白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法.pdf

白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，涉及一种从野生浆果(白刺)中提取水溶性多糖的方法。其特点是包含以下步骤：①将白刺果实用70％-90％的乙醇溶液在40-80℃下回流提取，过滤得滤渣；②所得滤渣用蒸馏水60-90℃回流提取，过滤得提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/10-1/5，加入3-5倍体积的95％乙醇，4℃下静置12-24h，离心弃去上清液取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白8-13次；⑤除净蛋白的多糖溶液经大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。

1、  白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于包括以下步骤：①将白刺果实用70％-90％的乙醇溶液在40-80℃下回流提取，过滤得滤渣；②所得滤渣用蒸馏水60-90℃回流提取，过滤得提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/10-1/5，加入3-5倍体积的95％乙醇，4℃下静置12-24h，离心弃去上清液取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白8-13次；⑤除净蛋白的多糖溶液经大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。

2、  如权利要求1所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于所用的原料为白刺鲜果或干燥的白刺果实或去除种籽的果皮果肉粉末。

3、  如权利要求1或2所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于：所述步骤①中所用乙醇浓度为70％-90％，提取温度为40-80℃，料液比为1∶3-1∶8，提取次数为1-3次，每次1-2h。

4、  如权利要求1或2所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于：所述步骤②中所用的提取溶剂为蒸馏水，提取温度为60-90℃，料液比为1∶3-1∶10，提取次数为2-4次，每次1-3h。

5、  如权利要求1或所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于：所述步骤④中检测蛋白质是否除净的方法是茚三酮法。

6、  如权利要求1或2或5所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于：所述步骤⑤中脱色所用的大孔吸附树脂为X-5型或AB-8型。

7、  如权利要求1或2或5所述的白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法，其特征在于：所述步骤⑥中透析所用的材料是截留分子量3500k的透析袋。

白刺果实中水溶性多糖的提取精制方法
技术领域
本发明涉及一种从野生浆果(白刺)中提取水溶性多糖的方法。特别是提取精制水溶性多糖的方法。
背景技术
白刺(Nitraria)为蒺藜科(Zygophyllceae)白刺属(Nitraria)灌木，在青海柴达木盆地有大量的分布。其抗逆性强，耐盐碱，能适应严酷恶劣的生境，是荒漠地区重要的建群植物。除了生态作用外，还有广谱的医疗和保健作用，民间用白刺果实治疗胃病，消化不良，伤风感冒、头痛头晕等症状。近年来大量实验还证明白刺果实具有降血脂、降血糖、提高免疫力、抗氧化等多种功能。因此白刺果可作为绿色营养食品、天然保健食品、药品的开发原料。多糖是天然有机化合物中的大分子物质，由单糖基通过糖苷键连接而成。越来越多的国内外研究证明多糖是一种非特异性免疫增强剂，可提高机体免疫力，增强抗病能力，从而达到抗衰老、抗肿瘤、抗病毒病菌、抗肝炎以及抗艾滋病等作用。天然活性多糖因其独特的功能，已成为天然药物学和保健食品学的研究热点。近些年来，各国学者竞相从各种生物材料中寻找和提取具有生理活性的多糖物质。目前多糖提取方法大致有水提醇沉，超声提取，微波提取，膜分离技术等，已广泛应用于真菌多糖、芦荟多糖、茶多糖、枸杞多糖等的提取，但尚未见到有关白刺多糖提取精制的报道。因此，研究柴达木地区特有的野生浆果-白刺中的多糖物质有其重要意义。
发明的内容
本发明的目的是为了提供一种从白刺果实中提取精制多糖的方法。
本发明的技术方案是，本发明可通过如下措施来实现：一种从白刺果实中提取精制多糖的方法，其特点是包括以下步骤：①将白刺果实用70％-90％的乙醇溶液在40-80℃下回流提取，过滤得滤渣；②所得滤渣用蒸馏水60-90℃回流提取，过滤得提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/10-1/5，加入3-5倍体积的95％乙醇，4℃下静置12-24h，离心弃去上清取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白8-13次；⑤除净蛋白的多糖溶液经大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。
所用的原料为白刺鲜果或干燥的白刺果实或去除种籽的果皮果肉粉末。
为了除去白刺果实中的单糖、寡聚糖、黄酮、部分色素等脂溶性杂质，所述步骤①的提取条件为：乙醇浓度为70％-90％，提取温度为40-80℃，料液比为1∶3-1∶8，提取次数为1-3次，每次1-2h。
所述步骤②中所用的提取溶剂为蒸馏水，提取温度为60-90℃，料液比为1∶3-1∶10，提取次数为2-4次，每次1-3h。
步骤④中检测蛋白质是否除净的方法是茚三酮法。
步骤⑤中脱色所用的大孔吸附树脂为X-5型或AB-8型。
步骤⑥中透析所用的材料是截留分子量3500k的透析袋。
本发明具有如下的优点和效果：1、本发明实现了对白刺的工业化提取方法2、该方法中进行了两次脱色处理(水提前的醇提、大孔吸附树脂柱)，使得到的白刺多糖色素杂质含量极少。3、本发明的工艺流程简单，效率高，所用溶剂为乙醇、蒸馏水，不对环境产生污染。4、产品成本低，原料充足，方法灵活实用因此利于推广、开发和应用。
具体实施方式
实施例一：①将采摘的白刺鲜果用3倍体积90％的乙醇溶液在40℃下回流提取2次，每次1.5h，过滤得滤渣；②所得滤渣用5倍体积蒸馏水70℃回流提取3次，每次2h，合并3次提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/5，加入5倍体积的95％乙醇，4℃下静置12h，离心弃去上清取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白8次，茚三酮检测；⑤除净蛋白的多糖溶液经X-5大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。
实施例二：①将干燥的白刺果实用5倍体积80％的乙醇溶液在60℃下回流提取1次，每次2h，过滤得滤渣；②所得滤渣用10倍体积蒸馏水60℃回流提取2次，每次3h，合并2次提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/7，加入4倍体积的95％乙醇，4℃下静置24h，离心弃去上清取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白11次，茚三酮检测；⑤除净蛋白的多糖溶液经AB-8型大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。
实施例三：①将干燥的白刺果实去除种籽用于提取种籽油，剩余的果皮果肉粉末作为提取多糖的原料。果皮果肉粉末加入8倍体积70％的乙醇溶液80℃下回流提取3次，每次1h，过滤得滤渣；②所得滤渣用3倍体积蒸馏水90℃下回流提取4次，每次1h，合并4次提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/10，加入3倍体积的95％乙醇，4℃下静置18h，离心弃去上清取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白13次，茚三酮检测；⑤除净蛋白的多糖溶液经X-5大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。
实施例四：①将干燥的白刺果实用5倍体积80％的乙醇溶液在60℃下回流提取1次，每次2h，过滤得滤渣；②所得滤渣用10倍体积蒸馏水60℃回流提取2次，每次3h，合并2次提取液；③将所得提取液浓缩至原体积的1/7，加入4倍体积的95％乙醇，4℃下静置24h，离心弃去上清取沉淀，冷冻干燥得白刺粗多糖粉末；④粗多糖粉末加入蒸馏水溶解，Sevage法脱蛋白11次，茚三酮检测；⑤除净蛋白的多糖溶液经AB-8型大孔吸附树脂柱，蒸馏水洗脱至流出液无色透明；⑥收集洗脱液浓缩，透析(透析所用的材料是截留分子量3500k的透析袋)，醇沉，取沉淀，冷冻干燥得精制多糖粉末。