一种具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜的制备方法.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 103340819 B (45)授权公告日 2014.11.19 CN 103340819 B (21)申请号 201310314954.5 (22)申请日 2013.07.23 A61K 8/99(2006.01) A61K 8/97(2006.01) A61Q 17/04(2006.01) (73)专利权人 海南光宇生物科技有限公司 地址 570216 海南省海口市金盘路26号2号 技术厂房第一层 (72)发明人 钟春燕 钟宇光 (54) 发明名称 一种具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜的制 备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种具有抗辐射功效的细菌纤 维素面膜的制。

2、备方法。涉及一种面膜材料制备技 术。包括 ： 选取能分泌细菌纤维素的菌株活化制 备成种子醪液， 然后将菌株浓度为 30 90wt% 的 种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的 发酵培养基中， 发酵培养37d后取出发酵产物。 发酵产物经纯化处理， 切割， 得到细菌纤维素三维 网络内部均匀分布有总黄酮的细菌纤维素面膜。 本发明制备过程绿色环保、 简单易行、 操作方便、 成本低， 得到的面膜持水性和透气性好， 具有良好 的抗辐射功效。 (51)Int.Cl. 审查员 杨倩 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书5页 (1。

3、0)授权公告号 CN 103340819 B CN 103340819 B 1/1 页 2 1. 一种具有保湿、 治疗皮肤干燥、 蜕皮的细菌纤维素面膜的制备方法， 其特征是 ：（1） 将仙人掌、 茶叶和竹叶冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 40 倍的乙醇水溶液中， 其中乙醇 水溶液浓度为 50wt% ； 将上述溶液在 800W 的超声功率下超声 5min， 过滤除去滤渣 ； 在滤液 中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 5wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶液 ； （2） 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 30g、 磷酸氢二钠 3g、 磷酸二氢钾 3g、 酵母膏 2g、 蛋白胨 4。

4、g 配制成发酵培养基 ； （3） 选取能分泌细菌纤维素的根瘤菌属和假单胞菌属活化制备成种子醪液， 然后将菌 株浓度为 60wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培 养 6d 后取出发酵产物 ； （4） 发酵产物在质量百分含量为 4% 的 NaOH 水溶液中， 在 60的温度下加热 6h ； 再用 蒸馏水反复冲洗至中性 ； 以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基 ； 切割后得到 具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且 细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 权 利 要 求 书 CN 103340819 B 。

5、2 1/5 页 3 一种具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种面膜材料制备技术， 特别涉及一种具有抗辐射功效的细菌纤维素 面膜的制备方法。 背景技术 0002 据研究皮肤长期暴露在生活环境的强日光、 紫外线、 电磁辐射中， 都会使人体皮肤 表面产生活性氧自由基。过量的活性氧自由基能够与体内不饱和脂肪酸、 蛋白质等作用生 成褐色素， 沉淀于皮肤上便成为各种色斑。此外， 过量自由基所形成的脂质过氧化物， 还会 损害生物膜， 破坏细胞， 阻碍正常的新陈代谢， 加速衰老， 并能引起诸如癌症、 白血病、 高血 压、 心肌梗塞、 糖尿病、 肝炎、 痛风、 肾炎、 白内。

6、障等多种疾病。 随着人类对于电视、 电脑、 智能 手机等家电产品的使用频率越来越高， 且电磁辐射主要集中在面部， 因此采用有效手段消 除过多的活性氧自由基降低辐射造成的皮肤尤其是面部伤害成为必要。 0003 随着人们生活水平的不断提高以及科学技术的不断发展， 近年来化妆品的品类在 不断增加， 科技含量也逐步提高。 其中面膜产品利用覆盖在肌肤表面的短暂时间， 暂时隔离 外界空气及污染， 提高肌肤温度， 皮肤的毛孔扩张， 促进汗腺分泌与新陈代谢， 使肌肤含氧 量上升， 能够有效排除肌肤毒素和累积的油脂物， 并快速将水分、 营养物质等渗入肌肤表皮 的角质层， 使得皮肤变得更加柔软、 光亮有弹性。 利。

7、用面膜使用便捷、 有效、 快速护肤的特点 与能够消除活性氧自由基的物质结合制备具有抗辐射功效的面膜产品具有巨大的市场价 值。 0004 植物中富含化学成分黄酮、 醇、 酚、 甾体化合物等， 这些物质具有很强的抗氧化作 用， 可以消除过多的活性氧自由基从而达到防止辐照的效果。细菌纤维素 （BC） 是一种天然 的生物高聚物， 有着较高的生物相容性、 适应性和良好的生物可降解性， 且具有高结晶度、 高纯度、 高持水性、 超细纳米纤维网络结构等许多良好的物理、 化学和机械性能。其具有良 好的延展性且与人体皮肤黏附性好， 是目前生物纤维素面膜的主要原料。 0005 本专利采用超声法从天然植物中提取总黄酮。

8、， 并且利用含有总黄酮的醇溶液作为 培养基， 生物发酵细菌纤维素材料制备出能够消除面部过多活性氧自由基具有抗辐射功效 的细菌纤维素面膜。 本发明制备过程绿色环保， 简单易行、 操作方便、 成本低， 得到的面膜持 水性和透气性好， 具有良好的抗辐射功效。 发明内容 0006 本发明的目的是提供一种具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜的制备方法。 涉及一 种面膜材料制备技术。 本发明制备过程绿色环保， 简单易行、 操作方便、 成本低， 得到的面膜 持水性和透气性好， 具有良好的保湿、 抗辐射功效。 0007 本发明的公开了一种具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜的制备方法， 包括 ： 选取 能分泌细菌纤维素的。

9、菌株活化制备成种子醪液， 然后将菌株浓度为3090wt%的种子醪液 均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培养 3 7d 后取出发酵产物， 说 明 书 CN 103340819 B 3 2/5 页 4 发酵产物经纯化处理， 切割， 得到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜。 0008 所述的能分泌细菌纤维素的菌株是木醋杆菌、 根瘤菌属、 八叠球菌属、 假单胞菌 属、 无色杆菌属、 产碱菌属、 气杆菌属或固氮菌属中的一种或几种。 0009 所述的含有植物类总黄酮乙醇溶液是由仙人掌、 芦荟、 茶叶、 银杏、 竹叶植物冷冻 干燥粉中的一种或几种加入到乙醇溶液中并通过超声处理得到的。 001。

10、0 所述的超声处理处理步骤为 ： 0011 （1） 将仙人掌、 芦荟、 茶叶、 银杏、 竹叶植物冷冻干燥粉中的一种或几种加入占植物 冷冻干燥粉重量 20 50 倍的乙醇水溶液中， 其中乙醇水溶液浓度为 40 80wt% ； 0012 （2） 将上述溶液在 100 800W 的超声功率下超声 5 40min， 过滤除去滤渣 ； 0013 （3） 在过滤后的滤液中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 5 15wt%， 得到含 有植物类总黄酮乙醇溶液。 0014 所述的发酵培养基为 ： 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中含有葡萄糖 10 30g、 磷 酸氢二钠 1 4g、 磷酸二氢钾 1 4g、 酵。

11、母膏 1 5g、 蛋白胨 1 5g。 0015 所述的纯化处理方法为， 发酵产物在质量百分含量为 1 8% 的 NaOH 水溶液中， 在 30 100的温度下加热 3 6h， 再用水反复冲洗至中性。 0016 与现有技术相比， 本发明的有益效果是 ： 本专利中利用总黄酮可以溶于醇类物质 的特点， 采用超声处理法以乙醇作为提取剂从天然植物中提取出植物类总黄酮， 并且利用 含有总黄酮的醇溶液作为培养基， 同时在培养过程中， 乙醇作为培养基中的碳源参与细菌 纤维素的生物合成。在菌株的生物发酵过程中， 乙醇被菌株氧化同时生成用于菌株合成的 ATP 等化合物， 乙醇中的总黄酮与细菌纤维素的分子产生键合作。

12、用， 从而在细菌纤维素三维 网络内部均匀分布总黄酮分子。生物发酵细菌纤维素材料制备出能够消除面部过多活性 氧自由基具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜。 本发明制备过程绿色环保、 简单易行、 操作方 便、 成本低， 得到的面膜持水性和透气性好， 具有良好的抗辐射功效。本专利选用纯天然的 植物作为提取总黄酮的来源， 这种植物类总黄酮具有很强的抗氧化作用， 可以消除过多的 活性氧自由基从而达到防止辐照的效果。 具体实施方式 0017 下面结合具体实施例， 进一步阐述本发明。 应理解， 这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。 此外应理解， 在阅读了本发明讲授的内容之后， 本领域技术人 员可。

13、以对本发明作各种改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。 0018 实施例 1 ： 0019 1、 将仙人掌冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 20 倍的乙醇水溶液中， 其中乙醇 水溶液浓度为 80wt% ； 将上述溶液在 100W 的超声功率下超声 40min， 过滤除去滤渣 ； 在滤液 中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 15wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶液。 0020 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 10g、 磷酸氢二钠 1g、 磷酸二氢钾 1g、 酵母膏 5g、 蛋白胨 1g 配制成发酵培养基。 0021 3、 选取能分泌细菌纤维。

14、素的木醋杆菌活化制备成种子醪液， 然后将菌株浓度为 30wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培养 7d 后取 说 明 书 CN 103340819 B 4 3/5 页 5 出发酵产物。 0022 4、 发酵产物在质量百分含量为 3% 的 NaOH 水溶液中， 在 80的温度下加热 6h。再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0023 实施例 2 ： 0024 1、 将芦荟冷冻干燥粉加入。

15、占冷冻干燥粉重量 30 倍的乙醇水溶液中， 其中乙醇水 溶液浓度为 70wt% ； 将上述溶液在 200W 的超声功率下超声 35min， 过滤除去滤渣 ； 在滤液中 加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 10wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶液。 0025 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 20g、 磷酸氢二钠 2g、 磷酸二氢钾 2g、 酵母膏 3g、 蛋白胨 3g 配制成发酵培养基。 0026 3、 选取能分泌细菌纤维素的八叠球菌属活化制备成种子醪液， 然后将菌株浓度为 50wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培养 5d 后取 出发。

16、酵产物。 0027 4、 发酵产物在质量百分含量为2%的NaOH水溶液中， 在100的温度下加热6h。 再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0028 实施例 3 ： 0029 1、 将茶叶冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 40 倍的乙醇水溶液中， 其中乙醇水 溶液浓度为 60wt% ； 将上述溶液在 300W 的超声功率下超声 30min， 过滤除去滤渣 ； 在滤液中 加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 5wt%， 得。

17、到含有植物类总黄酮乙醇溶液。 0030 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 30g、 磷酸氢二钠 4g、 磷酸二氢钾 4g、 酵母膏 1g、 蛋白胨 5g 配制成发酵培养基。 0031 3、 选取能分泌细菌纤维素的无色杆菌属活化制备成种子醪液， 然后将菌株浓度为 70wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培养 4d 后取 出发酵产物。 0032 4、 发酵产物在质量百分含量为 1% 的 NaOH 水溶液中， 在 90的温度下加热 3h。再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维。

18、素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0033 实施例 4 ： 0034 1、 将银杏和竹叶冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 50 倍的乙醇水溶液中， 其中 乙醇水溶液浓度为 50wt% ； 将上述溶液在 500W 的超声功率下超声 20min， 过滤除去滤渣 ； 在 滤液中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 15wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶液。 0035 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 10g、 磷酸氢二钠 3g、 磷酸二氢钾 3g、 酵母膏 2g、 蛋白胨 2g 配制成发酵培养基。 0036 3、。

19、 选取能分泌细菌纤维素的气杆菌属和固氮菌属活化制备成种子醪液， 然后将菌 株浓度为 90wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵培 说 明 书 CN 103340819 B 5 4/5 页 6 养 3d 后取出发酵产物。 0037 4、 发酵产物在质量百分含量为 5% 的 NaOH 水溶液中， 在 50的温度下加热 4h。再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0038 实施例 5 ： 00。

20、39 1、 将仙人掌和芦荟冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 30 倍的乙醇水溶液中， 其 中乙醇水溶液浓度为 40wt% ； 将上述溶液在 600W 的超声功率下超声 10min， 过滤除去滤渣 ； 在滤液中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 10wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶液。 0040 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 20g、 磷酸氢二钠 2g、 磷酸二氢钾 2g、 酵母膏 4g、 蛋白胨 4g 配制成发酵培养基。 0041 3、 选取能分泌细菌纤维素的木醋杆菌和产碱菌属活化制备成种子醪液， 然后将菌 株浓度为 80wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇。

21、溶液的发酵培养基中， 发酵培 养 7d 后取出发酵产物。 0042 4、 发酵产物在质量百分含量为 8% 的 NaOH 水溶液中， 在 30的温度下加热 6h。再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0043 实施例 6 ： 0044 1、 将仙人掌、 茶叶和竹叶冷冻干燥粉加入占冷冻干燥粉重量 40 倍的乙醇水溶液 中， 其中乙醇水溶液浓度为50wt% ； 将上述溶液在800W的超声功率下超声5min， 过滤除去滤 渣 ；。

22、 在滤液中加入蒸馏水， 调节滤液中的乙醇含量为 5wt%， 得到含有植物类总黄酮乙醇溶 液。 0045 2、 每 1L 的植物类总黄酮乙醇溶液中加入葡萄糖 30g、 磷酸氢二钠 3g、 磷酸二氢钾 3g、 酵母膏 2g、 蛋白胨 4g 配制成发酵培养基。 0046 3、 选取能分泌细菌纤维素的根瘤菌属和假单胞菌属活化制备成种子醪液， 然后将 菌株浓度为 60wt% 的种子醪液均匀接入含有植物类总黄酮乙醇溶液的发酵培养基中， 发酵 培养 6d 后取出发酵产物。 0047 4、 发酵产物在质量百分含量为 4% 的 NaOH 水溶液中， 在 60的温度下加热 6h。再 用蒸馏水反复冲洗至中性。以除去。

23、菌体蛋白和粘附在纤维素膜上的残余培养基。切割后得 到具有抗辐射功效的细菌纤维素面膜， 细菌纤维素三维网络内部均匀分布有总黄酮分子， 且细菌纤维素的分子与总黄酮分子间存在键合作用。 0048 以下通过试验进一步说明本发明的有益效果 0049 试验 1 0050 每个处理分别选择面部皮肤干燥、 蜕皮明显的患者 120 例分成 6 组， 每组 20 人进 行试验， 取实施例 1-6 所得的面膜两片， 分别于清晨和临睡前各用温开水洗脸后敷于面部， 然后在脸上保留15min左右。 试验30天后统计痊愈、 显效、 好转、 无效的病患数， 计算其总有 效率 （%） 。疗效判定标准 ： 痊愈 : 肤色改善、 。

24、蜕皮完全消退， 皮肤光滑滋润 ; 显效 : 肤 色有很大程度改善、 蜕皮明显消退 ; 好转 : 肤色有所改善、 蜕皮有所消退 ; 无效 : 肤 说 明 书 CN 103340819 B 6 5/5 页 7 色、 蜕皮变化不明显或加重。试验结果见表 1。 0051 表 1 实施例 1-6 对皮肤干燥、 蜕皮的患者使用效果表 0052 0053 试验 2 0054 选取 60 位志愿者进行试验， 60 位志愿者共分成 6 个小组， 每组 10 人。试验分两天 进行， 第一天测试的方法为每位志愿者在使用纯水面膜 （无纺布面膜， 添加的液体为水） 前 先用菲斯凯尔 SK-III 型手持式数显皮肤水份测。

25、试仪分别测试额头、 左脸、 右脸和下巴皮肤 的水分含量， 并取算术平均值， 然后洗净脸后敷上本发明面膜， 15 分钟后取下面膜， 用清水 洗脸、 抹干脸部， 1 小时后再用皮肤水份测试仪测试额头、 左脸、 右脸和下巴同样位置的皮肤 水分含量， 并取算术平均值 ； 第二天测试的方法与第一天测试方法相同， 但所用的面膜为本 发明面膜， 第一小组测试本实验例 1 产品， 第二小组测试本实验例 2 产品， 第三小组测试本 实验例 3 产品， 第四小组测试本实验例 4 产品， 第五小组测试本实验例 5 产品， 第六小组测 试本实验例 6 产品。每组 10 位志愿者将所测试的结果取算术平均值， 测试结果如表 2 ： 0055 表 2 0056 0057 六组志愿者分别使用纯净水面膜与实施例 1 6 所制备的产品进行对比后， 实施 例 1 6 所制备的产品均能明显提高脸部皮肤水分含量。 说 明 书 CN 103340819 B 7 。