《使用纯化的逆向热敏聚合物的内镜粘膜切除.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《使用纯化的逆向热敏聚合物的内镜粘膜切除.pdf（13页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 200880126231.X (22)申请日 2008.12.01 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 101932287 A (43)申请公布日 2010.12.29 (30)优先权数据 60/991,049 2007.11.29 US (85)PCT国际申请进入国家阶段日 2010.07.29 (86)PCT国际申请的申请数据 PCT/US2008/085114 2008.12.01 (87)PCT国际申请的公布数据 WO2009/070793 EN 2009.0。
2、6.04 (73)专利权人 普拉罗美德公司 地址 美国马萨诸塞州 (72)发明人 J-M富格尔 (74)专利代理机构 中国专利代理(香港)有限公 司 72001 代理人 吴娟 林毅斌 (51)Int.Cl. A61B 18/18(2006.01) (56)对比文件 US 2006/0070631 A1,2006.04.06, US 2006/0070631 A1,2006.04.06, US 2005/0147585 A1,2005.07.07, US 2006/0013883 A1,2006.01.19, 审查员 孙玉晗 (54)发明名称 使用纯化的逆向热敏聚合物的内镜粘膜切 除 (57)摘。
3、要 本发明的一方面涉及包含纯化的逆向热敏 聚合物的组合物在哺乳动物胃肠粘膜切除的内 镜程序中的用途。 本发明的另一方面涉及一种胃 肠粘膜切除的方法， 所述方法包括粘膜下给予哺 乳动物胃肠粘膜的区域有效量的包含纯化的逆 向热敏聚合物的组合物； 和手术切除胃肠粘膜的 所述区域。 本发明的又一方面涉及一种用于哺乳 动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒包 括包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物； 注射 器； 及其使用说明。 权利要求书2页 说明书9页 附图1页 CN 101932287 B 2016.12.14 CN 101932287 B 1.包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘膜。
4、的药物中的用途， 所 述用途包括给予哺乳动物胃肠粘膜的区域有效量的所述组合物， 其中所述纯化的逆向热敏 聚合物为纯化的泊洛沙姆237。 2.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物的转变温度在10-40之间。 3.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物在生理学温度下的体积为在低于其转变温度下的体积 的80-120。 4.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物包含5-35的所述纯化的逆向热敏。
5、聚合物。 5.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 不透射线的材 料。 6.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 顺磁性物质。 7.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 重原子。 8.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途，。
6、 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 过渡金属。 9.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠粘 膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 镧系元素。 10.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠 粘膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 锕系元素。 11.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在制备用于治疗胃肠 粘膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 染料。 12.根据权利要求1所述的包含纯化的逆向热敏聚合。
7、物的组合物在制备用于治疗胃肠 粘膜的药物中的用途， 其中所述组合物还包含任选选自以下的对比-增强试剂： 包含放射性 核素的材料。 13.一种用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒包括包含纯化的逆向 热敏聚合物的组合物， 其中所述纯化的逆向热敏聚合物为纯化的泊洛沙姆237； 注射器； 及 其使用说明。 14.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 其中所述组合 物的转变温度在10-40之间。 15.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 其中所述组合 物在生理学温度下的体积为在低于其转变温度下体积的80-120。 16.根据权利要求13所述。
8、的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 其中所述组合 物包含5-35的所述纯化的逆向热敏聚合物。 17.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 其中所述纯化 的逆向热敏聚合物具有1.5-1.0的多分散性指数。 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 101932287 B 2 18.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 不透射线的材料。 19.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 顺磁性物质。 20。
9、.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 重原子。 21.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 过渡金属。 22.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 镧系元素。 23.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 锕系元素。 24.根据权利要求13所述的用于哺乳动。
10、物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 染料。 25.根据权利要求13所述的用于哺乳动物胃肠内镜粘膜切除的试剂盒， 所述试剂盒还 包含对比-增强试剂， 所述对比-增强试剂选自： 包含放射性核素的材料。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 101932287 B 3 使用纯化的逆向热敏聚合物的内镜粘膜切除 0001 相关申请 0002 本申请要求2007年11月29日提交的美国临时专利申请序列号60/991,049的优先 权。 0003 发明背景 0004 内镜粘膜切除(EMR)在治疗早期胃肠癌中公认为是一种有疗效的治疗方式。 迄今 为止。
11、， 与盐水一起粘膜下注射用于在EMR过程中使并发症程度最低。 但是， 在盐水注射后组 织隆凸的持续时间较短， 且需要以较大的损害重复注射以进行EMR。 虽然在EMR中使用了具 有高粘度的溶液， 例如羟丙基甲基纤维素(HPMC)， 但是解决该问题的适当方案仍难以确定。 0005 发明概述 0006 本发明的一方面涉及包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物在胃肠粘膜切除的内 镜程序中的用途。 本发明的另一方面涉及一种胃肠粘膜切除的方法， 所述方法包括粘膜下 给予哺乳动物胃肠粘膜的区域有效量的包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物； 和手术切除 胃肠粘膜的所述区域。 本发明的又一方面涉及一种用于胃肠内镜粘膜切除。
12、的试剂盒， 所述 试剂盒包括包含纯化的逆向热敏聚合物的组合物； 注射器； 及其使用说明。 0007 附图简述 0008 图1图示作为温度的函数的LeGoo Endo(纯化的泊洛沙姆237的20-25含水溶液) 和未经纯化的泊洛沙姆407的20含水溶液的粘度。 0009 图2图示作为温度的函数的LeGoo Endo(纯化的泊洛沙姆237的20-25含水溶液) 和未经纯化的泊洛沙姆407的20含水溶液的粘度。 0010 发明详述 0011 内镜粘膜切除术(EMR)代表在胃肠道的微创手术中的主要进步。 EMR基于内镜检查 法提供目测和接近粘膜的构思， 粘膜是胃肠道的最内面的衬膜， 是从食道癌至直肠癌。
13、的大 多数胃肠癌起源的位点。 该方法将内镜手术的治疗功能与切除的组织的病理学检查的诊断 功能相结合。 0012 EMR首先在日本流行， 日本的内镜检查者面临着非常高发病率的胃癌。 这点区别于 大多数西方国家， 包括美国， 这些国家中结肠癌为更常见的疾病。 大多数结肠癌由粘膜息肉 引起， 粘膜息肉突出至结肠腔中， 使得在使用金属环来抓住息肉底部的内镜检查法中较容 易被除去。 随后用电流切除息肉， 同时产生切割作用和烧灼。 0013 与此相反， 在胃中大多数癌症不是起源于息肉， 而是起源于仅轻微提高、 持平、 或 轻微降低的粘膜发育异常损害。 使用简单的金属丝勒除器非常难以抓住这种损害。 日本内 。
14、镜检查者致力于开发多种方法来使发病的粘膜区域隆起， 使得勒除可能进行。 这些技术的 大多数使用流体注射入粘膜下层紧紧位于粘膜之下的胃肠道层， 以隆起粘膜并使其能 被勒除器抓住。 遗憾的是， 迄今为止使用的流体对于EMR不是最优化的， 例如， 因为这些流体 通常不够粘稠以提供足够持久、 隆凸的区域。 如果可得到能提供最优化的持久的、 隆凸的粘 膜表面的流体， EMR也可有效用于食道， 食道的早期癌症和恶变前的发育异常也往往是非息 肉状的和扁平的， 且EMR也可有效用于结肠， EMR在结肠中可用于帮助除去小的和大的扁平 说 明 书 1/9 页 4 CN 101932287 B 4 或固着的息肉。 。
15、0014 因为上述启示可考虑未经纯化的逆向热敏聚合物， 但是， 遗憾的是， 这些聚合物在 体温下凝胶化， 由于导管在结肠或胃内展开后很快升温至体温， 因此这些聚合物在用于注 射的导管中凝胶化。 0015 值得注意的， 显示快速可逆的液体至凝胶的转变的纯化的逆向热敏聚合物 (LeGoo-endoTM)已显示在人内镜胃肠粘膜切除(EMR)的体外和体内猪模式(porcine model) 中用作粘膜下注射溶液是有效的。 LeGoo-endod纯化的性质导致快速可逆液体至凝胶的转 变， 使其在室温下为液体， 且仅在EMR位点从导管涌出时凝胶化。 用LeGoo-endoTM得到的粘膜 隆凸比用其它常用物。
16、质得到的粘膜隆凸更持久。 此外， 用LeGoo-endoTM得到的粘膜隆凸的大 小和稠度没有显著的变化。 LeGoo-endoTM在体内结肠EMR中表现良好。 这些结果表明， 使用 LeGoo-endoTM或其它纯化的逆向热敏聚合物可提高人EMR程序的安全性和效力。 0016 在某些实施方案中， 由纯化的逆向热敏聚合物体内形成的疱(bleb)(即， 提供粘膜 隆凸的凝胶)保持约30-180分钟、 约45-150分钟、 约60-120分钟、 约75-100分钟、 约90分钟、 约80分钟、 约70分钟、 约60分钟、 约50分钟、 约40分钟或约30分钟。 0017 为了得到前述结果， 需要开发。
17、一种将在体温下转变为凝胶的纯化的逆向热敏聚合 物溶液通过导管注射至结肠或胃的方法。 在所克服的困难中的情况是由于导管停留在体内 时快速达到体温， 纯化的逆向热敏聚合物在达到EMR所需位点之前在导管内凝胶化。 例如， 由于在导管中形成凝胶， 通过推与导管连接的注射器的柱塞的手动注射不可行， 在低于 1200psi的压力下使用机械注射器辅助的注射也不可行； 此外， 排除高于1200psi的压力， 这 是由于这样的高压足以破裂任何常规导管。 换言之， 如果纯化的逆向热敏聚合物在导管中 凝胶化(即， 在达到EMR位点之前凝胶化)， 且常规导管可承受的压力不足以将流体形式的纯 化的逆向热敏聚合物递送至E。
18、MR位点， 则该方法不可行。 0018 值得注意的， 使用包含连接至填充有纯化的逆向热敏聚合物的注射器的高压针导 管的系统可解决递送问题， 其中， 所述高压针导管包含在通过手动(例如， 螺杆)、 电气或加 压气体机构在注射器的柱塞上产生压力的给药装置(例如， 注射器泵)中。 使用所述系统可 使用和承受的较高压力具有两种功能： (a)将粘稠的流体推送过导管； 和(b)允许足够快速 的注射， 其使得从室温注射器进入导管的纯化的逆向热敏聚合物持续调节导管的温度， 使 得聚合物在停留时间期间在导管中不凝胶化， 且仅在从导管中出来以后凝胶化， 并导致与 EMR位点直接接触。 0019 总之， LeGoo。
19、-Endo(在图中表示为 “PS 137-25” )为纯化的泊洛沙姆237的含水溶 液， 其在体温下的粘度为未经纯化的20泊洛沙姆407的3.9倍， 使得形成能经受得住弹性 粘膜所施加压力的持久的疱； 此外， LeGoo-Endo于25和室温下的粘度分别低于未经纯化 的20泊洛沙姆407在这些温度下的粘度的十分之一， 从而防止在LeGoo-Endo给予的过程 中在导管内形成凝胶， 这是部分地由于当新的LeGoo-Endo在加压下进入导管时连续冷却导 管。 0020 逆向热敏聚合物 0021 通常， 可将用于本发明方法的、 在体温下或大致体温下变为凝胶的逆向热敏聚合 物以液体或软凝胶形式注射到患。
20、者体内。 一旦注射材料达到体温， 其经历从液体或软凝胶 到硬凝胶的转变。 用于本发明方法的逆向热敏聚合物可包括具有逆热凝胶化特性的嵌段共 说 明 书 2/9 页 5 CN 101932287 B 5 聚物。 通常， 根据本发明， 也可使用于体温下以凝胶形式存在且在低于体温下以液体形式存 在的生物相容的、 生物可降解的嵌段共聚物。 同样， 所述逆向热敏聚合物可包括治疗剂， 例 如抗血管生成剂、 激素、 麻醉剂、 抗微生物剂(抗菌剂、 抗真菌剂、 抗病毒剂)、 抗炎剂、 诊断试 剂或伤口愈合试剂。 类似地， 可将低浓度的染料(例如亚甲基蓝)或填料加入到逆向热敏聚 合物中。 0022 逆向热敏聚合物。
21、的分子量可在1,000-50,000之间， 或在5,000-35,000之间。 通常 所述聚合物在含水溶液中。 例如， 典型的含水溶液包含约5-约30聚合物， 或约10-约 25聚合物。 合适的逆向热敏聚合物(例如泊洛沙姆或泊洛沙胺)的分子量可例如在5,000- 25,000之间， 或在7,000-20,000之间。 0023 给予哺乳动物的逆向热敏聚合物制剂的pH通常为约6.0至约7.8， 该pH为用于注射 进入哺乳动物体内的合适的pH水平。 可通过任何合适的酸或碱， 例如盐酸或氢氧化钠来调 节pH水平。 0024 泊洛沙姆(Pluronic) 0025值得注意的， Pluronic 聚合物。
22、具有独特的表面活性剂性能和极低的毒性和免疫 原性应答。 这些产品具有低的急性口腔和表皮毒性， 以及导致刺激或致敏的低潜能， 且全身 性慢性和亚慢性毒性低。 实际上， Pluronic 聚合物为经FDA批准可直接用于医学应用和作 为食品添加剂的少量表面活性剂之一(BASF(1990)Pluronic & Tetronic Surfactants， BASF Co.， Mount Olive， N.J.)。 最近， 已发现几种Pluronic 聚合物增强药物的治疗效果和 由腺病毒介导的基因转移效力。 ( March K L ， Madison J E ， Trapnell B C . “Pharm。
23、acokinetics of adenoviral vector-mediated gene delivery to vascular smooth muscle cells： modulation by poloxamer 407 and implication for cardiovascular gene therapy(腺病毒媒介介导的向脉管平滑肌细胞的基因递送的药代 动力学： 泊洛沙姆407的调节和心血管基因治疗的影响)” Hum Gene Therapy 1995， 6， 41- 53)。 0026 泊洛沙姆(或Pluronic)， 作为非离子表面活性剂， 广泛用于各种工业应用。 。
24、Nonionic Surfactants： polyoxyalkylene block copolymers(非离子表面活性剂： 聚氧化 烯嵌段共聚物)， 第60卷。 Nace VM， DekkerM(编辑)， 纽约， 1996， 第280页。 其表面活性剂特性 已经用于去垢、 分散、 稳定、 起泡和乳化作用。 Cabana A， Abdellatif AK， Juhasz J. “Study of the gelation process of polyethylene oxide， polypropylene oxide- polyethylene oxide copolymer(polo。
25、xamer 407)aqueous solutions(聚氧化乙烯、 聚氧 化丙烯-聚氧化乙烯共聚物(泊洛沙姆407)含水溶液的凝胶化过程的研究)” Journal of Colloid and Interface Science。 1997； 190： 307-312。 某些泊洛沙胺(例如， 泊洛沙胺1307 和1107)也显示逆向的感温性。 0027 已经考虑将一些聚合物用于多种心血管应用以及镰刀形红细胞贫血病应用。 Maynard C， Swenson R， Paris JA， Martin JS， Hallstrom AP， Cerqueira MD， Weaver WD.Random。
26、ized， controlled trial of RheothRx(poloxamer 188)in patients with suspected acute myocardial infarction(在怀疑患有急性心肌梗塞的患者中RheothRx (泊洛沙姆188)的受控试验).RheothRx in Myocardial Infarction Study Group.Am Heart J.1998年5月； 135(5Pt 1)： 797-804； O Keefe JH， Grines CL， DeWood MA， Schaer 说 明 书 3/9 页 6 CN 101932287 B。
27、 6 GL， Browne K， Magorien RD， Kalbfleisch JM， Fletcher WO Jr， Bateman TM， Gibbons RJ.Poloxamer-188 as an adjunct to primary percutaneous transluminal coronary angioplasty for acute myocardial infarction(泊洛沙姆-188作为急性心肌梗塞的初 级经皮穿刺冠状动脉成形术).Am J Cardiol.1996 Oct 1； 78(7)： 747-750； 和Orringer EP， Casella J。
28、F， Ataga KI， Koshy M， Adams-Graves P， Luchtman-Jones L， Wun T， Watanabe M， Shafer F， Kutlar A， Abboud M， Steinberg M， Adler B， Swerdlow P， Terregino C， Saccente S， Files B， Ballas S， Brown R， Wojtowicz-Praga S， Grindel JM.Purified poloxamer 188 for treatment of acute vasoocclusive crisis of sickle c。
29、ell disease： A randomized controlled trial(用于治疗镰刀形红细胞疾病的急性血管闭合 危象的纯化的泊洛沙姆188： 随机受控试验)。 JAMA.2001年11月7日； 286(17)： 2099-2106。 0028 重要的是， 这类聚合物的多种成员， 例如， 泊洛沙姆188、 泊洛沙姆407、 泊洛沙姆 338、 泊洛沙胺1107和1307， 都在生理学温度范围内显示逆向感温性。 Qiu Y， Park K.Environment-sensitive hydrogels for drug delivery(用于药物递送的环境-敏感性 水凝胶)。 Adv。
30、 Drug Deliv Rev.， 2001年12月31日； 53(3)： 321-339； 和Ron ES， Bromberg LE Temperature-responsive gels and thermogelling polymer matrices for protein and peptide delivery(用于蛋白质和肽递送的温度-应答性凝胶和热凝胶化聚合物基质) Adv Drug Deliv Rev.1998年5月4日； 31(3)： 197-221。 换言之， 这些聚合物为在低温下可溶 于含水溶液， 但在较高温度下凝胶化的类别的成员。 泊洛沙姆407为生物相容的聚氧化丙。
31、 烯-聚氧化乙烯嵌段共聚物， 其平均分子量为约12,500， 且聚氧化丙烯部分为约30； 泊洛 沙姆188的平均分子量为约8400， 且聚氧化丙烯部分为约20； 泊洛沙姆338的平均分子量 为约14,600， 且聚氧化丙烯部分为约20； 泊洛沙胺1,107的平均分子量为约14,000， 泊洛 沙胺1307的平均分子量为约18,000。 这种类型的聚合物也称为可逆凝胶化的， 因为其粘度 随着温度的升高和下降而分别增加和降低。 这种可逆凝胶化系统可用于以下情况： 需要处 理处于流体状态、 但优选在凝胶化的或更粘稠状态下实施的材料。 如上所述， 某些聚(氧化 乙烯)/聚(氧化丙烯)嵌段共聚物具有这些。
32、特性； 它们是市售可得的， 例如Pluronic 泊洛沙 姆和Tetronic 泊洛沙胺(BASF， Ludwigshafen， 德国)， 且一般分别称为泊洛沙姆和泊洛沙 胺。 参见美国专利4,188,373、 4,478,822和4,474,751(这些专利均通过参考引入本文)。 0029 泊洛沙姆的平均分子量在约1,000至大于16,000道尔顿范围内。 由于泊洛沙姆为 连续的系列反应的产物， 单个泊洛沙姆分子的分子量在平均分子量周围形成统计学分布。 此外， 市售可得的泊洛沙姆包含大量聚(氧乙烯)均聚物和聚(氧化乙烯)/聚(氧化丙烯)二 嵌段聚合物。 当泊洛沙姆组分嵌段的分子量增加时， 这。
33、些副产物的相对量也增加。 根据制造 商， 这些副产物可构成聚合物总质量的约15-约50。 0030 逆向热敏聚合物的纯化 0031 可利用用于水溶性聚合物的分级分离的方法纯化逆向热敏聚合物， 包括下列步 骤： 在水中溶解已知量的聚合物， 向聚合物溶液中加入可溶性萃取盐， 保持溶液在恒定的最 佳温度下一段时间以足够使两个不同的相显现出来， 并物理分离这两相。 此外， 可将包含优 选分子量的聚合物部分的相用水稀释至初始的体积， 可加入萃取盐， 以获得初始的浓度， 且 按需重复分离过程， 直至可回收比初始物质具有更窄的分子量分布和最佳物理特性的聚合 物。 说 明 书 4/9 页 7 CN 10193。
34、2287 B 7 0032 在某些实施方案中， 纯化的泊洛沙姆或泊洛沙胺具有约1.5-约1.0的多分散性指 数。 在某些实施方案中， 纯化的泊洛沙姆或泊洛沙胺具有约1.2-约1.0的多分散性指数。 0033 上述过程由形成包含在水中的聚合物和适当盐的含水两相系统组成。 在这种系统 中， 可向单相聚合物-水系统中加入可溶性盐以诱导相分离而产生高盐、 低聚合物的底层 相， 和低盐、 高聚合物的上层相。 较低分子量的聚合物优先分配进入高盐、 低聚合物的底层 相。 可利用该方法分级的聚合物包括聚醚、 二醇类例如聚(乙二醇)和聚(氧化乙烯)、 聚氧化 烯嵌段共聚物， 例如泊洛沙姆、 泊洛沙胺、 和聚氧化。
35、丙烯/聚氧化丁烯共聚物， 和其它多元 醇， 例如聚乙烯醇。 这些聚合物的平均分子量可在约800至大于100,000道尔顿范围内。 参见 美国专利6,761,824(通过参考引入本文)。 上述纯化方法固有地利用了泊洛沙姆分子、 聚 (氧化乙烯)均聚物和聚(氧化乙烯)/聚(氧化丙烯)二嵌段副产物的大小和极性以及溶解度 的差异。 除去一般包括较低分子量级分和副产物的泊洛沙姆的极性部分， 以容许回收泊洛 沙姆的较高分子量级分。 通过该方法回收的较大分子量的纯化的泊洛沙姆(纯化的逆向热 敏聚合物的实例)具有基本上不同于初始物质或市售可得的泊洛沙姆的物理特性， 包括较 高的平均分子量、 较低的多分散性以及。
36、在水溶液中较高的粘度。 0034 其它纯化方法可用于达到所需的结果。 例如， WO 92/16484(该专利通过参考引入 本文)公开了使用凝胶渗透色谱法分离显示有益生物效应而不产生潜在有害副作用的泊洛 沙姆188的级分。 这样得到的共聚物具有1.07或更低的多分散性指数， 且基本上是饱和的。 已显示潜在有害副作用与聚合物的低分子量、 不饱和部分相关， 而医药上有益的效果存在 于均一的较高分子量物质中。 通过纯化在合成共聚物期间的聚氧化丙烯中心嵌段或共聚物 产物本身来获得其它类似的改良的共聚物(例如， 美国专利5,523,492和美国专利5,696, 298， 这些专利均通过参考引入本文)。 0。
37、035 进一步地， 如在美国专利5,567,859(该专利通过参考引入本文)中所公开的， 超临 界流体萃取技术已被用于分级分离聚氧化烯嵌段共聚物。 获得由具有低于1.17的多分散性 的相当均一的聚氧化烯嵌段共聚物组成的纯化的馏分。 根据该方法， 在压力保持在2200磅/ 平方英寸(psi)且温度为40下的二氧化碳流中除去较低分子量馏分。 0036 此外， 美国专利5,800,711(该专利通过参考引入本文)公开了一种通过利用盐萃 取和液相分离技术分批除去低分子量种类而用于分级分离聚氧化烯嵌段共聚物的方法。 通 过该方法分级分离泊洛沙姆407和泊洛沙姆188。 在每一种情况下， 获得与初始物质相。
38、比具 有较高平均分子量和较低多分散性指数的共聚物馏分。 但是， 多分散性指数的变化并不大， 且通过凝胶渗透色谱法分析表明仍保留了一些低分子量物质。 在10-37的温度下， 分级 的聚合物的含水溶液的粘度显著大于市售可得的聚合物的粘度， 该特性对于一些医学和药 物递送应用很重要。 尽管如此， 当用于机体内部时， 认为这些聚合物的一些低分子量污染物 产生有害的副作用， 而使得在分级分离方法中将所述低分子量污染物除去变得特别重要。 因此， 通过该方法分级分离的聚氧化烯嵌段共聚物不适用于所有的医学用途。 0037 如上所述， 在人体中使用较大浓度的这些聚合物需要除去存在于商品制剂中的较 低分子量污染物。
39、。 如美国专利5,567,859(该专利通过参考引入本文； 实施例8和9)所说明 的， 较低分子量污染物最可能引起可见的毒性效果。 在利用未经纯化的泊洛沙姆188的临床 试验中， 发现不可接受水平的暂时性肾功能障碍， Maynard C， Swenson R， Paris JA， Martin JS， Hallstrom AP， Cerqueira MD， Weaver WD.Randomized， controlled trial of 说 明 书 5/9 页 8 CN 101932287 B 8 RheothRx(poloxamer 188)in patients with suspect。
40、ed acute myocardial infarction (在疑似患有急性心肌梗塞的患者中RheothRx(泊洛沙姆188)的随机、 受控试验)， RheothRx in Myocardial Infarction Study Group。 Am Heart J.1998年5月； 135(5Pt 1)： 797-804； 而利用纯化的泊洛沙姆188的另一临床试验特别提到未发现肾功能障碍， Orringer EP， Casella JF， Ataga KI， Koshy M， Adams-Graves P， Luchtman-Jones L， Wun T， Watanabe M， Shafe。
41、r F， Kutlar A， Abboud M， Steinberg M， Adler B， Swerdlow P， Terregino C， Saccente S， Files B， Ballas S， Brown R， Wojtowicz-Praga S， Grindel JM.Purified poloxamer 188 for treatment of acute vasoocclusive crisis of sickle cell disease： A randomized controlled trial(用于治疗镰刀形红细胞疾病的急性血管闭合 危象的纯化的泊洛沙姆188： 随机。
42、受控试验)。 JAMA.2001年11月7日； 286(17)： 2099-2106。 因 此， 看起来在EMR应用中急需仅利用经分级的泊洛沙姆和泊洛沙胺， 正如本文所预期的。 此 外， 这些热敏聚合物的分级分离产生具有较强耐机械性的改进的凝胶， 且由于改进的感温 性， 需要较少的聚合物以实现凝胶化(例如参见美国专利6,761,824(该专利通过参考引入 本文)， 关于纯化机理和所得到的粘度)。 0038 利用纯化的逆向热敏聚合物， 在与EMR关联中的药物递送 0039 仅仅由于不能获得实现将治疗有效量的生物学活性分子递送至治疗将提供治疗 益处的患者的特定细胞中的方法， 因此尚未实现许多类型的。
43、生物学活性分子的治疗有效应 用。 在适当的时候以受控的方式、 以最小副作用和每剂量的更大效果递送药物的新方法是 药物递送和制药行业所寻找的。 0040 用于本发明的EMR方法的可逆凝胶化聚合物具有使其成为常规小分子药物以及新 的大分子(例如， 肽)药物或其它治疗产品的合适递送载体的物理化学特性。 因此， 包含纯化 的逆向热敏聚合物的组合物可进一步包含所选择的药物试剂来提供预选择的药用效果。 药 用效果为寻求治疗疾病或身体紊乱的来源或症状的效果。 药物包括受到FDA药物准则管理 的产品以及消费品。 重要的是， 用于本发明的EMR方法的组合物能增溶和释放生理活性物 质。 预期增溶作用作为在大量水相。
44、中的溶解的结果而发生， 或通过在泊洛沙姆的疏水性结 构域产生的胶束中的溶质掺入而发生。 可通过扩散或网络侵蚀机理发生药物的释放。 0041 本领域技术人员认识到， 用于本发明的EMR方法的组合物可同时用于递送多种药 物和个人护理应用。 为了制备药物组合物， 将赋予期望的药物效果的有效量的药学活性剂 掺入到用于本发明的EMR方法的可逆凝胶化组合物中。 优选所选的试剂为水溶性的， 这将容 易地导致其本身在整个可逆凝胶化组合物中的均匀分散。 还优选该试剂不与组合物起反 应。 对于非水溶性的物质， 其也处于在整个组合物中分散或悬浮亲脂性物质的本发明的EMR 方法的范围内。 可利用本发明方法递送许多生理。
45、活性物质； 所递送的生理活性物质包括麻 醉剂、 抗微生物剂(抗菌剂、 抗真菌剂、 抗病毒剂)、 抗炎剂、 诊断试剂和伤口愈合试剂。 0042 因为用于本发明方法的可逆凝胶化组合物适用于在多种生理学条件下的应用， 可 掺入多种药学活性剂该组合物并通过该组合物施用。 装载入纯化的逆向热敏聚合物的聚合 物网络中的药物试剂可为任何具有生物活性的物质， 包括蛋白质、 多肽、 多核苷酸、 核蛋白、 多糖、 糖蛋白、 脂蛋白、 及其合成的和生物工程化的类似物。 0043 可在用于本发明方法的聚合物中掺入多许多治疗剂。 通常可通过本发明方法给药 的治疗剂包括， 但不限于： 抗感染药物， 例如抗生素和抗病毒剂；。
46、 镇痛剂和镇痛剂组合； 减食 说 明 书 6/9 页 9 CN 101932287 B 9 欲剂； 驱蠕虫药； 抗关节炎药； 平喘药； 抗惊厥剂； 抗抑郁剂； 抗利尿剂； 止泻药； 抗组胺剂； 抗 炎症试剂； 抗偏头痛制剂； 止恶心药； 抗肿瘤药； 抗帕金森病药物； 止痒药； 抗精神病药； 退热 药、 抗痉挛药； 抗胆碱能药； 拟交感神经药； 黄嘌呤衍生物； 心血管制剂， 包括钙离子通道阻 断剂和 -阻断剂， 例如心得静和抗心律失常药； 抗高血压药； 利尿剂； 血管扩张剂， 包括全身 性冠状动脉的、 外周的和大脑的； 中枢神经系统兴奋剂； 咳嗽和风寒制剂， 包括减充血剂； 激 素， 例如雌二醇。
47、和其它类固醇， 包括皮质醇； 安眠药； 免疫抑制剂； 肌肉松弛药； 副交感神经 阻滞药； 精神振奋药； 镇静剂； 和安定药； 以及天然衍生或遗传工程化的蛋白质、 多糖、 糖蛋 白、 或脂蛋白。 用于胃肠外给药的合适的药品是众所周知的， 如在Handbook on Injectable Drugs(可注射药物手册)， 第6版， Lawrence A.Trissel， American Society of Hospital Pharmacists， Bethesda， Md.， 1990中所举例说明的。 0044 药学活性化合物可为任何具有生物活性的物质， 包括蛋白质、 多肽、 多核苷酸、 核 。
48、蛋白、 多糖、 糖蛋白、 脂蛋白、 及其合成的和生物工程化的类似物。 术语 “蛋白质” 为本领域公 认的， 且就本发明的目的而言， 还包括肽。 蛋白质或肽可为任何生物学的、 天然存在的或合 成的蛋白质或肽。 0045 蛋白质的实例包括抗体、 酶、 生长激素和生长激素释放激素、 促性腺激素释放激 素、 及其激动剂和拮抗剂类似物、 抑生长素及其类似物、 促性腺激素例如促黄体激素和促卵 泡激素、 肽T、 降钙素、 甲状旁腺激素、 胰高血糖素、 加压素、 催产素、 血管紧张素I和II、 缓激 肽、 胰激肽、 粗肾上腺皮质激素、 促甲状腺激素、 胰岛素、 胰高血糖素以及上述分子的许多类 似物和同源物。 。
49、药物试剂可选自胰岛素， 选自MMR(腮腺炎、 麻疹和风疹)疫苗、 伤寒疫苗、 甲 型肝炎疫苗、 乙型肝炎疫苗、 单纯疱疹病毒、 细菌类毒素、 霍乱毒素B-亚基、 流感疫苗病毒、 博德特氏菌百日咳病毒、 痘苗病毒、 腺病毒、 金丝雀痘、 脊髓灰质炎疫苗病毒、 恶性疟原虫、 卡介苗(BCG)、 肺炎克雷白杆菌、 HIV外壳糖蛋白的抗原， 和选自牛生长激素(有时称为BST)、 雌激素、 雄激素、 胰岛素生长因子(有时称为IGF)、 白细胞介素I、 白细胞介素II和细胞因子 的细胞因子及其它试剂。 三个这种细胞因子为干扰素- 、 干扰素-和吞噬细胞增强激素。 0046 可掺入用于本发明的EMR方法的组合物的细菌类毒素的实例为破伤风、 白喉、 假单 胞菌属A、 结核分枝杆菌。 可掺入用于本发明的EMR方法的组合物的抗原的实例为HIV外壳糖 蛋白， 例如， 用于AIDS疫苗的gp 120或gp 160。 可包括的抗溃疡H2受体拮抗剂的实例为雷尼 替丁、 西咪替丁和法莫替丁， 其它抗溃疡药物为omparazide、 cesupride和米。