技术领域
本发明涉及酵素粉制备领域，尤其涉及一种白刺果酵素的制备方法。
背景技术
酵素是日本和台湾地区的说法，通常称作“酶”，其是催化特定化学反应的蛋白质、RNA 或其复合体，也有专家认为酵素是由多种氨基酸、维生素及矿物质构成的活性物质，被称为“活性的物质”和“掌握所有生命活动的物质”。众所周知，营养素必须在酵素的作用下分解到 15μm 左右的小分子，才能穿过肠壁上皮细胞，被毛细血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝脏则分泌脂肪酵素，而脾脏则分泌各种综合酵素，这些酵素通过对营养素的分解促进其吸收，从而达到全面调理的综合作用。由此可知，酵素的作用至关重要。
传统酵素加工过程花色苷易被分解，营养损失严重，并且发酵周期较长，至少数月至一年。发酵周期过长，效率低，成本高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种成本低廉、周期短的白刺果酵素的制备方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种白刺果酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将白刺干果经超微粉碎至粒径小于40µm，得到白刺果粉；
⑵所述白刺果粉中按1：1的重量比加入纯水，搅拌混匀后，按每L混合液依次加入1g壳聚糖、1g VC、1g柠檬酸，并于70℃加热25~30分钟，经自然冷却至室温，得到白刺果原液；
⑶在所述白刺果原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于50~60℃酶解3~4小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于40~50℃酶解2~4小时，得到酶解液；
⑷所述酶解液中按其重量依次接种1.5~2%酵母菌、4~5%乳酸菌和0.5~1%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养1~3天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/L加入蔗糖，得到白刺果酵素液；
⑸所述白刺果酵素液经冷冻干燥、粉碎至500~1000目后即得白刺果酵素粉。
所述步骤⑶中果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨所述白刺果原液中加入12~15g。
所述果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.5~1的重量比混合而成。
所述步骤⑶中果胶酶是指聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
所述步骤⑶中蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量按每吨所述白刺果原液中加入14~15g；所述蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶是指将蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶按1：1：1的重量比混合而成。
所述步骤⑷中酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。
所述步骤⑷中乳酸菌为嗜热链球菌、植物乳杆菌、双歧杆菌的任意组合。
所述步骤⑸中冷冻干燥的条件是指温度为-40℃~-80℃，真空度为10~40Pa。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明首次以青藏高原特色浆果白刺果为原料制备酵素，将白刺干果的保健活性功能与酵素生物活性功能相结合。
2、本发明采用冷冻干燥技术，花色苷活性不被破坏，营养得到最大保留，更加天然健康。
3、本发明采用酵母、乳酸菌和醋酸菌组合而成的纯种混合发酵技术，实现发酵过程的全程精准控制，所得产品品质稳定，质量安全可控，且大大缩短酵素制备周期（从传统工艺的数月至一年缩短至数周）。且比传统方法制备的酵素营养价值更高（生物活性酶含量高）。
4、将实施例1~3的白刺果酵素分别按照 GB/T23527-2009 蛋白酶制剂中蛋白酶测定方法；GB/T 24401-2009 a-淀粉酶制剂 中淀粉酶测定方法；GB/T 23535-2009 脂肪酶制剂中脂肪酶的测定方法和GB/T 5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶 (SOD) 活性的测定方法分别测量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及 SOD 活性，取白刺果原液作为对比例。结果如表1所示：
表1
结果显示，本发明的白刺果酵素包含丰富的生物酶活性成分，较白刺果汁具有显著提高，取得了显著的技术效果，是一种非常优异的保健产品。
具体实施方式
实施例1 一种白刺果酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将白刺干果经超微粉碎至粒径小于40µm，得到白刺果粉。
⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每L混合液依次加入1g壳聚糖、1g VC、1g柠檬酸，并于70℃加热25分钟，经自然冷却至室温，得到白刺果原液。
⑶在白刺果原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于50℃酶解3小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于40℃酶解2小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入12g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.5的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶是指聚半乳糖醛酸酶、果胶裂解酶和果胶酯酶中的任意一种或组合。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入14g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶是指将蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶按1：1：1的重量比（kg/kg）混合而成。
⑷酶解液中按其重量依次接种1.5%酵母菌、4%乳酸菌和0.5%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养1天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/L加入蔗糖，得到白刺果酵素液。
其中：酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。
乳酸菌为嗜热链球菌、植物乳杆菌、双歧杆菌的任意组合。
⑸白刺果酵素液在温度为-40℃、真空度为10Pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至500目后即得白刺果酵素粉。
实施例2 一种白刺果酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将白刺干果经超微粉碎至粒径小于40µm，得到白刺果粉。
⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每L混合液依次加入1g壳聚糖、1g VC、1g柠檬酸，并于70℃加热30分钟，经自然冷却至室温，得到白刺果原液。
⑶在白刺果原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于60℃酶解4小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于50℃酶解4小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入15g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：1的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶同实施例1。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入15g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶同实施例1。
⑷酶解液中按其重量依次接种2%酵母菌、5%乳酸菌和1%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养3天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/L加入蔗糖，得到白刺果酵素液。
其中：酵母菌、乳酸菌同实施例1。
⑸白刺果酵素液在温度为-80℃、真空度为40Pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至1000目后即得白刺果酵素粉。
实施例3 一种白刺果酵素的制备方法，包括以下步骤：
⑴将白刺干果经超微粉碎至粒径小于40µm，得到白刺果粉。
⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入纯水，搅拌混匀后，按每L混合液依次加入1g壳聚糖、1g VC、1g柠檬酸，并于70℃加热28分钟，经自然冷却至室温，得到白刺果原液。
⑶在白刺果原液中先加入预先活化的果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶（37℃温水溶解酶，并保温20min将酶活化），搅拌均匀后，于55℃酶解3.5小时，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶，搅拌均匀后，于45℃酶解3小时，得到酶解液。
其中：果胶酶或纤维素酶或果胶酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入13g。果胶酶-纤维素复合酶是指将果胶酶与纤维素酶按1：0.8的重量比（kg/kg）混合而成。果胶酶是同实施例1。
蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶的添加量按每吨白刺果原液中加入14.5g；蛋白酶-淀粉酶-纤维素复合酶同实施例1。
⑷酶解液中按其重量依次接种1.8%酵母菌、4.5%乳酸菌和0.8%醋酸菌，搅拌均匀后密闭，于30℃发酵培养2天，经过滤去除残渣后得到上清液，该上清液中按10g/L加入蔗糖，得到白刺果酵素液。
其中：酵母菌、乳酸菌同实施例1。
⑸白刺果酵素液在温度为-60℃、真空度为25Pa的条件下经冷冻干燥、粉碎至800目后即得白刺果酵素粉。