技术领域
本发明涉及一种中药新剂型，具体涉及传统中药升血小板片及其制备方法和质量控制技 术。
背景技术
升血小板胶囊是国家食品药品监督管理局局颁国家中成药标准汇编·中成药地方标准上 升国家标准部分内科气血津液分册收载品种，胶囊剂在生产中受囊壳质量影响较大；装量 差异较片剂难以控制；更重要的是质量控制指标低，原工艺甘草等水提取含多糖等易吸潮成 分，导致贮存过程中质量不够稳定易吸潮而变质。本发明是以新剂型、新制备工艺、新质量 标准对该品种进行研发，选择生产周期短，操作简便，干燥速度快，药物受湿热影响小，有 利于提高产品质量的薄膜衣片；而且片剂的片重差异容易控制，外型美观，患者易于服用和 携带。
发明内容
本发明的目的是对中药升血小板胶囊进行新剂型与新工艺研究，提供升血小板片及其制 备方法和质量控制技术。
本发明的技术方案如下：
升血小板片，原料药由青黛、连翘、仙鹤草、牡丹皮、甘草组成，其特征在于：
(1)配方重量比例为：
青黛167g 连翘500g 仙鹤草500g
牡丹皮833g 甘草250g
(2)辅料包括：
糊精、硫酸钙、羧甲基淀粉钠、淀粉、硫酸钙、微晶纤维素、交联聚维酮等。
所述的升血小板片的制备方法，其特征在于：
制备方法①：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、牡丹皮用乙醇提取，合并乙醇 提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成稠膏；连翘用水浸泡3～6小时，水蒸气蒸馏法提取 挥发油，挥发油另器贮存，水煎液留用。前述药渣与甘草加水煎提取，煎液与上述留用之水 煎液合并，滤过，浓缩成稠膏，与前述醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，50～70℃烘干， 粉碎成细粉，加入糊精、硫酸钙、羧甲基淀粉钠混匀，以2％羟丙基甲基纤维素(HPMC) 的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包 薄膜衣，即得。
制备方法②：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草用乙醇提取，合并乙醇提取液， 滤过，回收乙醇并减压浓缩成稠膏；连翘、牡丹皮用水浸泡3～6小时，水蒸气蒸馏法提取挥 发油6～8小时，挥发油另器贮存，水煎液留用；药渣与甘草加水煎提取，水煎液与上述留用 之水煎液合并，滤过，浓缩成稠膏，与前述醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，50-60℃ 烘干，粉碎成细粉，加入淀粉、硫酸钙、羧甲基淀粉钠混匀，以5％聚维酮K30的溶液制软 材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包薄膜衣，即 得。
制备方法③：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、甘草用乙醇提取，合并乙醇提 取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成稠膏；牡丹皮、连翘用水浸泡3～5小时，水蒸气蒸馏法 提取挥发油6～8小时，挥发油另器贮存，水煎液留用；药渣加水煎提取，水煎液与上述留用 之水煎液合并，滤过，浓缩成稠膏，与前述醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，50-60℃ 烘干，粉碎成细粉，加入淀粉、硫酸钙、微晶纤维素、交联聚维酮混匀，以5％聚维酮K30 的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包 薄膜衣，即得。
所述的制备方法，其特征在于：
制备方法①具体步骤为：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、牡丹皮以5倍量 80％乙醇提取二次，每次2小时，合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对 密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏；连翘用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时， 挥发油另器贮存，水煎液留用。药渣与甘草加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二 次水煎液与上述水煎液合并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，与上述 醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入糊精、硫酸钙、羧甲基 淀粉钠混匀，以2％羟丙基甲基纤维素(HPMC)的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒， 加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包薄膜衣，即得。
制备方法②具体步骤为：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草以5倍量65％乙醇 提取二次，每次2小时，合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对密度为 1.25～1.30(60℃)的稠膏；连翘、牡丹皮用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时， 挥发油另器贮存，水煎液留用；药渣与甘草加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二 次水煎液与上述留用之水煎液合并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏， 与上述醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入淀粉80g、硫酸 钙50g、羧甲基淀粉钠18g混匀，以5％聚维酮K30的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒， 加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包薄膜衣，即得。
制备方法③具体步骤为：以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、甘草以5倍量60％ 乙醇提取二次，每次2小时，合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对密度 为1.25～1.30(60℃)的稠膏；牡丹皮、连翘用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6 小时，挥发油另器贮存，水煎液留用；药渣加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二 次水煎液与上述留用之水煎液合并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏， 与上述醇提稠膏合并，加入青黛细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入淀粉60g、硫 酸钙30g、微晶纤维素30g、30g交联聚维酮15g混匀，以5％聚维酮K30的溶液制软材， 制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油，混匀，压片，包薄膜衣，即得。 升血小板片的质量控制方法，其特征在于通过以下步骤进行鉴别与测定：
(1)定性鉴别
A、取升血小板片5片，除去包衣，研细，取约0.1g，加三氯甲烷5ml充分搅拌，滤过， 作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含1mg的混合溶液， 作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种 溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5∶4∶1)为展开剂，展 开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
B、取升血小板片10片，除去包衣，研细，加甲醇60ml，加热回流40分钟，放冷，滤 过，滤液浓缩至约3ml，加入D101大孔树脂柱(内径1.5cm，30ml湿法装柱)上，用30％ 乙醇溶液100ml洗脱，弃去洗液，再用60％乙醇溶液150ml洗胶，收集洗脱液，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取 上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸(35∶5∶2) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
C、取升血小板片5片，除去包衣，研细，称取约1g，加乙醚10ml，密塞，振摇10分 钟，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加 丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000版一部附 录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙 酸乙酯(3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，热风吹 至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。
(2)定量测定
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：乙腈-水(52∶48) 为流动相；检测波长为292nm。理论板数按靛玉红峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备：精密称取靛玉红对照品适量，加丙酮制成每1ml含20μg的溶液， 即得。
供试品溶液的制备：取重量差异项下样品，除去包衣，研细，取约0.6g，精密称定，加 中性氧化铝10g，混匀，置索氏提取器中，加三氯甲烷100ml，回流提取10h，回收三氯甲 烷，残渣加丙酮溶解并稀释至25ml量瓶中，摇匀，滤过，即得。
测定法：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即 得。
升血小板片每片含青黛以靛玉红(C16H10N2O2)计，不得少于0.30mg。
本发明研究的升血小板片，具有清热解毒，凉血止血，散瘀消斑之功效。用于原发性血 小板减少性紫癜及肿瘤放疗、化疗所致血小板减少的治疗。症见：全身瘀点或瘀斑，发热烦 渴，小便短赤，大便秘结，或见鼻衄，齿衄，舌红苔黄，脉滑数或弦数。采用提高产品质量 的薄膜衣片，片剂的片重差异容易控制，外型美观，患者易于服用和携带。
具体实施方式
实施例1：
(1)处方：青黛167g 连翘500g 仙鹤草500g
牡丹皮833g 甘草250g
糊精40g 硫酸钙40g 羧甲基淀粉钠20g
以上制成1000片
(2)制法：
以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、牡丹皮以5倍量80％乙醇提取二次，每次2 小时，合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃) 的稠膏；连翘用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油另器贮存，水煎液 留用。药渣与甘草加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二次水煎液与上述水煎液合 并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，与上述醇提稠膏合并，加入青黛 细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入糊精40g、硫酸钙40g、羧甲基淀粉钠20g混匀， 以2％羟丙基甲基纤维素(HPMC)的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁， 喷入上述挥发油，混匀，压制成1000片，包薄膜衣，即得。
本发明中“倍量”一词的定义为：中药材重量与提取用液体的体积比，单位为：g/ml。
(3)提取溶媒用量考察
①评价指标——正丁醇提取物重
连翘主要含有挥发性成分、烃类、醛酮类、苯乙醇苷类、木脂素类、三萜类、及含黄 酮类，如芦丁(Rutin，芸香苷)等；甘草主要含有三萜类化合物、黄酮类化合物。由于成 分复杂难以以单一成分来表示药材提取效果，由于这些成分均可以用正丁醇提取，故评价升 血小板片提取效果的评价指标选择正丁醇提取物重较为适合。
②正丁醇提取物重测定方法
取连翘(水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时)25g、甘草12.5g加水煎煮二次，每次1.5 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至30ml，用水饱和正丁醇提取4次，每次20ml，静置， 分取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，静置，分取正丁醇液，置已恒 重的蒸发皿中水浴蒸干，置105℃干燥箱中干燥3小时，取出，置入干燥器中冷却0.5小时， 取出，迅速称重，计算正丁醇提取物重。
③因素水平的确定
我们选取3个水平，具体安排见因素水平表：
表1溶媒用量试验因素水平表 水平 溶媒用量(倍) 1 2 3 4 6 8
按因素水平表和评价指标确定的方案操作，分别测定出膏率、正丁醇提取物重。结果见 表：
表2提取溶媒用量考察结果(n＝2) 溶媒倍数(倍) 药材总量(g) 正丁醇提取物重(g) 4 6 8 37.5 37.5 37.5 0.47 0.63 0.67
结果表明：加6、8倍量水其正丁醇提取物重差别不大，故从生产实际考虑，选择加6 倍量水煎煮二次，每次1.5小时。
④放大验证试验
取连翘125g、甘草62.5g按选定的提取溶媒用量加水6倍量水煎煮二次，合并煎液，滤 过，取五分之一体积量滤液浓缩至30ml，用水饱和正丁醇提取4次，每次20ml，静置，分 取正丁醇液，再用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，静置，分取正丁醇液，置已恒重 的蒸发皿中水浴蒸干，置105℃干燥箱中干燥3小时，取出，置入干燥器中冷却0.5小时， 取出，迅速称重，计算得率，计算总正丁醇提取物重。验证结果见表：
表3放大验证试验结果 序号 药材总量(g) 总正丁醇提取物重 (g) 1 2 3 187.5 187.5 187.5 0.62×5＝3.10 0.64×5＝3.20 0.59×5＝2.95
*注：总正丁醇提取物重(g)＝5×正丁醇提取物重
结果表明：验证实验的结果同筛选的提取溶媒用量的结果是相吻合的，说明该工艺稳定 可行。
实施例2：
(1)处方：青黛167g 连翘500g 仙鹤草500g
牡丹皮833g 甘草250g
淀粉80g 硫酸钙50g 羧甲基淀粉钠18g
以上制成1000片
(2)制法：
以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草以5倍量65％乙醇提取二次，每次2小时， 合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏； 连翘、牡丹皮用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油另器贮存，水煎液 留用；药渣与甘草加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二次水煎液与上述水煎液合 并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，与上述醇提稠膏合并，加入青黛 细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入淀粉80g、硫酸钙50g、羧甲基淀粉钠18g混匀， 以5％聚维酮K30的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁，喷入上述挥发油， 混匀，压片，包薄膜衣，即得。
实施例3：
(1)处方：青黛167g 连翘500g 仙鹤草500g
牡丹皮833g 甘草250g
淀粉60g 硫酸钙30g 微晶纤维素30g 交联聚维酮15g
以上制成1000片
(2)制法：
以上五味药材，取青黛研成细粉；仙鹤草、甘草以5倍量60％乙醇提取二次，每次2 小时，合并二次乙醇提取液，滤过，回收乙醇并减压浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃) 的稠膏；牡丹皮、连翘用水浸泡4小时，水蒸气蒸馏法提取挥发油6小时，挥发油另器贮存， 水煎液留用；药渣加6倍量水煎提取2次，每次煎煮1.5小时，二次水煎液与上述水煎液合 并，滤过，浓缩成相对密度为1.25～1.30(60℃)的稠膏，与上述醇提稠膏合并，加入青黛 细粉，混匀，60℃烘干，粉碎成细粉，加入淀粉60g、硫酸钙30g、微晶纤维素30g、交联 聚维酮15g混匀，以5％聚维酮K30的溶液制软材，制成颗粒，烘干，整粒，加入硬脂酸镁， 喷入上述挥发油，混匀，压片，包薄膜衣，即得。
质量控制
【性状】升血小板片为薄膜衣片，除去薄膜衣后呈蓝褐色或蓝棕色；微有草腥气，味微 苦而略甜。
【鉴别】(1)取升血小板片5片，除去包衣，研细，取约0.1g，加三氯甲烷5ml充分搅 拌，滤过，作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含1mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验， 吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-三氯甲烷-丙酮(5∶4∶1) 为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的斑点。
(2)取升血小板片10片，除去包衣，研细，加甲醇60ml，加热回流40分钟，放冷，滤 过，滤液浓缩至约3ml，加入D101大孔树脂柱(内径1.5cm，30ml湿法装柱)上，用30％ 乙醇溶液100ml洗脱，弃去洗液，再用60％乙醇溶液150ml洗胶，收集洗脱液，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取 上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸(35∶5∶2) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取升血小板片5片，除去包衣，研细，称取约1g，加乙醚10ml，密塞，振摇10分 钟，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加 丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000版一部附 录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙 酸乙酯(3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，热风吹 至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。
【检查】应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录ID)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：乙腈-水(52∶48) 为流动相；检测波长为292nm。理论板数按靛玉红峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备精密称取靛玉红对照品适量，加丙酮制成每1ml含20μg的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取重量差异项下样品，除去包衣，研细，取约0.6g，精密称定，加 中性氧化铝10g，混匀，置索氏提取器中，加三氯甲烷100ml，回流提取10h，回收三氯甲 烷，残渣加丙酮溶解并稀释至25ml量瓶中，摇匀，滤过，即得。
测定法分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即 得。
升血小板片每片含青黛以靛玉红(C16H10N2O2)计，不得少于0.30mg。
【功能主治】清热解毒，凉血止血，散瘀消斑。用于原发性血小板减少性紫癜。症见： 全身瘀点或瘀斑，发热烦渴，小便短赤，大便秘结，或见鼻衄，齿衄，舌红苔黄，脉滑数或 弦数。
【用法用量】口服，一次4片，一日3次。
【禁忌】孕妇忌用
【注意事项】(1)骨髓巨核细胞减少型的血小板减少症及白细胞减少者慎用。
(2)定期复查血象。