技术领域
本发明涉及一种保肝护肝及调节血脂的保健食品，尤其是关于一种以中药 药物为原料的保肝护肝及调节血脂的保健食品及其制备方法。
背景技术
随着我国经济的迅速发展，国民生活水平的提高，饮食结构的调整，过量 饮酒和因为食物中过量蛋白、脂类、糖类摄入带来的疾病和潜在危害越来越 严重，如：酒精肝、脂肪肝、药物肝等。这些疾病的患者和相关的亚健康人 群越来越多，据统计，脂肪肝发病率已经达到10％，酒精肝发病率已经达到 1.92％，高血脂则是3.84％，因为酒精、药物、环境污染等因素引起的对肝脏 的化学性肝损伤和高血脂成为妨碍人们身体健康的一大危害。
虽然也有一些保肝护肝的保健食品以及一些治疗肝炎的药物，但是这些保 健食品及药物存在着许多不足。它们不是对肝脏的化学性肝损伤的保健功能 不强，就是没有调节血脂的保健功能，而药物并不适用于非肝炎患者长期服 用的情况，不能适用于长期服用。例如中国专利CN1243743(2000年)公开 的一种治疗慢性肝病的药物及其制备方法，它是治疗肝纤维化效果较好的中 药新药，但是由于是药物，其中的组分含量不适用于人们保健需要的长期服 用。所有这些难以满足人们身体健康的保健需要。结合保肝护肝与调节血脂 两种保健功能的保健食品的开发十分迫切。
发明内容
本发明提供一种保肝护肝及调节血脂的保健食品及其制备方法。
本发明是根据传统中医药理论和保健养生理论提出的保健食品，是以丹 参，桃仁、绞股兰，发酵虫草菌粉为有效成分的原料，再配之以辅料壳聚糖、 淀粉和糊精组成。
本发明保健食品组分及其重量份含量如下： 组分 丹参 桃仁 绞股兰 发酵虫草菌粉 壳聚糖 淀粉 糊精 重量份 6-10 1-3 4-8 1-3 0.02-0.06 0.8-2 0.5-1.5
本发明保健食品的最佳重量份含量是： 组分 丹参 桃仁 绞股兰 发酵虫草菌粉 壳聚糖 淀粉 糊精 重量份 8 2 6 2 0.05 0.9 0.6
配方中的发酵虫草菌粉、丹参、绞股蓝和桃仁经现代药理和临床研究表明， 均具有降血脂和提高肝脏SOD含量的作用，适宜作为保健调养食品长期服 用，起到对化学性肝损伤有辅助保护作用和调节血脂的保健功能。以下按保 健功能分类分别阐述本发明保健食品的配方依据。
对化学性肝损伤有辅助保护作用的配方依据：①发酵虫草菌粉系由本发明 人从天然冬虫夏草(Cordyceps Sinensis(Berk)Sace)中分离所得的虫草菌蝙蝠 蛾拟青霉通过微生物工程技术进行纯种培养，繁殖菌丝，加工制得，与天然 冬虫夏草主要成分基本相同，都含有粗蛋白、氨基酸、腺嘌呤、腺嘌呤核苷 等成分。此外，还含有钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌、磷、硒等微量元 素及维生素B1、B2、E等。有关研究表明，发酵虫草菌粉能提高小鼠肝组织SOD 的含量。②丹参对四氯化碳所致肝损伤有明显的保护作用，能减少血清及肝 组织SOD活力的下降；还具有抗脂质过氧化和保护肝细胞的作用。③绞股蓝 能明显降低大鼠肝脏过氧化脂质含量，增强细胞SOD活力。④桃仁对肝脏表 面微循环有一定的改善作用。综上所述，本配方应具有对化学性肝损伤有辅 助保护作用的保健功能。
调节血脂的配方依据：①发酵虫草菌粉可显著降低高血脂症小鼠血清胆固 醇和甘油三酯含量。②丹参具有降血脂作用，可降低家兔和肝中血清总胆固 醇、甘油三酯和低密度脂蛋白。③绞股蓝可降低高脂血症患者总胆固醇、甘 油三酯、低密度脂蛋白。综上所述，本配方应具有调节血脂的保健功能。
中医理论认为，脂肪肝为肝经湿热蕴结，肝胆疏泄失调致使痰湿内生，气 滞血瘀；瘀久化热致脾胃，痰热壅盛；久而伤胃及肾，引起肝肾阴亏。酒精 性肝损伤为湿热酒毒内蕴致肝失条达，脾失健运，痰湿瘀结，阻于肝络而成。 宜用疏肝理气，活血化瘀，补气益血，化痰散结之法。
本发明是依照上述中医辨证治则而进行组方，以丹参活血祛痰为君，《本 经》曰：“丹参主心腹邪气，肠鸣丝丝如走水，寒热积聚，破癓除瘕，止烦满， 益气”。冬虫夏草具补虚损，益精气作用，因脂肪肝、酒精性肝损伤同为气阴 二虚、肝脾肾三脏不足所致，肝肾同源，肾为之本，故冬虫夏草补肾益精而 治本(本发明以成分及作用相近的虫草菌粉代之)；桃仁“主瘀血，血闭，癓瘕” (《本经》)，助丹参活血化瘀，与冬虫夏草共为臣；绞股蓝味苦，性寒，清热 解毒，以解未净之热毒、是为佐。诸味配伍，共凑活血祛瘀，益精养肝之功。
本发明的配方组分，其剂量是以传统经验方和配方中各组分现代药理及临 床研究为依据，又参考治疗老年病及抗衰老健身的用量，通过多次组方试验， 综合评价而定，如下表1所示有效组分的剂量。
表1配方中有效组分的用量参照值及综合评定的剂量
显然，配方中有效组分剂量均以保健强身为目的，明显低于药物治疗用 量。
配方中的壳聚糖为一种天然高分子多糖，用于丹参、绞股蓝和桃仁水提 取后的精制除杂。壳聚糖本身也具有多方面的保健功能，可有效地降低肝脏 和血清中的胆固醇，强化肝脏功能，调节机体免疫系统等，因此在本发明成 品中含有一定量的壳聚糖对增强保健功能是非常有益的。
配方中的淀粉和糊精为压片制剂所需的辅料，均符合国家标准。
将上述各组分制成本发明保健食品的制备方法，包括下列步骤：
1.称取丹参、桃仁、绞股蓝，加入8-15倍重量的水，加热90-99℃呈亚 沸状态，动态循环水提取1.5-4小时，提取液，用60目滤布过滤，滤液在 50-80℃，真空度0.04-0.09Mpa下，进行真空浓缩，至浓缩液相对密度达 1.01-1.20(50℃)；
2.在浓缩液中加入浓度为500-1000ppm的壳聚糖，絮凝沉淀0.5-2小时；
3.絮凝沉淀液用200目微孔精密过滤，将精滤液在50-80℃，真空度 0.04-0.09Mpa下，进行真空浓缩，至浓缩液相对密度达1.05-1.30(50℃)；
4.称取发酵虫草菌粉，与浓缩液混合，喷雾干燥，得喷干粉，再在喷干 粉中加入淀粉和糊精，混合，制粒，干燥，得颗粒；
5.将颗粒压片，薄膜包衣，即得本发明成品片剂。
本发明的产品质量控制采用先进的高效液相色谱技术，对其功效成份进 行监控定量分析，如丹参素含量约为2.1mg/g，腺苷含量约为0.71g/kg，多糖 (以葡聚糖计)含量约为20mg/g，从而确保产品质量的可靠性和稳定性。
本发明成品的外观是薄膜包衣片剂，内容物是棕褐色粉末，有中药香气 味，其口味微甘微苦。
对本发明保健品取样进行急性毒性试验，样品对雌雄小白鼠的急性经口 LD50均大于21500mg/kg，以急性毒性半数致死量毒性分级，属无毒级物质。
本发明保健品样品为果绿色包衣片，人体推荐剂量为每日5.4g/60kg，进 行实验设低、中、高三个剂量组，分别相当于人体推荐剂量的5倍、10倍和 30倍。经国家指定检验机构的功能评价实验表明，经口给予动物样品30天 后，即具有降血脂和保护肝脏的作用，样品能抑制高脂高营养饲料大鼠的血 清胆固醇和甘油三酯的升高，能明显降低四氯化碳中毒小鼠血清谷丙转氨酶 GPT、谷草转氨酶GOT，肝脏病变明显减轻。保健功能评价结论是具有保护 肝脏和降血脂的保健功能，适宜保健调养食品长期服用，是一种新型的纯天 然保健食品。
本发明优点：本发明保健食品产品配方中的有效成分发酵虫草菌粉、丹 参、桃仁、绞股兰等均具有提高肝脏SOD含量及活力的作用。这些组分作为 一个中药复方，可实现保肝护肝与调节血脂两种保健功能的有机结合，而不 是仅仅是由其中几个组分实现一个功能，另几个组分实现另一个功能。这在 市场上现有的产品是独一无二的。配方中的壳聚糖为一种天然高分子多糖， 用于丹参、绞股蓝和桃仁水提后的精制除杂。且壳聚糖本身也具有多方面的 保健功能，可有效地降低肝脏和血清中的胆固醇，强化肝脏功能，调节机体 免疫系统等，因此在本产品中含有一定量的壳聚糖对增强保健功能是非常有 益的。又本发明产品无酒精味，且由于采用无糖薄膜包衣，因此产品对糖尿 病患者也适用。
本发明的制备方法综合了亚沸动态提取、絮凝沉淀、微孔精密过滤、喷 雾干燥、薄膜包衣制剂等多种先进技术，与传统制备方法相比，都有创新和 提高。采用亚沸动态提取技术，与传统的静态提取相比，不仅使提取技术得 到进一步提高，而且在节能、环保、劳动强度及提取时间和效率等方面都有 明显的改善。絮凝沉淀采用良好的絮凝剂壳聚糖，它溶解在水提液中以电中 和与吸附方式沉降带负电的粒子如杂质而未及多糖成份，经过滤即可达到提 纯的目的。这样，加入壳聚糖成分既可实现精制和提纯的目的，也如上述提 高了产品的功能。絮凝沉淀改变了由传统乙醇工艺带来的耗时长、长达24小 时，耗粮食酒精，以及对环境的特殊要求，同时保留了产品中能提高免疫功 能的多糖类活性成分、挥发性成分及多种微量元素，提高产品的质量，同时 产品的抗霉抗潮性能也大大提高。采用的微孔过滤技术，其中采用的微孔管 符合卫生要求，孔径可根据要过滤的粒子大小而选择，可反复冲洗使用，设 备占地面积小。喷雾干燥技术，使物料在瞬间得到干燥，减少了多糖类活性 成分、挥发性成分的损失，使产品的质量提高。薄膜包衣制剂中薄膜包衣的 包衣为水溶性，具有抗湿、避光、遮味、片型好等优点；使产品片剂不易碎 裂，可以长时间保存，而且不含乙醇，生产工艺省去了防爆的需要，更加安 全，也符合环保的要求；不含糖分，符合现代人的生活需要。多种先进技术 的应用使整个工艺流畅，生产周期缩短一半以上。可形成一条现代化的生产 流水线。
具体实施方式
实施例1，本发明保健食品调节血脂作用的实验
样品处理及配制：将片剂样品研磨成粉末，取样品2.25g、4.5g、13.5g， 分别加蒸馏水至100ml，使成均匀混悬液，即为低、中、高三个剂量组的供 试液。
实验动物：SD大鼠，雄性，体重150-190克。
剂量设计：
样品人体推荐剂量为每天5.4g/60kg，本实验设低、中、高三个剂量组， 分别为0.45、0.9、2.7g/kg，分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍，对照 组给予蒸馏水。
高脂高营养饲料：每100g基础饲料中加胆固醇1g，胆盐0.5g，猪油10g， 蛋黄粉10g。
给样途径：灌胃，灌胃剂量为2ml/100g体重。
实验方法和结果：取大白鼠40只，以普通饲料喂饲5天后，称重，取尾 血，测血清甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白的正常值，然后根据基础血脂 水平将大鼠随机分为四组，每组10只，分别为样品三剂量组和对照组，按剂 量设计给予样品，同时各组均喂饲高脂饲料，连续喂养30天后，称重，取鼠 眼血测各项血脂指标。
表2样品对大鼠体重的影响
组别 动物数 体重(克) 增重(克)
(只) 给样前 给样后
对照 10 172±8.8 297±14.8 125±9.2
低剂量 10 172±9.2 286±16.3 114±12.3
中剂量 10 170±10.2 282±19.8 112±14.8
高剂量 10 172±9.6 288±16.5 116±13.2
由表2可见，样品各剂量组动物体重增长与对照组相比，均无显著性差 异。
表3抑制大鼠血脂升高的作用 组别 动物数 胆固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白
(只) (mmol/l) (mmol/l) (mmol/l)
试验前 试验后 试验前 试验后 试验前 试验后 对照 10 1.93±0.05 3.86±0.31 1.31±0.11 2.22±1.16 0.52±0.03 0.62±0.10 低剂量 10 1.92±0.05 3.53±0.11 1.29±0.13 2.18±0.12 0.52±0.03 0.61±0.05 中剂量 10 1.92±0.06 3.32±0.13 1.28±0.11 2.11±0.13 0.54±0.02 0.62±0.04 高剂量 10 1.94±0.06 2.69±0.08* 1.29±0.12 1.70±0.07* 0.53±0.02 0.65±0.06
*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)
由表3可见，对于喂饲高脂高营养饲料的大鼠，同时经口给予不同剂量 的样品30天，可抑制大鼠血清胆固醇和甘油三酯的升高，经统计学分析，样 品高剂量组的胆固醇和甘油三酯与对照组相比，均有显著性差异。
表4对大鼠血脂水平的影响
组别 动物数 胆固醇 甘油三酯 高密度脂蛋白
(只) (％) (％) (mmol/l)
对照 10
低剂量 10 -8.5 -1.8
中剂量 10 -14.0 -5.0
高剂量 10 -30.3 -23.4 +0.03
由表4可见，样品高、中、低剂量组胆固醇和甘油三酯与对照组相比都 有下降，尤其是高剂量组分别下降了30.3％和23.4％，高密度脂蛋白上升 0.03mmol/l(1.2mg/dl)。
本实验结论：经口给予动物样品30天后，具有调节血脂作用。
实施例2，本发明保健食品对化学物所致肝损伤的保护作用的实验
样品处理：将片剂样品研磨成粉末，取样品2.25g、4.5g、13.5g分别加 蒸馏水至100ml，使成均匀混悬液，即为高、中、低三个剂量组的供试液。
剂量设计：样品人体推荐剂量为每天5.4g/60kg。本实验设低、中、高三 个剂量组：0.45、0.9、0.27g/kg，分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍， 另设肝损伤模型组和正常对照组(给予蒸馏水)。
实验动物：昆明种小白鼠，18-22克，雌性。
给样途径：灌胃，灌胃容积为0.4ml/20g。
实验方法和结果：
各剂量组给以样品，对照组和模型组给以饮用蒸馏水，连续30天。第30 天各剂量组及模型组用CCl4染毒，剂量24ml/kg，腹腔注射(i.p)。第31天、 5组动物摘眼球取血，离心，取血清。测定如下生化指标：血清谷丙转氨酶 (GPT)、谷草转氨酶(GOT)、白/球蛋白比例(A/G)；并取肝脏进行病理组 织学检查。实验结果用Spss软件统计。
1.体重
表5样品对动物体重的影响
组别 动物数 初始体重 中期体重 终期体重
正常对照 10 19±0.7 32±0.7 41±0.5
CCl4模型 10 19±0.5 32±0.7 41±2.2
低剂量 10 19±0.6 32±0.7 42±0.6
中剂量 10 19±0.7 32±0.8 41±1.1
高剂量 10 19±0.7 32±0.7 41±0.7
由表5可见，样品各剂量组与对照组相比，均无显著性差异。
2.生化检测结果
表6样品对小白鼠的GPT、GOT和A/G的影响
组别 动物数 谷丙转氨酶 谷草转氨酶 白/球蛋
(只) (IU/L) (IU/L) 白比例
正常对照 10 33±19* 70±38* 1.78±0.34
CCl4模型 10 3334±1852 3258±1593 1.54±0.11
低剂量 10 2160±1684 2105±1642 1.74±0.16
中剂量 10 1267±1356* 1278±1735* 1.52±0.23
高剂量 10 1919±1338* 1532±1422* 1.79±0.38
*P＜0.05与CCl4模型组比较，经方差分析
由表6可见，正常对照组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量明显低于CCl4模型组，存在显著性差异，说明模型成立。样品中、高剂量组与CCl4模型组 比较，谷丙转氨酶、谷草转氨酶明显降低，均存在显著性差异。
3.病理检查结果
表7病理检查总积分
组别 动物数 颗粒 水样 气球 脂肪 胞浆 细胞 炎症细胞 总分 平均分
变性 变性 变性 变性 凝聚 坏死 浸润
正常对照 10 14 2 0 1 1 0 6 24 2.4±1.5*
CCl4模型 10 15 27 27 0 21 48 21 159 15.9±4.0
低剂量 10 16 24 22 0 19 39 18 138 13.8±3.9
中剂量 10 15 20 17 0 23 41 21 137 13.7±4.2
高剂量 10 13 10 9 3 17 24 12 88 8.8±4.1*
*P＜0.05与CCl4模型组比较(经方差分析)
如表7所示，由大体检查和镜检结果可见，正常对照组的病理积分明显 低于CCl4模型组，存在显著性差异，说明模型成立。样品高剂量组与CCl4模型对照组相比，病理积分明显下降，存在显著性差异。
本实验结论：动物经口喂养样品30天后，具有对化学物所致肝损伤的保 护作用。
实施例3发酵虫草菌粉的制造
从天然冬虫夏草中分离得的虫草菌种蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali Chen&Dai，参考文献：姜文侠等，食用菌学报，1999，6(2)pp38-40)首先进 行斜面菌种培养，以蛋白胨、葡萄糖、牛膏等为培养基，115℃灭菌30分钟， 接种后置于25℃恒温培养7天，菌丝均匀长满斜面后，低温保存备用。再摇 瓶种子培养，以蛋白胨、葡萄糖、牛肉膏等为培养基，采用300ml装100ml 培养基，115℃灭菌30分钟，接种振荡(100rpm)培养，25～30℃，时间3 天。再种子罐种子培养，将摇瓶3天培养的种子经纯度检查后，于无菌条件 下并种进罐(100L)。罐温25～30℃，罐压0.05Mpa，搅拌转速200rpm，培养 3天。种子罐培养基为蔗糖、牛肉汁、黄豆粉等。再发酵培养，1000L发酵罐， 罐温25～30℃，罐压0.05Mpa，搅拌转速140rpm，培养3天。发酵罐培养基 同种子罐培养基。发酵培养后，无染菌放罐，繁殖菌丝，过滤，收集菌丝体。 于80℃将菌丝体干燥，控制含水量低于7％，然后粉碎过筛，控制60目以下 细粉大于80％，得发酵虫草菌粉。测定腺苷值为0.30％，测定值附合中华人 民共和国卫生部部级标准(1995年11月)，包装后置于通风干燥处保存。
实施例4本发明保健食品的制备方法
1.称取丹参400克，桃仁100克，绞股兰300克投入提取罐，加水8升， 加热到95-98℃亚沸状态，动态循环水提取2小时，分离出提取液，渣离去。 将提取液用60目滤布过滤，滤去杂质，得滤液。将滤液在65℃，真空度0.08Mpa 下进行真空浓缩，至浓缩液相对密度达1.04(50℃)；
2.在浓缩液中加入25克壳聚糖(以800ppm浓度加入)，进行絮凝沉淀 0.5小时；
3.絮凝沉淀液用200目微孔过滤，得精滤液，将它在65℃，真空度0.08Mpa 下，进行真空浓缩，至浓缩液相对密度达1.10(50℃)；
4.称取发酵虫草菌粉100克，与浓缩液混合，喷雾干燥，得喷干粉，再 在喷干粉中加入淀粉45克和糊精30克，混合，制粒，干燥，得颗粒270克；
5.将颗粒压片，无糖薄膜包衣，即得成品保健食品片剂300片。每片含 0.9克剂量。
服法：每天服3次，每次2片，(成人推荐剂量为5.4g/60kg，天)。