带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾病药物中的应用.pdf

《带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾病药物中的应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾病药物中的应用.pdf（8页完整版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)授权公告号 CN 102784134 B (45)授权公告日 2014.04.09 CN 102784134 B (21)申请号 201210306272.5 (22)申请日 2012.08.27 A61K 31/216(2006.01) A61K 31/4245(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (73)专利权人 南京中医药大学 地址 210029 江苏省南京市汉中路 282 号 (72)发明人 唐于平 李念光 段金廒 (74)专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限 公司 32200 代理人 杨海军 (54) 发明名称 。

2、带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治 疗恶性肿瘤疾病药物中的应用 (57) 摘要 本发明公开了带有一氧化氮供体的芳香酸 衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾病药物中的新应 用， 本发明通过大量实验筛选出具有强抗肿瘤活 性的带一氧化氮的阿魏酸或咖啡酸衍生物， 实 验结果表明， 具有很好的抑制肿瘤细胞生长和 能促进肿瘤细胞凋亡的作用， 且对多种恶性肿 瘤细胞均具有强的杀灭作用， 应用范围更广泛。 尤其是 (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯 酸-4-4-苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧 基 -2- 丁 酯， (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲 氧 基 苯 基 。

3、) 丙 烯 酸 -4-4- 苯 磺 酰 基 -1,2,5- 噁 二 唑 -5- 氧 -3- 氧 基 -1- 丁 酯， (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -2-2-4- 苯磺酰 基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙 酯 3 个化合物显示出非常强的抗多种肿瘤活性， 有望开发成新的抗肿瘤药物。 (51)Int.Cl. 审查员 田小藕 权利要求书 1 页 说明书 6 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书6页 (10)授权公告号 CN 102784134 B CN 102784134 B 1/1 页 。

4、2 1. 具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 其中 A 代表下列官能团 ： 3- 甲氧基 -4- 羟基苯基 ； R3代表 -CH2CH2-、 -CH(CH3)CH2CH2-； - CH2CH2CH2CH2- 或 -CH2CH2OCH2CH2- ； 所述的肿瘤为白血病。 权 利 要 求 书 CN 102784134 B 2 1/6 页 3 带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾 病药物中的应用 技术领域 0001 本发明涉及一种药物， 具体涉及带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在制备治疗恶 性肿瘤疾病药物中的应用。 背景技术 0002 肿瘤已成为21世纪威胁人类生存的。

5、头号杀手， 平均每年有670万人死于各种肿瘤 疾病。 中国为世界癌症高发国家之一， 每年新增220万名癌症患者， 占全球总数达20%， 现有 癌症患者 450 万人， 并且每年呈快速增长趋势。临床上目前治疗肿瘤的药物， 抗肿瘤效果有 效， 且药物毒性大， 在杀死肿瘤细胞的同时也无选择性的杀死白细胞、 淋巴细胞等人体自身 免疫细胞， 导致病人常常由于因自身免疫能力低下并发感染， 患者使用不良反应大， 且疗程 长， 费用高， 在临床使用中有较大的局限性。 0003 芳香酸类化合物， 如阿魏酸、 咖啡酸、 肉桂酸、 异阿魏酸以及香豆酸报道具有很好 的抗血栓活性， 临床上常用于心血管疾病， 尽管芳香酸。

6、类化合物具有多种药理活性， 但是 , 由于他们的分子亲水性较强 , 较难透过生物膜脂质双分子层而影响其药效作用 （王汝涛 , 周四元 , 张峰 , 等 . 阿魏酸乙酯对过氧化氢损伤人血管内皮细胞的保护作用 J. 中 国临床药理学与治疗学 , 2004, 9(7): 763-765.） 限制了该类化合物的应用。中国专利 201010214044.6， 报道了带有一氧化氮供体的芳香酸前体药物及其制备方法和其应用， 但 目前还未有带有一氧化氮供体的芳香酸衍生物在抗恶性肿瘤疾病药物中的应用的报道。 因 此， 很有必要在现有技术的基础之上研发设计抗肿瘤效果好， 不良反应低的抗肿瘤新药。 发明内容 000。

7、4 发明目的 ： 本发明的目的是为了解决现有技术的不足， 提供带有一氧化氮供体的 芳香酸衍生物在制备治疗恶性肿瘤疾病药物中的新应用。实验结果表明， 带有一氧化氮供 体的芳香酸衍生物对多种肿瘤细胞具有强抗肿瘤活性， 临床使用安全， 不良反应低。 0005 技术方案 ： 为了实现以上目的， 本发明所采取的技术方案如下 ： 0006 具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 0007 0008 其中A代表下列官能团 ： 3,4-二羟基苯基或3-甲氧基-4-羟基苯基 ； R1代表丙基、 丁基、 戊基、 已基或 2- 丁烯基。 0009 当 A 为 3- 甲氧基 -4- 羟基苯基， R1分。

8、别为丙基、 丁基、 戊基、 已基、 2- 丁烯基时， 化 合物分别为化合物 1 至 5。 说 明 书 CN 102784134 B 3 2/6 页 4 0010 当 A 为 3,4- 二羟基苯基， R1分别为丙基、 丁基、 2- 丁烯基时， 化合物分别命名为化 合物 6 至 8。 0011 本发明提供的具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 0012 0013 其中 A 代表下列官能团 ： 3- 甲氧基 -4- 羟基苯基 ； R2代表邻位或对位 -PhCH2-， 或者是邻位或对位 -Ph-。其中当 R2代表邻位、 对位 -Ph- 时， 化合物分别为化合物 9 至 10。 其中当。

9、 R2代表邻位、 对位 -PhCH2-时， 化合物分别为化合物 11 至 12。 0014 本发明提供的具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 0015 0016 其中 A 代表下列官能团 ： 3- 甲氧基 -4- 羟基苯基 ； R3代表 -CH2CH2-、 -CH(CH3) CH2CH2-； -CH2CH2CH2CH2- 或 -CH2CH2OCH2CH2-。 其 中 ； R3代 表 -CH2CH2-、 -CH(CH3)CH2CH2-； - CH2CH2CH2CH2- 或 -CH2CH2OCH2CH2- 的化合物分别为化合物 13 至 16， 并且分别命名为 ： (E)-3-(。

10、4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧 基 - 乙酯， (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二 唑 -5- 氧 -3- 氧基 -2- 丁酯， (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰 基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -1- 丁酯， (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯 酸 -2-2-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙酯。 0017 (E)-。

11、3-(4- 羟 基 -3- 甲 氧 基 苯 基 ) 丙 烯 酸 -4-4- 苯 磺 酰 基 -1,2,5- 噁 二 唑 -5- 氧 -3- 氧基 -2- 丁酯的结构解析数据为 ： 1H NMR (CDCl 3) : 1.40 (d, J = 6.2 Hz, 3H, CH3), 2.22 (m, 2H, CH2), 3.92 (s, 3H, OCH3), 4.53 (t, J = 6.2 Hz, 2H, CH2O), 5.26 (q, J = 6.2 Hz, 1H, COOCH), 5.90 (brs, 1H, OH), 6.29 (d, J = 15.9 Hz, 1H, C=CH), 6.90。

12、-7.08 (m, 3H, Ar-H), 7.61 (d, J = 15.9 Hz, 1H, CH=C), 7.60-7.77 (m, 3H, Ar-H), 8.08 (m, 2H, Ar-H). ESI-MS: 513 M+Na+ 0018 (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲 氧 基 苯 基 ) 丙 烯 酸 -4-4- 苯 磺 酰 基 -1,2,5- 噁 二 唑-5-氧-3-氧基-1-丁酯的结构解析数据为 ： 浅褐色粉末， 收率92.0%， Mp: 143.3-146.9 C。 1H NMR (CDCl 3) : 1.88-2.05 (m, 4H, 2CH2), 3.91 (s, 3H,。

13、 OCH3), 4.30 (t, J = 6.2 Hz, 2H, CH2O), 4.50 (t, J = 6.2 Hz, 2H, COOCH2), 5.88 (brs, 1H, OH), 6.29 (d, J = 15.9 Hz, 1H, C=CH), 6.91-7.09 (m, 3H, Ar-H), 7.62 (d, J = 15.9 Hz, 1H, 说 明 书 CN 102784134 B 4 3/6 页 5 CH=C), 7.62-7.77 (m, 3H, Ar-H), 8.06 (m, 2H, Ar-H). ESI-MS: 513 M+Na+。 0019 (E)-3-(4- 羟 基 -。

14、3- 甲 氧 基 苯 基 ) 丙 烯 酸 -2-2-4- 苯 磺 酰 基 -1,2,5- 噁 二唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙酯的结构解析数据为 ： 白色粉末， 收率 82.8%， Mp: 115.5-115.8 C。 1H NMR (CDCl 3) : 3.86 (t, J = 4.7 Hz, 2H, OCH2), 3.91 (s, 3H, OCH3), 3.93 (t, J = 3.5 Hz, 2H, CH2O), 4.39 (t, J = 4.7 Hz, 2H, CH2O), 4.59 (t, J = 3.5 Hz, 2H, COOCH2), 5.89 (br s, 1H,。

15、 OH), 6.29 (d, J = 15.9 Hz, 1H, C=CH), 6.88-7.09 (m, 3H, Ar-H), 7.63 (d, J = 15.9 Hz, 1H, CH=C), 7.51-7.74 (m, 3H, Ar-H), 8.06 (m, 2H, Ar-H). ES -MS: 529 M+Na+。 0020 作为优选方案， 所述的具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 所述的肿瘤为恶性黑色素瘤、 宫颈癌、 头颈部肿瘤、 胃癌、 结肠癌、 肝癌、 肾癌、 乳腺癌、 白血 病或肺腺癌。 0021 作为优选方案， 所述的具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药。

16、物中的应用， 所述的肿瘤为恶性黑色素瘤、 宫颈癌、 头颈部肿瘤、 胃癌、 结肠癌、 肝癌、 肾癌、 乳腺癌、 白血 病或肺腺癌。 0022 作为优选方案， 所述的具有通式 （） 所示的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用， 所述的肿瘤为恶性黑色素瘤、 宫颈癌、 头颈部肿瘤、 胃癌、 结肠癌、 肝癌、 肾癌、 乳腺癌、 白血 病或肺腺癌。 0023 本发明提供的通式 （） 、（） 和 （） 所示的化合物和要学上可接受的载体制备成 片剂、 胶囊剂、 注射剂、 丸剂、 滴丸剂等剂型的药物。 0024 有益效果 ： 本发明提供的中药组合物和现有技术相比具有以下优点 ： 0025 本发明通过大量实验筛选出具有。

17、强抗肿瘤活性的带一氧化氮的阿魏酸或咖啡酸 衍生物， 实验结果表明， 具有具有很好的抑制肿瘤细胞生长和能促进肿瘤细胞凋亡的作用， 且对多种恶性肿瘤细胞均具有强的杀灭作用， 应用范围更广泛。 尤其是 (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -2- 丁酯， (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧 基 -1- 丁酯， (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -2-2-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二 唑。

18、 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙酯 3 个化合物体内、 体外显示出强的抗多种肿瘤活性， 有 望开发成新的抗肿瘤药物。 0026 本发明提供的抗肿瘤化合物可以方便和药学载体制备成多种剂型， 临床上服用方 便。 具体实施方式 0027 下面结合具体实施例进一步阐明本发明， 应理解这些实施例仅用于说明本发明而 不用于限制本发明的范围， 在阅读了本发明之后， 本领域技术人员对本发明的各种等价形 式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。 0028 实施列 1 体外抗肿瘤实验 0029 采用 MTT 法检测以上化合物 1 至化合物 16 对肺癌， 恶性黑色素瘤 （Melanoma） ， 宫。

19、 颈癌 (cervical)， 头颈部肿瘤， 乳腺癌体外抗肿瘤作用。 0030 以每孔 800-1000 个细胞种至 384 孔细胞板中， 每孔 45ul 培养液， 37， 5%CO2培养 说 明 书 CN 102784134 B 5 4/6 页 6 24 小时。将以上化合物 1 至化合物 16 化合物以 DMSO 倍比稀释至化合物板中， 将不同浓度 化合物 0.5ul 加入细胞培养板中， 培养 72 小时， 加入 5ul Alamablue 并孵育 4 小时， 然后在 酶标仪上读结果， 计算各药物的抑制率。具体实验结构如表 1 所示 ： 0031 表 1 带 NO 供体阿魏酸和咖啡酸衍生物对。

20、人癌细胞列的体外抗肿瘤活性 （IC50， 单 M） 0032 0033 由以上表1的实验结果表明， 本发明提供的带NO供体阿魏酸和咖啡酸衍生物对人 癌细胞列均具有很好的抗肿瘤效果， 尤其是化合物8、 9、 14、 15和16显示出了非常强的抗多 种肿瘤的活性， 取得了非常好的技术效果。 0034 实施例 2 采用 CCK-8 细胞增殖检测法测定化合物 14、 15 和 16 对人癌细胞体外增 殖的影响 0035 1、 采用 CCK-8 细胞增殖检测法测定化合物 (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯 酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -。

21、2- 丁酯， 即化合物 14 ； (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -1- 丁酯， 说 明 书 CN 102784134 B 6 5/6 页 7 即化合物 15 ； (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -2-2-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁 二唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙酯， 即化合物 16 对人胃癌细胞 MGC-803、 人结肠癌细 胞 SW620、 人肝癌细胞 SMMC-7721、 人肾癌细胞 Ketr-3、 人乳腺癌细胞 MCF-7、 人白血病细胞。

22、 HL-60 体外增殖的影响。 0036 2、 测试药物 ： 化合物14、 15、 16分别稀释成100uM、 50uM和10uM ； 对照药物 ： 紫杉醇 注射液稀释成 10g/mL（太极集团四川太极制药有限公司， 批号 ： 10090029） ； 同时设立阴 性组 ： 0.1%DMSO。 0037 3、 实验方法 ： 0038 3.1、 细胞消化、 计数、 配制成浓度为 3 5104个 /mL 的细胞悬液， 96 孔细胞培养 板中每孔加入 100L 细胞悬液 （每孔 3 5103个细胞） ； 0039 3.2、 96 孔细胞培养板置于 37， 5%CO2培养箱中培养 24 小时 ； 004。

23、0 3.3、 用完全培养基稀释各药物至所需浓度， 每孔加入 100L 不同浓度的含以上 测试药物的培养基， 同时设立阴性对照组， 阳性对照组 ； 0041 3.4、 96 孔细胞培养板置于 37， 5% CO2培养箱中培养 72 小时 ； 将 96 孔板进行 CCK-8 染色， 每孔加入 10L CCK-8， 在培养箱继续培养 4 小时 ； 摇床 10 分钟轻轻地混匀 ； =450nm， 酶标仪读出每孔的 OD 值， 计算抑制率。 0042 0043 4、 实验结果 0044 具体实验结果如表 2 所示 ： 0045 表 2 化合物 14、 15 和 16 体外抗人癌细胞活性测试结果 0046。

24、 0047 由表 2 的实验结果表明， 本发明提供的化合物 14 至 16， 即化合物 (E)-3-(4- 羟 基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -2- 丁酯 ； (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧 说 明 书 CN 102784134 B 7 6/6 页 8 基 -1- 丁酯 ； (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -2-2-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二 唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙。

25、酯对人胃癌细胞 MGC-803、 人结肠癌细胞 SW620、 人肝癌细 胞 SMMC-7721、 人肾癌细胞 Ketr-3、 人乳腺癌细胞 MCF-7 和人白血病细胞 HL-60 也均具有非 常强的抗肿瘤活性。 0048 由以上实验结果表明， 本发明提供的带一氧化氮的阿魏酸或咖啡酸衍生物， 具有 很好的抗肿瘤作用， 尤其是化合物 (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸 -4-4- 苯磺 酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -2- 丁酯 ； (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧基苯基 ) 丙烯 酸 -4-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 -1- 丁酯 ； (E)-3-(4- 羟基 -3- 甲氧 基苯基 ) 丙烯酸 -2-2-4- 苯磺酰基 -1,2,5- 噁二唑 -5- 氧 -3- 氧基 - 乙氧基 乙酯对 多种肿瘤细胞均显示出了非常强的活性， 很有希望开发成为新一代抗肿瘤药物。 0049 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人 员来说， 在不脱离本发明原理的前提下， 还可以做出若干改进和润饰， 这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。 说 明 书 CN 102784134 B 8 。