技术领域
本发明涉及一种冻干保护剂，具体是指用于制作腮腺炎减毒活疫苗冻干制 剂的一种无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂。
背景技术
冻干保护剂，简称冻保剂，是将疫苗制成冻干制剂时，添加在疫苗中用于 防止疫苗因冷冻干燥发生性变的保护剂；用于制作腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂 的冻干保护剂，简称腮苗冻保剂。
现有技术腮苗冻保剂中含有明胶、人血白蛋白成分，用现有技术腮苗冻保 剂制备的腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂简称现有腮苗冻干制剂；生物医药科技研 究发现，现有腮苗冻干制剂的部分被接种人群尤其是儿童，会对其中的明胶、 人血白蛋白成分产生强烈的过敏反应，或者有感染肝炎的风险；究其机理，导 致过敏反应的是明胶或明胶的衍生物能够引起部分被接种者产生抗明胶分子的 IgE抗体，明胶既可以引起细胞介导免疫反应，也可以引起非细胞介导免疫反 应；另外，明胶内含有其他菌种的内毒素亦可导致部分被接种者产生发热反应； 此外，导致部分被接种者感染肝炎是源自现有技术腮苗冻保剂中的人血白蛋白 中携带有肝炎病源，虽然人血白蛋白来源于检测合格的健康人血，但是受现有 检测技术水平的局限，人血白蛋白中携带的肝炎病源会对疫苗产生隐性污染； 还有，人血白蛋白供应紧张价格昂贵，成本高；因此，现有技术存在过敏反应、 感染肝炎隐患、成本高的问题与不足。
发明内容
针对上述现有技术存在的问题与不足，本发明采用由蔗糖、海藻糖、右旋 糖酐、谷氨酸钠、尿素、精氨酸、199培养基、甘露醇、灭菌注射用水制备的腮 苗冻保剂的技术方案，提供一种无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂，旨在 使腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂，避免明胶、人血白蛋白的弊端，达到消除过敏 反应、避免感染肝炎、降低成本的目的。
本发明的目的是这样实现的：一种无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂， 包括配方和制备工艺，
所述的配方为，
原料1：蔗糖，药用级，20～70；
原料2：海藻糖，药用级，10～50；
原料3：右旋糖酐40，药用级，10～50；
原料4：谷氨酸钠，药用级，5～15；
原料5：尿素，药用级，2～8；
原料6：精氨酸，药用级，0.5～5；
原料7：199培养基，5～30；
原料8：甘露醇，药用级，5～50；
溶剂：灭菌注射用水，余量；
配方单位为克/1000毫升；
所述的制备工艺为，混合定容；
步骤一、
将配方中的原料1～8和4/5的溶剂置于烧杯中搅拌混合溶解，获得混合液；
步骤二、
将所述混合液移至容量瓶中，用配方中余下的1/5溶剂注入容量瓶内进行定 容，之后，盖上容量瓶的瓶塞，翻转摇匀，静置3～5分钟，获得定容液；之后， 用20％药用级的盐酸将所述定容液的pH值调节至7.2～7.6；获得定容粗液；
步骤三、
将所述定容粗液经0.2微米滤膜除菌过滤移至容器瓶中，封盖，获得无明胶 和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂制品。
试验
对用本发明的无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂制备的无明胶和人血 白蛋白成分的腮苗冻干制剂的安全性、有效性和稳定性，与用现有技术腮苗冻 保剂制备的现有腮苗冻干制剂进行对照组试验；
定义：在本发明所述配方的范围内，制备3组比例各异的无明胶和人血白 蛋白成分的腮苗冻保剂，分别称为保护剂1、保护剂2、保护剂3；
以原代鸡胚细胞为培养基质制备的腮腺炎病毒细胞培养物，分别添加所述 保护剂1、保护剂2、保护剂3制取的腮腺炎病毒收获液，经分装冻干获得的无 明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻干制剂，分别称为样本1、样本2、样本3；
所述保护剂1的配方比例为，右旋糖苷40，30；蔗糖，50；海藻糖，20； 谷氨酸钠，10；尿素，5；精氨酸，2；甘露醇，10；199培养基，10；灭菌注射 用水，余量；单位为克/1000毫升；
所述保护剂2的配方比例为，右旋糖苷40，20；蔗糖，50；海藻糖，10； 谷氨酸钠，10；尿素，5；精氨酸，2；甘露醇，5；199培养基，10；灭菌注射 用水，余量；单位为克/1000毫升；
所述保护剂3的配方比例为，右旋糖苷40，40；蔗糖，50；海藻糖，30； 谷氨酸钠，10；尿素，5；精氨酸，2；甘露醇，15；199培养基，10；灭菌注射 用水，余量；单位为克/1000毫升；
所述现有技术腮苗冻保剂简称现有保护剂，所述现有保护剂的组份为，明 胶，1％；蔗糖，5％；谷氨酸钠，1％；尿素，0.5％；精氨酸，0.2％；人血白蛋 白，1％；
以原代鸡胚细胞为培养基质制备的腮腺炎病毒细胞培养物，添加所述现有 保护剂制取的腮腺炎病毒收获液，经分装冻干获得的腮苗冻干制剂称为现有样 本；
对样本1、样本2、样本3和现有样本分别进行渗透压、水分含量、内毒素 含量、冻干前后滴度下降、37℃稳定性和2-8℃稳定性检测，试验结果如下：
A、渗透压指标试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本按《中国药典》三部附录V H提供 的方法分别进行渗透压测定，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3的渗透压均在400-500m0sm/kg的范围内， 远远低于现有样本，样本1、样本2、样本3的渗透压指标优于现有样本。
B、水分含量试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本按《中国药典》三部附录VII D提供 的方法别进行水分测定，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3和现有样本的水分均小于2％，符合《中国 药典》水分小于3％的要求。
C、内毒素含量试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本《中国药典》三部附录XII E提供的方 法分别进行内毒素含量测定，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3的内毒素均小于5EU/ml，符合《中国药典》 内毒素含量小于50EU/ml的要求；样本1、样本2、样本3均优于现有样本；
D、冻干前后滴度下降试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本冻干前及冻干后的样品分别进行病毒 滴定，比较滴度变化，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3和现有样本疫苗冻干前后的滴度下降差值均 小于1.0lg CCID50/ml，符合《中国药典》要求。
E、37℃稳定性试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本置于37℃的条件下，分别于0、7天 进行病毒滴定，比较滴度变化，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3和现有样本在37℃条件下放置至7天，病毒 滴度下降值小于0.5lg CCID50/ml，同时下降后的滴度仍在《中国药典》要求的 范围内，符合《中国药典》要求。
F、2～8℃稳定性试验
将样本1、样本2、样本3和现有样本置于2～8℃的条件下，分别于0、1、 3、6、12、18、24个月进行病毒滴定，比较滴度变化，结果如下：
结论：样本1、样本2、样本3和现有样本在在2-8℃条件下放置24个月， 病毒滴度无明显下降，符合《中国药典》要求。
有益效果
综上试验数据证明，本发明的无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂参与 制备的腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂符合药典要求，由于本发明的无明胶和人血 白蛋白成分的腮苗冻保剂中不含明胶、人血白蛋白，避免了明胶、人血白蛋白 对人体的危害，增强了腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂的安全性，同时使腮腺炎减 毒活疫苗冻干制剂，消除了过敏反应、消除了感染肝炎隐患、降低了成本。
上述，本发明采用由蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、谷氨酸钠、尿素、精氨酸、 199培养基、甘露醇、灭菌注射用水制备的腮苗冻保剂的技术方案，克服了现有 技术存在过敏反应、感染肝炎隐患、成本高的问题与不足，所提供的一种无明 胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂，使腮腺炎减毒活疫苗冻干制剂，避免了明 胶、人血白蛋白的弊端，达到了消除过敏反应、消除感染肝炎隐患、降低成本 的目的。
实施例说明
以下通过具体实施例对本发明的一种无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保 剂作进一步详细说明，所属领域的技术人员可以参照实施例的配方和制备工艺 制得无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂，但不应理解为对本发明的任何限 制。
具体实施方式
实施例
品名：无明胶和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂
配方：配方单位为克/1000毫升；
原料1：蔗糖，药用级，20～70；
原料2：海藻糖，药用级，10～50；
原料3：右旋糖酐40，药用级，10～50；
原料4：谷氨酸钠，药用级，5～15；
原料5：尿素，药用级，2～8；
原料6：精氨酸，药用级，0.5～5；
原料7：199培养基，5～30；
原料8：甘露醇，药用级，5～50；
溶剂：灭菌注射用水，余量；
制备
制备条件、设备
环境气压：一个大气压；环境温度：室温；
制备设施、设备：无菌室；烧杯；容量瓶；容器瓶；0.2微米滤膜；
制备工艺：混合定容；
步骤一、
将配方中的原料1～8和4/5的溶剂置于烧杯中搅拌混合溶解，获得混合液；
步骤二、
将所述混合液移至容量瓶中，用配方中余下的1/5溶剂注入容量瓶内进行定 容，之后，盖上容量瓶的瓶塞，翻转摇匀，静置3～5分钟，获得定容液；之后， 用20％药用级的盐酸将所述定容液的pH值调节至7.2～7.6；获得定容粗液；
步骤三、
将所述定容粗液经0.2微米滤膜除菌过滤移至容器瓶中，封盖，获得无明胶 和人血白蛋白成分的腮苗冻保剂制品。