【技术领域】
本发明属于医用药品技术领域。更具体地，本发明涉及一种抗菌壳 聚糖凝胶剂，还涉及所述抗菌壳聚糖凝胶剂的制备方法。
【背景技术】
高分子水凝胶材料本身所具有的优越性能，如溶胀特性、粘弹性行 为和适当的力学强度等，使得它引起了众多研究者极大兴趣与关注，相 应的制备与开发研究日新月异、硕果累累，其应用已渗入到医疗卫生、 生物医药、日用化工、食品、环保等各个领域，并还在向更广阔的应用 领域拓展。特别是良好的生物相容性又使得它在生物医学方面的应用前 景看好，如可作为组织填充剂、药物缓释剂、酶的包埋、蛋白质电泳、 接触眼镜、人工血浆、人造皮肤、组织工程支架材料等，而且随着性能 优异的水凝胶不断开发，生物医学技术水平得到很大地提高。许多研究 已经证实，壳聚糖作为自然界中唯一的碱性多糖，具有明显的杀菌作用， 在酸性条件下，高脱乙酰度的壳聚糖分子中的氨基带有正电荷，能够吸 附带有负电荷的细菌，干扰细胞的生命状态，使细胞膜变形破裂，内含 物渗出，造成细菌溶解而死亡。研究也发现，高分子量壳聚糖具有优异 的凝胶特性，通过壳聚糖分子链中基团的特殊静电力、亲疏水作用和氢 键作用，能够与一些胶凝剂产生复合，形成能够保持大量水分的胶态物 质，具有很强的吸湿、保湿性能，同时还能提供足够的粘性，可以贴于 粘膜、皮肤等处而不脱落，不会对人体皮肤产生不良刺激及过敏反应等。 因此，目前有许多研究集中于开发各种各样的壳聚糖凝胶并应用生物医 学工程。
目前，一些发明专利或发明专利申请涉及采用壳聚糖制备凝胶，例 如CN101278896B公开了一种壳聚糖纳米银凝胶剂及其应用，它是由纳 米银、壳聚糖类聚合物、卡波姆、聚卡波菲、纤维素、聚乙烯醇、聚乙 二醇、聚酰胺、粘土、胶原蛋白、果胶、硫酸、醋酸、甲酸等制备得到 的。CN103316033A公开了一种凝胶剂及其用途，它是由壳聚糖类聚合 物、透明质酸类物质、乳酸类物质、凝胶基质、保湿剂、稀释剂等制备 得到的。CN102397474A公开了一种治疗应激性胃溃疡的龙血竭口服凝 胶剂，它是由龙血竭提取物、卡波姆、壳聚糖、羧甲基纤维素钠、二乙 醇胺等制备得到的。CN103520232A公开了一种凝胶剂的制备方法，它 是由蛇床子提取物包合物、盐酸克林霉素包合物、羟丙基纤维素、水、 甘油、壳聚糖、羟苯乙酯乙醇溶液、硫酸钠水溶液等制备得到的。此外， CN102657602公开了3,5-羟基-4-异丙基二苯乙烯壳聚糖凝胶剂及其制 备方法；CN102626524A公开了壳聚糖妇科抗菌凝胶及其制备方法；CN 101757071A公开了一种不可逆阴道抗菌凝胶制剂及其制备方法等。
这些现有技术存在如下技术缺陷：1、多数凝胶剂虽以壳聚糖为主 体基质，但都负载其它的药物，其中包括化学药物、生物药物、中草药 或纳米银等，采用壳聚糖制成凝胶剂型的目的主要是使药物起到缓释作 用；2、一般使用合成材料卡波姆等作为形成凝胶的主要材料；3、未使 用其它可产生损伤组织与细胞修复作用的天然活性生物质材料，产品的 有效性与安全性受到限制。因此，研发一种制作简单、安全、环保，并 且具有组织修复功能的新型纯壳聚糖凝胶剂用于临床治疗具有重要意 义。
【发明内容】
[要解决的技术问题]
本发明的目的是提供一种抗菌壳聚糖凝胶剂。
本发明的另一个目的是提供所述抗菌壳聚糖凝胶剂的制备方法。
[技术方案]
本发明是通过下述技术方案实现的。
本发明涉及一种抗菌壳聚糖凝胶剂的制备方法。
该抗菌壳聚糖凝胶剂制备方法的步骤如下：
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水混合均匀，往其中加入分子量60×104Da、脱乙酰 度85-95％的高分子量壳聚糖与分子量低于1×103Da、脱乙酰度98-100％ 的低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再加入聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌 均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
将蚕丝蛋白加到乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙醇 溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度90～100℃，然后加入卡拉胶，搅拌溶解，得到 一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
烯丙基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8～2.2进 行混合，得到一种混合物；然后将所述混合物加到蒸馏水中，溶解后再 加入蔗糖脂肪酸酯，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合 物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅拌均 匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液，加入 蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本发明的一种优选实施方式，在步骤A中，冰醋酸与蒸馏水的 重量比是0.8～1.2：16～22。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤A中，所述高分子量壳 聚糖与所述低分子量壳聚糖的重量比是1.8～2.2：2.6～3.4。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，聚氧乙烯羊毛醇 醚与壳聚糖总量的重量比是1:4.8～5.2。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤B中，蚕丝蛋白与乙醇 水溶液的重量比是0.3～0.8：1.6～2.4。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤B中，所述的乙醇水溶 液的浓度是以体积计80～95％。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤C中，蒸馏水与卡拉胶 的重量比是25～35：0.5～1.8。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，烯丙基三苯基溴 化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物与蒸馏水的重量比是0.1～0.5：8～12。
根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤D中，烯丙基三苯基溴 化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物与蔗糖脂肪酸酯的重量比是0.1～0.5： 0.8～1.2。
本发明还涉及采用所述制备方法得到的抗菌壳聚糖凝胶剂。所述的 抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、白色念珠菌 或绿脓杆菌的抗菌能力达到99％以上。
下面将更详细地描述本发明。
本发明涉及一种抗菌壳聚糖凝胶剂的制备方法。
该抗菌壳聚糖凝胶剂制备方法的步骤如下：
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水混合均匀，往其中加入分子量60×104Da、脱乙酰 度85-95％的高分子量壳聚糖与分子量低于1×103Da、脱乙酰度98-100％ 的低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再加入聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌 均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
在这个步骤中，冰醋酸与蒸馏水的重量比是0.8～1.2：16～22，优选 地，冰醋酸与蒸馏水的重量比是1.0：18～20。
壳聚糖(β-(1→4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖)的化学结构为带阳离子 的高分子碱性多糖聚合物，是自然界唯一带正电荷、阳离子食用纤维； 它具有物理性能稳定、良好的溶解性、亲水吸湿性、生物降解性、生物 相容性和成膜性、粘结性、透气性等理化性能。
在本发明中，将高分子量壳聚糖与低分子量壳聚糖配合使用的目的 在于利用高分子量壳聚糖的良好胶凝性质与低分子量壳聚糖的良好抗 菌性质。
在这个步骤中，所述高分子量壳聚糖与所述低分子量壳聚糖的重量 比是1.8～2.2：2.6～3.4。如果高分子量壳聚糖的量过低或过高时，则会使 该凝胶剂的凝胶性质受到影响。同样地，如果低分子量壳聚糖的量过低 或过高时，则会使凝胶剂的抗菌性能受到影响。因此，所述高分子量壳 聚糖与所述低分子量壳聚糖的重量比为1.8～2.2：2.6～3.4是合理的，优 选地是2.0：2.8～3.2。
本发明使用的高分子量壳聚糖与低分子量壳聚糖是目前市场上销 售的产品，例如由济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药 级壳聚糖销售的高分子量壳聚糖，由河北百味生物科技有限公司以商品 名壳聚糖销售的低分子量壳聚糖。
所述的聚氧乙烯羊毛醇醚(ethoxylatedlanolinalcohol)是由羊毛脂 醇与环氧乙烷通过加成反应制成的。在本发明中，聚氧乙烯羊毛醇醚的 作用在于提高增溶与改善对皮肤的渗透相容作用。
在这个步骤中，所述聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖总量(所述高分子 量壳聚糖的量与所述低分子量壳聚糖的量之和)的重量比是1:4.8～5.2。 根据本发明，如果壳聚糖总量小于4,8，则会使凝胶的形成效果及抗菌 作用下降；如果壳聚糖总量大于5.2，则会使凝胶对皮肤的润湿与渗透 作用效果下降；因此，壳聚糖总量为4.8～5.2是恰当的，优选地是1:5.0。
本发明使用的聚氧乙烯羊毛醇醚是目前市场上销售的产品，例如由 英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销售的产品。
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
将蚕丝蛋白加到乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙醇 溶液。
蚕丝蛋白是从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白，它的含量是蚕丝 量的70％～80％，它含有18种氨基酸，其中甘氨酸(gly)、丙氨酸(ala) 和丝氨酸(ser)的量为所述氨基酸总量的80％以上。
在这个步骤中，蚕丝蛋白与乙醇水溶液的重量比是0.3～0.8：1.6～2.4。 所述的乙醇水溶液的浓度是以体积计80～95％。
根据本发明，蚕丝蛋白与乙醇水溶液的量小于或高于这个范围都是 不可取的，因为蚕丝蛋白量高则使溶解不完全且溶液粘度偏高，量低则 达不到蚕丝蛋白起到的对皮肤的护理和修复效果。优选地，蚕丝蛋白与 乙醇水溶液的重量比是0.4～0.6：1.8～2.2。
本发明使用的蚕丝蛋白是目前市场上销售的产品，例如由苏州宝丝 立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销售的产品。
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度90～100℃，然后加入卡拉胶，搅拌溶解，得到 一种卡拉胶溶液。
卡拉胶(kappa-Carrageenan)是从麒麟菜等红藻类海草中提炼出来 的亲水性胶体，它是由半乳糖及脱水半乳糖所组成的多糖类硫酸酯钙、 钾、钠、铵盐。本发明使用的卡拉胶是目前市场上销售的产品，例如由 宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销售的产品。
在这个步骤中，蒸馏水与卡拉胶的重量比是25～35：0.5～1.8。
D、制备季鏻化合物溶液
烯丙基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8～2.2 进行混合，得到一种混合物；然后将所述混合物加到蒸馏水中，溶解后 再加入蔗糖脂肪酸酯，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化 合物溶液；
在这个步骤中，烯丙基三苯基溴化膦(Allyltriphenylphosphonium bromide)的作用是通过带三个苯基的作用，改善凝胶的凝胶性质，提高 壳聚糖的抗菌性能。
烯丙基三戊基氯化膦(Allyltriamylphosphoniumchloride)的作用是 通过带直链烷基(戊基)季鏻化合物的作用，与带苯基季鏻化合物产生 协同效应，大大提升凝胶的胶凝性质与壳聚糖的抗菌性能。
蔗糖脂肪酸酯(SucroseFattyAcidEsters)的作用是作为一种非离子 表面活性剂起到乳化及稳定作用，同时，也能够进一步提升抗菌效果。
本发明使用的烯丙基三苯基溴化膦是目前市场上销售的产品，例如 根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化膦产 品。
本发明使用的烯丙基三戊基氯化膦是目前市场上销售的产品，例如 由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化膦离子液 体销售的产品。
本发明使用的蔗糖脂肪酸酯是目前市场上销售的产品，例如由杭州 金鹤来食品添加剂有限公司以商品名蔗糖酯销售的产品。
在本发明中，烯丙基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物与 蒸馏水的重量比是0.1～0.5：8～12。
当蒸馏水的量为8～12时，如果所述混合物的量小于0.1，则使其与 壳聚糖的协同抗菌效果受影响；如果所述混合物的量大于0.5，则凝胶 的胶凝硬度不理想；因此，所述混合物的量为0.1～0.5是合适的，优选 地，烯丙基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物与蒸馏水的重量 比是0.2～0.4：9～11。
在这个步骤中，烯丙基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物 与蔗糖脂肪酸酯(SucroseFattyAcidEsters)的重量比是0.1～0.5：0.8～1.2。
当所述混合物的量为0.1～0.5时，如果蔗糖脂肪酸酯的量小于0.8， 则乳化及稳定作用不好；如果蔗糖脂肪酸酯的量大于1.2，则对凝胶性 质不利；因此，蔗糖脂肪酸酯的量为0.8～1.2是合适的，优选地，烯丙 基三苯基溴化膦与烯丙基三戊基氯化膦混合物与蔗糖脂肪酸酯的重量 比是0.2～0.4：0.9～1.1。
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
本发明的抗菌壳聚糖凝胶剂经过国家标准抑菌检测法(GB/T 16886)检测分析，所制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大 肠杆菌、链球菌、绿脓杆菌等的抗菌能力均达到99％以上，显示出良好 的抑菌能力。
本发明是以高分子壳聚糖和低分子壳聚糖复合物为主要基质，配合 使用抗菌增效剂、胶凝剂、组织细胞修复辅料等组合复配，避免使用其 它化学药物、生物药物及中草药和纳米银、卡波姆等成分，提高了凝胶 剂的安全性，同时也降低成本和减少对患者的刺激性，促进患者恢复健 康。
采用本发明制备的壳聚糖抗菌凝胶剂可以应用于治疗皮肤细菌感 染、男女外阴瘙痒、阴道炎、脚气病、褥疮、皮肤长期性溃疡等。
本发明的壳聚糖抗菌凝胶剂可以采用本技术领域里的技术人员熟 知的常规方法进行应用。
[有益效果]
本发明与现有技术相比具有如下有益效果：
1、本发明的壳聚糖抗菌凝胶剂主体是天然产物壳聚糖，没有使用 其它合成的化学或生物药物、中草药等，不易产生耐药性，生物安全性 高；
2、以分子量60×104Da的高分子量壳聚糖作为胶凝基质，配合使用 卡拉胶等天然海藻提取物，取得很好的胶凝效果，避免使用卡波姆等合 成化学材料，进一步提高了产品的安全性与环保效益；
3、采用分子量低于1000Da低分子量高脱乙酰度的壳聚糖作为抗菌 主体，配合使用季鏻化合物作为增效剂，取得很好的抗菌效果，避免使 用其它药物；
4、使用了蚕丝蛋白与蔗糖脂肪酸酯复合物等具有损伤组织与细胞 修复作用的天然活性生物质材料，能够促进患者早日恢复健康机能；
5、本发明的壳聚糖抗菌凝胶剂具有高效协同抗有害微生物作用， 对细菌、病毒、真菌均具有明显杀灭效果，对金黄色葡萄球菌、溶血性 链性菌、绿脓杆菌、白色念珠菌以及大肠杆菌和其它有害真菌等临床致 病菌均有99％以上的杀灭效率。
【具体实施方式】
通过下述实施例将能够更好地理解本发明。
实施例1：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比0.9：22混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比1.8：2.6，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度88％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量800Da、脱乙酰度100％的 低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖 总量的重量比1:4.8加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销 售的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计80％的乙醇水溶液的重量比0.3：1.8， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度90℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比25： 1.0往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.1：11，将所 述的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限 公司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂 肪酸酯的重量比是0.1：1.1，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的 季鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.3％。
实施例2：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比0.8：16混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比2.0：3.4，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度85％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量900Da、脱乙酰度98％的低 分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖总 量的重量比1:5.2加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销售 的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计85％的乙醇水溶液的重量比0.4：2.3， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度92℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比30： 0.5往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.0进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.5：8，将所述 的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限公 司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂肪 酸酯的重量比是0.2：0.8，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的季 鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.6％。
实施例3：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比1.2：18混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比2.2：3.2，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度92％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量960Da、脱乙酰度100％的 低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖 总量的重量比1:5.0加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销 售的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计90％的乙醇水溶液的重量比0.6：1.6， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度100℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比35： 1.8往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.2进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.4：10，将所 述的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限 公司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂 肪酸酯的重量比是0.5：1.0，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的 季鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.2％。
实施例4：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比1.0：20混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比1.9：3.0，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度95％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量845Da、脱乙酰度98％的低 分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖总 量的重量比1:4.9加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销售 的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计95％的乙醇水溶液的重量比0.8：2.4， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度96℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比30： 1.4往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.0进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.2：12，将所 述的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限 公司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂 肪酸酯的重量比是0.4：1.2，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的 季鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.6％。
实施例5：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比0.9：16混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比2.2：3.0，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度88％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量900Da、脱乙酰度100％的 低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖 总量的重量比1:4.9加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销 售的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计80％的乙醇水溶液的重量比0.4：2.4， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度92℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比35： 1.4往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:1.8进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.5：10，将所 述的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限 公司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂 肪酸酯的重量比是0.2：1.2，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的 季鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.8％。
实施例6：壳聚糖抗菌凝胶剂的制备
A、制备含壳聚糖的复合液
将冰醋酸与蒸馏水按照重量比1.2：20混合均匀，按照高分子量壳 聚糖与低分子量壳聚糖的重量比1.8：3.4，往其冰醋酸水溶液中加入由 济南海得贝海洋生物工程有限公司以商品名食品医药级壳聚糖销售的 分子量60×104Da、脱乙酰度92％的高分子量壳聚糖、由河北百味生物 科技有限公司以商品名壳聚糖销售的分子量845Da、脱乙酰度100％的 低分子量壳聚糖，搅拌溶解，均化后再按照聚氧乙烯羊毛醇醚与壳聚糖 总量的重量比1:4.8加入由英国禾大公司以商品名聚氧乙烯羊毛醇醚销 售的聚氧乙烯羊毛醇醚，搅拌均匀，得到一种含壳聚糖的复合液；
B、制备蚕丝蛋白乙醇溶液
按照蚕丝蛋白与浓度以体积计85％的乙醇水溶液的重量比0.6：1.6， 将由苏州宝丝立蚕丝蛋白纤维科技有限公司以商品名蚕丝蛋白纤维销 售的蚕丝蛋白加到所述乙醇水溶液中，搅拌溶解，得到一种蚕丝蛋白乙 醇溶液；
C、制备卡拉胶溶液
将蒸馏水加热到温度90℃，然后按照蒸馏水与卡拉胶的重量比30： 1.0往其蒸馏水中加入由宁波北仑雅旭化工有限公司以商品名卡拉胶销 售的卡拉胶，搅拌溶解，得到一种卡拉胶溶液；
D、制备季鏻化合物溶液
由根据暨南大学CN102020675B专利技术制备的烯丙基三苯基溴化 膦产品与由上海笛柏化学品技术有限公司以商品名烯丙基三戊基氯化 膦离子液体销售的烯丙基三戊基氯化膦按照重量比1:2.2进行混合，得 到一种混合物；然后按照所述混合物与蒸馏水的重量比0.2：11，将所 述的混合物加到蒸馏水中，溶解后再加入由杭州金鹤来食品添加剂有限 公司以商品名蔗糖酯销售的蔗糖脂肪酸酯，其中所述的混合物与蔗糖脂 肪酸酯的重量比是0.2：1.0，搅拌均匀，得到一种含有蔗糖脂肪酸酯的 季鏻化合物溶液；
E、制备凝胶剂
将步骤A得到的含壳聚糖的复合液与步骤B得到的蚕丝蛋白乙醇 溶液混合均匀，再把这种混合溶液加到步骤C得到的卡拉胶溶液中，搅 拌均匀，接着加入步骤D得到的含有蔗糖脂肪酸酯的季鏻化合物溶液， 加入蒸馏水，混合均匀，得到所述的抗菌壳聚糖凝胶剂。
根据本说明书描述的国家标准抑菌检测法检测分析确定，本实施例 制备的抗菌壳聚糖凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、绿脓 杆菌的抗菌能力均达到99.5％。