本发明涉及含式（Ⅰ）的三环化合物的外用水液组合物或其药物学上可接受的盐，具体地说，本发明涉及外用水液组合物，其特征是它含有所说的三环化合物和一种水溶性加溶剂。本发明的组合物是作为医药用的。式（Ⅰ）的三环化合物如下：
式中每相邻的取代基对[R1和R2]、[R3和R4]、[R5和R6]分别代表：
a）两个相邻的氢原子;或
b）在其相连的碳原子之间形成第二个键
除上述定义外，R2可代表一烷基;
R7代表H、OH、被保护的羟基或O-烷基，或与R1一起代表＝O;
R8和R9分别代表H或OH;
R10代表H、烷基、一个或多个羟基取代的烷基、链烯基、一个或多个羟基取代的链烯基或＝O取代的烷基;
X代表O、（H、OH）、（H、H）或-CH2O-;
Y代表O、（H、OH）、（H、H）、N-NR11R12或N-OR13;
R11和R12分别代表H、烷基、芳基或甲苯磺酰基;
R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R22和R23分别代表H或烷基;
R20和R21分别代表O或分别代表（R20a，H）和（R21a，H）;R20a和R21a分别代表OH、O-烷基或OCH2OCH2CH2OCH3或R21a为一保护羟基;
另外，R20a和R21a一起在含氧环中可代表一氧原子;
N为1、2或3;
除上述定义外，Y、R10和R23与它们连接的碳原子一起可代表一五元或六元的含N-、S-或O的杂环，该杂环可以是饱和的或不饱和的，还可以是被选自烷基、羟基、一个或多个羟基取代的烷基、O-烷基、苄基和-CH2Se（C6H5）的一个或多个基团取代。
本发明中所采用的三环化合物（Ⅰ）和其药物学上可接受的盐具有明显的免疫抑制、抗微生物和其他药理活性，在防治组织或器官移植排外性、移植物-宿主疾病、各种自动免疫疾病和传染性疾病的价值是已知的（日本专利公开No.61-148181/1986和欧洲专利公开No.0323042）。
特别是FK 506（化学结构如下），是由Streptomyces（特别是Streptomyces tsukubaensis No.9993（FERM-BP 927））属产生FK 506的微生物经发酵而生产的，已被证明是有突出的免疫活性的，并在防治眼科疾病上也是有价值的。
[化学名：17-烯丙基-1，14-二氢-12-[2-（4-羟基-3-甲氧基环己基）-1-甲基乙烯基]-23，25-二甲氧基-13，19，21，27-四甲基-11，28-二氧杂-4-氮杂三环[22.3.1.04，9]二十八碳-18-烯-2，3，10，16-四酮]
在眼科临床使用本发明的三环化合物（Ⅰ）时，在口服、肌内、静脉或其他全身性途经给药时会诱发全身性副反应，所以在眼科领域内局部使用滴眼剂将能保证在较小计量时有预期的效果并可减小副作用。
但是本发明的三环化合物（Ⅰ）是易溶于有机溶剂和油类赋形剂而极难溶于水的，因此，为了在眼科领域内可以使用化合物（Ⅰ），只有象其他不溶性药物一样将化合物（Ⅰ）制成眼科油溶液或眼膏。
然而，尚且不谈三环化合物（Ⅰ）在眼内的渗透性，这种眼科油溶液或眼膏可以诱发暂时性的视力损害和不舒适。所以这些制剂在临床应用上并不象所希望的那样有用。
关于三环化合物（Ⅰ）的眼科应用，非常需要有改进的眼内转移动力学和没有上述缺点的眼科制剂。
本发明的发明人在有关技术上进行不艰苦的探索，发现了在三环化合物（Ⅰ）中加入水溶性加溶剂可以得到水液组合物，这样就可以保证三 环化合物（Ⅰ）甚至是在低剂量时有效地转移至体内，特别是转移至眼内，而不会引起上述的视觉损害和不适，并且其在眼内的转移速度是不低的，不象通常的滴眼剂能迅速地被眼泪冲洗掉。本发明的构思和研究发展就是基于上述发现的。
本发明涉及外用的水液组合物，其特征在于该组合物含三环化合物（Ⅰ）或其药物学上可接受的盐和一水溶性加溶剂。
现将说明化合物（Ⅰ）的具体实施例和本发明的最佳优选方案详细叙述如下。
说明书中所使用的“低级”一词是包括1至6的任何碳原子数，除非另外指明。
适合的“烷基”指直链或支链饱和脂肪烃基团，可包括低级烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、戊基、新戊基、己基等。
适合的“链烯基”指有一个双键的直接或支链不饱和脂肪烃基团，可包括低级链烯基如乙烯、丙烯、丁烯、甲基丙烯、戊烯、己烯等。
适合的“芳基”可包括苯基、甲苯基、二甲苯基、异丙苯基、2，4，6-三甲苯基、萘基等。
“被保护的羟基”中保护基团的适合例子可包括：
1-低级烷硫基低级烷基如低级烷硫甲基（例如甲硫甲基、乙硫甲基、丙硫甲基、丙异硫甲基、丁硫甲基、异丁硫甲基、己硫甲基等），比较好的是C1-C4烷硫甲基，最好的是甲硫甲基;
三取代甲硅烷基如三低级烷基甲硅烷基（例如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三丁基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、三叔丁基甲硅烷基等）;
低级烷基二芳基甲硅烷基（例如甲基二苯基甲硅烷基、乙基二苯基甲硅烷基、丙基二苯基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基等），较好的是三（C1-C4）烷基甲硅烷基和C1-C4烷基二苯基甲硅烷基，最好的是叔 丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基;以及
酰基如脂酰基、芳酰基和芳基取代的脂酰基，该酰基衍生自羧酸、磺酸或氨基甲酸。
脂酰基可包括低级烷酰基，它们还可有一个或多个适合的取代物，如羧基（例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基、羧乙酰基、羧丙酰基、羧丁酰基、羧己酰基等）、环状低级烷氧基低级烷酰基，它们还可含有一个或多个适合的取代物，如低级烷基（例如环丙氧基乙酰基、环丁氧基丙酰基、环庚氧基丁酰基、 氧基戊酰基、 氧基丙酰基、 氧基丁酰基、 氧基戊酰基、 氧基己酰基等）、樟脑磺酰基、具有一个或多个适合取代物的低级烷基氨基甲酰基（适合的取代物如羧基或被保护的羧基）例如羧基低级烷基氨基甲酰基（例如羧甲基氨基甲酰基、羧乙基氨基甲酰基、羧丙基氨基甲酰基、羧丁基氨基甲酰基、羧戊基氨基甲酰基、羧己基氨基甲酰基等）、被保护的羧基低级烷基氨基甲酰基如三低级烷基甲硅烷基低级烷氧基羰基低级烷基氨基甲酰基（例如三甲基甲硅烷基甲氧羰乙基氨基甲酰基、三甲基甲硅烷基乙氧羰丙基氨基甲酰基、三乙基甲硅烷乙氧羰丙基氨基甲酰基、叔丁基二甲基甲硅烷基乙氧羰丙基氨基甲酰基、三甲基甲硅烷基丙氧羰丁基氨基甲酰基等）、以及其他。
芳族酰基可包括可以有一个或多个如硝基的适合取代的芳酰基（例如苯甲酰基、甲苯甲酰基、二甲苯甲酰基、萘甲酰基、硝基苯甲酰基、二硝基苯甲酰基、硝基萘甲酰基等）、可以有一个或多个如囟素取代的芳基磺酰基（例如苯磺酰基、甲苯磺酰基、二甲苯磺酰基、萘磺酰基、氟苯磺酰基、氯苯磺酰基、溴苯磺酰基、碘苯磺酰基等），以及其他。
芳基取代的脂族酰基可包括可有一个或多个如低级烷氧基和三囟代低级烷基取代的芳基低级烷酰基（例如苯乙酰基、苯丙酰基、苯丁酰基、2-三氯甲基-2-甲氧基-2-苯乙酰基、2-乙基-2-三氟甲基-2-苯乙 酰基、2-三氟甲基-2-丙氧基-2-苯乙酰基等），以及其他。
在上述的酰基中，比较好的是可被羧基、环烷基上有两个（C1-C4）烷基的环（C5-C6）烷氧基（C1-C4）烷酰基、樟脑磺酰基、羧（C1-C4）烷基氨基甲酰基、三（C1-C4）烷基甲硅烷基（C1-C4）烷氧基羰基（C1-C4）烷基氨基甲酰基、有一个或两个硝基的苯甲酰基、囟素取代的苯磺酰基、有C1-C4烷氧基的苯基（C1-C4）烷酰基和三囟代（C1-C4）烷基。这些基团中最好的是乙酰基、羧丙酰基、 氧基乙酰基、樟脑磺酰基、苯甲酰基、硝基苯甲酰基、二硝基苯甲酰基、碘代苯磺酰基和2-三氟甲基-2-甲氧基-2-苯乙酰基。
适当的“五元或六元含N-、S-或O的杂环”可包括吡咯、四氢呋喃等。
化合物（Ⅰ）的药物学上可接受的盐是无毒性的盐，可为相应的与无机或有机碱形成的盐，如碱金属盐（例如钠盐、钾盐等）、碱土金属盐（例如钙盐、镁盐等）、铵盐和胺盐（例如三乙胺盐、N-苄基-N-甲胺盐等）。
化合物（Ⅰ）由于有不对称碳原子或双键可有Conformers（译注：围绕单键旋转形成的异构体）或一对或多对立体异构体，如光学和几何立体异构体。这些Conformers和异构体也在本发明的范围之内。
水溶性加溶剂最好是对三环化合物（Ⅰ）有加溶效应和对溶液有增稠效应的水溶性化合物，或是对三环化合物（Ⅰ）的吸收有促进效应的水溶性化合物。
有增稠效应的水溶性加溶剂能延长在结膜囊内的停留时间，因而有助于活性化合在眼内的渗透，这类水溶性加溶剂的优先选择的例子有水溶性纤维素聚合物（例如甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素等）、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮以及类似物。
在这些加溶剂中，水溶性纤维素聚合物是较优先选择的，羟丙基甲基纤维素是最优先选择的。
对三环化合物（Ⅰ）的吸收有促进效应的水溶性加溶剂包括水溶性二醇，特别是低分子量水溶性二醇（如乙二醇、二亚乙基二醇、三亚乙基二醇、亚丙基二醇等）。最好的这类加溶剂是亚丙基二醇。
有增稠效应的水溶性加溶剂和有吸收促进效应的水溶性加溶剂可以单独使用也可结合使用。
三环化合物（Ⅰ）在本发明水液组合物中的浓度不是关键性的，但可根据情况而选择，例如根据水溶性加溶剂的类型来选择。优先选择的浓度是0.001-1%（重量）的范围，较优选选择的是0.005-0.5%（重量）的范围。
水溶性加溶剂在本发明组合物中的浓度有赖于水溶性加溶剂的类型，但一般是0.01-20%（重量），最好是0.1-10%（重量）。
再者，根据制备目的组合物的方法、三环化合物（Ⅰ）的浓度和/或种类或水溶性加溶剂的浓度，本发明的水液组合物可以是悬浮液。水溶性加溶剂在悬浮液中可以起分散剂的作用。这样的悬浮液作为滴眼剂可望有持续的松弛和稳定性。
需要时，在本发明的水液组合物中可加入各种在液体制剂中常用的、特别是在滴眼剂中常用的添加剂，如象等渗剂（例如氯化钠等）、缓冲剂（例如硼酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等）、防腐剂（例如氯化苄铵、氯化苄甲乙氧铵、氯代丁醇等）、增稠剂（例如糖-乳糖、甘露糖醇、麦芽糖等、透明质酸或其盐-透明质酸钠、透明质酸钾、粘多糖-软骨素硫酸、聚丙烯酸钠、羧基乙烯基聚合物、交联聚丙烯酸盐等）
本发明的外用水液组合物可由下述步骤制备：用所说的水溶性加溶剂使三环化合物（Ⅰ）溶解，或用能溶解三环化合物（Ⅰ）的有机溶剂如乙醇将三环化合物（Ⅰ）溶于一有机溶剂，加入所说的水溶性加溶剂并 除去溶剂的步骤;按要求并以适合的量加入添加剂如等渗剂、缓冲剂、防腐剂的步骤和加入生理盐水或蒸馏水的步骤。
如果本发明的水液组合物是悬浮液，其制备可采用将水溶性加溶剂加入生理盐水或蒸馏水的步骤，需要时在所得到的溶液中加入如等渗剂、缓冲剂、防腐剂、增稠剂等;以及在所得到的溶液中加入三环化合物（Ⅰ）的步骤。水溶性加溶剂与三环化合物（Ⅰ）的适合的重量比可为0.01/1至100/1，优先选择的是0.1/1至50/1，较优选择的是0.5/1至5∶1。
效果
现将本发明的效果叙述如下：
试验样品
滴眼剂（Ⅰ）…
按实例4的方法制备
对照剂…FK506 油滴剂（0.01%）
在FK 506中加入橄榄油，搅拌溶解。
试验方法
每次试验以10ml滴眼剂滴注入8-10周龄的雄性SD大鼠（体重275-405g）的双眼内，共滴5次，每次间隔5分钟，一小时后，将大鼠放血致死，剥离双眼。用常用的酶免疫分析法（例如日本专利公开No.1-92659/1989所述的间接法）测定FK 506在每个分离的双眼的角膜和晶状体内的浓度。
结果示于表1和2中，所有数据均以平均±SEM表示。
试验结果
表1：FK506在角膜中的浓度
FK 506浓度（ng/g）
试样
1小时后
滴眼剂（1） 2218.8±470.1
对照 N.D.＊
＊…未检测到（检测极限：20ng/g）
表2：FK 506在晶状体内的浓度
FK 506浓度（ng/g）
试样
1小时后
滴眼剂（1） 2.8±0.7
对照 N.D.＊
＊…未检测到（检测极限：6ng/g）
很明显，从上面的结果可看出，本发明的水液组合物不仅有所希望有的外用水剂特性，还能高效率地渗透入体内，特别是渗入眼组织。因此，本发明的水液组合物特别适合于防治各种眼疾，如自动免疫疾病等（例如春季结膜炎、贝切特氏眼色素层炎综合症、角膜炎、疱疹角膜炎、圆锥角膜、营养障碍上皮角膜、角膜白、眼天疱疮、莫伦氏溃疡、巩膜炎和格雷夫斯氏眼病）以及角膜移植排斥。
水液组合物的上述剂量随病人的年令和条件是有不同的，可对每一条件或病案来选择有效剂量。
下述的实例将进一步对本发明进行解释
实例1
100ml组合物中含
FK506 0.01g
羟丙基甲基纤维素2906 1.00g
生理盐水 q.s.
将FK 506溶于适量当的乙醇，然后加入羟丙基甲基纤维素2906。搅拌后，减压除去乙醇，残渣用足够的生理盐水稀释至100ml，搅拌溶解固体，制成滴眼剂。
实例2
100ml组合物中含
FK 506 0.01g
亚丙基二醇 5.00g
生理食盐水 q.s.
将FK 506搅拌溶于亚丙基二醇，溶液用生理食盐水稀释至100ml，搅拌后制成滴眼剂。
实例3
100ml组合物中含
FK506 0.01g
羟丙基甲基纤维素2906 1.00g
亚丙基二醇 5.00ml
生理食盐水 q.s.
将FK506溶于适量乙醇，接着加入羟丙基甲基纤维2906，搅拌后减压除去乙醇，残渣用亚丙基二醇稀释，加足量的生理食盐水制成100ml，搅拌混合物，制成滴眼剂。
实例4
FK506 100mg
羟丙基甲基纤维素2906 350mg
磷酸氢二钠 18.4mg
磷酸二氢钠 1547mg
磷酸 0.32mg
氯化钠 228mg
氯化苄烷铵 20mg
蒸留水 q.s.
以磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸和蒸馏水制成磷酸缓冲液（pH4.5，100ml）。将氯化钠、氯化苄烷铵和羟丙基甲基纤维素2906溶于所说的磷酸缓冲液（95ml）后，在所得到的溶液中加入FK506。经充分搅拌后，用适量的磷酸缓冲液稀释所得到的悬浮液至100ml。彻底搅拌，制成滴眼剂。
实例5
100ml组合物中含
FK506 100mg
甲基纤维素 10mg
磷酸氢二钠 18.4mg
磷酸二氢钠 1547mg
磷酸 0.32mg
氯化钠 288mg
氯化苄烷铵 20mg
蒸馏水 q.s.
按与实例4类似的方法制备水悬浮液滴眼剂
实例6
100ml组合物中含
FK506 100mg
聚乙烯醇 1400mg
磷酸氢二钠 18.4mg
磷酸二氢钠 1547mg
磷酸 0.32mg
氯化钠 288mg
氯化苄烷铵 20mg
蒸馏水 q.s.
按与实例4类似的方法制成水悬浮液滴眼剂。