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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611214419.2 (22)申请日 2016.12.26 (71)申请人 新昌县钧国生物技术有限公司 地址 312500 浙江省绍兴市新昌县梅渚镇 梅渚村商务街78-1号 (72)发明人 孟繁星 王淼 (74)专利代理机构 北京高航知识产权代理有限 公司 11530 代理人 赵永强 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基及其应 用 (57)摘要 本发明公开了弄岗马兜铃组织培养的增殖 培养基及其应用，。
2、 所述的培养基包括： 牛肉50- 100份、 蛋白胨15-20份、 二氧化氯水溶液15-25 份、 碘化钾15-30份、 硝酸钾15-35份、 山嵛醇0.1- 0.5份、 琼脂8-18份、 麦芽糖7-20份、 硫酸镁7-20 份、 食盐7-30份、 贝粉7-20份、 骨粉5-30份、 维生 素C2-10份、 吲哚丁酸2-10份。 本发明通过改良培 养基的配置， 解决了其它增殖培养基配方不适合 弄岗马兜铃组培节增殖培养的问题， 可以提高其 增殖效果。 权利要求书1页 说明书3页 CN 106718916 A 2017.05.31 CN 106718916 A 1.一种培养基在弄岗马兜铃组织培养的。
3、增殖培养中的应用， 其特征在于： 培养基由以 下原料及其重量份数组成： 牛肉50-100份、 蛋白胨15-20份、 二氧化氯水溶液15-25份、 碘化 钾15-30份、 硝酸钾15-35份、 山嵛醇0.1-0.5份、 琼脂8-18份、 麦芽糖7-20份、 硫酸镁7-20份、 食盐7-30份、 贝粉7-20份、 骨粉5-30份、 维生素C2-10份、 吲哚丁酸2-10份。 2.根据权利要求1所述的一种培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 其 特征在于： 培养基由以下原料及其重量份数组成： 牛肉80份、 蛋白胨15份、 二氧化氯水溶液 20份、 碘化钾20份、 硝酸钾15份、 山嵛醇0.。
4、1-0.5份、 琼脂10份、 麦芽糖10份、 硫酸镁15份、 食 盐15份、 贝粉15份、 骨粉10份、 维生素C8份、 吲哚丁酸5份。 3.根据权利要求1所述的一种培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 包 括以下几个步骤： 1） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎； 2） 加水1000毫升浸泡， 15-25下放置12-20小时或50-60下放置半小时。 用纱布将肉 汁过滤； 3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入碳酸钠至红色， 调整pH值； 4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌； 5） 将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。
5、。 4.根据权利要求3所述的培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 其特征 在于， 步骤1） 中剁碎中要注意让肉碎的均匀。 5.根据权利要求3所述的培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 其特征 在于， 步骤2） 中用纱布将肉汁过滤中要补足失水。 6.根据权利要求3所述的培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 其特征 在于， 步骤3） 中pH值在5.5-6.0。 7.根据权利要求3所述的培养基在弄岗马兜铃组织培养的增殖培养中的应用， 其特征 在于， 步骤4） 中高压蒸汽灭菌时间在15-25 min。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106718916 A 2 。
6、弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基及其应用 技术领域 0001 本发明涉及农业种植领域， 尤其是涉及一种弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基及 其应用。 背景技术 0002 弄岗马兜铃， 草质藤本， 茎长4-5米， 6棱， 无毛。 叶纸质或膜质， 卵状心形、 心形弄岗 马兜铃或近圆形， 长8-13厘米， 宽9-12厘米， 顶端急渐尖， 基部心形， 两侧裂片近圆形， 长2-3 厘米， 稍扩展或下垂， 上面绿色， 无毛， 下面浅绿色， 密被细短柔毛， 密布油点;基出脉7条， 网 脉较稀疏， 各级叶脉均在下面明显凸起;叶柄柔弱， 长2-8厘米， 无毛。 总状花序常1-2个聚生 于叶腋， 有花2-6朵;花梗长1。
7、-2厘米， 基部有小苞片;小苞片卵形， 长5-7毫米， 宽约3毫米， 无 柄， 上面被短柔毛， 下面无毛;花被全长约4.5厘米， 基部膨大呈球形， 直径约4毫米， 向上渐 收狭成一长管， 管长约1厘米， 近管口渐扩大成漏斗状;檐部一侧极短， 有时稍2裂， 另一侧向 上延伸成舌片近10年来我国天然药物的需求也翻了3番， 年需求量已高达60万吨， 出口约30 万吨。 0003 国内中药材需求正以15%的年均增长率强劲递增。 过度无序开采导致中药材资源 质量性紧缺： 中药资源产地大面积植被被毁， 导致生态环境日益恶化， 野生资源逐年减少， 许多珍稀道地药材物种濒危灭绝， 大自然的宝贵财富基因、 物种。
8、和生态系统近年来正遭 受退化、 消失威胁。 0004 弄岗马兜铃具有特殊的药用价值， 而随着社会经济迅速发展、 人口快速增长， 人类 对自然资源的需求量不断加大， 生态平衡被破坏， 许多珍稀物种灭绝。 作为重要的自然资源 之一， 弄岗马兜铃难免此难， 正面临可持续发展危机和生物多样性受到破坏的极其严重的 挑战。 发明内容 0005 本发明的目的是针对上述存在问题， 提供一种促生长、 诱导生根生芽效果好的弄 岗马兜铃组织培养的增殖培养基， 所述的培养基包括： 牛肉50-100份、 蛋白胨15-20份、 二氧化氯水溶液15-25份、 碘化钾15-30份、 硝酸钾15- 35份、 山嵛醇0.1-0.。
9、5份、 琼脂8-18份、 麦芽糖7-20份、 硫酸镁7-20份、 食盐7-30份、 贝粉7-20 份、 骨粉5-30份、 维生素C2-10份、 吲哚丁酸2-10份。 0006 培养基配制： （1） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎。 0007 （2） 加水1000毫升浸泡， 15-25下放置12-20小时或50-60下放置半小时。 用纱 布将肉汁过滤， 补足失水。 0008 （3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入苏打 （碳酸钠） 至红色， 调整pH 值。 0009 （4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌。 说 明 书 1/3 页 3 CN 10671。
10、8916 A 3 0010 （5） 将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。 0011 本发明通过改良培养基的配置， 解决了其它增殖培养基配方不适合弄岗马兜铃组 培节增殖培养的问题， 可以提高其增殖效果。 具体实施方式 0012 以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。 0013 实施例1： 一种弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基， 包括： 牛肉50份、 蛋白胨15份、 二氧化氯水溶 液15份、 碘化钾15份、 硝酸钾15份、 山嵛醇0.1份、 琼脂8份、 麦芽糖7份、 硫酸镁7份、 食盐7份、 贝粉7份、 骨粉5份、 维生素C2份、 吲哚丁酸2份。 0014 培养基配制： （1。
11、） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎。 0015 （2） 加水1000毫升浸泡， 15下放置12小时。 用纱布将肉汁过滤， 补足失水。 0016 （3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入苏打 （碳酸钠） 至红色， 调整pH 值。 0017 （4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌。 0018 （5） 将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。 0019 实施例2： 一种弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基， 包括： 牛肉60份、 蛋白胨16份、 二氧化氯水溶 液18份、 碘化钾16份、 硝酸钾20份、 山嵛醇0.5份、 琼脂10份、 麦芽糖8份。
12、、 硫酸镁10份、 食盐10 份、 贝粉8份、 骨粉10份、 维生素C5份、 吲哚丁酸4份。 0020 培养基配制： （1） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎。 0021 （2） 加水1000毫升浸泡， 18下放置14小时。 用纱布将肉汁过滤， 补足失水。 0022 （3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入苏打 （碳酸钠） 至红色， 调整pH 值。 0023 （4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌。 0024 （5） 将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。 0025 实施例3： 一种弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基， 包括： 牛肉70。
13、份、 蛋白胨18份、 二氧化氯水溶 液21份、 碘化钾21份、 硝酸钾22份、 山嵛醇0.2份、 琼脂15份、 麦芽糖12份、 硫酸镁15份、 食盐 22份、 贝粉12份、 骨粉15份、 维生素C6份、 吲哚丁酸7份。 0026 培养基配制： （1） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎。 0027 （2） 加水1000毫升浸泡20下放置15小时。 用纱布将肉汁过滤， 补足失水。 0028 （3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入苏打 （碳酸钠） 至红色， 调整pH 值。 0029 （4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌。 0030 （5） 将上述已灭菌的。
14、培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。 说 明 书 2/3 页 4 CN 106718916 A 4 0031 实施例4： 一种弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基， 包括： 牛肉100份、 蛋白胨20份、 二氧化氯水溶 液25份、 碘化钾30份、 硝酸钾35份、 山嵛醇0.3份、 琼脂18份、 麦芽糖20份、 硫酸镁20份、 食盐 30份、 贝粉20份、 骨粉30份、 维生素C10份、 吲哚丁酸10份。 0032 培养基配制： （1） 取适量新鲜牛肉， 去净脂肪、 筋腱后， 绞碎或剁碎。 0033 （2） 加水1000毫升浸泡， 25下放置13小时。 用纱布将肉汁过滤， 补足失水。 0034。
15、 （3） 向肉汁中加入蛋白胨和食盐。 将肉汁加热， 放入苏打 （碳酸钠） 至红色， 调整pH 值。 0035 （4） 加入剩余所需材料， 分装， 高压蒸汽灭菌。 山嵛醇在培养基中与碘化钾结合起 到了诱导生根生芽的作用。 将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质， 制成培养基。 0036 本发明的弄岗马兜铃组织培养的增殖培养基的效果： 测定指标腋芽数目 （7天）腋芽数目 （10天）腋芽数目 （14天） 实验组63035 对照21020 由表可知， 本增殖培养基对弄岗马兜铃的增殖效果是很显著的。 0037 以上所述仅为本发明的较佳实施例， 并不用以限制本发明， 凡在本发明的精神和 原则之内， 所作的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 明 书 3/3 页 5 CN 106718916 A 5 。