发明领域
本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别涉及一种治疗心律失常的药物组合 物及其制备方法。
背景技术
心律失常(Cardiac Arrhythmia)是指心脏冲动的频率、节律、起源部位、传导速 度与激动次序的异常。正常的心脏激动起源于心脏的窦房结，窦房结是心脏起搏的最高 “司令部”。由“司令部”发出的“指令”按一定的顺序和时间依次下传到心房和心室， 激发心脏相应的部位产生激动。
心律失常是临床常见病、多发病，严重的心律失常是心肌肥厚、心肌缺血、心肌梗 死及心力衰竭等患者的最终死因之一。近年来，西医的非药物方式治疗心律失常取得了 重大的进展，如射频导管消融根治房室结折返性心动过速、房室折返性心动过速、心房 扑动和室性心动过速；埋藏式自动心脏复律除颤器(ICD)可显著改善恶性心律失常的预 后。但是，心房颤动的射频导管消融的疗效不确切，恶性室性心律失常的射频导管消融 成功率低，或即使接受了ICD治疗也需要长期服药。因此，抗心律失常药物仍然是治疗 心律失常的主要方法。然而，抗心律失常西药制剂普遍存在致(促)心律失常作用，以 及负性变力性、脏器毒性作用等毒副反应，尤其是大型流行病学试验——心律失常抑制 试验(CAST)结果表明，用I类抗心律失常药物治疗心肌梗死后病人的室性早搏和非持 续性室速，非但不能改善病人的预后，反而显著增加病人的猝死和病死率。因此，选择 适合的抗心律失常药物对于该疾病的防治至关重要。
中医药治疗心律失常，在缓解症状和改善生活质量等方面具有一定优势，显示了良 好应用前景。心律失常属于中医“心悸”、“怔忡”的范畴。中医学认为，心悸多由于脏 腑气血阴阳虚损、内伤七情、气滞血瘀交互作用致心失所养、心脉失畅而引起。多数中 医学者认为，心悸属本虚标实之证，发病乃由素体虚弱、正气亏虚(本虚)，邪毒乘虚而 入(标实)，侵及心脉所致。通过分型辨证选用适宜的中成药，对于改善上述症状、控制 病情有较好的疗效。
我们根据多年来科学研究和大量的临床治疗经验，从本病的病因病机入手，确立了 益气解毒的治疗方法，在临床上治疗各种心律失常过程中获得了很好疗效：将人参和黄 连为君臣药物的中药复方应用于中医辨证为“心悸”气虚瘀毒的患者中，经连续2周左 右的治疗，心律失常等症状均能够得到很好的改善。
根据上述的中医“心悸”的益气解毒治疗原则，本发明在处方优化过程中，在多种 益气中药(包括人参、西洋参和黄芪等)中，优选了人参果总皂苷；在多种清热解毒药 (包括黄连、黄芩、黄柏和栀子等)中，优选了黄连总生物碱。可以在不降低原有药材 的药效作用基础上，提高对现有中药材的利用率，缓解资源匮乏的现状，同时还能极大 地降低新药研制的成本。
本发明提供的治疗心律失常的中药组合物的组成的科学性，得到了化学和现代中医 药学技术的证明。化学和现代中医药学技术表明：人参果具有降血压，降血糖，抗心律 失常和抗心肌缺血再灌注损伤等药理作用。其中，人参果总皂苷(Ginsengfruirsaponins， GFS)是人参果的主要有效活性成分，又称地精子皂苷，系从五加科人参的成熟果实中提 取的人参皂苷类物质。现已经研究证明：该人参皂苷类物质含有人参皂苷Re、Rb1、Rb2、 Rc、Rg1和Rd等多种皂苷类成分。对其进行的理化常数、紫外、核磁、质谱等检测测定， 确认了其化学结构并发现人参果总皂苷中人参皂苷Re含量最高，含量达85％，是人参根 的30倍，约占全果的6％。以人参果总皂苷替代人参入药，可以在不降低人参药效作用 的基础上，提高对现有人参药材的利用率，缓解人参资源匮乏的现状，同时还能极大地 降低新药研制的成本。
化学和现代中医药学技术表明：黄连干燥根茎中含有黄连总生物碱。黄连总生物碱 是毛茛科植物黄连干燥根茎中提取的主要有效活性成分。现已经研究证明：该黄连总生 物碱含有小檗碱、黄连碱、甲基黄连碱、巴马亭、药根碱、表小檗碱及木兰花碱等。黄 连总生物碱具有显著的抗心力衰竭、抗心律失常、降低胆固醇、抗制血管平滑肌增殖、 改善胰岛素抵抗、抗血小板、抗炎等作用；其中，抗心律失常的作用尤为显著。大量研 究表明，黄连总生物碱能够通过延长动作电位时程和有效不应期、抑制钠通道、抑制钙 离子内流和抗自由基损伤等药理作用，能抑制各种心律失常、消除折返。以黄连中的总 生物碱提取物入药，可以有效地提高黄连的药效作用，达到去粗取精的目的。
发明内容
本发明的目的在于公开一种治疗心律失常的药物组合物，本发明的另一个目的在于 公开该药物组合物的制备方法。
本发明目的是通过如下方案实现的：
本发明药物组合物的原料药组成为：
人参果 8-30重量份 黄连 1重量份；
本发明药物组合物的原料药组成优选为：
人参果 12重量份 黄连 1重量份；
本发明药物组合物的原料药组成优选为：
人参果 25重量份 黄连 1重量份。
本发明药物组合物的原料药组成为：
人参果总皂苷提取物 0.8-4重量份 黄连总生物碱提取物 1重量份；
本发明药物组合物的原料药组成优选为：
人参果总皂苷提取物 1.2重量份 黄连总生物碱提取物 1重量份；
或
人参果总皂苷提取物 2重量份 黄连总生物碱提取物 1重量份；
或
人参果总皂苷提取物 3重量份 黄连总生物碱提取物 1重量份；
或
人参果总皂苷提取物 1.8重量份 黄连总生物碱提取物 1重量份。
本发明药物组合物的制备方法为：
人参果总皂苷提取物的制备方法：从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加 0.5-1.5重量倍的纯化水后，搅拌5-15分钟，静置，冷沉2-4h，吸取上清液，金属滤网 粗滤，滤液导入贮液罐中；余下果浆提取2次：第一次加0.5-1.5重量倍纯化水加热提 取1-3h，第二次加0.5-1.5重量倍纯化水加热提取1-3h，两次提取液经板框过滤，滤液 与上清液过滤到高位槽后进D101大孔树脂柱吸附果苷，流速为1-4L/min，按口尝有苦味 时则判定树脂柱吸附饱和，D101大孔树脂柱吸附饱合后，用纯化水将管路及树脂柱中药 液全部顶出并收集到高位槽，再次上柱吸附，然后用纯化水从下至上洗树脂至无色，再用 70-90％V/V的乙醇从上至下，流速3.5-6.5L/min，洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真 空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷 雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取物；
黄连总生物碱提取物的制备方法为：黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加 入8-12重量倍60-80％V/V的乙醇，回流提取2-5次，每次0.5-2.5h，过滤，合并滤液， 60℃下减压浓缩回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml，得黄连提取物，取黄连提取物适量， 用3-8％w/w的NaOH调至pH5～6，按生药与树脂质量比为1∶1的比例进大孔树脂吸附，流 速为1-3BV/h，以2-5BV的纯化水洗脱后，以3-8BV的40-60％V/V的乙醇洗脱，收集洗脱 液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇至无醇味后，在60℃下药液浓缩至相对 密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥，得到黄连总生物碱提取物。
本发明药物组合物的制备方法优选为：
人参果总皂苷提取物的制备方法：从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加1 重量倍的纯化水后，搅拌10分钟，静置，冷沉3h，吸取上清液，金属滤网粗滤，滤液导 入贮液罐中；余下果浆提取2次：第一次加1重量倍纯化水加热提取2h，第二次加1重 量倍纯化水加热提取1.5h，两次提取液经板框过滤，滤液与上清液过滤到高位槽后进D101 大孔树脂柱吸附果苷，流速为2-3L/min，按口尝有苦味时则判定树脂柱吸附饱和，D101 大孔树脂柱吸附饱合后，用纯化水将管路及树脂柱中药液全部顶出并收集到高位槽，再 次上柱吸附，然后用纯化水从下至上洗树脂至无色，再用80％V/V的乙醇从上至下，流速 5.5L/min，洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下 药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取 物。见图1。
黄连总生物碱提取物的制备方法：黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加入 10重量倍70％V/V的乙醇，回流提取3次，每次1h，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩 回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml，得黄连提取物，取黄连提取物适量，用5％w/w的NaOH 调至pH5～6，按生药与树脂质量比为1∶1的比例进大孔树脂吸附，流速为2BV/h，以3BV 的纯化水洗脱后，以5BV的50％V/V的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回 收罐中，回收乙醇至无醇味后，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经 喷雾干燥机喷雾干燥，得到黄连总生物碱提取物。见图2。
其中所述的人参果为五加科人参的成熟干燥果实；所述的黄连为毛茛科植物黄连干 燥根茎。
其中人参果总皂苷提取物优选参照中国药典2005年版(第一部附录VID)方法，采 用高效液相色谱法测定人参果总皂苷提取物中人参皂苷Re(C48H82O18)的含量不得少于 6-10％，参照中国药典2005年版(第一部附录VA)方法，采用紫外-可见分光光度法，以 人参皂苷Re为对照品测定人参果总皂苷提取物中总皂苷的含量为70-90％；优选人参果总 皂苷提取物中人参皂苷Re(C48H82O18)的含量不得少于8.0％，人参果总皂苷提取物中总皂苷 的含量为82％。
其中黄连总生物碱提取物优选参照《中国药典》第2005版(第一部附录VA)方法， 采用紫外分光光度法测定黄连总生物碱提取物中的总生物碱的含量为40-60％，优选黄连 总生物碱提取物中的总生物碱的含量为50％。
取上述原料药，混合均匀后，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的颗 粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、缓释制剂、口服液体制剂或注射剂等。
本发明药物组合物的比例范围以人参果总皂苷提取物中人参皂苷Re(C48H82O18)、总皂 苷和黄连总生物碱提取物中的总生物碱的含量为基础涵盖了不同的提取率，当提取率高 时，投放的原料药就少，提取率低，则相应增加原料药的投放。
药理实验结果表明，本发明提供的治疗心律失常的中药组合物，可有效抵抗电刺激 家兔心脏诱发的心律失常，乌头碱诱发的大鼠心律失常和冠状动脉结扎导致的犬心律失 常，可以明显的延长有效不应期(ERP)，提高室颤阈(VFT)，减少室性早搏(VP)次数和室 性心动过速(VT)次数，可使豚鼠心室乳头肌细胞动作电位幅度(APA)和动作电位上升速率
(Vmax)显著降低，有效不应期(ERP)及动作电位持续时间(APD)显著增高，是治疗 心律失常(中医病名：心悸)的有效中药组合物。
附图说明
图1是人参果总皂苷提取物的提取纯化工艺流程图。
图2是黄连总生物碱提取物的提取纯化工艺流程图。
下述实验例和实施例均用于说明但不限于本发明。
实验例1 组合物对离体豚鼠心室乳头肌细胞动作电位的影响(体外实验)
1.1实验方法
(1)实验动物及分组：300g-400g豚鼠(中国科学院遗传研究所动物中心提供)30 只，雌雄不限。动物随机分为3组：正常对照组(予生理盐水)、缺血缺氧组(予生理盐水)、 缺血缺氧+组合物组(组合物由实施例1方法制备，予按成人剂量换算后剂量的组合物)， 每组8只，连续喂养10天。
(2)给药方法：正常对照组，用改良的Locke液冲以95％(V/V)O2和5％(V/V)CO2恒温、恒速灌流。缺血缺氧组，灌流液模拟缺氧成分(mmol/l)，NaCL 134.3，KCL 5.4，CaCl21.8，MgCl2 0.5，NaHCO3，NaH2PO4 0.9，乳酸钠20.2，并在缺血液中通以95％(V/V)O2和5％ (V/V)CO2饱和气体灌流，(PO2在5kPa左右)缺血缺氧+组合物组，在缺血缺氧灌流液中 加入组合物。
(3)豚鼠心室乳头肌细胞分离和动作电位的记录：击昏开胸，迅速取出心脏，置于 37℃的95％(V/V)O2和5％(V/V)CO2饱和的台氏液中，分离出乳头肌，固定于恒温(36 ±0.5)℃、恒流(5ml·mon-1)灌流槽底部。用为操纵仪将双极不锈钢电极插入细胞， 待放大器上显示出电位-70～-90mV即为静息电位，然后用刺激器经刺激隔离器输出波宽 1ms、强度为阈值的1.5倍的刺激，频率为1Hz。记录电极为充以3mmol·L-1Kcl的玻璃电 极，电阻为10-15MΩ，插入后引出动作电位，信号经微电极放大器放大后输入双线示波 器中，同时经BL420S生物机能实验系统输入计算机中，用专业软件程序处理分析。
(4)观察指标：有效不应期(ERP)、动作电位持续时间(APD)，动作电位幅度(APA) 和动作电位上升速率(Vmax)。
1.2.统计方法
采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差表示，组间 比较用t检验，P＜0.05认为有统计学意义。
1.3实验结果
见表1。与缺血缺氧组相比，缺血缺氧+组合物组可使心室肌细胞APA、Vmax显著降 低(P＜0.05)，使ERP及APD显著增高(P＜0.05)。
表1组合物对离体豚鼠心室乳头肌细胞动作电位的影响
注：与缺血缺氧组相比，*P＜0.05。
实验例2 组合物治疗电刺激家兔心脏诱发的心律失常实验研究(体内实验)
1.1试验方法
(1)实验动物与分组
清洁级新西兰兔42只，雌雄不拘，体重2.5±0.25kg，随机分为4组：正常对照组(予 生理盐水)、模型对照组，阳性药对照组(予乙胺碘呋酮)、组合物组(予以由实施例1方法 制备的组合物)，每组8只，连续喂养10天。
(2)室颤阈测定实验：
给药期间自由饮食、饮水，至给药第9天禁食。末次给药后30min，用戊巴比妥钠 30mg/kg静脉麻醉，仰卧位固定，在兔四肢内侧皮下安插电极针，同步描记3导心电图； 颈胸部备皮，气管插管，接呼气机，经右颈总动脉插入双极导管，置导管的电极端于主 动脉起始部调整电极，直至图像上出现满意的H波，记录希氏束电图，将另一根四极导 管由右颈外静脉插入右心房，导管极间距为2mm，极宽为1mm，外径1.5mm，以其一对电 极起搏心房，用另一对电极记录右心房电信号，并且以此信号的波形判断电极的位置， 起搏电极于右心室上部，完成心房程控刺激后，急需推送导管至右心室，记录V波，再 行心室程控刺激，电流强度为2倍舒张期阈值，脉宽2ms。
(3)指标测定：
舒张期兴奋阈(DET)：采用S1S2法测定。采用(波宽2ms，波间隔148ms，强度1mA)驱 动心脏，于第8个S1后100ms施加一个S2刺激(波宽2ms)，初始强度0.1mA，先以0.1mA 递增，再以0.02mA精确，以能引起心室兴奋的最小刺激强度为DET。
有效不应期(ERP)：采用S1S2法，S1设置同前，以2倍DET强度的S2在舒张后期 (100ms)逐步前移，先以10ms步长测定，再以2ms步长精确，直至S2不能引起心室兴奋， 此时的S1，S2间期即为ERP。
室颤阈(VFT)测定：采用串刺激，波宽5ms，波间隔5ms，脉冲数10。刺激发放采用 R波触发，每25个心搏触发一次刺激，每次递增0.5mA，以刚能诱发室颤(≥6个不规则 的室性波)的最小刺激强度为室颤阈。
1.2统计方法
采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差表示，组间 比较用t检验，P＜0.05认为有统计学意义
1.3实验结果：
见表2。电刺激家兔心脏后，诱发心律失常，与模型对照组比较，ERP及VFT在阳性 组、组合物干预组明显升高(P＜0.05)，与阳性对照组比较，无统计学意义。
表2组合物对电刺激家兔心脏诱发的心律失常的影响
注：与模型对照组比较，*P＜0.05。
实验例3 组合物抗乌头碱诱发的大鼠心律失常作用的药效学研究(体内实验)
1.1试验方法
(1)实验动物及分组
健康清洁级SD大鼠30只，体重180±20g，雄性。(中国科学院遗传研究所动物中心 提供)，随机分为3组，每组10只。第1组为模型组，给予生理盐水；第2组为试验组， 给予由实施例1方法制备的组合物；第3组为阳性对照组，给予乙胺碘呋酮。
(2)乌头碱诱发的大鼠心律失常模型的建立：以上各组灌胃体积为20ml·kg-1。试 验前30min灌胃给药，然后分别给予各组大鼠腹腔注射戊巴比妥钠(30mg·kg-1)麻醉， 固定于手术台，分离左颈静脉插管输入药物，尾静脉插入头皮针输入乌头碱。作II导联 心电记录。用晨动泵从尾静脉以5μg·kg-1·min-1恒速推注乌头碱，直至心跳停止，其 间监测心电变化。
(3)指标测定：记录室性早搏(VP)、室性心动过速(VT)、室性纤颤(VF)和心脏停 跳(CA)时的乌头碱用量。
1.2统计方法：采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差表示，组间比较用t检验，P＜0.05认为有统计学意义。
1.3实验结果：
见表3。与模型对照组相比，组合物与阳性对照组的室性早搏(VP)、室性心动过速 (VT)、室性纤颤(VF)和心脏停跳(CA)时的乌头碱用量均明显增加(P＜0.05)，阳性对照 组与模型对照组相比，无统计学意义。
表3组合物对乌头碱诱发的大鼠心律失常影响(μg)
注：与模型对照组比较，*P＜0.05
实验例4 组合物抗冠状动脉结扎致犬心律失常作用的药效学研究
1.1实验方法
(1)实验动物与分组：健康比格犬，24只，随机分为4组(n＝6)，第1组为正常对 照组，给予生理盐水；第2组为模型对照组，给予生理盐水；第3组为阳性药物对照组， 灌胃给予乙胺碘呋酮；第4组为试验用药组，给予由实施例1方法制备的组合物。
(2)冠状动脉结扎致犬心律失常模型的建立：实验时予腹腔注射戊巴比妥钠 30mg·kg-1麻醉，固定于手术台，行气管切开术作气管插管连接呼吸机进行人工通气；作 左颈动脉、颈静脉分离，行动脉插管监测、记录血压，行颈静脉插管缓慢滴注生理盐水(每 分钟8-10滴)保持静脉通畅，以备给药；固定心电图电极于动物四肢以监测、记录心电图 情况；分别记录5min正常心电图后，于左胸第四肋间隙开胸，暴露心脏，于左冠状动脉 前降支1/2处结扎造成心肌缺血改变。待心电图出现改变时，记录5min心电图结果，然 后按上述分组及剂量分别给予生理盐水、乙胺碘呋酮或组合物，并记录给药后心电图变 化。
(3)指标测定：分别统计给药前后心率、每5min内出现的室性早搏(VP)次数、室 性心动过速(VT)次数，计算室性早搏百分率，室性心动过速百分率。
1.2统计方法
采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差表示，并 用t检验分析组内用药前后及对照组与给药组间的差异，P＜0.05认为有统计学意义。
1.3实验结果：
见表4。冠状动脉结扎致犬心律失常后，给予不同处理之后，与模型对照组比较，阳 性对照组和组合物干预组均可以明显减少室性早搏(VP)百分率和室性心动过速(VT)百分 率(P＜0.05)。
表4组合物对冠状动脉结扎致犬心律失常的影响(μg，n＝10)
注：与正常对照组比较，*P＜0.05
实验例5 本发明药物组合物原料药的制备及协同实验
1.样品及给药剂量
(1)人参果总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物组合物样品
按质量比为1.2∶1的比例取实施例1制备的人参果总皂苷提取物(总皂苷含量为82％) 和黄连总生物碱提取物(总生物碱含量为50％)的混合物适量，按120mg/kg剂量灌胃给予 大鼠，观察药效作用。
(2)人参果总皂苷提取物样品
取实施例1制备的人参果总皂苷提取物(总皂苷含量为82％)适量，按120mg/kg剂量 灌胃给予大鼠，观察药效作用。
(3)黄连总生物碱提取物样品
取实施例1制备的黄连总生物碱提取物(总生物碱含量为50％)适量，按120mg/kg剂 量灌胃给予大鼠，观察药效作用。
2.药效作用研究
采用大鼠对本发明药物组合物和其原料药的药效作用进行了比较。药理实验方法与 结果如下：
健康SD大鼠40只，体重160g～280g，分为模型组(给予生理盐水)、阳性药组(给 予乙胺碘呋酮)、本发明药物组合物组、人参果皂苷提取物组和黄连总生物碱提取物组 (n＝8只)。给予对应药物14d后，禁食水8h。静脉注射1.2g/kg乌拉坦麻醉。仰卧位固 定，暴露股静脉，置留置针，采用生物信号采集系统记录标准肢体II导联心电图，对应 分组静脉注射乌头碱30L/kg，5s内注完，观察指标：室性早搏(VPB)，室性心动过速(VT)， 心室颤动(VF)的发生次数和单次的持续时间。心律失常评分法： Score＝(log10VPBs)+2(log10number of episodes of VT)+2[(log10number of episodes of VF)+(log10 total duration of VF)]，用于对心律失常严重程度进行定量分析。
表5药效比较结果
注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
实验结果说明，本发明药物组合物组的药效作用明显优于人参果总皂苷提取物或黄 连总生物碱提取物单独用药组。
实验例6本发明药物制剂的配比筛选实验
根据中医益气养阴清热法治疗心悸的配伍原则，以大鼠的心律失常评分为考察指标， 比较了人参果总皂苷提取物与黄连总生物碱提取物以0.6∶1、1.2∶1、1.8∶1和2.4∶1的 比例混合的组合物(组合物由实施例1方法制备，分别相当于人参果总皂苷提取物有效成 分与黄连总生物碱提取物有效成分的质量比为1∶1、2∶1、3∶1和4∶1)的药效作用，以大 鼠的心律失常评分为考察指标，比较各不同比例提取物的药效作用，实验方法同上。结 果见表6。
表6不同比例的人参果总皂苷与黄连总生物碱的药效差异比较
注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
实验结果说明，人参果总皂苷与黄连总生物碱的最佳比例为2∶1(相当于人参果总皂 苷提取物与黄连总生物碱提取物的质量比为1.2∶1)。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施方式
实施例1：胶囊剂
从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加1重量倍的纯化水后，搅拌10分钟， 静置，冷沉3h，吸取上清液，金属滤网粗滤，滤液导入贮液罐中；余下果浆提取2次： 第一次加1重量倍纯化水加热提取2h，第二次加1重量倍纯化水加热提取1.5h，两次提 取液经板框过滤，滤液与上清液过滤到高位槽后进D101大孔树脂柱吸附果苷，流速为 2-3L/min，按口尝有苦味时则判定树脂柱吸附饱和，D101大孔树脂柱吸附饱合后，用纯 化水将管路及树脂柱中药液全部顶出并收集到高位槽，再次上柱吸附，然后用纯化水从下 至上洗树脂至无色，再用80％V/V的乙醇从上至下，流速5.5L/min，洗脱，收集洗脱液， 将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13， 浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋 上，检验合格后，密封保存。
其中人参果总皂苷提取物参照中国药典2005年版(第一部附录VID)方法，采用高 效液相色谱法测定人参果总皂苷提取物中人参皂苷Re(C48H82O18)的含量不得少于8.0％；参 照中国药典2005年版(第一部附录VA)方法，采用紫外-可见分光光度法，以人参皂苷 Re为对照品测定人参果总皂苷提取物中总皂苷的含量为82％。
黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加入10重量倍70％V/V的乙醇，回流提取 3次，每次1h，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml，得 黄连提取物，取黄连提取物适量，用5％w/w的NaOH调至pH5～6，按生药与树脂质量比为 1∶1的比例进大孔树脂吸附，流速为2BV/h，以3BV的纯化水洗脱后，以5BV的50％V/V 的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇至无醇味后，在 60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥，得到黄连总生 物碱提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存。
其中黄连总生物碱提取物参照《中国药典》第2005版(第一部附录VA)方法，采用 紫外分光光度法测定黄连总生物碱提取物中的总生物碱的含量为50％。
取人参果总皂苷提取物40g和黄连总生物碱提取物20g，充分混匀后，加入常规辅料， 按照常规工艺制备成胶囊，每粒胶囊0.25g，约含人参果总皂苷20mg，黄连总生物碱10mg， 成人日用量：2粒/次，3次/日。禁忌：忌与五灵脂、藜芦同服。
实施例2：片剂
从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加1.5重量倍的纯化水后，搅拌8分 钟，静置，冷沉2.5h，吸取上清液，金属滤网粗滤，滤液导入贮液罐中；余下果浆提取 2次：第一次加1.3重量倍纯化水加热提取2.5h，第二次加0.8重量倍纯化水加热提取 1.2h，两次提取液经板框过滤，滤液与上清液过滤到高位槽后进D101大孔树脂柱吸附果 苷，流速为3-4L/min，按口尝有苦味时则判定树脂柱吸附饱和，D101大孔树脂柱吸附饱 合后，用纯化水将管路及树脂柱中药液全部顶出并收集到高位槽，再次上柱吸附，然后用 纯化水从下至上洗树脂至无色，再用85％V/V的乙醇从上至下，流速4L/min，洗脱，收 集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下药液浓缩至相对密度 为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取物，取样装袋后，填写 标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存。
其中人参果总皂苷提取物参照中国药典2005年版(第一部附录VID)方法，采用高 效液相色谱法测定人参果总皂苷中人参皂苷Re(C48H82O18)的含量不得少于7.0％；参照中国 药典2005年版(第一部附录VA)方法，采用紫外-可见分光光度法，以人参皂苷Re为对 照品测定人参果总皂苷提取物中总皂苷的含量为86％。
黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加入11重量倍65％V/V的乙醇，回流提 取3次，每次2h，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml， 得黄连提取物，取黄连提取物适量，用6％w/w的NaOH调至pH5～6，按生药与树脂质量比 为1∶1的比例进大孔树脂吸附，流速为1.5BV/h，以2.5BV的纯化水洗脱后，以4BV的 55％V/V的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇至无醇味 后，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥，得到 黄连总生物碱提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存。
其中黄连总生物碱提取物参照《中国药典》第2005版(第一部附录VA)方法，采用 紫外分光光度法测定黄连总生物碱提取物中的总生物碱的含量为56％。
取人参果总皂苷提取物24.4g和黄连总生物碱提取物20g，充分混匀后，加入常规辅 料，按照常规工艺制备成片剂。
实施例3：丸剂
取实施例1制备的人参果总皂苷提取物18g和黄连总生物碱提取物20g，充分混匀后， 加入常规辅料，按照常规工艺制备成丸剂。
实施例4：口服液体制剂
按质量比为1.8∶1的比例取人参果总皂苷提取物和黄连总生物碱提取物，充分混匀 后，加入常规辅料，按照常规工艺制备成口服液体制剂，其中人参果总皂苷提取物中人参 皂苷Re(C48H82O18)的含量不得少于6.0％，总皂苷的含量为88％，黄连总生物碱提取物中的 总生物碱的含量为50％。
实施例5：颗粒剂
按质量比为4∶1的比例取人参果总皂苷提取物和黄连总生物碱提取物，充分混匀后， 加入常规辅料，按照常规工艺制备成颗粒剂，其中人参果总皂苷提取物中人参皂苷 Re(C48H82O18)的含量不得少于9.0％，总皂苷的含量为75％，黄连总生物碱提取物中的总生 物碱的含量为45％。
实施例6：滴丸剂
按质量比为3∶1的比例取人参果总皂苷提取物和黄连总生物碱提取物，充分混匀后， 加入常规辅料，按照常规工艺制备成颗粒剂，其中人参果总皂苷提取物中人参皂苷 Re(C48H82O18)的含量不得少于10％，总皂苷的含量为80％，黄连总生物碱提取物中的总生物 碱的含量为42％。
实施例7：片剂
人参果 12kg 黄连 1kg
从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加1重量倍的纯化水后，搅拌10分钟， 静置，冷沉3h，吸取上清液，金属滤网粗滤，滤液导入贮液罐中；余下果浆提取2次： 第一次加1重量倍纯化水加热提取2h，第二次加1重量倍纯化水加热提取1.5h，两次提 取液经板框过滤，滤液与上清液过滤到高位槽后进D101大孔树脂柱吸附果苷，流速为 2-3L/min，按口尝有苦味时则判定树脂柱吸附饱和，D101大孔树脂柱吸附饱合后，用纯 化水将管路及树脂柱中药液全部顶出并收集到高位槽，再次上柱吸附，然后用纯化水从下 至上洗树脂至无色，再用80％V/V的乙醇从上至下，流速5.5L/min，洗脱，收集洗脱液， 将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13， 浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋 上，检验合格后，密封保存；
黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加入10重量倍70％V/V的乙醇，回流提 取3次，每次1h，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml， 得黄连提取物，取黄连提取物适量，用5％w/w的NaOH调至pH5～6，按生药与树脂质量比 为1∶1的比例进大孔树脂吸附，流速为2BV/h，以3BV的纯化水洗脱后，以5BV的50％V/V 的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇至无醇味后，在 60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥，得到黄连总生 物碱提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存；
取上述人参果总皂苷提取物和黄连总生物碱提取物，充分混匀后，加入常规辅料， 按照常规工艺制备成片剂。
实施例8：胶囊
人参果 25kg 黄连 1kg
从人参果浆窖吸入人参果浆适量，装入罐中，加1.2重量倍的纯化水后，搅拌8分 钟，静置，冷沉2.5h，吸取上清液，金属滤网粗滤，滤液导入贮液罐中；余下果浆提取 2次：第一次加1.3重量倍纯化水加热提取2.5h，第二次加0.8重量倍纯化水加热提取 1.2h，两次提取液经板框过滤，滤液与上清液过滤到高位槽后进D101大孔树脂柱吸附果 苷，流速为3-4L/min，按口尝有苦味时则判定树脂柱吸附饱和，D101大孔树脂柱吸附饱 合后，用纯化水将管路及树脂柱中药液全部顶出并收集到高位槽，再次上柱吸附，然后用 纯化水从下至上洗树脂至无色，再用85％V/V的乙醇从上至下，流速4L/min，洗脱，收 集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，在60℃下药液浓缩至相对密度 为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥得人参果总皂苷提取物，取样装袋后，填写 标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存；
黄连药材粉碎后，取适量的黄连药材粉末，加入11重量倍65％V/V的乙醇，回流提 取3次，每次2h，过滤，合并滤液，60℃下减压浓缩回收乙醇，进一步浓缩至0.5g/ml， 得黄连提取物，取黄连提取物适量，用6％w/w的NaOH调至pH5～6，按生药与树脂质量比 为1∶1的比例进大孔树脂吸附，流速为1.5BV/h，以2.5BV的纯化水洗脱后，以4BV的 55％V/V的乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇至无醇味 后，在60℃下药液浓缩至相对密度为1.10-1.13，浓缩液经喷雾干燥机喷雾干燥，得到 黄连总生物碱提取物，取样装袋后，填写标签并挂在袋上，检验合格后，密封保存； 取上述制备的人参果总皂苷提取物和黄连总生物碱提取物，充分混匀后，加入常规辅料， 按照常规工艺制备成胶囊。
实施例9：滴丸
取人参果25kg和黄连1kg，按照常规工艺，加入常规辅料，制成滴丸。