《一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤模型的方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤模型的方法.pdf（6页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810280845.9 (22)申请日 2018.04.02 (71)申请人 大连大学 地址 116622 辽宁省大连市开发区学府大 街10号 (72)发明人 宋捷 夏阳 李娜 梁文波 杨静娴 康廷国 (74)专利代理机构 大连八方知识产权代理有限 公司 21226 代理人 卫茂才 (51)Int.Cl. A61D 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪 联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤模型的 方法 (57)摘要 本发明具体涉及。
2、一种将全自动脑立体定位 仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠开放性创伤 性脑损伤模型的方法。 具体包括以下步骤：（1） 将 颅转固定在全自动脑立体定位仪机械手臂Y轴 上；（2） 将小鼠固定在脑立体定位仪水浴床上并 使用颅转开颅；（3） 开颅后取下颅转将阻力检测 仪安装到全自动脑立体定位仪上；（4） 使用全自 动脑立体定位仪控制造模位置， 使用阻力检测仪 观测造模过程中阻力变化情况。 本发明首次将全 自动脑立体定位仪和阻力实时监测系统联合， 稳 定的建立了开放性TBI小鼠模型， 解决了造模过 程中脑部定位准确性差且不能实时监测的问题。 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 108904090 A。
3、 2018.11.30 CN 108904090 A 1.一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤 模型的方法， 其特征在于， 该方法包括以下步骤： 1） 固定颅转并开颅： 将带有转头的颅转固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上； 将小鼠固定在水浴 床上以维持体温， 剔除小鼠头部毛发后剪开小鼠头皮， 使颅骨暴露； 对颅骨进行转孔， 小心 取出颅骨和颅膜， 使大脑暴露； 2） 固定阻力检测仪并调节位置： 取下颅转， 将阻力检测仪固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上； 将钢针安装在 阻力检测仪的下方， 调节钢针至颅骨开孔的正上方， 然后缓慢调节脑立体定位仪机械手。
4、臂Y 轴直至钢针顶端接触小鼠大脑但阻力检测仪并不显示数据为止， 即阻力为0； 3） 损伤大脑并监测损伤过程： 设置Y轴移动速度及移动时间， 以上述设定参数运行设备， 使钢针开始向下运行， 观测 并记录每次造模过程中阻力变化数据； 设备运行停止后， 将钢针停留于脑内一定时间； 随后 设置Y轴移动速度及移动时间， 移动方向与造模过程相反， 退出钢针， 造模结束； 4） 涂骨蜡并缝合伤口： 清理伤口血迹， 使用骨蜡将颅骨转孔封闭， 随后使用缝合针将小鼠头部皮肤缝合， 并将 其从脑立体定位仪上取下， 获得创伤性脑损伤小鼠模型。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108904090 A 2 一种。
5、将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠 开放性创伤性脑损伤模型的方法 技术领域 0001 本发明属于实验动物模型领域， 具体涉及一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测 仪联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤模型的方法。 背景技术 0002 开放性脑损伤是创伤性脑损伤的一种， 是由外力直接作用于头部引起的， 并对损 伤周围的组织， 脉管， 神经细胞产生破坏性影响， 包括： 组织撕裂、 细胞破损和出血等， 致死 致残率高。 随着社会的发展和人们生活水平的提高， 私家车越来越多， 酒后驾车违章驾驶等 情况的发生日益增多， 这就导致交通意外的发生的增加。 其中由于意外造成的创伤性脑损 伤也有增无减。
6、。 在美国， 创伤性脑损伤每年会造成70000人死亡， 175,000人神经性功能障 碍。 这些惊人的数据引起了科学家对创伤性脑损伤的关注。 因此需要模拟损伤过程开发脑 损伤模型， 进而科学家们可针对创伤性脑损伤的发病特点和病理特征进行科学研究。 但目 前成熟的脑损伤模型多为闭合性脑损伤， 而针对开放性脑损伤模型的研究较少， 这是因为 开放性脑损伤建模稳定性、 可控性差， 进而限制了该模型的发展和应用。 因此现阶段缺少稳 定、 可控的开放性创伤性脑损伤建模方法。 0003 全自动脑立体定位仪通过数控面板， 操控机械手臂可以准确的对损伤部位进行定 位， 进而解决造模稳定性差的问题。 阻力检测仪可。
7、以监控造模过程中阻力的实时的变化情 况， 进而可以解决造模可控性差的问题。 将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合成一个 造模系统， 可以解决开放性脑损伤建模稳定性、 可控性差的问题， 为开放性脑损伤的相关科 学研究提供一种更优的建模方法， 进而加快开放性脑损伤研究领域的发展。 发明内容 0004 为克服现有技术在开放性脑损伤建模上存在稳定性、 可控性差的缺陷， 本发明提 出一种将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合运用建立小鼠开放性创伤性脑损伤模型 的方法。 0005 该方法包括以下步骤： 1） 固定颅转并开颅： 将带有转头的颅转固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上； 将小鼠固定在水浴 床上。
8、维持体温， 剔除小鼠头部毛发后剪开小鼠头皮， 使颅骨暴露， 对颅骨进行转孔， 小心取 出颅骨和颅膜， 使大脑暴露； 2） 固定阻力检测仪并调节位置： 取下颅转， 将阻力检测仪固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上； 将钢针安装在 阻力检测仪的下方， 调节钢针至颅骨开孔的正上方， 然后缓慢调节脑立体定位仪机械手臂Y 轴直至钢针顶端接触小鼠大脑但阻力检测仪并不显示数据为止， 即阻力为0； 3） 损伤大脑并监测损伤过程： 说 明 书 1/3 页 3 CN 108904090 A 3 设置Y轴移动速度及移动时间， 以上述设定参数运行设备， 使钢针开始向下运行， 观测 并记录每次造模过程中阻力变化数据。
9、； 设备运行停止后， 将钢针停留于脑内一定时间； 随后 设置Y轴移动速度及移动时间， 移动方向与造模过程相反， 退出钢针， 造模结束； 4） 涂骨蜡并缝合伤口： 清理伤口血迹， 使用骨蜡将颅骨转孔封闭， 随后使用缝合针将小鼠头部皮肤缝合， 并将 其从脑立体定位仪上取下， 获得创伤性脑损伤小鼠模型。 0006 与现有技术相比， 本发明具有如下有益效果： 本发明首次将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合成一个系统， 成功的建立了开放 性TBI小鼠模型。 造模过程中使用全自动脑立体定位仪对损伤位置进行准确定位， 使用阻力 检测仪监测造模过程中损伤阻力的变化， 解决了现有技术造模过程中脑部定位准确性、 。
10、稳 定性差且不能实时监测的问题。 附图说明 0007 图1为建模过程中阻力实时变化示意图。 具体实施方式 0008 以下结合附图和具体的实施方式对本发明作进一步的说明。 0009 实施例1： 模拟脑内注射给药造成的开放性创伤性脑损伤的小鼠模型建模方法。 0010 本实施案例所用材料主要如下： （1） 标本来源： 选用成年的(25-30 g) C57BL/6J小鼠， 鼠龄在34个月， 购自辽宁长生 生物技术有限公司。 0011 （2） 主要试剂及设备： 水合氯醛 （凯基， 中国） 、 生理盐水 （微盐， 中国） 、 碘/酒精 （衡 洁， 中国） 、 缝合针 （美邦， 中国） 、 骨蜡 （W810。
11、T， 强生， 美国） 、 尖端被进行顿化处理的不锈钢针 （Hamilton Company, Reno, NV） 、 颅转 （204， 世新， 中国） 、 全自动脑立体定位仪 （PTW-1， 成 都仪器厂, 中国） 、 阻力检测仪(HF-2, 温州鼎仪器制造, 中国)。 0012 一种模拟脑内注射给药造成的开放性创伤性脑损伤的小鼠模型建模方法， 具体步 骤如下： (1)固定颅转并开颅： 将带有转头的颅转固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上， 使用全自动脑立体 定位仪调整颅转至合适位置。 随后， 使用水合氯醛(4%, 0.1 ml/10 g)对小鼠进行麻醉输 液， 速度为1.0 ml/min。
12、。 剃光小鼠头部毛发， 用碘/酒精消毒， 将其固定在全自动脑立体定位 仪上， 并使用水浴床加热保持小鼠体温在37 C左右。 固定后， 小鼠头骨由正中矢状切开， 位 置始于两眼睛之间延伸到耳朵， 使前囟和人字缝完全暴露。 使用颅钻在小鼠左脑颅骨位于 中线左侧2.5毫米， 人字缝后2.5毫米处， 钻出一个直径为2 mm的洞。 小心的去掉颅骨和脑膜 使大脑暴露， 出血时使用生理盐水进行清洗， 并保持暴露表面始终湿润。 0013 (2)固定阻力检测仪并调节位置： 上步开颅后， 取下颅转， 将阻力检测仪固定到全自动脑立体定位仪机械手臂的Y轴上， 并调节至合适的位置， 将20号， 直径为1.5毫米的钢针固。
13、定于阻力检测仪下方 （具体钢针规 格的选择可视实验需要， 钢针外径需小于颅骨开孔的孔径） ， 使用全自动脑立体定位仪数控 说 明 书 2/3 页 4 CN 108904090 A 4 面板调节机械手臂X轴和Z轴来调整针尖的位置， 使其准确对准颅骨转孔处， 再调整Y轴使针 尖和大脑刚刚接触但阻力为0， 停止调整。 如果阻力检测仪显示出阻力数据， 应立即停止向 下调节Y轴， 改为缓慢向上调节Y轴， 并始终注视着阻力检测仪的数值变化， 当数值变为0时 立即停止调节， 观察钢针顶端是否接触大脑表面， 如果接触停止调节， 准备下一步实验， 如 果未接触反复重复上述操作直至合格。 0014 (3)损伤大脑。
14、并监测损伤过程： 调节全自动脑立体定位仪数控面板， 设置Y轴移动速度为0.2mm/s， 运行时间为20s。 将 阻 力检测仪连接电脑， 打开阻力检测仪， 按照上述设定参数运行全自动脑立体定位仪， 并 在电 脑上观察、 记录阻力变化， 如图1所示。 设备停止运行后， 将针留在原位停留5分钟不移 动。 随后， 设置Y轴移动速度为-0.2mm/s， 运行时间为30s， 取出钢针。 如果造模过程中某组 阻 力变化异常说明该组造模不成功， 成功的模型应该是每组的阻力变化规律和数据是相 近的。 0015 (4) 涂骨蜡并缝合伤口： 清理伤口血迹， 使用骨蜡将颅骨转孔封闭， 随后使用缝合针将小鼠头部皮肤缝合， 并将 其从脑立体定位仪上取下， 获得模拟脑内注射给药造成的开放性创伤性脑损伤的模型小 鼠。 0016 本发明首次将全自动脑立体定位仪和阻力检测仪联合成一个系统， 成功的建立了 开放性TBI小鼠模型。 造模过程中使用全自动脑立体定位仪对损伤位置进行准确定位， 使用 阻力检测仪监测造模过程中损伤阻力的变化， 解决了现有技术造模过程中脑部定位准确 性、 稳定性差且不能实时监测的问题。 说 明 书 3/3 页 5 CN 108904090 A 5 图1 说 明 书 附 图 1/1 页 6 CN 108904090 A 6 。