艾替开韦(Entecavir)，[1S-(1α,3α,4β)]-2-氨基-1,9-二 氢-9-[4-羟基-3-(羟甲基)-2-亚甲基环戊基]-6H-嘌呤-6-酮， 是用于治疗乙肝病毒感染的抗病毒剂，目前正在进行临床评价。
Zahler等人在美国专利5206244中公开了艾替开韦及其治疗乙肝 的应用。该专利公开的口服或非胃肠给药的有效抗病毒剂量为约1.0- 50mg/kg体重，该所需剂量可以适当的时间间隔每日给药数次。
Bisacchi等人在WO 98/09964中公开了改进的合成艾替开韦的方 法。
本发明涉及含有低剂量艾替开韦的药物组合物及这类低剂量组合 物用于安全有效治疗乙肝病毒感染的应用。
本发明还涉及用低剂量的艾替开韦与其他药物活性物质联合治疗 乙肝病毒感染的方法。适合该目的的其他物质包括其他抗病毒剂和/或 免疫调节剂。艾替开韦和一种或多种其他药物活性物质可结合在同一种 剂型内或者可以各自独立的剂型按照处方计划同时或顺序给药。
本发明还涉及含有低剂量药物活性物质的口服给药的药物组合 物。该组合物是通过使药物活性物质的颗粒粘着在载体基质的表面获得 的。使药物活性物质沉着在载体基质上的方法是为了使活性物质/载体 基质颗粒的聚集降低到最少。
本发明涉及含有约0.001mg-约25mg低剂量抗病毒剂艾替开韦的 药物组合物，该组合物每日给药一次用于治疗成人患者的乙肝病毒感 染。优选的药物组合物含有约0.01mg-约10mg的艾替开韦，最优选的 药物组合物含有约0.01-约5mg艾替开韦。并且，这类优选的和最优选 的药物组合物每日给药一次用于治疗成人患者的乙肝病毒感染。
术语成人患者被定义为年龄为约16岁或16岁以上并且体重等于或 高于50公斤的患者。含有上述范围低限量艾替开韦的药物组合物适于 对儿童患者或体重低于50公斤的患者给药。
用于每日给药的上述低剂量艾替开韦药物组合物还可不太经常性 地对某些患者给药。例如，对通过每日服用低剂量艾替开韦药物组合物 进行治疗而使他们的乙肝病毒感染得到控制的患者可施行维持治疗方 案以使其免受进一步的感染。这种维持治疗方案包括每日不足一次地服 用低剂量艾替开韦组合物。例如，每三或四天给药一次或者每周给药一 次就足矣。
本发明的低剂量艾替开韦药物组合物可配制成经任何适当途径给 药的形式。例如优选的口服给药组合物可以是片剂、胶囊、颗粒或粉末 形式，或者可以是酏剂、溶液或悬浮液形式。按照本领域熟知的方法， 低剂量艾替开韦药物组合物还可配制成非胃肠、直肠或经鼻腔给药的形 式。这类制剂可包括可药用赋形剂，所述赋形剂包括这类组合物中常用 的膨胀剂、润滑剂、崩解剂、粘合剂等。本发明还包括缓释制剂。
现在出人意料地发现，每日服用一次本发明的低剂量艾替开韦药物 组合物可有效地治疗乙肝病毒感染，而不会产生在美国专利5206244中 描述的高剂量方案给药带来的有害副作用。
本发明还涉及用上述的低剂量艾替开韦组合物联合一种或多种其 他药物活性物质治疗乙肝病毒感染的方法。适于该目的的其他药物活性 物质包括一种或多种抗病毒剂，例如地丹诺辛、拉米夫定、abacavir, adefovir,adefovir dipivoxil，泛昔洛韦，(2R,4R)-4-(2,6-二氨 基-9H-嘌呤-9-基)-2-羟甲基-1,3-二氧戊环(DPAD)、乙肝免疫调节蛋白 (Enzo Biochem的EHT 899)、emtricitabine、1-(2-脱氧-2-氟-β-D- 阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶(FMAU)、GLQ-223(化合物A,α-天花粉蛋 白)、epvudine(L-dT)、epcitabine(L-dC)、利巴韦林、tenofovir (PMPA)、2′,3′-二脱氧-2′,3′-二脱氧-β-L(-)-5-氟胞苷 [L(-)Fd4C]，以及其他氟代L-和D-核苷。适于该目的的药物活性物 质还包括一种或多种免疫调节剂，例如α-干扰素、β-干扰素、 pegylated干扰素、α-胸腺素和乙肝疫苗，例如HBV/MF59、Hepagene 和Theradigm-HBV。
当其他药物活性物质适于口服给药时，他们可与低剂量艾替开韦结 合形成单剂量的片剂或胶囊。如果一种或多种其他药物活性物质不能与 艾替开韦相容性地结合在同一种剂型中，例如，如果给药方式不同或者 如果给药频率不同，则一种或多种其他的药物活性物质可单独给药。一 种或多种其他活性物质的给药量是其单独治疗的常用量或者由治疗的 医师来决定减少用量。独立的剂型形式可按照处方计划同时或顺序给 药。
本发明还包括用上述低剂量艾替开韦组合物治疗并发感染患者的 方法。并发感染患者是除感染乙肝病毒外，还患有其他病毒性或非病毒 性疾病的感染者。尤其是，这类治疗方法可用于并发感染丙型肝炎或HIV 的乙肝患者。这种并发感染患者优选使用上述的低剂量艾替开韦组合物 与一种或多种上述的其他药物活性物质联合治疗。例如并发乙肝和丙肝 的患者除使用利巴韦林和干扰素进行治疗外，还应使用低剂量艾替开韦 组合物进行治疗。
另一方面，本发明是含量低于或等于约10mg艾替开韦的药物组合 物，尤其是片剂和胶囊的制备方法。这类组合物通过简单地将活性物质 与赋形剂混合不能制成内容物均匀良好的制剂。传统的制粒方法也不适 于如此低剂量的活性产品。
含有约0.001mg-约10mg艾替开韦的片剂和胶囊制剂可按照下述 方法进行制备，以确保产品的高效力和良好的均匀性。首先将艾替开韦 沉着到载体基质的表面上来制备组合物。该步骤通过下列操作完成：形 成艾替开韦和粘合性物质的溶液，然后在载体基质颗粒保持运动的同时 以喷雾或液流的方式应用该溶液。控制条件以使颗粒的聚集降到最低。 随后，从载体表面除去溶剂，剩下粘着在载体基质表面的艾替开韦。这 防止了艾替开韦与基质分离并在随后的操作中使艾替开韦的损失降到 最低。
干燥后，将艾替开韦包衣的载体基质颗粒与组合物中包含的任何其 他成分，例如崩解剂和/或润滑剂混合。然后将得到的粉末压成片或填 无到胶囊中。
在喷雾步骤期间，通过机械搅拌或气流搅拌使载体基质颗粒保持运 动。在机械搅拌方法中，将载体基质放入机械(高剪切)搅拌机中搅拌。 将含艾替开韦和粘合物质的溶液以控制的速率在雾化压力(0-2巴)下 喷雾到载体基质颗粒上。为使艾替开韦最大量地沉着到载体上，调整喷 雾装置的位置以确保围绕着载体进行喷雾。控制沉着的速率和喷雾方式 以使颗粒的聚集降到最低。一旦沉着上含艾替开韦的溶液，将湿的艾替 开韦/载体基质颗粒转移到干燥器中，盘式干燥器或流化床干燥器都适 用。在升高的温度下除去溶剂。当溶剂是水或调节过pH的水时，适合 的温度为约50℃-约80℃。
在气流搅拌方法中，将载体基质放入底部带有细孔筛的筒中。调节 进入的气流以使基质颗粒的运动保持恒定和流动。平衡载体物质使其达 到约25℃-约80℃。将含艾替开韦和粘合性物质的溶液以控制速率在 上述雾化压力下喷雾到载体基质颗粒上。再有，调整喷雾装置的位置以 确保围绕着载体进行喷雾，并控制沉着的速率以使颗粒的聚集降到最 低。一旦沉着上艾替开韦溶液，将温度升高以除去溶剂。当溶剂是水或 调节过pH的水时，适合的温度为约50℃-约80℃。在气流搅拌方法中， 将艾替开韦沉着在载体基质上和除去溶剂的两步操作可在同一装置中 进行，但在机械搅拌方法中，则需要两种装置。
上述方法还具有减少设备环境中操作人员与艾替开韦的接触。
虽然上面的方法描述的是含约0.005mg-约10mg艾替开韦的药物 组合物的制备，但它们也可用于制备含有低剂量任何可溶性药物活性物 质的药物组合物。
上述方法中的优选溶剂是水或调节过pH的水。可通过加入酸，例 如盐酸降低水的pH来提高艾替开韦在水中的溶解度。
粘合性物质优选是具有高稠度的聚合物。适合的物质包括聚维酮、 甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基 纤维素、明胶、瓜尔胶和黄原胶，聚维酮是优选的。终组合物中粘合性 物质的含量优选为组合物总重的约1％-约10％(重量)。
载体基质是易于被喷雾包衣并且不易聚集的可药用的物质。适合的 物质包括微晶纤维素、磷酸钙、糊精、葡萄糖、dextrates、甘露醇、 山梨醇和蔗糖，微晶纤维素是优选的。终组合物中载体物质的含量优选 为组合物总重的约80％-约95％(重量)。
终组合物中包括的崩解剂含量优选为组合物总重的约1％-约7 ％。适合的崩解剂包括交联聚维酮、交联羧甲基纤维素、淀粉乙醇酸钠、 预明胶化淀粉和玉米淀粉，交联聚维酮是优选的。
终组合物中包括的润滑剂含量优选为组合物总重的约0.1％-约5 ％。适合的崩解剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂基富马酸钠和月桂基硫 酸钠，硬脂酸镁是优选的。
所得的片剂或胶囊可以是膜包衣的，以便于服用。用于膜包衣的适 合物质是聚合的包衣剂、色素、增塑剂、增溶剂等。适合的包衣剂包括 羟丙甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素邻苯 二甲酸酯等。膜包衣组合物中还可包含作为增塑剂的聚乙二醇。膜包衣 组合物中也可使用其他的增塑剂，例如柠檬酸二乙酯和柠檬酸三乙酯。 适宜的增溶剂包括聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯，尤其是聚山梨醇酯80。 适宜的色素包括二氧化钛和各种氧化铁。
将包衣组合物中的成分分散在适宜的溶剂，优选水中。包衣组合物 可采用常规锅包衣或喷雾包衣技木用于片剂或胶囊。
下列实施例说明本发明的低剂量艾替开韦组合物。
实施例1
采用上述方法制备10微克艾替开韦片剂。 成分 量％(重量/重量) 量/片 艾替开韦 0.01 0.01mg 微晶纤维素，NF 93.24 93.24mg 交联聚维酮，NF 4.00 4.00mg 聚维酮，USP 2.50 2.50mg 硬脂酸镁，NF 0.25 0.25mg 纯水，USP* 适量 —— 总计 100.00 100.00mg
*通过干燥除去。
实施例2
采用上述方法制备10毫克艾替开韦胶囊。 成分 量％(重量/重量) 量/枚 艾替开韦 10.00 10.00mg 微晶纤维素，NF 82.03 82.03mg 交联聚维酮，NF 4.00 4.00mg 聚维酮，USP 2.50 2.50mg 硬脂酸镁，NF 0.25 0.25mg 盐酸 1.22 1.22mg 纯水，USP* 适量 —— 总计 100.00 100.00mg
胶囊壳 ——
*通过干燥除去。
实施例3
采用上述方法制备50微克艾替开韦胶囊。 成分 量％(重量/重量) 量/枚 艾替开韦 0.05 0.05mg 磷酸二钙，NF 93.20 93.20mg 交联聚维酮，NF 4.00 4.00mg 羟丙基纤维素，NF 2.50 2.50mg 硬脂酸镁，NF 0.25 0.25mg 纯水，USP* 适量 —— 总计 100.00 100.00mg
胶囊壳 ——
*通过干燥除去。
实施例4
采用上述方法制备1毫克艾替开韦片剂。 成分 量％(重量/重量) 量/片 艾替开韦 1.00 1.00mg 甘露醇，NF 90.00 90.00mg 交联羧甲基纤维素钠，NF 4.00 4.00mg 甲基纤维素，NF 2.50 2.50mg 硬脂酸，NF 2.50 0.25mg 纯水，USP* 适量 —— 总计 100.00 100.00mg
*通过干燥除去。
实施例5
对实施例1的含0.01mg艾替开韦的100mg片剂和实施例4的含 1.0mg艾替开韦的100mg片剂采用常规锅包衣或喷雾包衣技术用下面列 出的组合物进行膜包衣。 成分 量％(重量/重量) 量/片1 Opadry 1-10 1-10mg 增塑剂2 0-10 0-10mg 纯水，USP* 适量 _—— *通过干燥除去。 Opadry是市售的，含有羟丙甲基纤维素、二氧化钛、聚乙二醇、聚山 梨醇酯80、合成氧化铁黄和合成氧化铁红。 1假设以片重为100mg进行计算。 2适宜的增塑剂是柠檬酸二乙酯和柠檬酸三乙酯。
实施例6
对慢性乙肝病毒感染的人类患者给予28天艾替开韦，以随机、双盲、 安慰剂对照、剂量调整试验方式研究艾替开韦的安全性和抗病毒活性。 在所有试验剂量下，艾替开韦都显示出有效的抗病毒活性。每天分别服 用一次剂量为0.05、0.1、0.5和1.0mg艾替开韦药剂，第28天时血液 中的乙肝病毒DNA水平的平均对数减少分别为2.21,2.25,2.81和 2.42。艾替开韦易于为患者耐受。