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1、(10)申请公布号 CN 102218062 A (43)申请公布日 2011.10.19 CN 102218062 A *CN102218062A* (21)申请号 201110102607.7 (22)申请日 2011.04.25 A61K 31/4439(2006.01) A61K 31/365(2006.01) A61P 3/10(2006.01) (71)申请人 刘树芹 地址 276014 山东省临沂市罗庄区工业街 56 号 (72)发明人 刘树芹 (54) 发明名称 一种治疗糖尿病的药物组合物 (57) 摘要 本发明公开了一种治疗糖尿病及其并发症的 药物组合物， 特别涉及一种含有牛。
2、蒡苷元和罗格 列酮或其药学上可接受的盐的药物组合物， 以及 该组合物在制备治疗糖尿病、 糖尿病并发症、 与糖 尿病有关的疾病的药物中的用途。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 10 页 CN 102218071 A1/1 页 2 1. 一种药物组合物， 其特征在于它含有活性成分牛蒡苷元和罗格列酮或其药学上可接 受的盐。 2. 如权利要求 1 所述的药物组合物， 其特征在于组合物中牛蒡苷元与罗格列酮或其药 学上可接受的盐的重量比为 0.1-1000 1。 3. 如权利要求 2 所述的药物组合物， 其特征在于组合物中牛蒡。
3、苷元与罗格列酮或其药 学上可接受的盐的重量比为 0.1-100 1。 4. 如权利要求 1 所述的药物组合物， 其特征在于所述的罗格列酮或其药学上可接受的 盐为其盐酸盐、 甲酸盐、 富马酸盐、 乙酸盐、 苯甲酸盐、 甲磺酸盐、 硫酸盐或马来酸盐。 5. 如权利要求 4 所述的药物组合物， 其特征在于所述的罗格列酮或其药学上可接受的 盐为盐酸罗格列酮或马来酸罗格列酮。 6. 如权利要求 5 所述的药物组合物， 其特征在于所述的罗格列酮或其药学上可接受的 盐为马来酸罗格列酮。 7. 如权利要求 1 所述的药物组合物， 其特征在于所述的药物组合物中还含有药学上可 接受的辅料。 8. 如权利要求 7 。
4、所述的药物组合物， 其特征在于所述的辅料包含粘合剂、 填充剂、 湿润 剂、 润滑剂或崩解剂中一种或多种。 9. 如权利要求 8 所述的药物组合物， 其特征在于所述的药物组合物为片剂、 胶囊、 粉 剂、 颗粒、 口腔崩解片或分散片。 10. 如权利要求 1-9 任一所述的药物组合物， 其特征在于所述的药物组合物在制备治 疗糖尿病、 糖尿病并发症的药物中的用途。 权 利 要 求 书 CN 102218062 A CN 102218071 A1/10 页 3 一种治疗糖尿病的药物组合物 技术领域 0001 本发明属于医药技术领域， 具体涉及一种治疗糖尿病的药物组合物， 特别涉及一 种含有牛蒡苷元和罗。
5、格列酮或其可药用盐的药物组合物。 背景技术 0002 据世界卫生组织 (WHO) 统计， 目前全球糖尿病患者约为 1.94 亿， 到 2030 年还将翻 一番。中国的糖尿病患者已达 4000 万左右， 仅次于印度居世界第二位。我国的糖尿病人群 中 2 型糖尿病患者约占糖尿病患者总数的 90 -95。2 型糖尿病已成为威胁我国国民健 康的主要疾病之一。中华医学会糖尿病学分会最新完成的中国糖尿病流行病学调查显示 ： 目前， 在我国城镇人口中， 糖尿病患者大概有 4100 万人， 患病率已达 3.2， 年平均增长率 已接近 10。在经济相对发达的北京上海等大城市， 糖尿病的发病率更是达到 8左右。 。
6、0003 罗格列酮 (Rosiglitazone)， CAS 号 122320-73-4， 属于噻唑烷二酮类抗糖尿病 药， 通过提高胰岛素的敏感性而有效地控制血糖。本品为过氧化物酶体增殖激活受体 (PPAR-) 的高选择性、 强效激动剂。人类的 PPAR 受体存在于胰岛素的主要靶组织如肝 脏、 脂肪和肌肉组织中。本品激活 PPAR- 核受体， 可对参与葡萄糖生成、 转运和利用的胰 岛素反应基因的转录进行调控。此外， PPAR- 反应基因也参与脂肪酸代谢的调节。罗格 列酮除了被证实有强大、 持久的降糖作用外， 还被证实可以改善血脂紊乱， 降低血浆游离脂 肪酸水平， 减轻脂肪毒性作用， 间接地保护。
7、了胰岛 - 细胞功能。还能起到增加高密度脂蛋 白、 降低甘油三脂和舒张期血压， 减少微量蛋白尿等有利作用。 因此罗格列酮不仅因为良好 的降血糖作用， 使糖尿病微血管并发症减少， 也由于对高血压、 高血脂的有利作用， 而可望 大大降低糖尿病大血管并发症。 然而其不适用于有明显肝功能异常者与合并有充稳中有充 血性心力衰竭的 2 型糖尿病人。 0004 牛蒡苷元又叫牛蒡子苷元 (Arctigenin)， CAS 号 7770-78-7， 分子式为 C21H24O6， 分子量为 372.41。牛蒡苷元主要来源于牛蒡子， 牛蒡子为菊科植物牛蒡的干燥成熟果实， 是常用中药， 具有疏散风热、 宣肺透疹、 解。
8、毒利咽的功能， 用于风热感冒、 咳嗽痰多、 麻疹、 风 疹、 咽喉肿痛、 痒腮丹毒、 痈肿疮毒。该中药含有木脂素类化合物， 主要是牛蒡苷 (arctiin) 和牛蒡苷元 (arctigenin) 等。据文献报道， 牛蒡苷元比牛蒡苷具有更强的生物活性， 比如 显著的抗菌、 抗病毒、 抗肿瘤、 抗 PAF 受体及钙拮抗活性。申请号为 200310105686.2 公开了 牛蒡苷及其苷元在制备治疗糖尿病及其并发症的药物中的应用， 申请号为 200410097292.1 公开了牛蒡苷及其苷元在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。 0005 目前， 通过对国内外公开出版物的检索发现， 现有技术中牛蒡苷元和。
9、罗格列酮或 其可药用盐单方治疗糖尿病及其并发症已有报道， 但是目前并未发现牛蒡苷元和罗格列酮 或其可药用盐作为复方药物治疗糖尿病以及其并发症的相关报道。 发明内容 0006 发明人通过大量研究惊奇的发现， 牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐联合药物形 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A2/10 页 4 式可提供特别有益的血糖血脂控制效果， 并且没有发现副反应。这种联合药物形式能特别 好的应用于治疗糖尿病， 尤其是 2 型糖尿病和与糖尿病相关的疾病， 达到降低血糖， 血脂， 改善糖尿病的目的， 其效果显著优于任意单一成分， 同时显著降低了肝毒性， 肝功能异常等 副。
10、反应的发生率。 0007 本发明提供了一种含有有效量活性成分牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐的药 物组合物， 以及其在制备治疗糖尿病、 糖尿病并发症、 与糖尿病有关的疾病的药物中的用 途。 0008 本发明所述的罗格列酮或其可药用盐选自盐酸盐、 甲酸盐、 富马酸盐、 乙酸盐、 苯 甲酸盐、 甲磺酸盐、 硫酸盐或马来酸盐， 优选使用罗格列酮盐酸盐或马来酸盐， 最优选使用 罗格列酮马来酸盐。 0009 当所述的药物组合物含有牛蒡苷元和罗格列酮或其药学上可接受的盐时， 牛蒡苷 元与罗格列酮或其药学上可接受的盐的重量比为 (0.1-1000) 1， 优选牛蒡苷元与罗格列 酮或其药学上可接受的盐的重量比为。
11、 (0.1-100) 1。牛蒡苷元和罗格列酮或其药学上可 接受的盐的组合物在治疗糖尿病及其并发症方面效果极其显著， 与单独给药牛蒡苷元或罗 格列酮或其药学上可接受的盐相比， 在治疗糖尿病及其并发症方面具有协同作用。 0010 本发明所述的牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐的药物组合物， 以口服形式给药 时， 牛蒡苷元的每日用量为 0.01-100mg/kg 体重， 罗格列酮或其药学上可接受的盐时其有 效剂量为 0.001-1mg/kg 体重。给药时间和给药次数需要根据医生对病情的诊断结果而定。 将对小鼠的糖尿病、 糖尿病并发症的治疗方案应用于人身上， 所有药物对人的有效剂量可 以通过该药物对小鼠的。
12、有效剂量进行换算， 这对于本领域的普通技术人员来说是显而易见 的。 0011 本发明人通过大量的研究发现， 牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐组合物可提供 特别有益的血糖血脂控制效果， 并且没有发现副反应。这种联合药物形式能特别好的应用 于治疗糖尿病， 尤其是 2 型糖尿病和与糖尿病相关的疾病， 达到降低血糖， 血脂， 改善糖尿 病的目的， 其效果显著优于任意单一成分。 0012 本发明药物组合物， 可以改善胰岛素抵抗达到降糖降脂的效果。联合用药从减少 吸收， 加强代谢两方面起作用， 药效显著强于单药。 本发明药物组合物的联合用药可以减少 罗格列酮或其可药用盐的用量， 减少了由于罗格列酮用量过大引。
13、起的低血糖发生的几率。 0013 罗格列酮本身有一定的的心脏副作用， 罗格列酮可增加血浆容积， 引起心脏前负 荷增大并诱导心脏肥大， 发明人惊奇的发现本发明药物组合物可以显著改善罗格列酮的心 脏副反应。 糖尿病人在高血糖的同时， 大多伴有高血脂、 肥胖。 本发明药物组合物既能降糖， 又能降脂， 从而更有效的， 并且是长效持续的改善糖尿病。 本发明的一个优势在于当根据本 发明方法使用时， 所用的各种活性剂量水平将小于达到单纯加和的血糖血脂控制作用可能 需要的剂量。 0014 本发明的药物组合物为本发明提供的含有牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐组 合物， 根据需要， 该组合物中还含有适量的药学上可接。
14、受的辅料。 0015 本发明的牛蒡苷元和罗格列酮或其可药用盐的组合物可以是片剂、 胶囊、 粉剂、 颗 粒、 口腔崩解片、 分散片， 或诸如口服或无菌胃肠外溶液或悬液等液体制剂形式。 0016 为了达到给药的一致性， 本发明组合物优选为单剂形式。 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A3/10 页 5 0017 用于口服给药的单剂表示形式可以是片剂和胶囊， 并可含有常规赋形剂诸如粘合 剂， 例如糖浆、 阿拉伯胶、 明胶、 山梨醇或聚乙烯吡咯烷酮 ； 填充剂， 例如乳糖、 玉米淀粉、 磷 酸钙、 甘氨酸 ； 压片润滑剂， 例如硬脂酸镁 ； 崩解剂， 例如淀粉、 淀粉。
15、乙醇酸钠 ； 或药学上可 接受的湿润剂， 如十二烷基磺酸钠。 0018 固体口服组合物可以用常规的混合、 填充或压片法制备。重复混合操作可以用于 将活性剂充分分布到使用大量填充剂的组合物中。 片剂可以按照常规药物制备中众所周知 的方法包衣， 特别是包肠溶衣。 0019 口服液体制剂可以使例如乳剂、 糖浆的形式， 或则可以作为干燥产品存在， 使用前 再用水或其他合适的载体重新构成。这种液体可以有常规添加剂， 诸如悬浮剂， 例如山梨 醇、 糖浆、 甲基纤维素、 明胶、 羟乙基纤维素、 羧甲基纤维素、 硬脂酸铝凝胶、 氢化食用脂 ； 乳 化剂， 例如卵磷脂或阿拉伯胶 ； 无水载体， 如杏仁油、 氢化。
16、椰子油、 丙二醇。如果需要还可以 加入常规调味剂或着色剂。对于胃肠外给药， 可利用该化合物与无菌载体制备液体单位剂 型， 并且根据所用的浓度， 可以悬浮或溶解于载体中。在制备溶液时， 可以将该化合物溶解 于注射用水并过滤灭菌， 之后灌注到小瓶或安瓶中密封。 为了增强稳定性， 可以将该组合物 冷冻后填充到小瓶中， 并在真空下除去水分。 胃肠外悬液使用实质相同的方式制备的， 只是 化合物不是溶于载体中， 而是悬浮于载体中， 且灭菌不是通过过滤完成。 该组合物中可包含 表面活性剂或湿润剂以促进该化合物均有分布。 0020 根据不同的给药方法组合物可以含有 0.1至 99重量、 优选为 10-60重量。
17、的 活性物质。这些组合物按照常规方法配制， 诸如在标准参考书中， 例如在英国和美国药典、 Remington S 药物科学、 马丁代尔药典和 Harry S 化妆品学中公开的那些。本文中使用的 术语 “与糖尿病相关的疾病” 包括与前驱糖尿病状态有关的那些疾病， 与糖尿病自身有关 的疾病和与糖尿病相关的并发症 ； 包括诸如胰岛素抗性疾病， 包括遗传性胰岛素抗性、 葡萄 糖耐量削弱和高胰岛素血症 ； 包括高血糖， 胰岛素抗性， 包括后天胰岛素抗性和肥胖和高血 脂 ； 其他与糖尿病自身有关的疾病包括高血压和心血管疾病， 尤其是动脉粥样硬化和高血 脂。本文中使用的术语 “与糖尿病有关的并发症 “包括肾。
18、脏疾病， 尤其是与 H 型糖尿病有关 的肾脏疾病， 神经病和视网膜病。 0021 本文中的术语 “药学上可接受的” 包含人和兽医用途， 例如术语 “药学上可接受的” 包含兽医学尚可接受的化合物。 通过本发明的治疗提供特别有意的血糖血脂控制作用指示 为相对于对照的协同作用， 该对照预期为单独的活性药剂的作用总和。血糖控制可以利用 常规方法来描述其特征， 例如通过测量常用的血糖控制指数， 例如禁食血浆葡萄糖或糖化 血红蛋白 (HbAlc)。这些指标可以利用标准方法测定。血脂控制可以利用常规方法来描述 其特征， 例如通过测量常用的血脂控制指数， 如血浆中低密度脂蛋白 LDL 含量。这些指标可 以利用。
19、标准方法测定。 0022 综上， 本发明的药物组合物与现有技术相比， 特别是与单方给药相比， 在改善血 糖、 降低血脂和糖化血清蛋白水平方面取得了意想不到的技术效果， 具有显著的优势， 并具 协同作用， 同时对预防和/或治疗糖尿病及其并发症治如肾脏疾病， 尤其是与H型糖尿病有 关的肾脏疾病、 神经病和视网膜病具有极其显著的优势， 并取得了很好的协同效果。 具体实施方式 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A4/10 页 6 0023 以下通过具体实施例进一步描述本发明， 但本发明的应用范围不限于下列实施 例， 某些修饰和等价变化对于本领域的普通技术人员是显而易见。
20、的且包括在本发明的范围 内。 0024 实施例 1 ： 片剂 0025 0026 0027 制备工艺 ： 将处方中的盐酸罗格列酮、 牛蒡苷元过 80 目筛， 微晶纤维素和低取代 羟丙基纤维素过 80 目筛， 称取处方量的盐酸罗格列酮、 牛蒡苷元与低取代羟丙基纤维素、 微晶纤维素混合均匀， 加入 2羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒， 60干燥， 16 目筛整粒， 干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀， 压片即得。 0028 实施例 2 ： 片剂 0029 0030 制备工艺 ： 将处方中的马来酸罗格列酮、 牛蒡苷元过 80 目筛， 微晶纤维素和低取 代羟丙基纤维素过 80 目筛， 称取处方量的马来酸罗格。
21、列酮、 牛蒡苷元与低取代羟丙基纤维 素、 微晶纤维素混合均匀， 加入 2羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒， 60干燥， 16 目筛整 粒， 干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀， 压片即得。 0031 实施例 3 ： 胶囊剂 0032 配方 ： 0033 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A5/10 页 7 0034 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液适量 0035 制备方法 ： 甲磺酸罗格列酮、 牛蒡苷元及辅料分别过 80 目筛备用。照处方称取甲 磺酸罗格列酮、 乳糖、 淀粉、 L-HPC， 以等量递增法混匀后， 加入 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液制 软材， 过24目筛制粒， 于60。
22、干燥后， 过24目筛整粒。 将牛蒡苷元与微晶纤维素混合均匀， 采用干法制粒， 过 24 目筛制粒。将以上两种颗粒与硬脂酸镁、 微粉硅胶混合均匀后， 装入胶 囊， 制成胶囊剂。 0036 实施例 4 ： 胶囊剂 0037 配方 ： 0038 0039 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液适量 0040 制备方法 ： 盐酸罗格列酮、 牛蒡苷元及辅料分别过 80 目筛备用。照处方称取盐酸 罗格列酮、 乳糖、 淀粉、 L-HPC， 以等量递增法混匀后， 加入 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液制软 材， 过 24 目筛制粒， 于 60干燥后， 过 24 目筛整粒。将牛蒡苷元与微晶纤维素混合均匀， 采用干法制粒， 过 24 目筛。
23、制粒。将以上两种颗粒与硬脂酸镁、 微粉硅胶混合均匀后， 装入胶 囊， 制成胶囊剂。 0041 实施例 5 ： 片剂 0042 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A6/10 页 8 0043 制备工艺 ： 将处方中的马来酸罗格列酮、 牛蒡苷元过 80 目筛， 微晶纤维素和低取 代羟丙基纤维素过 80 目筛， 称取处方量的马来酸罗格列酮、 牛蒡苷元与低取代羟丙基纤维 素、 微晶纤维素混合均匀， 加入 2羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒， 60干燥， 16 目筛整 粒， 干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀， 压片即得。 0044 实施例 6 ： 胶囊剂 0045 0046。
24、 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液适量 0047 制备方法 ： 马来酸罗格列酮、 牛蒡苷元及辅料分别过 80 目筛备用。照处方称取马 来酸罗格列酮、 乳糖、 淀粉、 L-HPC， 以等量递增法混匀后， 加入 5聚乙烯吡咯烷酮水溶液制 软材， 过24目筛制粒， 于60干燥后， 过24目筛整粒。 将牛蒡苷元与微晶纤维素混合均匀， 采用干法制粒， 过 24 目筛制粒。将以上两种颗粒与硬脂酸镁、 微粉硅胶混合均匀后， 装入胶 囊， 制成胶囊剂。 0048 实施例 7 ： 马来酸罗格列酮、 牛蒡苷元复方的药效学实验 0049 1. 动物模型 ： 高脂饮食加小剂量链脲佐菌素 (STZ) 建立 2 型糖尿病合并高脂血。
25、症 大鼠模型。雄性 SD 大鼠， 周龄为 9 周 10 周， 体重 (18025)g， 清洁级， 数量 100 只， 随机 分为正常对照组 (10 只 ) 和造模组 (90 只 )。正常对照组给予基础饲料， 造模组给予高脂 高糖饲料 ( 含蔗糖 20， 猪油 10， 胆固醇 2.5， 胆盐 0.25， 基础饲料 67.25 )。饲养 5 周后， 禁食 12h， 模型组大鼠按 40mg/kg 体重腹腔注射 STZ( 用前以 0.1mol/L、 pH4.2 的枸 橼酸一枸橼酸钠缓冲液配制成 1的溶液 )， 正常对照组仅注射等量枸橼酸一枸橼酸钠缓 冲液。注射 STZ 一周后， 断尾取血测空腹血糖 (。
26、FBG) 和血脂。以空腹血糖 11mmol/L， TG、 LDL-C 与正常对照组存在显著性差异 (P 0.05) 为成模标准。造模组大鼠注射 STZ 一周 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A7/10 页 9 后， 90 只达到成模标准， 空腹血糖均值为 (18.54.05)mmol/L， 成模率为 90。 0050 2. 分组 ： 将符合成模标准的大鼠随机分为如下各组， 每组各 9 只。实验分组与给 药终浓度如下 ： 0051 模型组 0052 牛蒡苷元低剂量组 ： 0.5mg/kg 牛蒡苷元 0053 牛蒡苷元高剂量组 ： 50.0mg/kg 牛蒡苷元 。
27、0054 马来酸罗格列酮低剂量组 ： 0.05mg/kg 马来酸罗格列酮 0055 马来酸罗格列酮高剂量组 ： 5mg/kg 马来酸罗格列酮 0056 组合物 A 组 ： 50.0mg/kg 牛蒡苷元 +0.05mg/kg 马来酸罗格列酮 0057 组合物 B 组 ： 5.0mg/kg 牛蒡苷元 +1.0mg/kg 马来酸罗格列酮 0058 组合物 C 组 ： 0.5mg/kg 牛蒡苷元 +5.0mg/kg 马来酸罗格列酮 0059 组合物 D 组 ： 5.0mg/kg 牛蒡苷元 +0.05mg/kg 马来酸罗格列酮 0060 3. 实验步骤 ： 各药物组灌胃给予相应的药物， 正常对照组和模型。
28、组给予等体积的 D-hank s 液灌胃， 每天上午灌胃给药 1 次， 连续灌胃 5 周， 每 3 天称重 1 次， 随体重调整给 药量。末次给药后禁食 12h， 戊巴比妥钠麻醉， 腹主动脉取血， 离心后分离血清 ； 氧化酶法测 定血清 FBG、 LDL-C、 HDL-C 的含量。 0061 4、 试验结果结果以每组 (n 6) 平均值 SD 并以 Dunnett S 检验分析得出。 0062 4.1 各组合物药物对血糖的影响 ： 0063 组别 FBGmmol/L 马来酸罗格列酮低剂量组 19.01.5 马来酸罗格列酮高剂量组 17.51.9 牛蒡苷元低剂量组 20.02.5 牛蒡苷元高剂量。
29、组 17.81.8 组合物 A 组 14.51.7 组合物 B 组 12.31.9 组合物 C 组 14.82.0 组合物 D 组 13.22.0 模型组 21.53.7 正常对照组 5.50.78 0064 结果分析 ： 从实验结果来看， 组合物 A 组、 B 组、 C 组、 D 组与马来酸罗格列酮高剂量 组和低剂量组、 牛蒡苷元高剂量组和低剂量组、 模型组、 正常对照组相比具有极显著性差异 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A8/10 页 10 (p 0.01)。 0065 马来酸罗格列酮组、 牛蒡苷元组、 及本发明药物组相对于模型组来说， 都能一定程 度。
30、的降低血糖。但以本发明药物组降糖效果最好， 并明显优于马来酸罗格列酮高剂量组和 低剂量组、 牛蒡苷元高剂量组和低剂量组， 具有极显著性差异 (p 0.01)。 0066 4.2 各组药物对血脂的影响 ： 0067 组别 HDL-Cmmol/L LDL-Cmmol/L 马来酸罗格列酮低剂量组 0.400.15 1.630.40 马来酸罗格列酮高剂量组 0.500.13 1.500.60 牛蒡苷元低剂量组 0.300.15 2.050.45 牛蒡苷元高剂量组 0.480.08 1.880.58 组合物 A 组 0.650.18* 1.020.24# 组合物 B 组 0.710.12* 0.990.。
31、41# 组合物 C 组 0.750.15* 1.110.61# 组合物 D 组 0.690.12* 0.900.41# 模型组 0.190.13 2.710.55 正常对照组 0.820.12 0.340.10 0068 与马来酸罗格列酮高剂量组或低剂量组、 牛蒡苷元高剂量或低剂量组、 模型组、 正 常对照组相比 ： *p 0.05 ；#p 0.05 ； 与模型组相比*p 0.01 ；#p 0.01。 0069 结果分析 ： 从实验结果来看， 马来酸罗格列酮高剂量组或低剂量组、 牛蒡苷元高剂 量或低剂量组、 及本发明药物组合物 A、 B、 C、 D 组相对于模型组来说， 都能一定程度的降低 血。
32、脂。但是以本发明药物组合物 A、 B、 C、 D 组降血脂效果最好， 并明显优于马来酸罗格列酮 高剂量组或低剂量组、 牛蒡苷元高剂量或低剂量组 (p 0.01)。 0070 实验结论 ： 实验结果表明， 本发明药物具有降低血糖的作用， 同时具有降低血脂的 作用。达到同等降血糖的效果时， 本发明药物组合物中所使用的马来酸罗格列酮的量比单 独使用马来酸罗格列酮的量要少的多， 本发明药物的降血糖降血脂效果优于单独使用其任 一组分， 本发明药物能够安全有效的治疗糖尿病， 尤其是糖尿病并发高血脂的患者。 0071 4.3 各组药物对尿微量清蛋白含量及肾指数的影响 0072 (1) 尿微量清蛋白含量测定 。
33、0073 1、 试剂 ： 1、 10 (v/v) 的冰醋酸溶液 (PH2.8)。 0074 2、 0.303mol/L 甘氨酸 - 冰醋酸缓冲液 (PH3.0) ： 称取 22.72g 甘氨酸， 用 10冰醋 酸溶液稀释成 1000ml， 加 NaN3100mg， 室温密封可稳定 1 年。 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A9/10 页 11 0075 3、 溴酚蓝(1.924mmol/L)贮存液 ： 精确称取257.36mgBPB， 用无水乙醇溶至200ml， 4冰箱可稳定 1 年。 0076 4、 溴酚蓝 (0.231mmol/L) 显色剂 ： 取 60。
34、mlBPB 贮存液， 加入 2.5mlTriton X-100， 用甘氨酸 - 冰醋酸缓冲液稀释至 500ml， 室温密封可保存 1 年。 0077 标本的采集和检测 ： 于第 5 周末将大鼠分别放于代谢笼中饲养， 收集隔夜 12 小时 尿， 准确记录尿量。取 4ml， 叠氮钠处理后， 离心 (2000r/min)10min， 取上清液置 -20冰箱 保存待测尿微量清蛋白。取相应浓度的尿微量清蛋白标准液 400L 于对应的杯内， 各加 200L 显色剂， 混匀 ( 防止产生气泡 )， 用紫外分光光度计， 于 600nm 下测定吸光度 A。 0078 (2) 肾指数的测定 0079 准确称取大鼠。
35、体重后， 颈椎脱位法处死大鼠， 打开腹腔， 取出肾脏， 称湿重。 以两肾 总湿重 / 体重得出大鼠肾指数值。 0080 各组药物对糖尿病大鼠尿微量清蛋白和肾指数的影响 0081 组别 n 吸光度 A(600nm) 肾指数 ( ) 模型组 6 0.6600.231 0.980.055 牛蒡苷元低剂量组 6 0.6420.209 0.880.045 牛蒡苷元高剂量组 6 0.5510.145 0.850.065 马来酸罗格列酮低剂量组 6 0.5910.132 0.790.014 马来酸罗格列酮高剂量组 6 0.4620.137 0.800.061* 组合物 A 组 6 0.3640.322* 0。
36、.720.013* 组合物 B 组 6 0.3420.284* 0.690.025* 组合物 C 组 6 0.3900.045* 0.710.053* 组合物 D 组 6 0.3330.246* 0.700.035* 0082 * 与模型组相比较， P 0.05， * 与模型组相比较， P 0.01。 0083 结果分析 ： 从实验结果来看， 本发明药物组合物 A、 B、 C 组相对于模型组来说， 与模 型组比较， *p 0.05， 有显著性差异 ； 与模型组比较，*p 0.01， 有极显著性差异。说明牛 蒡苷元和吡格列酮或其可药用盐联合应用在影响大鼠尿微量清蛋白和肾指数方面有很好 的协同作用。
37、。 0084 4.4 各组药物对高血压模型大鼠血压的影响 0085 从第一周末开始， 每两周进行一次尾动脉收缩压测定。结果表明， 各给药组与模 型组均有显著性差异， 说明牛蒡苷元和吡格列酮或其可药用盐联合应用具有较好的降压作 用， 在降低大鼠血压方面有很好的协同作用。 0086 表 3 复方对大鼠血压的影响 (kPa) 说 明 书 CN 102218062 A CN 102218071 A10/10 页 12 0087 组别 n 1 周末 3 周末 5 周末 模型组 6 18.883.6 18.514.1 18.804.2 牛蒡苷元低剂量组 6 18.90+4.0 19.011.8 18.70。
38、3.1 牛蒡苷元高剂量组 6 18.043.2 18.123.5 18.103.3 马来酸罗格列酮低剂量组 6 17.802.3 17.652.1 17.112.4 马来酸罗格列酮高剂量组 6 17.633.0 16.992.6 16.782.7 组合物 A 组 6 17.742.9 16.883.1 16.002.4* 组合物 B 组 6 17.543.3 16.452.8* 16.203.2* 组合物 C 组 6 17.613.4 17.091.9 16.123.1* 组合物 D 组 6 17.513.7 17.002.0 16.152.1* 0088 * 与模型组相比较， P 0.05。 0089 实验结论 ： 实验结果表明， 本发明的药物组合物与现有技术相比， 特别是与单方给 药相比， 在改善血糖、 降低血脂和糖化血清蛋白水平方面取得了意想不到的技术效果， 具有 显著的优势， 并具协同作用， 同时对预防和 / 或治疗糖尿病及其并发症治如肾脏疾病， 尤其 是与 H 型糖尿病有关的肾脏疾病等方面具有极其显著的优势， 并取得了很好的协同效果。 说 明 书 CN 102218062 A 。