技术领域
本发明属于药物应用领域，具体涉及中药组合物的用途。
背景技术
微血管是血液循环系统的终末结构，是血液与组织器官内物质代谢和能量转换的场所之一。微血管内皮细胞则是构成血液与组织之间的主要屏障，并且能合成、分泌和降解多种生物活性物质，保持着所供养区域内环境的稳态平衡。在正常情况下，微循环内的血流量与组织器官的代谢水平相适应，维持着各组织器官的血液灌注量并调节回心血量。微血管内的血液灌流有着自身特点，不是靠心跳的推动，而是主要依赖于自身的舒缩调节，属于一种“海涛式灌注”，而非田园式漫灌。当微血管内皮功能受损时，则会出现微血管通透性增加，分泌功能异常，调节舒缩功能障碍等一系列病理变化。而微血管内的血流速度是直接反应微循环功能状态的指标之一，在多种疾病状态下会出现不同程度的改变。所以，微血管内血流速度在一定程度上将直接影响微循环内的血液灌流，从而引起组织器官内血氧供给平衡失调，特别是对于病变区域的微循环影响可能更加明显。
血脂作为血液的组份之一与微循环关系非常密切。一方面，高血脂可引发大量白细胞活化，并分泌多种炎性介质、活性氧以及酶类，引起炎症瀑布反应，损伤微血管内皮细胞及组织细胞；另一方面，微血管内皮细胞被激活后，细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）等各种黏附因子表达增加，促使中性粒细胞活化、聚集，并黏附于微血管内皮细胞，影响微血管内皮功能，导致微循环障碍。此外，血脂升高还可使红细胞变形能力下降，血流阻力增加，通行能力下降，并激活血小板促进微血管内血栓形成，进而影响微循环灌注。
微循环障碍是许多疾病的病理生理基础，而甲襞微循环是全身末梢循环状况的窗口，其变化能在一定程度上反映全身微循环状态，也是中医借助现代科技手段对“望诊”内容的进一步延伸。甲襞微循环检查能够直观的、非侵入性地评估微血管系统，并可作为疾病诊断和疗效评判的筛选指标。
发明内容
本发明的目的是提供一种中药组合物在制备改善甲襞微循环血流速药物中的应用。
本发明所采用的技术方案是：
一种中药组合物在制备改善甲襞微循环血流速药物中的应用，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：
人参5-9 水蛭5-11 土鳖虫6-9 制乳香2-4 赤芍4-7 降香2-4 檀香2-4 全蝎3-7 蝉蜕6-10 蜈蚣1-3 冰片2-6 炒酸枣仁4-9。
作为优选方式，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：
人参 6 水蛭 10 土鳖虫 9 制乳香 4 赤芍 4 降香 2
檀香 4 全蝎 7 蝉蜕 7 蜈蚣 3 冰片 6 炒酸枣仁5。
或
人参 9 水蛭 5 土鳖虫 6 制乳香 3 赤芍 7 降香 4
檀香 2 全蝎 3 蝉蜕 6 蜈蚣 1 冰片 2 炒酸枣仁7。
或
人参 6 水蛭 11 土鳖虫 7 制乳香2 赤芍 5 降香 2
檀香 2 全蝎 3 蝉蜕 7 蜈蚣 1 冰片 5 炒酸枣仁5。
超出“人参5-9 水蛭5-11 土鳖虫6-9 制乳香2-4 赤芍4-7 降香2-4 檀香2-4 全蝎3-7 蝉蜕6-10 蜈蚣1-3 冰片2-6 炒酸枣仁4-9”这个范围的药味制成的药物的效果都不好。
所述中药组合物的活性成分由下列成分组成：
a 平均粒径小于100 μm的全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫、蝉蜕及制乳香药粉;
b 冰片药粉;
c 由降香和檀香提取的挥发油;
d 人参用乙醇提取后的醇提液经浓缩后的醇提浸膏;
e 提取成分c后的降香和檀香药渣的水提液、赤芍和炒酸枣仁加水煎煮后的水提液以及提取成分d后的人参药渣的水提液过滤、混匀后浓缩成的水提浸膏。
为实现上述技术方案，将该中药组合物制为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
所述胶囊剂是由以下步骤制成的：
a) 按照重量份比例称取各原料药；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100 μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏；
d) 制剂工艺：
在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c）所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。
所述胶囊剂是由以下步骤制成的：
a) 按照重量份比例称取各原料药；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上；粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于100 μm；待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加水煎煮，水提液过滤后，待浓缩成浸膏；人参用乙醇提取后，再用水提取，醇提液回收乙醇后，浓缩成醇提浸膏，水提液过滤与所有的水提液混匀后浓缩成水提浸膏，将浸膏直接喷雾干燥成喷雾粉；
d) 制剂工艺：
将超微粉碎粉与步骤c)所得喷雾干燥粉一起加到沸腾制粒干燥机中，再喷溶媒制成颗粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成胶囊。
为验证所述中药组合物的效果，作了以下实验
1 材料与方法
1.1 实验动物
40只新西兰兔，雌雄各半，体重2.0±0.2kg，由北京富豪实验动物养殖中心提供，动物许可证号：SCXK（京）2010-0010。动物单笼饲养于河北省络病重点实验室。每天光照、黑暗各12小时，温度20℃～25℃，相对湿度40%～70%。换气次数8-10次/h，普通动物室每日通风，定时消毒。
1.2 药物与试剂
阿托伐他汀钙片，辉瑞制药有限公司，批号：1237133；本发明中药组合物，石家庄以岭药业，批号：20120924；超出本发明药物重量份数范围的组合物：人参4、水蛭12、土鳖虫5、制乳香1、赤芍8、降香1、檀香5、全蝎2、蝉蜕5、蜈蚣4、冰片7、炒酸枣仁3，羧甲基纤维素钠，天津永大化学试剂开发中心，批号：20120418；硫化钠，天津博迪化工股份有限公司，批号：20121109。血脂四项试剂盒由北京九强生物技术有限公司提供，总胆固醇（TC）试剂批号：12-1015P；甘油三酯（TG）试剂批号：12-1107P；低密度脂蛋白（LDL）试剂批号：12-0813P；高密度脂蛋白（HDL）试剂批号：12-0822P。
高脂饲料配方：胆固醇1%，蛋黄粉7.5%，猪油5%，基础饲料86.5%，由河北医科大学实验动物中心加工定制。
1.3 实验仪器
日立7080全自动生化分析仪；冷冻离心机（美国索富达公司）；ZL104型微循环检测仪和微循环图像分析系统（徐州众联医疗器械有限公司）。
1.4 实验分组与检查方法
实验动物适应性喂养2周后，随机分为空白组，模型组，阿托伐他汀组，本发明中药组合物组（治疗组），超出本发明药物重量份数范围的组合物（对比组）每组8只。各组之间动物的体重和性别无显著性差异（P＞0.05）。空白组继续饲喂普通颗粒饲料，其余各组饲喂高脂饲料，以模型组总胆固醇、低密度脂蛋白高于正常2倍以上表示造模成功, 阿托伐他汀、超出本发明药物重量份数范围的组合物和本发明中药组合物在高脂喂养的同时开始灌胃给药，给药前用0.5%的羧甲基纤维素钠水溶液将阿托伐他汀、超出本发明药物重量份数范围的组合物和本发明中药组合物分别按2.5mg/kg、0.3g/kg和0.3g/kg配成相应浓度的混悬液（灌胃体积均为3ml/kg），每日1次，连续6周。由于兔子甲襞微血管的形态不像人类那样呈典型的“发夹状”，尚缺少统一的评定标准，所以采用微血管内的血流速度作为评价指标。实验前一天用6%的硫化钠将家兔左前肢第三趾脱毛，分别于给药后2W，4W、6W末测量其甲襞微循环的血流速度，并留取血液标本。
测量时保持室温20±2℃，将家兔置于微循环检测仪旁，用黑布罩上家兔的双眼，以避免受到光源等惊吓。在已脱毛的左前肢第三趾上滴少许香柏油，以提高透光度，减少散射。调节冷光源，先在低倍镜下观察甲襞的全貌，选择适当部位，换用高倍镜进行定点连续观察并记录结果。通过计算机微循环图像分析系统测量甲襞微血管内的血流速度。
1.5 统计学处理
采用SPSS18.0统计软件包，计量数据用均数±标准差（ QUOTE ±s）表示。组间比较用单因素方差分析（One-Way ANOVA），两两比较采用最小显著法（LSD），方差不齐用Dunnett’s T3法，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 动物存活状况
实验过程中，模型组1只动物死于腹泻；阿托伐他汀组1只动物死于腹泻，1只死于胀气；治疗组1只死于灌胃意外；对比组动物全部存活；空白组动物全部存活。
2.2 各组血脂水平的变化
表1显示，与空白组相比，模型组血脂四项水平于2W时明显升高。与模型组比较，对比组在2W、4W、6W时TC、TG、HDL-C、LDL-C均未有明显变化；阿托伐他汀组和治疗组在2W时总胆固醇（TC）水平开始出现显著下降（P＜0.05），且前者的下降幅度大于后者（P＜0.05）；在4W和6W时两者降低TC的作用无明显差异（P＞0.05）；阿托伐他汀组和治疗组甘油三酯（TG）水平分别在2W时和4W时开始明显降低（P＜0.05）；阿托伐他汀组仅在4W时表现出升高高密度脂蛋白（HDL-C）作用（P＜0.05），其它时间点升高HDL-C的作用不明显（P＞0.05）；治疗组虽也有升高HDL-C的趋势，但作用效果不明显（P＞0.05）；阿托伐他汀组和治疗组低密度脂蛋白（LDL-C）水平均在4W时出现显著降低（P＜0.05），虽然前者的LDL-C水平在数值上低于后者，但两者之间未出现统计学差异（P＞0.05）。
2.3 不同时间各组甲襞微循环血流速度变化
表2显示，与空白组相比，模型组甲襞微循环血流速度从2W时开始出现进行性下降（P＜0.05）。与模型组相比，对比组无明显变化，阿托伐他汀组和治疗组于实验2W时均能明显改善微血管内血流速度（P＜0.05），且在4W和6W时治疗组改善微血管血流速度的作用优于阿托伐他汀组（P＜0.05）。
2.4 甲襞微循环血流速度与血脂水平相关性分析
图1显示，新西兰兔甲襞微循环血流速度与其血脂水平呈负相关关系，其中与TC的相关系数为r=-0.82，与TG的相关系数为r=-0.80，与HDL-C的相关系数为r=-0.68，与LDL-C的相关系数为r=-0.79。在一定时间范围内，高脂血症兔甲襞微循环的血流速度随血脂水平的升高呈下降趋势。
由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术进步是：
本发明的中药组合物除了降低高脂血症的TC、TG和LDL-C水平以外，可以提高甲襞微循环血流速度。
附图说明
图1是微血管血流速度与TC相关性；
图2是微血管血流速度与TG相关性；
图3是微血管血流速度与HDL-C相关性；
图4是微血管血流速度与LDL-C相关性。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步详细说明：
实施例1：
a) 原料药配方为：
人参39.6g 水蛭72.6g 土鳖虫46.2g 制乳香13.2g 赤芍33g 降香13.2g 檀香13.2g 全蝎19.8g 蝉蜕 46.2g 蜈蚣 6.6g 冰片 33g 炒酸枣仁33g；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于30 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料；
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.05醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.05的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c）所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，混匀后由胶囊充填机充填，制成1000粒胶囊。
本发明药物的用量，为每次2-4粒，每日服用三次。
实施例2
a) 原料药配方为：
人参 59.4g 水蛭 52.8g 土鳖虫 46.2g 制乳香13.2g
赤芍 33g 降香 13.2g 檀香 13.2g 全蝎 39.6g
蝉蜕 46.2g 蜈蚣 6.6g 冰片 33g 炒酸枣仁33g
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径小于70 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成相对密度在60℃测定为1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.0的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
在沸腾制粒干燥机中加入超微粉碎粉，再将步骤c)所得提取浸膏喷入制粒；将制成的颗粒经整粒，加入冰片细粉，喷入由降香和檀香提取的挥发油，按常规制剂工艺压制成1000片。
本发明药物的用量，为每次2-4片，每日服用三次。
实施例3：丸剂的制备
a) 原料药配方为：
人参 39.6g 水蛭 66g 土鳖虫 46.2g 制乳香13.2g
赤芍 33g 降香 13.2g 檀香 13.2g 全蝎 46.2g
蝉蜕 46.2g 蜈蚣 6.6g 冰片 33g 炒酸枣仁33g
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径10μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.1的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
按常规制剂工艺，制成1000粒丸剂。
本发明药物的用量，为每次2-4粒，每日服用三次。
实施例4
a)原料药配方
人参 60g 水蛭 100 g 土鳖虫 90 g 制乳香 40 g 赤芍 40 g 降香 20 g 檀香 40 g 全蝎 70 g 蝉蜕 70g 蜈蚣 30g 冰片 60g 炒酸枣仁50g；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径20 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.1醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.1的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
按常规制剂工艺，制成颗粒剂。
实施例5
a)原料药配方
人参 90g 水蛭 50 g 土鳖虫 60 g 制乳香 30 g 赤芍 70 g 降香 40 g 檀香 20 g 全蝎 30 g 蝉蜕 60 g 蜈蚣 10 g 冰片 20 g 炒酸枣仁70 g；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径50 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.0的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
按常规制剂工艺，制成散剂。
实施例6
a)原料药配方
人参 60g 水蛭 110 g 土鳖虫 60 g 制乳香 30 g 赤芍 50 g 降香 20 g 檀香 20 g 全蝎 60g 蝉蜕 70 g 蜈蚣 10 g 冰片 50 g 炒酸枣仁50 g；
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径60 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.1的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
按常规制剂工艺，制成口服液。
实施例7
a)原料药配方
人参40g、水蛭120g、土鳖虫50g、制乳香10g、赤芍80g、降香10g、檀香50g、全蝎20g、蝉蜕50g、蜈蚣40g、冰片70g、炒酸枣仁30g。
b) 药材粉碎工艺：
将全蝎、水蛭、蜈蚣、土鳖虫和蝉蜕五种虫药经净选、水洗处理后和净选炮制后的制乳香按处方配料，由粉碎机进行粉碎，药粉细度达到80目以上;粗粉后的药粉经各种超微粉碎技术进行超微粉碎，使药粉平均粒径60 μm;待粉碎的药材经清洗烘干灭菌后，配料;
c) 提取浓缩和干燥工艺：
降香和檀香先加水提取挥发油后再用水提取，赤芍和炒酸枣仁加适量水煎煮二次，每次3小时，合并水提液，过滤后，待浓缩成浸膏；人参用适量70%的乙醇提取二次，每次3小时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，再用水提取，醇提液浓缩成60℃测定相对密度为1.0醇提浸膏，水提液过滤与上述所有水提液混匀后浓缩至60℃测定相对密度为1.1的清膏，备用；
d) 制剂工艺：
按常规制剂工艺，制成颗粒剂。
该药物组合物超出了本发明各药味的的选择范围，实验证明，效果不好。