技术领域
本发明涉及兽用抗生素制剂技术领域，具体涉及一种抑制猪蓝耳病病毒复制的兽用 酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂及其制备方法。
背景技术
酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素又称泰万菌素、超级泰乐菌素，为新一代超级大环内酯 类中新型动物专用抗生素。酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素是目前杀灭支原体活性最强的抗 生素，酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素及其代谢产物（3-AT）不但对肺炎支原体等病原体具 有很强的杀灭活性，同时还可激活机体巨噬细胞，使巨噬细胞数量增加，吞噬功能增强， 同时促进溶菌酶的分泌，增强机体非特异性免疫功能，改善蓝耳病病毒的免疫抑制性因 素的影响，间接地抑制蓝耳病毒在机体定植。
酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素生物活性稳定、生物利用度极高，不易产生耐药性，与 其他常用抗菌药物无交叉耐药性，广谱高效、敏感性高，是大环内酯类中作用最强的抗 菌药物。目前酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂主要通过拌料饲喂给药，但酒石酸乙酰 异戊酰泰乐菌素原料药气味较大，味苦，且易飞散，使其适口性差，影响动物采食，需 增加给药次数，不利于达到高效的治疗效果。因此目前研发企业急需完善该预混剂的制 备工艺，掩盖其苦味，改善动物的适口性，提高利用率，保证其临床疗效以达到治疗的 目的。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明的第一个目的在于提供了一种兽用酒石酸乙酰 异戊酰泰乐菌素预混剂，该预混剂中含有酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，该包合物 可有效防止光照、温度的影响，从而提高药物的稳定性，避免药物受饲料中成分的影响， 掩盖药物的苦味，增加畜禽的适口性，且具有较好的流动性，易于混饲给药，另外酒石 酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物可以延缓药物释放，延长药物的作用时间，从而起到长效、 缓释作用。
本发明的第二个目的在于提供了一种上述兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂的 制备方法。
实现本发明的第一个目的的技术方案是：
一种兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，由酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物 和基质稀释剂组成。
优选地，所述酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物中的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素在 预混剂中的重量百分比为20%。
所述的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物的制备方法如下：
（1）、将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与包被载体按1:1-1:4的重量比搅拌 30min混匀，制成药物-包被载体混合物；
所述的包被载体为羟丙基-β-环糊精、聚丙烯酸树酯Ⅱ和聚乙二醇6000中的任意一 种或两种以上的混合物；
优选地，所述的包被载体为聚丙烯酸树酯Ⅱ，或包被载体为羟丙基-β-环糊精与聚 乙二醇6000重量比2：1-4：1的混合物；
最佳地，所述的包被载体为羟丙基-β-环糊精与聚乙二醇6000重量比为2：1-4：1 的混合物；
（2）、将羧甲基纤维素、D-山梨醇和无水乙醇加入到上述混合物中，继续搅拌混匀， 得到半包合的药物；
所述的羧甲基纤维素的用量为步骤（1）的药物-包被载体混合物重量的0.5%-2%，D- 山梨醇的用量为步骤（1）的药物-包被载体混合物重量的1%-5%，所述的无水乙醇的用量 为步骤（1）的药物-包被载体混合物重量的2%-8%；
（3）、将液态聚乙二醇在搅拌下滴加到上述半包合的药物中以提高包封率，滴完后以 800r/min的速度搅拌1.5h，所得包合物水洗，然后真空干燥，至无水乙醇挥发完全，得 到粉末状的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物；
所述的液态聚乙二醇为聚乙二醇200或聚乙二醇400，优选聚乙二醇200；
所述的液态聚乙二醇用量为步骤（1）的药物-包被载体混合物重量的0.5%-1.5%。
所述的基质稀释剂为淀粉和/或滑石粉。
最佳地，所述的基质稀释剂为滑石粉。
实现本发明的第二个目的的技术方案是：
一种上述兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂的制备方法，步骤如下：
首先测定酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物的包封率和载药量，然后通过该载药量 和所需的兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂中的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素含量来 计算需要加入的基质稀释剂的量，然后将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物和基质稀释 剂置于搅拌混合器中，搅拌15min后即制得。
优选地，所述酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物中的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素在 预混剂中的重量百分比为20%。
载药量和包封率分别按以下公式计算：
包合物载药量=包合物内的药量/包合物的总重量×100%
包合物包封率=[包合物内的药量/（包合物内的药量+介质中的药量）]×100%
与现有技术相比，本发明的优点和有益效果在于：
在本发明中添加了无水乙醇和聚乙二醇200或聚乙二醇400促进包合物的粘合，同 时加入润湿剂D-山梨醇及粘合剂羧甲基纤维素，形成半固体状态，增加了整个药物与高 分子载体之间的分子作用力，提高了包合物的包封率。
本发明制得的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，重复性好，包封率可达到87.6%， 所制备的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂性质稳定，均一性好，流动性大，无苦味， 适口性得到了大大的改善。具备掩盖药物的苦味、增加药物溶出速度、提高药物稳定性 以及生物利用度等优点，对胃肠道刺激性小，且具有吸收不受胃排空的影响，吸收均匀， 能改变释药速率等优点。
附图说明
图1为A组猪免疫前蓝耳病抗体检测结果。
图2为B组猪免疫前蓝耳病抗体检测结果。
图3为A组免疫后蓝耳病抗体检测结果。
图4为B组免疫后蓝耳病抗体检测结果。
具体实施方式
下面申请人将结合具体的实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明，目的在于 使本领域技术人员更加清楚完整地理解本发明。以下内容不应以任何方式被理解或解释 为对本申请权利要求书请求保护范围的限制。
实施例1
一种兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，其制备方法如下：
（1）将10g酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与10g聚丙烯酸树脂Ⅱ进行搅拌混匀， 时间为30min，制成药物-包被载体混合物；
（2）将0.1g羧甲基纤维素、0.2g D-山梨醇和0.4ml无水乙醇加入到步骤（1）所得 药物-包被载体混合物中，继续搅拌混匀，得到半包合的药物；
（3）将0.05ml聚乙二醇200在搅拌下滴加到步骤（2）的半包合的药物中，以提高 包封率，滴完后以800r/min的速度搅拌1.5h，所得包合物水洗，然后真空干燥，至无水 乙醇挥发完全，得到粉末状酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，测得包封率为78.5%，载 药量为25.8%；
（4）根据载药量，加入淀粉到步骤（3）所得酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物中， 一同置于搅拌混合器中，搅拌15min将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物稀释至酒石酸 乙酰异戊酰泰乐菌素重量百分比为20%的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，所得预混剂 均一性较好，流动性一般。
实施例2
一种兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，其制备方法如下：
（1）将10g酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与20g包被载体复合物（包被载体复 合物为羟丙基-β-环糊精与聚乙二醇6000重量比2:1的混合物）进行搅拌混匀，时间为 30min，制成药物-包被载体混合物；
（2）将0.3g羧甲基纤维素、0.3g D-山梨醇和1.2ml无水乙醇加入到步骤（1）所得 药物-包被载体混合物中，继续搅拌混匀，得到半包合的药物；
（3）将0.075ml聚乙二醇200在搅拌下滴加到步骤（2）的半包合的药物中，以提高 包封率，滴完后以800r/min的速度搅拌1.5h，所得包合物水洗，然后真空干燥，至无水 乙醇挥发完全，得到粉末状酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，测得包封率为81.5%，载 药量为33.4%；
（4）根据载药量，加入滑石粉到步骤（3）所得酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物中， 一同置于搅拌混合器中，搅拌15min将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物稀释至酒石酸 乙酰异戊酰泰乐菌素重量百分比为20%的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，所得预混剂 均一性较好，流动性较好。
实施例3
一种兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，其制备方法如下：
（1）将10g酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与30g包被载体复合物（包被载体复 合物为羟丙基-β-环糊精与聚乙二醇6000重量比3:1的混合物）进行搅拌混匀，时间为 30min，制成药物-包被载体混合物；
（2）将羧甲基纤维素0.6g、1.6g D-山梨醇和2.0ml无水乙醇加入到步骤（1）所得 药物-包被载体混合物中，继续搅拌混匀，得到半包合的药物；
（3）将0.2ml聚乙二醇200在搅拌下滴加到步骤（2）的半包合的药物中，以提高包 封率，滴完后以800r/min的速度搅拌1.5h，所得包合物水洗，然后真空干燥，至无水乙 醇挥发完全，得到粉末状酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，测得包封率为87.6%，载药 量为36.8%；
（4）根据载药量，加入滑石粉到步骤（3）所得酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物 中，一同置于搅拌混合器中，搅拌15min将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物稀释至酒 石酸乙酰异戊酰泰乐菌素重量百分比为20%的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，所得预 混剂均一性好，流动性好。
实施例4
一种兽用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，其制备方法如下：
（1）将10g酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与40g包被载体复合物（包被载体复 合物为羟丙基-β-环糊精与聚乙二醇6000重量比4:1的混合物）进行搅拌混匀，时间为 30min，制成药物-包被载体混合物；
（2）将1g羧甲基纤维素、2.5g D-山梨醇和4.0ml无水乙醇加入到步骤（1）所得药 物-包被载体混合物中，继续搅拌混匀，得到半包合的药物；
（3）将0.375ml聚乙二醇200在搅拌下滴加到步骤（2）的半包合的药物中，以提高 包封率，滴完后以800r/min的速度搅拌1.5h，所得包合物水洗，然后真空干燥，至无水 乙醇挥发完全，得到粉末状酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物，测得包封率为80.3%，载 药量为25.6%；
（4）根据载药量，加入滑石粉到步骤（3）所得酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物中， 一同置于搅拌混合器中，搅拌15min将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素包合物稀释至酒石酸 乙酰异戊酰泰乐菌素重量百分比为20%的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，所得预混剂 均一性较好，流动性一般。
本发明的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂稳定性试验
一、实验材料
⒈试剂和药品
酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂（由实施例3制得），酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素 原料药+载体（对照组）。
⒉主要实验设备
药品稳定性试验箱无锡晟泽理化器械有限公司生产。
二、实验方法
1.试验组
按照实施例3方法制备20wt%酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂三批分别为 20120903、20120904、20120905。
2.对照组
直接将酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素原料药与载体滑石粉混合均匀，配置20%（重量百 分比）的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，批号分别为：20120906、20120907、20120908。
3.试验方法及结果
将六批样品放置在温度为40±2℃，相对湿度为75±5%的条件下进行加速试验。采用 亚硝酸钠饱和溶液为加湿剂，将六批样品置于稳定性试验箱中，调温至40±2℃，定期观 察3个月，于第0、1、3个月各取样一次，并评价其含量、性状、适口性和流动性结果 见表3-2。
表3-2加速试验（40±2℃，RH75±5%）
结果表明：由实施例3制得的三批酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂在加速试验中 性质稳定，含量未发生明显的变化，而未经包被的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素直接与载 体混合后制备的预混剂，性质不稳定，苦味未得到掩盖，适口性差，含量有明显下降， 加速试验含量下降均超过5%，发生了明显的变化。以上实验结果可说明通过包合后，酒 石酸乙酰异戊酰泰乐菌素的稳定性得到了大大提高，且所制备的预混剂流动性好，性质 稳定，无苦味，适口性得到改善。
本发明的酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂对母猪蓝耳病稳定的临床试验
1试验目的
本实验旨在评价酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂对母猪蓝耳病的稳定性试验研 究，观察临床上母猪使用酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂后蓝耳病的抑制情况。
2供试药品
酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂，含量规格20%，按实施例3制备而得。
3试验动物
健康后备母猪(无接种蓝耳疫苗)，60头。试验前预饲3d，饲喂不含大环内酯类药物 的饲料，自由饮水。
4试验设计
（1）给药：设置每1t饲料添加400g酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂剂量组，连续给 药2周。
（2）试验分组：将60头健康后备母猪（无接种蓝耳疫苗）随机分成两组，各30头。
实验组：饲喂按后备母猪营养要求配制并添加酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂 的日粮。再接种蓝耳疫苗。
空白对照组：饲喂按后备母猪营养要求配制并不添加任何药物的日粮。再接种蓝耳 疫苗。
（1）临床症状见表1。
表1临床症状情况
从以上结果，可以看出，试验组与对照组，体温上无明显差异，均在正常体温范围 内，但精神状态对照组较试验组差，以及对照组出现18头呼吸加快的反应，并且对照组 平均采食量有下降的趋势，总结得出给药组对母猪抗病力有所提高，并且能提高采食量。
（2）抗体水平检测结果
实验组设为组A，空白对照组设为组B，各30头，分别编号为A1-A30，B1-B30。
表2免疫前各组猪蓝耳病抗体检测结果
附图1为A组猪免疫前蓝耳病抗体检测结果，附图2为B组猪免疫前蓝耳病抗体检 测结果。
表3免疫后各组蓝耳病抗体检测结果
图3为A组免疫后蓝耳病抗体检测结果，图4为B组免疫后蓝耳病抗体检测结果。
注：猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)病毒抗体检测ELISA试剂盒，武汉科前动物生物制品有限责任公司，批号：120505。 判断标准：试验成立的条件是阳性对照平均值OD630nm值≥0.7，阴性对照平均OD630nm值＜0.3。样品OD630nm 值＞0.42，判为阳性（＋）；样品OD630nm值＜0.38判为阴性（－）；样品OD630nm值介于0.38和0.42之间， 判为可疑（±），需重新检测。
免疫前随机分配为2组的后备母猪，都存在蓝耳病的感染。经过酒石酸乙酰异戊酰 泰乐菌素预混剂处理组再免疫蓝耳病疫苗后蓝耳病抗体都比较高，抗体水平整齐。对照 组免疫蓝耳病抗体后抗体虽有所增加，但抗体水平极不整齐，抗体差别比较大，而且部 分猪经蓝耳病疫苗免疫但抗体依然不高，这样的猪群并不能抵御蓝耳病的感染，存在爆 发蓝耳病的危险，猪群极不稳定。通过猪群的抗体水平我们可以看出实施例3制得的酒 石酸乙酰异戊酰泰乐菌素预混剂对蓝耳病病毒的抑制具有很明显的效果。