技术领域
本发明涉及一种药物组合物，尤其是一种中药组合物及其制备方法，属中药领域。
背景技术
心绞痛是冠状动脉暂时性痉挛，而引起心肌急剧的缺血、缺氧。临床表现为肋骨后剧烈 的、压榨性疼痛，伴濒死感。疼痛可放散至心前区及左上肢，常发生于情绪激动或活动时， 持续一般为2～3分钟，不超过15分钟，经休息或口服硝酸甘油可缓解。本病多见于男性，多 数病人在40岁以上，常见的诱因有劳累、情绪激动等；如不及时救治，常会造成发病者的死 亡。而早期的防治工作，对于减少该病的发病率和死亡率更为重要。在急救方面，硝酸甘油 发挥了巨大作用，而如何将祖国医学的精华应用到这一领域来，一直是个难题近年来。对中 药在心血管救治方面的研究，显得意义重大。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗初发性劳累性心绞痛和稳定性劳累性心绞痛的药物组合 物，该药物组合物是由如下重量比的原料药制成的：川芎80～120份、苏合香4～6份、冰片7 ～12份。优选后的重量比为：川芎100份、苏合香5份、冰片10份。
鉴于以上药味的特性和应用所需，可以制成滴丸剂或喷雾剂。不论制成何种剂型，均 要经过如下工艺步骤：
取原料药，将川芎粉碎成粗粉，用60～80％乙醇逆向浸渍，固液分离，药液静置，取 上清液，下层药液滤过，滤液与上清液合并，适时加入冰片、苏合香混匀，在此基础上就可 以制成各种所需剂型。
具体地讲，喷雾剂可以这样制备：
取原料药，将川芎粉碎成粗粉，用75％乙醇2000ml逆向浸渍5次，固液分离，药液静置 ，取上清液，下层药液滤过，滤液与上清液合并，加入冰片、苏合香搅拌使溶解，静置，滤 过，加52％乙醇调整至所需总量，分装，即得。
滴丸剂可以这样制备：
取原料药，将川芎粉碎成粗粉，用75％乙醇2000ml逆向浸渍5次，固液分离，药液静置 ，取上清液，下层药液滤过，滤液与上清液合并，减压浓缩至相当密度为1.36～1.38(50℃ )的稠膏。取聚乙二醇适量，置水浴上加热熔融，依次加入川芎稠膏、聚山梨酯80、苏合香 及冰片，并用基质调整至适量，密闭下搅拌均匀，保持温度80℃，滴入液体石蜡中(1～5℃) ，即得。
在病人使用时，喷雾剂可以喷于患者口鼻腔，通过粘膜吸收达到快速起效的目的；滴丸 剂则可含于舌下，也能过到迅速救治的效果，因而这二个剂型是发明人的首选剂型。但也不 排除利用本发明的基本工艺，制成其他剂型的可能，这些可能均应在本发明的保护范围内。
为了控制本发明制剂的质量，发明人还同时研究了其质量控制方法，包括定性鉴别方法 和含量测定方法。
定性鉴别：
取本发明组合物制剂1～4g(ml)，加醋酸乙酯25ml，超声处理10分钟，放置，取醋酸 乙酯液水浴蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1g，加 75％乙醇5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取苏合香对照药材0.05g ，加无水乙醇5ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μ 1分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙醚-冰醋酸(6 ∶1∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在 与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同的浅蓝色荧光斑点；喷以5％硫酸乙醇溶液，在 105℃烘数分钟，供试品色谱中，在与苏合香对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的玫 瑰红色斑点。
含量测定：
a.高效液相色谱法测定川芎中阿魏酸的含量
色谱条件与系统适用性试验 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％冰醋酸 (27∶73)为流动相；检测波长为320nm，柱温40℃，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于 2500。
对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml约含20μg 的对照品溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本发明组合物制剂1～4g(ml)，精密称定(量取)，置具塞锥 形瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95∶5)50ml，称定重量，超声(100W，50kHz)处理30分钟， 放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(95∶5)补足减失的重量，于冰箱中冷冻4小时，取出， 立即滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品液。
测定法 分别精密吸取供试品液、对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得。
b.气相色谱法测定冰片的含量
色谱条件与系统适用性试验 0.32mm×30m弹性石英毛细管柱；柱温：130℃。理论板数 按龙脑峰计算应不低于14000，龙脑峰和内标峰的分离度应符合要求。
校正因子测定 取萘适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶 液。另取冰片对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液 。精密量取对照品溶液4ml和内标溶液2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀， 吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。
供试品溶液的制备 取本发明组合物制剂0.2～1g(ml)，精密称定，置具塞锥形瓶中 ，精密加醋酸乙酯25ml，超声(100W，50kHz)处理20min，放冷，滤过，取续滤液，备用。
测定法 精密量取供试品溶液5ml和内标溶液2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻 度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。
本发明药物制剂具有活血化瘀，行气止痛。用于初发性劳累性心绞痛和稳定性劳累性心 绞痛的心血瘀阻证候，症见心胸刺痛，胸闷不舒，心悸气短。发明人还根据其功能主治，从 对急性心肌缺血的影响等方面对其药效学进行了研究。
受试药物：按照本发明最优技术方案制备的本品制剂1批，含33.83mg生药/粒的滴丸。 速效救心丸：天津第六中药制药厂，50mg/粒，批号：040301。试验药物均在实验前以蒸馏 水配制成1ml/kg的溶液。
动物：健康成年杂种犬15只，体重13.56±1.35kg，雌雄兼用，由浏阳牧业有限公司提 供。昆明种小鼠，雌雄各半，18～22g，由山东医科大学实验动物中心提供。
主要仪器：SC-3型电动人工呼吸机，上海医疗设备厂；二导生理记录仪，上海光电医用 电子仪器有限公司生产。
实验方法：取15只杂种犬分3组，犬以戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉麻醉，右侧卧位固定 于手术台上气管插管，连接SC-3型电动人工呼吸机。分离颈外静脉，双向插管以备采血。在 左侧第四肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左前降支中段，穿线以 备结扎，造成实验性急性心肌缺血模型，缝置多点(21点)固定式心外膜电极连二导生理记 录仪描记心外膜心电图。结扎冠脉后30min进行记录作为药前对照值。沿腹部正中线开腹， 分离十二指肠，插管以备给药，并于药后30，60，120，180min分别记录21个标测点的心外 膜心电图。
以ST段升高大于2mv作为判断标准，计算心肌缺血的范围(ST段升高的总点数N-ST)和 心肌缺血的程度(ST段升高的总mv数∑-ST)。结果见下：
表1 对心外膜电极心肌缺血程度(mv)的影响 组别 剂量 (mg/kg) 给药前 给药后 30min 60min 120min 180min 生理盐水 等体积 272.50± 88.10 309.60±101.36 △△ 340.78±103.58 △△ 373.15± 119.09△△ 344.19± 118.49△△ 阳性药 6.4 302.12± 46.45 262.44±46.57 △△ 219.12±45.69** △△ 171.04± 62.49△△ 140.00± 43.39△△ 本品制剂 9.0 260.50± 55.15 160.58± 27.88#△△ 120.22±21.35# △△ 89.78± 24.73*△△ 69.71± 21.24*△△
与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性药组，#P＜0.05，##P＜0.01；与自身前后 比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。
结果表明，本品制剂能明显减轻心肌缺血度，且起效迅速，药效持续时间也长，阳性药 亦抗急性心肌缺血的作用，但其作用速度及持续时间均不及本品制剂。
表2 对心外膜电极N-ST的影响 组别 剂量 (mg/kg) 给药前 给药后 30min 60min 120min 180min 生理盐水 等体积 19.80±0.45 20.00±0.00 20.00±0.00 20.00±0.00 20.00±0.00 阳性药 6.4 20.00±0.00 20.00±0.00 20.00±0.00 19.20±0.84 18.20±1.92* △ 本品制剂 9.0 20.00±0.00 19.20±0.84 18.40±1.14* △ 17.40±0.88** △△ 16.00±1.14# △△
与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性药组，#P＜0.05，##P＜0.01；与自身前后 比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。
结果表明，本品制剂能明显缩小犬急性心肌缺血范围，且与阳性药相比药效较好。
具体实施方式
实施例一
【处方】川芎1000g 苏合香50g 冰片100g
【制法】以上三味，川芎粉碎成粗粉，用75％乙醇2000ml逆向浸渍5次，固液分离，药 液静置，取上清液，下层药液滤过，滤液与上清液合并，加入冰片、苏合香搅拌使溶解，静 置，滤过，加52％乙醇调整总量至1000ml，分装，即得。
实施例二
【处方】川芎1000g 苏合香50g 冰片100g
【制法】以上三味，川芎粉碎成粗粉，用75％乙醇2000ml逆向浸渍5次，固液分离，药 液静置，取上清液，下层药液滤过，滤液与上清液合并，减压浓缩至相当密度为1.36～1.38 (50℃)的稠膏。取聚乙二醇适量，置水浴上加热熔融，依次加入川芎稠膏、聚山梨酯80、 苏合香及冰片，并用基质调整至总量为666.7g，密闭下搅拌均匀，保持温度80℃，滴入液体 石蜡中(1～5℃)，即得。
实施例三
上述本发明组合物制成的滴丸剂的质量控制方法：
鉴别：
取滴丸2g，加醋酸乙酯25ml，超声处理10分钟，放置，取醋酸乙酯液水浴蒸干，残渣加 醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1g，加75％乙醇5ml，超声处理30 分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取苏合香对照药材0.05g，加无水乙醇5ml使溶解， 作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl分别点于同一以羧甲基纤 维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙醚-冰醋酸(6∶1∶0.1)为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的 位置上，显相同的浅蓝色荧光斑点；喷以5％硫酸乙醇溶液，在105℃烘数分钟，供试品色谱 中，在与苏合香对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的玫瑰红色斑点。
含量测定：
a.高效液相色谱法测定川芎中阿魏酸的含量
色谱条件与系统适用性试验 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1％冰醋酸( 27∶73)为流动相；检测波长为320nm，柱温40℃，理论板数按阿魏酸峰计算应不低于2500 。
对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml约含20μg 的对照品溶液，即得。
供试品溶液的制备 取重量差异检查项下丸剂适量研细，称取1.5g，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入甲醇-甲酸(95∶5)50ml，称定重量，超声(100W，50kHz)处理30分 钟，放冷，再称定重量，用甲醇-甲酸(95∶5)补足减失的重量，于冰箱中冷冻4小时，取 出，立即滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品液。
测定法 分别精密吸取供试品液、对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每单位量含川芎以阿魏酸(C10H10O4)计，不得少于0.0168mg。
上述单位量是指含相当0.03833g原药材的成品药剂量。
b.气相色谱法测定冰片的含量
色谱条件与系统适用性试验 HP-1 0.32mm×30m弹性石英毛细管柱；柱温：130℃。理 论板数按龙脑峰计算应不低于14000，龙脑峰和内标峰的分离度应符合要求。
校正因子测定 取萘适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为内标溶 液。另取冰片对照品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液 。精密量取对照品溶液4ml和内标溶液2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀， 吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品适量，研碎，取0.4g，精密称定，置具塞锥 形瓶中，精密加醋酸乙酯25ml，超声(100W，50kHz)处理20min，放冷，滤过，取续滤液， 备用。
测定法 精密量取供试品溶液5ml和内标溶液2ml，置10ml量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻 度，摇匀，吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。
本品每单位量含冰片以龙脑(C10H18O)和异龙脑(C10H18O)的总量计，不得少于3mg。
上述单位量是指含相当0.03833g原药材的成品药剂量。