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1、(10)申请公布号 CN 103931500 A (43)申请公布日 2014.07.23 CN 103931500 A (21)申请号 201410165582.9 (22)申请日 2014.04.19 201310137928.X 2013.04.19 CN A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 云南农业大学 地址 650201 云南省昆明市盘龙区北郊黑龙 潭云南农业大学 (72)发明人 张新永 包媛媛 宋雷 (74)专利代理机构 北京英特普罗知识产权代理 有限公司 11015 代理人 齐永红 (54) 发明名称 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基 (57) 摘要 本发明。
2、公开了一种促进马铃薯组培苗快速生 长的培养基, 由以下组分组成 : 硝酸铵, 硝酸钾, 氯化钙, 硫酸镁, 磷酸二氢钾, 碘化钾, 硼酸, 硫酸 锰, 硫酸锌, 钼酸钠, 硫酸铜, 氯化钴, 乙二胺四乙 酸铁钠, 肌醇, 烟酸, 盐酸吡哆醇, 盐酸硫胺素, 蔗 糖, 琼脂, 水。使用本发明的培养基能促使马铃薯 组培苗的生长速度, 从接种之日起到株高长至 8 厘米所需要的时间仅为 20 天, 大大提高了组培苗 剪切、 转接的工作效率。 (66)本国优先权数据 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说。
3、明书3页 (10)申请公布号 CN 103931500 A CN 103931500 A 1/1 页 2 1. 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基, 其特征在于 : 以 1L 培养基计, 由以下 组分组成 : 硝酸铵 (NH4NO3)1567.5 1732.5mg, 硝酸钾 (KNO3)1805 1995mg, 氯化钙 (CaCl22H2O)418 462mg, 硫酸镁 (MgSO47H2O)399 441mg, 磷酸二氢钾 (KH2PO4)162 178mg, 碘化钾 (KI)0.79 0.87mg, 硼酸 (H3BO3)5.9 6.5mg, 硫酸锰 (MnSO4 4H2O)16.1 17。
4、.7mg, 硫酸锌 (ZnSO47H2O)8.2 9.0mg, 钼酸钠 (Na2MoO42H2O)0.24 0.26mg, 硫酸铜 (CuSO45H2O)0.024 0.026mg, 氯化钴 (CoCl26H2O)0.024 0.026mg, 乙二胺四乙酸铁 钠 (FeNa2EDTA H2O)72 78mg, 肌醇 (C6H12O6)95 105mg, 烟酸 (C6H5NO2)0.48 0.52mg, 盐 酸吡哆醇 (C8H11NO3HCl)0.48 0.52mg, 盐酸硫胺素 (C12H17ClN4OSHCl)0.09 0.11mg, 蔗糖 (C12H22O11)28500 31500mg,。
5、 琼脂 6650 7350mg, 余量为水。 2. 根据权利要求 1 所述的培养基, 其特征在于, 以 1L 培养基计, 由以下组分组 成 : 硝酸铵 (NH4NO3)1650mg, 硝酸钾 (KNO3)1900mg, 氯化钙 (CaCl22H2O)440mg, 硫酸镁 (MgSO47H2O)420mg, 磷酸二氢钾 (KH2PO4)170mg, 碘化钾 (KI)0.83mg, 硼酸 (H3BO3)6.2mg, 硫酸锰 (MnSO44H2O)16.9mg, 硫酸锌 (ZnSO47H2O)8.6mg, 钼酸钠 (Na2MoO42H2O)0.25mg, 硫 酸 铜 (CuSO45H2O)0.025。
6、mg,氯 化 钴 (CoCl26H2O)0.025mg,乙 二 胺 四 乙 酸 铁 钠 (FeNa2EDTAH2O)75mg,肌 醇 (C6H12O6)100mg,烟 酸 (C6H5NO2)0.5mg,盐 酸 吡 哆 醇 (C8H11NO3HCl)0.5mg, 盐酸硫胺素 (C12H17ClN4OSHCl)0.1mg, 蔗糖 (C12H22O11)30000mg, 琼脂 7000mg, 余量为水。 权 利 要 求 书 CN 103931500 A 2 1/3 页 3 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基 技术领域 0001 本发明涉及一种培养基, 具体涉及一种能促进马铃薯组培苗快速生长的培养基。
7、。 背景技术 0002 目前, 国内外进行马铃薯组培苗快速生长所使用是 MS 培养基, 但是一般情况下在 MS 培养基上生长的组培苗需 30 天左右株高才能够长至 8 厘米, 且主茎较细弱, 分枝细长且 较多, 交织在一起, 不利于剪切转接操作, 导致转接时工作效率低, 同时由于组培苗长势较 弱, 假植或移栽时缓苗时间较长, 成活率相对也较低。由于传统的 MS 培养基存在以上缺点, 国内外的研究人员也对其配方进行了各种改良, 但是效果并不明显。 发明内容 0003 本发明的目的在于克服现有技术的不足, 提供一种促进马铃薯组培苗快速生长的 培养基。 0004 为实现上述目的, 本发明通过以下技术。
8、方案实现 : 0005 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基, 以 1L 培养基计, 由以下组分组成 : 硝 酸铵(NH4NO3)1567.51732.5mg, 硝酸钾(KNO3)18051995mg, 氯化钙(CaCl2 2H2O)418 462mg, 硫 酸 镁 (MgSO47H2O)399 441mg, 磷 酸 二 氢 钾 (KH2PO4)162 178mg, 碘 化 钾 (KI)0.79 0.87mg, 硼 酸 (H3BO3)5.9 6.5mg, 硫 酸 锰 (MnSO44H2O)16.1 17.7mg, 硫 酸 锌 (ZnSO47H2O)8.2 9.0mg,钼 酸 钠 (Na2MoO。
9、42H2O)0.24 0.26mg,硫 酸 铜 (CuSO45H2O)0.024 0.026mg, 氯化钴 (CoCl26H2O)0.024 0.026mg, 乙二胺四乙酸铁 钠 (FeNa2EDTA H2O)72 78mg, 肌醇 (C6H12O6)95 105mg, 烟酸 (C6H5NO2)0.48 0.52mg, 盐 酸吡哆醇 (C8H11NO3HCl)0.48 0.52mg, 盐酸硫胺素 (C12H17ClN4OSHCl)0.09 0.11mg, 蔗糖 (C12H22O11)28500 31500mg, 琼脂 6650 7350mg, 余量为水。 0006 优选的是 : 以 1L 培养。
10、基计, 由以下组分组成 : 硝酸铵 (NH4NO3)1650mg, 硝酸 钾 (KNO3)1900mg, 氯化钙 (CaCl22H2O)440mg, 硫酸镁 (MgSO47H2O)420mg, 磷酸二氢钾 (KH2PO4)170mg, 碘化钾 (KI)0.83mg, 硼酸 (H3BO3)6.2mg, 硫酸锰 (MnSO44H2O)16.9mg, 硫 酸锌 (ZnSO47H2O)8.6mg, 钼酸钠 (Na2MoO42H2O)0.25mg, 硫酸铜 (CuSO45H2O)0.025mg, 氯 化 钴 (CoCl26H2O)0.025mg,乙 二 胺 四 乙 酸 铁 钠 (FeNa2EDTAH2O。
11、)75mg,肌 醇 (C6H12O6)100mg, 烟 酸 (C6H5NO2)0.5mg, 盐 酸 吡 哆 醇 (C8H11NO3HCl)0.5mg, 盐 酸 硫 胺 素 (C12H17ClN4OSHCl)0.1mg, 蔗糖 (C12H22O11)30000mg, 琼脂 7000mg, 余量为水。 0007 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基的制备方法, 包含以下步骤 : 0008 a、 准确称取除琼脂外的培养基其余组分, 加蒸馏水充分溶解后, 定容 ; 0009 b、 准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中, 加热至 70 90至琼脂完全溶解 ; 0010 c、 分别用 1mol/l 的硝酸或。
12、 1mol/l 的氢氧化钠溶液将培养基的 pH 值调节至 5.5-5.7 ; 0011 d、 将配制好的培养基分装至组织瓶中, 于121125、 103.43kPa下灭菌2030 说 明 书 CN 103931500 A 3 2/3 页 4 分钟, 制得本发明的培养基。 0012 进一步地 : 步骤 a 后不加入琼脂, 制得本发明的不含琼脂的培养基。 0013 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基的使用方法, 在无菌操作台上, 每 50ml 含有琼脂的培养基中扦插入10-12个马铃薯组培苗茎段, 在环境温度20-22、 24小时光照 的组培室内培养 10 天后再加入 10ml 不含琼脂的培养基。
13、, 继续培养 10 天。 0014 与现有技术相比, 本发明的培养基, 能快繁马铃薯组培苗, 在 24 小时光照、 室内温 度20-22的条件下, 组培苗生长迅速, 从接种之日起到株高长至8厘米所需要的时间为20 天, 植株生长健壮, 叶色浓绿, 茎秆粗壮, 分枝少, 大大提高了组培苗剪切、 转接的工作效率, 同时也大幅提高了其假植、 移栽的成活率。 具体实施方式 0015 下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步说明。 0016 本发明提供一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基, 以 1L 培养基计, 由以 下组分组成 : 硝酸铵 (NH4NO3)1567.5 1732.5mg, 硝酸钾 。
14、(KNO3)1805 1995mg, 氯化钙 (CaCl22H2O)418 462mg, 硫酸镁 (MgSO47H2O)399 441mg, 磷酸二氢钾 (KH2PO4)162 178mg, 碘化钾 (KI)0.79 0.87mg, 硼酸 (H3BO3)5.9 6.5mg, 硫酸锰 (MnSO4 4H2O)16.1 17.7mg, 硫酸锌 (ZnSO47H2O)8.2 9.0mg, 钼酸钠 (Na2MoO42H2O)0.24 0.26mg, 硫酸铜 (CuSO45H2O)0.024 0.026mg, 氯化钴 (CoCl26H2O)0.024 0.026mg, 乙二胺四乙酸铁 钠 (FeNa2E。
15、DTA H2O)72 78mg, 肌醇 (C6H12O6)95 105mg, 烟酸 (C6H5NO2)0.48 0.52mg, 盐 酸吡哆醇 (C8H11NO3HCl)0.48 0.52mg, 盐酸硫胺素 (C12H17ClN4OSHCl)0.09 0.11mg, 蔗糖 (C12H22O11)28500 31500mg, 琼脂 6650 7350mg, 余量为水。 0017 其制备方法为 : 0018 a、 准确称取除琼脂外的培养基其余组分, 加蒸馏水充分溶解后, 定容 ; 0019 b、 准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中, 加热至 70 90至琼脂完全溶解 ; 0020 c、 分别用 1m。
16、ol/l 的硝酸或 1mol/l 的氢氧化钠溶液将培养基的 pH 值调节至 5.5-5.7 ; 0021 d、 将配制好的培养基分装至组织瓶中, 于121125、 103.43kPa下灭菌2030 分钟, 制得本发明的培养基。 0022 进一步地 : 步骤 a 后不加入琼脂, 制得本发明的不含琼脂的培养基。 0023 实施例 1 : 0024 一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基, 以 1L 培养基计, 由以下组分组 成 : 硝酸铵 (NH4NO3)1650mg, 硝酸钾 (KNO3)1900mg, 氯化钙 (CaCl22H2O)440mg, 硫酸镁 (MgSO47H2O)420mg, 磷酸二。
17、氢钾 (KH2PO4)170mg, 碘化钾 (KI)0.83mg, 硼酸 (H3BO3)6.2mg, 硫酸锰 (MnSO44H2O)16.9mg, 硫酸锌 (ZnSO47H2O)8.6mg, 钼酸钠 (Na2MoO42H2O)0.25mg, 硫 酸 铜 (CuSO45H2O)0.025mg,氯 化 钴 (CoCl26H2O)0.025mg,乙 二 胺 四 乙 酸 铁 钠 (FeNa2EDTAH2O)75mg,肌 醇 (C6H12O6)100mg,烟 酸 (C6H5NO2)0.5mg,盐 酸 吡 哆 醇 (C8H11NO3HCl)0.5mg, 盐酸硫胺素 (C12H17ClN4OSHCl)0.1。
18、mg, 蔗糖 (C12H22O11)30000mg, 琼脂 7000mg, 余量为水。 0025 上述培养基的制备方法, 包含以下步骤 : 说 明 书 CN 103931500 A 4 3/3 页 5 0026 a、 准确称取除琼脂外的培养基其余组分, 加蒸馏水充分溶解后, 定容 ; 0027 b、 准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中, 加热至 70 90至琼脂完全溶解 ; 0028 c、 分别用 1mol/l 的硝酸或 1mol/l 的氢氧化钠溶液将培养基的 pH 值调节至 5.5-5.7 ; 0029 d、 将配制好的培养基分装至组织瓶中, 于121125、 103.43kPa下灭菌203。
19、0 分钟, 制得本发明的培养基。 0030 进一步地 : 步骤 a 后不加入琼脂, 制得本发明的不含琼脂的培养基。 0031 将上述制备方法制得的培养基, 用于繁殖马铃薯组培苗, 其方法为 : 在无菌操作台 上, 每 50ml 含有琼脂的培养基中扦插入 10-12 个马铃薯组培苗茎段, 在环境温度 20-22、 24 小时光照的组培室内培养 10 天后再加入 10ml 不含琼脂的培养基, 继续培养 10 天。 0032 使用本实施例中的培养基, 对不同的马铃薯组培苗进行培养, 其典型结果如下 : 0033 1、 宣威市马铃薯种薯研发中心组培室利用本实施例的培养基和方法快繁马铃薯 组培苗, 20。
20、11 年 3 月 17 日剪切接种, 室内温度设定为 22, 24 小时光照, 2011 年 4 月 6 日 组培苗株高长至8厘米, 生长时间是20天, 组培苗生长健壮, 叶色浓绿, 茎秆粗壮, 平均茎粗 0.19 厘米, 平均每株苗茎节数 4.5 个。 0034 2、 云南农业大学薯类作物研究所组培室利用本实施例的培养基和方法快繁马铃 薯组培苗, 2011 年 3 月 6 日剪切接种, 室内温度设定为 20, 24 小时光照, 2011 年 3 月 27 日组培苗株高长至8厘米, 生长时间是21天, 组培苗生长健壮, 叶色浓绿, 茎秆粗壮, 平均茎 粗 0.17 厘米, 平均每株苗茎节数 4。
21、.7 个。 0035 3、 云南农业大学农学与生物技术学院组培室利用本实施例的培养基和方法快繁 马铃薯组培苗, 2011 年 4 月 7 日剪切接种, 室内温度设定为 21, 24 小时光照, 2011 年 4 月 27日组培苗株高长至8厘米, 生长时间是20天, 组培苗生长健壮, 叶色浓绿, 茎秆粗壮, 平均 茎粗 0.18 厘米, 平均每株苗茎节数 4.6 个。 0036 相同条件下, 使用MS培养基保存的马铃薯组培苗, 2011年4月7日剪切接种, 2011 年 5 月 7 日组培苗株高长至 8 厘米, 生长时间是 31 天, 组培苗生长较弱, 叶色淡绿, 茎秆细 弱弯曲, 分枝较多且细弱, 平均茎粗 0.12 厘米, 平均每株苗茎节数 4.1 个。 0037 本发明所描述的具体实施例只用于对该培养基的具体实现过程的详细描述, 而不 是对该培养基的限定。任何对此产品进行的修饰与改良, 在专利范围或范畴内同类或相近 物质的替代与使用, 均属于本发明专利范围, 受此专利保护。 说 明 书 CN 103931500 A 5 。