技术领域
本发明属于动物药品的制备技术领域，具体涉及一种动物专用的大环内酯类 抗菌药磷酸替米考星微球的制备方法。
背景技术
替米考星(tilmicosin)是一种以泰乐菌素为前体半合成的畜禽专用抗生素， 由英国Elanco公司于20世纪80年代研制开发，具有很强的抗菌活性，抗菌谱 广，耐药性低，对所有的革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌、螺旋体、霉形体等 均有抑制作用。兽医临床常用其磷酸盐，但因现有的磷酸替米考星制剂的适口性 普遍较差，影响动物的采食，从而降低了药物对疾病的疗效。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种动物专用磷酸替 米考星微球的制备方法，将淡黄棕色至淡红棕色颗粒状的磷酸替米考星原料药采 用特定包衣包被后得到载药量适中，包封率高的白色磷酸替米考星微球，解决了 该药适口性差的问题，以更好地满足生产需要。
为了实现上述目的，本发明的技术方案一种动物专用磷酸替米考星微球的制 备方法，其步骤如下：
①将丙烯酸树脂溶于无水乙醇中，配制成浓度为5-15wt％的丙烯酸树脂的 无水乙醇溶液，称为溶液A；
所述丙烯酸树脂为德国罗姆(Rohm)丙烯酸树脂(尤特奇)RSPO；
②将磷酸替米考星原料药和大豆油按照重量比1∶1.25-1∶6.5混合，搅拌使 两者混合均匀，得混合物B；
③将溶液A加入到混合物B中，超声1min使其充分混匀，得混合物C；
其中混合物B中的磷酸替米考星原料药与溶液A中的丙烯酸树脂的重量比 为1∶2.12-1∶3.52；
④将司盘-80(SP-80)、粉末二氧化硅和液体石蜡混合后置于40℃水浴中， 在800-1000r/min的速度搅拌下，滴加混合物C，滴毕后继续在40℃水 浴中搅拌1-3h，使无水乙醇挥发完全，得到混合物D；
其中司盘-80、粉末二氧化硅、液体石蜡和混合物C中所含磷酸替米考星原 料药的比例为：(0.45-0.75g)∶(0.3-0.5g)∶(30-50mL)∶(0.25-0.5g)；
⑤混合物D用石油醚洗涤3次，以洗去液体石蜡，然后进行真空抽滤，所 得固体在40℃下烘干，即得本发明的磷酸替米考星微球。
本发明以淡黄棕色至淡红棕色颗粒状的磷酸替米考星原料药为原料，丙烯酸 树脂为包衣，将水溶性药物粉末包裹入隔离层的大豆油相内，通过界面分子作用 力包裹以及随后疏水性高分子溶液的第二次包囊。所制得的微球使药物的适口性 得到了极大的改善，且药物的包封率达到74.57％～99.82％。
本发明的优点和有益效果如下：
1、本发明采用人药常用的包衣丙烯酸树脂对适口性差的磷酸替米考星原料 药进行包被，使得药物的包封率较其他方法有明显的提高；
2、本发明中所选用的制备工艺简单，稳定性好，具有较好的产业化应用前 景；
3、本发明方法所制备的磷酸替米考星微球很好地解决了原料药直接饲喂所 引起的适口性差的问题，为药物的临床应用奠定了很好的基础。
附图说明
图1实施例1的药物溶出度曲线图；
图2实施例2的药物溶出度曲线图；
图3实施例3的药物溶出度曲线图；
图4实施例4的药物溶出度曲线图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明方法做进一步的阐述。
实施例1
一种动物专用磷酸替米考星微球的制备方法，其步骤如下：
(1)称取丙烯酸树脂RSPO 1.11g，溶于10mL的无水乙醇，得溶液A；
(2)称取0.5g磷酸替米考星原料药，加入到1.25g大豆油中，搅拌均匀，得 混合物B；
(3)将溶液A加入到混合物B中，超声1min使其充分混匀，得混合物C；
(4)将0.75g SP-80、0.5g二氧化硅和50mL液体石蜡混合后置于40℃水浴 中，在900r/min的速度搅拌下，滴加混合物C，滴毕后继续在40℃水浴中搅拌 1.0h，让无水乙醇挥发完，得到混合物D；
(5)混合物D用石油醚洗涤3次，每次用石油醚20mL，振荡离心后弃掉溶 液，以洗去液体石蜡，然后进行真空抽滤，所得固体在40℃下烘干，即得本发 明的磷酸替米考星微球。
所得的磷酸替米考星微球的理化性质稳定，通过高效液相色谱法测得载药量 和包封率的结果分别是24.56％和74.57％。对该例制得的微球样分装成三批，分 别存放至4℃冰箱、常温以及40℃烘箱中考察，发现微球的外观形态、粒径及其 分布、载药量、体外释药百分率与考察前均无显著变化，微球稳定性良好。
实施例2
一种动物专用磷酸替米考星微球的制备方法，其步骤如下：
(1)称取丙烯酸树脂RSPO 0.53g，溶于10mL的无水乙醇，得溶液A；
(2)称取0.25g磷酸替米考星原料药，加入到0.625g大豆油中，搅拌均匀， 得混合物B；
(3)将溶液A加入到混合物B中，超声1min使其充分混匀，得混合物C；
(4)将0.45g SP-80、0.5g二氧化硅和50mL液体石蜡混合后置于40℃水浴中， 在900r/min的速度搅拌下，滴加混合物C，滴毕后继续在40℃水浴中搅拌1.5h， 让无水乙醇挥发完，得到混合物D；
(5)混合物D用石油醚洗涤3次，每次用石油醚20mL，振荡离心后弃掉溶 液，以洗去液体石蜡，然后进行真空抽滤，所得固体在40℃下烘干，即得本发 明的磷酸替米考星微球。
所得的磷酸替米考星微球的理化性质稳定，通过高效液相色谱法测得载药量 和包封率的结果分别是26.45％和99.82％。对该例制得的微球样分装成三批，分 别存放至4℃冰箱、常温以及40℃烘箱中考察，发现微球的外观形态、粒径及其 分布、载药量、体外释药百分率与考察前均无显著变化，微球稳定性良好。
实施例3
一种动物专用磷酸替米考星微球的制备方法，其步骤如下：
(1)称取丙烯酸树脂RSPO 1.11g，溶于10mL的无水乙醇，得溶液A；
(2)称取0.375g磷酸替米考星原料药，加入到0.625g大豆油中，搅拌均匀， 得混合物B；
(3)将溶液A加入到混合物B中，超声1min使其充分混匀，得混合物C；
(4)将0.6g SP-80、0.4g二氧化硅和40mL液体石蜡混合后置于40℃水浴中， 在900r/min的速度搅拌下，滴加混合物C，滴毕后继续在40℃水浴中搅拌2.0h， 让无水乙醇挥发完，得到混合物D；
(5)混合物D用石油醚洗涤3次，每次用石油醚20mL，振荡离心后弃掉溶 液，以洗去液体石蜡，然后进行真空抽滤，所得固体在40℃下烘干，即得本发 明的磷酸替米考星微球。
所得的磷酸替米考星微球的理化性质稳定，通过高效液相色谱法测得载药量 和包封率的结果分别是25.39％和97.83％。对该例制得的微球样分装成三批，分 别存放至4℃冰箱、常温以及40℃烘箱中考察，发现微球的外观形态、粒径及其 分布、载药量、体外释药百分率与考察前均无显著变化，微球稳定性良好。
实施例4
一种动物专用磷酸替米考星微球的制备方法，其步骤如下：
(1)称取丙烯酸树脂RSPO 1.76g，溶于10mL的无水乙醇，得溶液A；
(2)称取0.5g磷酸替米考星原料药，加入到1.625g大豆油中，搅拌均匀， 得混合物B；
(3)将溶液A加入到混合物B中，超声1min使其充分混匀，得混合物C；
(4)将0.75g SP-80、0.5g二氧化硅和50mL液体石蜡混合后置于40℃水浴 中，在1000r/min的速度搅拌下，滴加混合物C，滴毕后继续在40℃水浴中搅拌 1.5h，让无水乙醇挥发完，得到混合物D；
(5)混合物D用石油醚洗涤3次，每次用石油醚20mL，振荡离心后弃掉溶 液，以洗去液体石蜡，然后进行真空抽滤，所得固体在40℃下烘干，即得本发 明的磷酸替米考星微球。
所得的磷酸替米考星微球的理化性质稳定，通过高效液相色谱法测得载药量 和包封率的结果分别是26.88％和96.72％。对该例制得的微球样分装成三批，分 别存放至4℃冰箱、常温以及40℃烘箱中考察，发现微球的外观形态、粒径及其 分布、载药量、体外释药百分率与考察前均无显著变化，微球稳定性良好。
磷酸替米考星微球溶出度试验
一、实验材料
1.主要试剂和药品
磷酸替米考星微球(本发明的实施例所制得的产品)；其他试剂均符合试验 要求。
2.主要仪器设备
RC-6D型药物溶出度测试仪，天津市国铭医药设备有限公司。
二、实验方法
称取磷酸替米考星微球0.1g，参照中国《中国兽药典》(2010年版)第一 部溶出度测定法第一法，以900mL 0.02％Tween-20(g/mL)水溶液为释放介质， 转速为75rpm，温度为37±0.5℃，分别于5min、10min、15min、30min、45min、 1h、1.5h、2h、4h、5h、6h、7h、8h、9h、10h、11h和12h时取样5mL (同时补充等体积同温度新鲜溶出介质)，依法测定，计算其溶出度。
三、实验结果
按上述方法进行溶出度测定，实施例1-4的药物微球释药曲线图见图1到图4。 从图中可知，实施例1的微球中药物的释放速度较其他3个实施例的快，且药物持 续释放的时间间隔较其他实施例的短。实施例2、3、4微球中药物的释放曲线则 相近。微球中磷酸替米考星呈持续缓慢释放的趋势，磷酸替米考星微球的释药初 期为快速释药，在该阶段，存在于微球表面的药物较快地释放出来；后期为缓慢 释药，存在于丙烯酸树脂微球孔隙中的药物逐渐释放出来。
磷酸替米考星微球适口性试验
一、实验材料
1.主要试剂和药品
磷酸替米考星微球(本发明的实施例所制得的产品)，支乐静(武汉回盛生 物科技有限公司产品)。
2.实验动物
长白猪，体重25-30kg，共36头，笼养，自由采食饮水，饲喂不含抗菌药 物的全价日粮，试验前饲养5d。
二、实验方法
1.动物分组
36头猪随机分成6组，每组6个重复。
I组饲喂不含抗菌药物的全价料(对照组)；
II组饲喂添加支乐静的全价料；
III组饲喂添加实施例1所制备的磷酸替米考星微球的全价料；
IV组饲喂添加实施例2所制备的磷酸替米考星微球的全价料；
V组饲喂添加实施例3所制备的磷酸替米考星微球的全价料；
VI组饲喂添加实施例4所制备的磷酸替米考星微球的全价料。
2.给药
对照组动物按支乐静使用说明书给药，其他试验组中，首先对微球中的药物 与原料药进行含量换算，保证每个试验组与II组饲喂的磷酸替米考星含量相同。 连续饲喂15d。
3.评价指标
以日采食量、日增重和料肉比三个指标来评价包被后药物(磷酸替米考星微 球)的适口性问题。
三、实验结果
饲喂各实施例的产品后的日采食量、日增重和料肉比的结果见表1-4。
表1实施例1三个组别的日采食量、日增重和料肉比
添加磷酸替米考星微球的实验组和对照组的日采食量、日增重和料肉比的相 对偏差分别是-34.27％、-43.81％和17.20％；添加磷酸替米考星的实验组和对照 组的日采食量、日增重和料肉比的相对偏差分别是-44.87％、-53.47％和19.0％； 添加磷酸替米考星的实验组与添加磷酸替米考星微球的实验组的日采食量、日增 重和料肉比的相对偏差分别是-24.26％、-24.46％和0.31％。
表2实施例2三个组别的日采食量、日增重和料肉比
添加磷酸替米考星微球的实验组和对照组的日采食量、日增重和料肉比的相 对偏差分别是-5.35％、-5.44％和0.36％；添加磷酸替米考星的实验组和对照组的 日采食量、日增重和料肉比的相对偏差分别是-44.87％、-53.47％和19.0％；添加 磷酸替米考星的实验组与添加磷酸替米考星微球的实验组的日采食量、日增重和 料肉比的相对偏差分别是-41.76％、-50.79％和18.57％。
表3实施例3三个组别的日采食量、日增重和料肉比
添加磷酸替米考星微球的实验组和对照组的日采食量、日增重和料肉比的相 对偏差分别是-7.73％、-4.22％和1.0％；添加磷酸替米考星的实验组和对照组的 日采食量、日增重和料肉比的相对偏差分别是-50.22％、-57.55％和17.56％；添 加磷酸替米考星的实验组与添加磷酸替米考星微球的实验组的日采食量、日增重 和料肉比的相对偏差分别是-49.68％、-55.68％和13.49％。
表4实施例4三个组别的日采食量、日增重和料肉比
添加磷酸替米考星微球的实验组和对照组的日采食量、日增重和料肉比的相 对偏差分别是-7.73％、-8.03％和0.72％；添加磷酸替米考星的实验组和对照组的 日采食量、日增重和料肉比的相对偏差分别是-50.22％、-57.55％和17.56％；添 加磷酸替米考星的实验组与添加磷酸替米考星微球的实验组的日采食量、日增重 和料肉比的相对偏差分别是-46.05％、-53.85％和16.73％。
结果表明：实施例1-4中包被后的磷酸替米考星微球，较直接饲喂磷酸替米 考星原料药对动物的适口性有了较好的改善。