一种川芎和葛根药用组合物在制备改善肠道环境的食品或药品中的用途.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201811035030.0 (22)申请日 2018.09.06 (71)申请人 南方医科大学 地址 510515 广东省广州市白云区沙太南 路1023号-1063号 (72)发明人 赵洁 吴芃 蔡铮 周浩 陈润芝 徐影 (74)专利代理机构 北京市诚辉律师事务所 11430 代理人 范盈 (51)Int.Cl. A61K 36/488(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A23L 33/105(2016.01) (54)发明名称 一种川芎和葛根药用组合物在。

2、制备改善肠 道环境的食品或药品中的用途 (57)摘要 本发明涉及一种川芎和葛根药用组合物在 制备改善肠道环境的食品或药品中的用途， 具体 公开了一种川芎和葛根药用组合物在制备改善 肠道环境的食品或药品中的用途； 所述川芎和葛 根药用组合物为葛根和川芎的水提取物， 其中葛 根和川芎的水提取物中包含葛根素、 大豆苷、 川 芎嗪和大豆苷元； 其中葛根素在药用组合物中的 含量为0.8mg/g以上， 大豆苷在药用组合物中的 含量为0.2mg/g以上； 川芎嗪在药用组合物中的 含量为0.7mg/g以上； 大豆苷元含量在0.02mg/g 以上。 权利要求书1页 说明书7页 附图12页 CN 10901042。

3、0 A 2018.12.18 CN 109010420 A 1.一种川芎和葛根药用组合物在制备改善肠道环境的食品或药品中的用途， 所述川芎 和葛根药用组合物为葛根和川芎的水提取物， 其中葛根和川芎的水提取物中包含葛根素、 大豆苷、 川芎嗪和大豆苷元； 其中的葛根素在药用组合物中的含量为0.8mg/g以上， 大豆苷 在药用组合物中的含量为0.2mg/g以上； 川芎嗪在药用组合物中的含量为0.7mg/g以上； 大 豆苷元含量在0.02mg/g以上。 2.根据权利要求1所述的用途， 所述的川芎和葛根药用组合物通过以下方法制备， 称取 质量比例为1:1的葛根和川芎， 以每克生药加水10mL， 冷水浸泡。

4、1h后， 煎煮1h， 取滤液； 药渣 再用10倍的水煎煮1h， 取滤液， 合并两次滤液； 浓缩。 3.根据权利要求1所述的用途， 改善肠道环境是指提改变肠道微生物的组成结构。 4.根据权利要求3所述的用途， 改变肠道微生物的组成结构是指增加益生菌的种类和 数量， 降低致病菌的种类和数量。 5.根据权利要求4所述的用途， 所述的益生菌选自Alloprevotella， Ruminococcaceae_ UCG_005， Ruminococcaceae_NK4A214_group， Ruminococcaceae_UCG_004， Oscillospira， Lachnospiraceae_NK4。

5、B4_group， Akkermansia和Megasphaera， 致病菌选自厚壁菌门 (Firmicutes)， 拟杆菌门， Bacteroides， Escherichia_Shigella ,Haemophilus , Eubacterium_nodatum_group， Collinsella， Enterococcus， Proteus， Alistipes， Klebsiella， Shuttleworthia， Faecalibacterium。 6.根据权利要求1所述的用途， 改善肠道环境是指改善了缺血性脑卒中患者的肠道环 境。 7.根据权利要求1所述的用途， 改善肠道环境是。

6、指阻止缺血性脑卒中患者肠道微生物 移位。 8.根据权利要求1所述的用途， 阻止缺血性脑卒中患者肠道微生物移位是指维持缺血 性脑卒中患者肠屏障功能的完整性。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 109010420 A 2 一种川芎和葛根药用组合物在制备改善肠道环境的食品或药 品中的用途 技术领域 0001 本发明涉及一种中药组合物的用途， 具体涉及川芎和葛根药用组合物在制备改善 肠道环境的食品或药品中的用途。 背景技术 0002 肠道中栖息着数量庞大、 种类繁多的微生物， 这些微生物与其所寄居的肠道环境 组成了肠道微生态系统。 肠道微生物是肠道微生态系统的重要组成部分， 人类在长期进化 过。

7、程中与肠道微生物形成了互利共生的关系。 肠道微生物可参与多种疾病如心脑血管系 统、 消化系统、 中枢神经系统、 免疫系统以及代谢性疾病的发生与发展1-7， 与健康密切相 关。 肠道微生物可在肠黏膜表面形成保护性的生物屏障以维持肠上皮结构和功能的完整 性， 并抑制病原菌的过度增殖和感染， 促进并维护免疫系统的正常运行8-10。 一旦受到宿主 自身疾病及外界环境变化的影响， 肠道微生物中共生菌、 益生菌、 致病菌、 条件致病菌的相 对数量和丰度可能会发生变化， 打破肠道微生物本来的平衡状态， 进而引发肠道菌群失调， 诱发或加速许多疾病的发生与发展11-13。 如消化系统疾病： IBD、 IBS等；。

8、 神经系统疾病： 孤 独症、 抑郁症等； 代谢系统疾病： 糖尿病、 肥胖等； 心脑血管系统疾病： 缺血性脑卒中等。 肠道 菌群失调可直接侵袭损伤肠道上皮细胞， 破坏肠道黏膜屏障， 增加肠黏膜通透性14； 肠道 菌群失调也会导致大量致病菌滋生， 使肠道上皮细胞受到各种有毒物质如内毒素、 肠毒素 等的侵害15。 因此， 维持肠道微生态系统的平衡对宿主的生理健康显得尤为重要。 0003 1、 针对上述缺点， 说明本发明的目的及能够达到的技术效果。 0004 中药是我国传统医学的重要组成部分， 中药用于预防和治疗疾病已经有几千年历 史。 中药最传统的给药方式为口服， 药物口服后在胃肠道内不可避免的与肠。

9、道微生物接触， 因此， 肠道微生物对中药的代谢转化具有非常重要的影响， 肠道微生物可将药物转化为代 谢产物， 起到 “增效” 或 “减毒” 的作用。 而中药口服后也在很大程度上影响了肠道微生物的 结构和组成。 例如， 中药能够保护胃肠道黏膜屏障功能， 促进益生菌的繁殖， 抑制有害菌的 生长， 对维持肠道微生态系统平衡起着关键作用16。 0005 中药葛根(Puerariae Lobatae Radix)药食同源， 在中国和日本有数千年的食用 历史， 有 “亚洲人参” 之美誉， 由葛根制的的葛粉被称之为 “长寿粉” ， 在日本被誉为 “皇室特 供食品” ， 可见葛根具有极高的食用和药用价值。 研。

10、究表明， 葛根不仅能调控肠道微生物代 谢碳水化合物、 脂类、 蛋白质的能力， 还能显著地增加乳杆菌和双歧杆菌等益生菌的数量， 提高肠道微生物的抗氧化性， 具有极好的改善肠道微生态的作用17。 中药川芎有活血行 气、 祛风止痛的功效。 研究表明， 川芎不仅可以活血化淤， 也能够通过其对内毒素的灭活作 用来防治肠道微生物失调及内毒素血症18。 因此， 本发明旨在开发一种能够改善肠道微生 态的肠内营养药用组合物。 本发明根据葛根、 川芎等中药的药理活性特点， 以中医药配伍理 论为依据， 结合肠道菌群16S rRNA基因测序和药效学研究， 公开一种改善肠道微生态的肠 内营养药用组合物。 该药物组合物可。

11、作为膳食添加剂补充益生元去有效改善正常生理条件 说 明 书 1/7 页 3 CN 109010420 A 3 下和疾病状态下的肠道微生态， 增加益生菌的种类和数量， 降低致病菌的种类和数量， 维持 肠道上皮完整性， 阻止肠道微生物及其代谢产物移位， 从而有效地发挥肠内营养的作用。 有 效的预防和治疗某些疾病如消化系统疾病： IBD、 IBS等； 神经系统疾病： 孤独症、 抑郁症等； 代谢系统疾病： 糖尿病、 肥胖等； 心脑血管系统疾病： 缺血性脑卒中等。 发明内容 0006 本发明涉及一种能够改善肠道微生态的肠内营养药用组合物。 该药物组合物可作 为益生元去有效改善正常生理条件下和疾病状态(如。

12、消化系统疾病： IBD、 IBS等； 神经系统 疾病： 孤独症、 抑郁症等； 代谢系统疾病： 糖尿病、 肥胖等； 心脑血管系统疾病： 缺血性脑卒中 等)下的肠道微生态， 增加益生菌的种类和数量， 降低致病菌的种类和数量， 维持肠道上皮 完整性， 阻止肠道微生物及其代谢产物移位， 从而有效地发挥肠内营养的作用。 该组合物主 要由以下原料组成： 川芎或川芎提取物与葛根或葛根提取物， 二者的重量配比范围为川芎 或川芎提取物1-500份、 葛根或葛根提取物1-1000份。 该药用组合物可以单独或与药用辅料 组合制成适合于口服的制剂形式。 如颗粒剂、 胶囊剂、 片剂、 滴丸剂、 液体制剂如口服液、 混 。

13、悬剂、 糖浆剂等以及缓释、 控释制剂等。 通过实验研究表明： 本发明提供的药用组合物一方 面可明显减少正常生理状态下的肠道微生物群的多样性， 改变肠道微生物的组成结构， 并 能够降低厚壁菌门(Firmicutes)与拟杆菌门(Bacteroidetes)的比例。 另一方面， 该药用组 合物能显著增加疾病模型(缺血性脑卒中)下益生菌的种类和数量， 降低致病菌的种类和数 量。 增加的益生菌主要包括： Alloprevotella ,Ruminococcaceae_UCG_005 , Ruminococcaceae_NK4A214_group,Ruminococcaceae_UCG_004 ,Osc。

14、illospira , Lachnospiraceae_NK4B4_group,Akkermansia and Megasphaera。 降低的致病菌主要包括： Bacteroides,Escherichia_Shigella,Haemophilus,Eubacterium_nodatum_group, Collinsella,Enterococcus,Proteus,Alistipes,Klebsiella,Shuttleworthia和 Faecalibacterium。 此外， 该药物组合物还可以通过增加疾病状态(缺血性脑卒中)下大鼠 脑与肠组织中紧密连结蛋白claudin-5和ZO-1。

15、的表达， 有效地维持了脑与肠组织紧密连接 的完整性， 从而能够逆转疾病状态(缺血性脑卒中)下血脑屏障和肠道屏障的破坏， 因此有 效阻止肠道微生物及其代谢产物移位。 因此本发明提供的药用组合物对正常生理状态下和 心脑血管疾病如(缺血性脑卒中)状态下的肠道微生态均具有很好的调节营养作用。 0007 本发明提供的药用组合物， 川芎提取物或川芎以川芎嗪计， 其含量不低于10。 0008 工艺： (水或乙醇提取) 0009 称取质量比例为1:1的葛根和川芎， 以每克生药加水10mL， 冷水浸泡1h后， 煎煮1h， 取滤液； 药渣再用10倍的水煎煮1h， 取滤液， 合并两次滤液； 浓缩。 0010 本发明。

16、经过对正常生理状态大鼠进行药物诱导(使用该药物组合物灌胃处理14 天)， 结合线栓法制备的大鼠右侧大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion， MCAO)模型及药效学实验验证， 结果表明， 本发明提供的药用组合物一方面可明显减少正常 生理状态下的肠道微生物群的多样性， 改变肠道微生物的组成结构， 并能够降低厚壁菌门 (Firmicutes)与拟杆菌门(Bacteroidetes)的比例。 另一方面， 该药用组合物能显著增加疾 病模型(缺血性脑卒中)下益生菌的种类和数量， 降低致病菌的种类和数量。 除此之外该药 物组合物还可以通过增加Claudin-5和ZO。

17、-1的表达， 有效地维持了紧密连接的完整性， 从而 说 明 书 2/7 页 4 CN 109010420 A 4 能够逆转缺血性脑卒中疾病状态下血脑屏障和肠道屏障的破坏并能够有效地阻止肠道微 生物及其代谢产物移位。 因此本发明提供的药用组合物对正常生理状态下和心脑血管疾病 如(缺血性脑卒中)状态下的肠道微生态均具有很好的调节作用。 0011 本发明一个方面提供了一种川芎和葛根药用组合物在制备改善肠道环境的食品 或药品中的用途； 所述川芎和葛根药用组合物为葛根和川芎的水提取物， 其中葛根和川芎 的水提取物中包含葛根素、 大豆苷、 川芎嗪和大豆苷元； 其中葛根素在药用组合物中的含量 为0.8mg/。

18、g以上， 大豆苷在药用组合物中的含量为0.2mg/g以上； 川芎嗪在药用组合物中的 含量为0.7mg/g以上； 大豆苷元含量在0.02mg/g以上。 0012 在本发明的技术方案中， 所述的川芎和葛根药用组合物通过以下方法制备， 称取 质量比例为1:1的葛根和川芎， 以每克生药加水10mL， 冷水浸泡1h后， 煎煮1h， 取滤液； 药渣 再用10倍的水煎煮1h， 取滤液， 合并两次滤液； 浓缩。 0013 在本发明的技术方案中， 改善肠道环境是指提改变肠道微生物的组成结构。 0014 在本发明的技术方案中， 改变肠道微生物的组成结构是指增加益生菌的种类和数 量， 降低致病菌或条件致病菌的种类和。

19、数量。 0015 在本发明的技术方案中， 所述的益生菌选自Alloprevotella， Ruminococcaceae_ UCG_005， Ruminococcaceae_NK4A214_group， Ruminococcaceae_UCG_004， Oscillospira， Lachnospiraceae_NK4B4_group， Akkermansia和Megasphaera， 致病菌选自厚壁菌门 (Firmicutes)， 拟杆菌门， Bacteroides， Escherichia_Shigella ,Haemophilus , Eubacterium_nodatum_group，。

20、 Collinsella， Enterococcus， Proteus， Alistipes， Klebsiella， Shuttleworthia， Faecalibacterium。 0016 在本发明的技术方案中， 改善肠道环境是指改善了缺血性脑卒中患者的肠道环 境。 0017 在本发明的技术方案中， 改善肠道环境是指阻止缺血性脑卒中患者肠道微生物移 位。 0018 在本发明的技术方案中， 阻止缺血性脑卒中患者肠道微生物移位是指维持缺血性 脑卒中患者肠屏障功能的完整性。 0019 有益效果 0020 采用川芎与葛根适宜配比的药用组合物无论对正常生理状态下的肠道微生态还 是缺血性脑卒中疾病。

21、状态下的肠道微生态均有较好的调节作用， 可以开发成为膳食添加剂 补充益生元达到肠内营养的作用。 附图说明 0021 图1： 川芎、 葛根药用组合物调节正常生理状态下的肠道微生态， 其中a为微生物在 门水平上的相对丰度， b为门水平上有差异的微生物， c为正常组与药物组物诱导组的生物 标记物 0022 图2： 川芎、 葛根药用组合物调节缺血性脑卒中疾病状态下的肠道微生态； 其中， a 为模型对照组， b为空白组， c为尼莫地平组， d为药物组和e为生理盐水组。 0023 a组各菌生物标记丰度从上至下为1Bacteroides， 2Escherichia_Shigella， 3Allobaculu。

22、m， 4Coprococcus_2， 5Ruminococcaceae_UCG_013， 6Subdoligranulum， 说 明 书 3/7 页 5 CN 109010420 A 5 7Turicibacter， 8Haemophilus， 9Paeniclostridium， 10Eubacterium_nodatum_group， 11Eubacterium_ruminantiumgroup， 12Bacteroides_pectinophilus_group， 13Paraprevotella， 14Faecalibaculum， 15Collinsella， 16Ruminiclo。

23、stridium_1， 17Family_Xlll_AD3011_Group， 18Eisenbergiella， 19Bifidobacterium， 20Enterococcus， 21Anaerofilum， 22Proteus， 23Coriobacteriaceae_UCG_002， 24Defluviitaleaceae_UCG_ 011， 25uncultured。 0024 b组各菌生物标记丰度从上至下为1Sutterella， 2Lachnospiraceae_NK4A136_ group， 3Parabacteroides， 4Intestinimonas， 5Eubact。

24、erium_coprostanoligenes_group， 6Lachnospiraceae_UCG_001， 7Eubacterium_xylanophilum_group， 8Butyrivibrio， 9Roseburia， 10Lachnoclostridium， 11Fusicatenibacter， 12Coprococcus_1， 13Oscillibacter， 14Tyzzerella， 15Acetatifactor， 16Mucispirillum， 17Anaeroplasma， 18Lachnospiraceae_FCS020_group， 19Ruminiclos。

25、tridium， 20Peptococcus， 21Butyricicoccus， 22Lachnospiraceae_ND3007_group， 23Eubacterium_ventriosum_ group 0025 c组各菌生物标记丰度从上至下为1Helicobacter， 2Rikenellaceae_RC9_gut_ group， 3uncultured_bacterium， 4Clostridium_sensu_stricto_1， 5Ruminoccaceae_UCG_ 010， 6Christensenellaceae_R_7_group， 7Ambiguous_taxa， 8。

26、uncultured_bacterium， 9uncultured， 10Butyricimonas， 11uncultured_bacterium， 12Ambiguous_taxa， 13Fusobacterium， 14Prevotellaceae_NK3B31_group， 15Epulopiscium， 16Eubacterium_ eligens_group， 17uncultured_rumen_bacterium， 18Gelria， 19Anaerostipes， 20Erysipelotrichaceae_UCG_004， 21Erysipelotrichaceae_UCG。

27、_003， 22Trichococcus， 23Papillibacter， 24Erysipelatoclostridium。 0026 d组各菌生物标记丰度从上至下为1Prevotella_9， 2Alloprevotella， 3Ruminococcaceae_UCG_005， 4Ruminococcaceae_NK4A214_group， 5uncultured_ Bacteroidales_bacterium， 6Ruminococcaceae_UCG_004， 7Oscillospira， 8Lachnospira， 9Lachnospiraceae_NK4B4_group， 10。

28、Dialister， 11Veillonella， 12Ruminococcus_gnavus_ group， 13Odoribacter， 14Anaerofustis， 15Akkermansia， 16Megasphaera， 17Ambiguous_ taxa。 0027 e组各菌生物标记丰度从上至下为1uncultured_bacterium， 2Alistipes， 3Prevotellaceae_UCG_001， 4Ruminococcaceae_UCG_014， 5Ruminococcus_1， 6Phascolarctobacterium， 7Ruminiclostridiu。

29、m_6， 8Klebsiella， 9Candidatus_ Saccharimonas， 10Ruminiclostridium_9， 11uncultured_bacterium， 12Shuttleworthia， 13Ambiguous_taxa， 14uncultrred， 15Candidatus_Arthromitus， 16Megamonas， 17Faecalibacterium， 18gut_metagenome， 19Ruminococcaceae_UCG_002， 20Psychrobacter。 0028 图3： Claudin-5在结肠中的表达； 0029 图4： 。

30、ZO-1在结肠中的表达； 0030 图5： Claudin-5在大脑中的表达； 0031 图6： ZO-1在大脑中的表达； 说 明 书 4/7 页 6 CN 109010420 A 6 0032 图7： 血清中LPS活性； 0033 图8： 血清中二胺氧化酶(DAO)活性； 0034 图9： 血清中D-乳酸盐的浓度。 具体实施方式 0035 提供下述实例是为了更好地进一步理解本发明， 并不局限于所述实施方式， 不对 本发明的内容和保护范围构成限制， 任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技 术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的方法， 均落在本发明的保护范围 之内。 0036。

31、 实施例1川芎、 葛根药用组合物的制备及质量控制 0037 称取葛根和川芎， 其中葛根和川芎的比例为1:1， 以每克生药加水10mL， 冷水浸泡 1h后， 煎煮1h， 取滤液。 药渣再用10倍的水煎煮1h,取滤液， 合并两次滤液。 浓缩至含葛根素 5mg/mL的葛根川芎合煎液。 置4冰箱保存备用。 给药剂量均按照葛根素50mg/kg。 本发明提 供的药用组合物主要含的成分有葛根素、 川芎嗪、 大豆苷、 大豆苷元。 通过HPLC检测其含量 及给药剂量如表1所示。 0038 表1、 川芎、 葛根药用组合物中主要成分的含量及给药剂量 0039 0040 实施例2川芎、 葛根药用组合物调节正常生理状态。

32、下的肠道微生态 0041 取至少10只健康雄性SD大鼠(体质量240-260g)， 灌胃给以实施例1所述给药剂量 给予该组合物14天， 之后采用腹部按摩法收集新鲜粪便。 采用PowerSoil DNA Isolation Kit(Mobio,美国)对粪便中的DNA进行提取， 通过Illumina Miseq平台对所有样本的16S rRNA基因的V4区进行测序。 并对测序结果进行生物信息学分析与挖掘。 结果表明， 如图1a, 1b所示， 川芎、 葛根药用组合物显著地增强了拟杆菌(Bacteroidetes)和柔膜菌门 (Tenericutes)的相对丰度， 并显著降低了厚壁菌(Firmicute。

33、s) 和脱铁杆菌 (Deferribacteres)的相对丰度。 如图1c所示， 川芎、 葛根药用组合物显著改变了肠道微生 物群的组成结构并降低了厚壁菌与拟杆菌的比例。 0042 实施例3川芎、 葛根药用组合物调节缺血性脑卒中疾病状态下的肠道微生态 0043 采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion， MCAO)模型用于模拟缺血性脑卒中疾病， 采用Longa评分法对其神经功能学进行 评分， 并结合全脑TTC染色对该模型成功与否进行评价。 取至少50只雄性SD大鼠(体质量 240-260g)， 随机分为空白(Control)， 模型对。

34、照组(MCAO)， 生理盐水组(Saline)， 实施例1药 物组(Decoction)和尼莫地平组(Nimodipine)。 其中空白的大鼠未受到任何干预， 只是灌胃 给以同体积的生理盐水。 模型对照组组， 大鼠缺血2小时， 再灌注24小时。 在剩余三组中， 分 说 明 书 5/7 页 7 CN 109010420 A 7 别在模型对照组建模后给大鼠灌胃生理盐水， 上述药物组合物(含50mg/kg葛根素)或尼莫 地平片剂(用生理盐水溶解， 阳性对照组， 190mg/kg)并持续14天。 同样收集新鲜粪便进行 16S rRNA基因测序。 如图2所示， 结果表明， 缺血性脑中风通过富集致病菌和机。

35、会致病菌引 发肠道微生物紊乱， 包括拟杆菌(Bacteroides)， 大肠志贺氏杆菌(Escherichia_ Shigella)， 嗜血杆菌(Haemophilus)， 纠缠真杆菌(Eubacterium_nodatum_group)， 柯林斯 氏菌(Collinsella)， 肠球菌(Enterococcus)， 变形杆菌(Proteus)， 另枝菌(Alistipes)， 克 雷伯氏菌(Klebsiella)， Shuttleworthia和Faecalibacterium。 而本发明提供的川芎、 葛根 药用组合物可以通过增加益生菌来重塑缺血性脑卒中状态下的肠道微生态， 这些益生菌包 。

36、括拟普雷沃菌(Alloprevotella)， 瘤胃菌(Ruminococcaceae)， 颤螺菌(Oscillospira)， 毛 螺旋菌(Lachnospiraceae_NK4B4_group)， 阿克曼菌(Akkermansia)和巨球型菌属 (Megasphaera)。 但是口服尼莫地平虽然能够缓解缺血性脑卒中的状态， 但是其使肠道中富 集了大量的致病菌， 加剧了肠道微生物群失调。 0044 实施例4川芎、 葛根药用组合物调节缺血性脑卒中疾病状态下的脑屏障和肠道屏 障 0045 采用试剂盒(参见表2)对结肠和脑组织中的紧密连接蛋白， 包括Claudin-5,ZO-1 的蛋白含量进行了测。

37、定。 如图3-6以及表3所示， 我们的结果表明， 在缺血性脑卒中疾病模型 下， Claudin-5,ZO-1的蛋白含量在结肠和脑组织中显著降低， 表明缺血性脑卒中不仅破坏 血脑屏障， 也破坏肠屏障。 阳性药物尼莫地平不会改善这种损伤， 然而本发明提供的川芎、 葛根药用组合物能够逆转这种损伤， 能够很好的维持脑屏障和肠屏障结构和功能的完整 性。 当肠屏障受到破坏时， 肠道微生物及其代谢产物可能会发生移位， 通过肠上皮进入血液 循环， 对机体造成损害。 因此我们进一步研究了肠道微生物移位情况。 0046 表2试剂盒的信息表 0047 0048 表3紧密连接蛋白在结肠和脑中的表达 说 明 书 6/7。

38、 页 8 CN 109010420 A 8 0049 0050 实施例5川芎、 葛根药用组合物阻止缺血性脑卒中疾病状态下肠道微生物移位 0051 采用试剂盒测定血清中肠道微生物移位的标记物， 主要包括脂多糖(LPS)、 二胺氧 化酶(DAO)、 D-乳酸盐。 如图7-9以及表4所示， 我们的结果表明， 在缺血性脑卒中疾病状态 下， DAO， LPS， D-乳酸盐显著增加， 表明肠道微生物和其代谢产物发生了移位。 阳性药物尼莫 地平， 加重了对肠屏障的损伤及肠道微生物移位， 引起大量内毒素入血。 而本发明提供的川 芎、 葛根药用组合物能够有效的维持肠屏障功能的完整性， 抑制肠道微生物和其代谢产物。

39、 的移位。 0052 表4肠道微生物移位标记物 0053 0054 注； 不同字母表示P0.05,具有统计学差异， 相同字母无差异。 说 明 书 7/7 页 9 CN 109010420 A 9 说 明 书 附 图 1/12 页 10 CN 109010420 A 10 图1 说 明 书 附 图 2/12 页 11 CN 109010420 A 11 说 明 书 附 图 3/12 页 12 CN 109010420 A 12 说 明 书 附 图 4/12 页 13 CN 109010420 A 13 说 明 书 附 图 5/12 页 14 CN 109010420 A 14 说 明 书 附 图 6/12 页 15 CN 109010420 A 15 图2 说 明 书 附 图 7/12 页 16 CN 109010420 A 16 图3 说 明 书 附 图 8/12 页 17 CN 109010420 A 17 图4 说 明 书 附 图 9/12 页 18 CN 109010420 A 18 图5 图6 说 明 书 附 图 10/12 页 19 CN 109010420 A 19 图7 图8 说 明 书 附 图 11/12 页 20 CN 109010420 A 20 图9 说 明 书 附 图 12/12 页 21 CN 109010420 A 21 。