6中的护肤品及2mL 20mmol/L DPPH溶液，混匀后反应30min，迅速测定各实验组反应液在517nm波长处的吸光度，对照溶剂用无水乙醇代替。按下式计算清除率：清除率＝[1-(A1－A2)/A3]×100。其中，A1为2mL DPPH溶液与2mL实验组1～6护肤品组成的反应液的吸光度；A2为2mL实验组1～6护肤品与2mL无水乙醇组成的反应液的吸光度；A3为2mL DPPH溶液与2mL无水乙醇组成的反应液的吸光度。

(二)效果评价标准

1、利用皮肤黑色素含量和光亮度的变化率来评价本发明护肤品的美白效果，具体方法如下：

(1)皮肤黑色素含量：使用日本美能达CD-2600分光光度计分析受试者面部肌肤的黑色素含量变化情况。其采用Lab颜色系统，收集与皮肤表面垂直的反射光，其测量参数中的b·反映从黄到蓝的颜色变化范围(值变化范围：+60黄色～-60蓝色)，与皮肤黑素含量呈正相关，这与黑色素反射黄光有关。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的黑色素含量进行检测，并记录；试验3周后，再次对每一位受试者肌肤的黑色素进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的黑色素下降率：黑色素下降率＝(试验前数值-试验后数值)/试验前数值×100％。黑色素含量下降率越大，表明美白效果越好。

(2)皮肤光亮度：利用皮肤测试系统(VISIA)测量皮肤的光亮度，皮肤越光亮则值越高，而皮肤越暗淡则值越低。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的光亮度进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤的光亮度的变化率：光亮度变化率＝(试验后数值-试验前数值)/试验前数值×100％。光亮度上升率越大，表明美白效果越好。

2、利用皮肤水分含量的变化率来评价本发明护肤品的补水效果，具体方法如下：

(1)皮肤水分含量：利用德国CK公司的皮肤水份测试仪(Corneometer CM825)测定受试者面部肌肤的水分含量。试验开始之前，先对每一位受试者肌肤的水分含量进行检测，并记录；试验一个月后，再次对每一位受试者肌肤的水分含量进行检测，并记录。利用以下公式计算肌肤水分含量的上升率：水分含量上升率＝(试验后数值-试验前数值)/试验前数值×100％。水分含量上升率越大，表明补水效果越好。

3、利用DPPH自由基清除率来评价本发明护肤品的抗氧化效果，清除率越高，表明抗氧化效果越好。

4、本发明安全性的评价标准如表1所示：

表1本发明安全性的评价标准

(三)测试结果

一个月后，对所有受试者的使用效果进行统计，结果如表2所示。

表2本发明护肤品效果测试结果

由表2可知，本发明实施例1～6中护肤品均具有非常好的美白补水和抗氧化效果，黑色素含量下降率可高达38％，同时水分含量上升65％以上，对DPPH自由基清除率高达96％。受试者反应使用本发明护肤品以后，肌肤变得白皙水嫩有弹性、色斑减少、皱纹明显消失。且所有受试者在使用过程中均未出现过敏、泛红、瘙痒或长痘等现象，安全无刺激。其中，实施例6中的护肤品美白补水和抗氧化效果最好。

实施例9

本发明护肤品包含山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物。为研究4种组分的选择对美白补水和抗氧化效果的影响，本实施例对护肤品的原料选择进行了实验。

(一)实验设计

为探讨原料的选择对本发明护肤品效果的影响，设计实验组1和对照组1～4，具体如表3所示。实验组1和对照组1～4中各原料的用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。

表3实验组设计

实验组护肤品原料组成实验组1 山竹干细胞提取物、柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组1 柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组2 山竹干细胞提取物、玫瑰提取物和香橙提取物对照组3 山竹干细胞提取物、柠檬提取物和香橙提取物对照组4 山竹干细胞提取物、柠檬提取物和玫瑰提取物

(二)实验方法

1、护肤品美白效果测试：L-酪氨酸酶活性抑制试验

酪氨酸酶是黑色素形成过程中主要的限速酶，该酶的活性大小决定着黑色素形成的数量，其活性越高，则产物黑色素生成越多。因此，抑制酪氨酸酶活性是有效减少黑色素生成的一种途径。L-酪氨酸酶与其底物L-酪氨酸可以发生催化反应，当在反应体系中添加有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂后，对催化反应可以产生抑制作用，通过测定添加有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂前后475nm处吸光度值的变化，来评价该有L-酪氨酸酶活性抑制作用的试剂对L-酪氨酸酶活性的抑制率，抑制率越高，美白效果越好。

试验方法为：依次向试管中加入PBS、待测试样品溶液和酪氨酸溶液，于35℃水浴10min，然后加入L-酪氨酸酶液，混匀，再于35℃下孵育30min，迅速测定反应液在475mm处的吸光值。试验中对照组加入与待测样品溶液等体积的蒸馏水，所述待测试样品溶液为实验组1和对照组1～4制备得到的护肤品，加入体积为0.5mL。抑制率由以下公式计算得到：抑制率＝(对照组吸光值-样品组吸光值)/对照组吸光值×100％。

2、护肤品补水效果测试

选取200例女性健康受试者，年龄介于30～55岁之间。将所有受试者随机分成5个组，分别使用表3中原料制备的护肤品。所有受试者早晚洁面后取适量护肤品涂抹于面部，并轻柔按摩2～3min，促进吸收。试用期间防止阳光暴晒，并禁止使用其他护肤品。连续使用一个月后，对所有受试者进行补水效果的检测和记录。

3、护肤品的抗氧化能力进行测试

同实施例8。

(三)实验结果

对表3不同原料制备得到的护肤品的效果进行评价，补水效果评价标准同实施例8，结果如表4所示：

表4不同原料制备得到的护肤品使用效果检测结果

由上述实验结果可知，本发明护肤品4种原料同时使用时能取得最好的美白补水和抗氧化效果(实验组1)。本发明护肤品的组成是发明人经过大量研究获得的，各组分间可产生很好的协同作用。缺少任何一种原料，其效果都会显著下降(对照组1～4)。尤其是缺少山竹干细胞提取物时(对照组1)，护肤品的使用效果下降最严重。其他缺少两种或三种原料的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。

实施例10

本发明美白补水护肤品，含有以下质量百分含量的原料：山竹干细胞提取物0.01～3％、柠檬提取物0.1～2％、玫瑰提取物0.1～1.5％和香橙提取物0.5～5％。为研究本发明护肤品原料配伍量对效果的影响，本实施例对护肤品各原料的使用量进行了研究。

(一)实验设计

本实施例以山竹干细胞提取物的使用量为例，为探讨山竹干细胞提取物的使用量对本发明护肤品使用效果的影响，设计实验组2～4以及对照组5～6，具体如表5所示。各组其他原料的使用量同实施例6，各原料提取方法以及护肤品的制备方法同实施例7。

表5实验组设计

实验组山竹干细胞提取物的使用量/质量百分含量实验组2 0.01％实验组3 3％实验组4 2.5％对照组5 0.009％对照组6 3.1％

(二)实验方法

本实施例实验方法同实施例9。

(三)实验结果

对各组原料制备得到的护肤品的效果进行评价，评价标准同实施例9，结果如表6所示：

表6实验结果

由上述实验结果可知，本发明护肤品山竹干细胞提取物的使用量在0.01～3％质量百分含量之间(实验组2～4)时可以取得很好的美白补水和抗氧化效果，不在此范围内的使用量(对照组5～6)均会影响护肤品的使用效果。本发明护肤品各原料的使用量是发明人经过大量实验统计出的最优比例，各原料的使用量在本发明质量百分含量范围内可以保证护肤品取得很好的使用效果，任何一个原料使用量的增加或减少都会影响原料间的协同效应，从而影响护肤品的功效。如对照组6增加了山竹干细胞提取物的使用量，但是其使用效果并没有相应变好，反而有所下降。柠檬提取物、玫瑰提取物和香橙提取物使用量的实验结果与本实施例类似，具体数据省略。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。