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1、(10)申请公布号 CN 102919516 A (43)申请公布日 2013.02.13 CN 102919516 A *CN102919516A* (21)申请号 201210426173.0 (22)申请日 2012.10.31 A23K 1/06(2006.01) A23K 1/16(2006.01) (71)申请人 贵州大学 地址 550025 贵州省贵阳市贵州大学花溪北 校区科技处 (72)发明人 王开功 郭素环 周碧君 文明 程振涛 夏先林 (74)专利代理机构 贵阳中新专利商标事务所 52100 代理人 吴无惧 (54) 发明名称 一种酒糟新型生物饲料及其生产工艺 (57) 摘。
2、要 本发明公开了一种酒糟新型生物饲料及其生 产工艺, 包括酒糟培养基和菌种, 其特征在于 : 酒 糟培养基的配方为 : 鲜白酒糟 50% 70%、 玉米粉 5% 15%、 菜籽粕 5% 15%、 水 15% 25%, 此处 的百分比指各配方占酒糟培养基的总重量之比 ; 每 80 120g 酒糟培养基中另加硫酸亚铁 12 18mg、 硫酸锌1015mg、 硫酸锰812mg、 硫酸铜 12 18mg、 磷酸氢钙 1 3g ; 菌种包括枯草芽孢 杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母 ; 工 艺流程包括 : 进行拮抗试验, 菌种扩大培养、 纯度 及活性检查, 酒糟培养基的配制及灭菌, 酒糟微生。
3、 物固态发酵和 9 11d 后酒糟生物饲料的处理 ; 周期短、 蛋白质含量高。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页 说明书 4 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 2 页 说明书 4 页 附图 1 页 1/2 页 2 1. 一种酒糟新型生物饲料, 包括酒糟培养基和菌种, 其特征在于 : 酒糟培养基的配方 为 : 鲜白酒糟50%70%、 玉米粉5%15%、 菜籽粕5%15 %、 水15%25 %, 此处的百分比 指各配方占酒糟培养基的总重量之比 ; 且每 80 120 g 酒糟培养基中另加硫酸亚铁 12 18 mg、 硫酸锌 10 1。
4、5 mg、 硫酸锰 8 12 mg、 硫酸铜 12 18 mg、 磷酸氢钙 1 3g ; 菌种 包括枯草芽孢杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母。 2. 根据权利要求 1 所述的一种酒糟新型生物饲料, 其特征在 : 每 80 120 g 酒糟培 养基接种枯草芽孢杆菌菌液 1 3mL, 活菌数为 1.01011 1.51011cfu/mL ; 接种绿色 木霉菌菌液 1 3mL, 活菌数为 6.81010 7.21010cfu/mL ; 接种嗜酸乳杆菌菌液 1 3mL, 活菌数为 2.01010 2.21010cfu/mL ; 接种班图酒香酵母菌液 1 3mL, 活菌数为 3.21011 。
5、3.61011cfu/mL。 3. 如权利要求 1 所述的一种酒糟新型生物饲料的工艺流程, 其特征在于 : 包括以下过 程 : 进行拮抗试验, 菌种扩大培养、 纯度及活性检查, 酒糟培养基的配制及灭菌, 酒糟微生物 固态发酵和 9 11 d 后酒糟生物饲料的处理。 4. 根据权利要求 3 所述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 拮抗试验 : 将班图酒香酵母、 枯草芽孢杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌 4 种菌两两组合分组, 将每组的其 中一种菌以 8 12 mm 的间隔划线接种于普通培养基上, 然后取另外一种菌垂直划一条直 线, 28 32培养 22 26 h, 观察十字交叉处是。
6、否有被抑制而发生菌落萎缩和消失的现 象。 5. 根据权利要求 3 所述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 菌种扩大 培养、 纯度及活性检查 : 将所选 4 种菌分别接种一环斜面菌于 100mL 液体培养基中, 150r/ min、 30摇菌, 其中枯草芽孢杆菌、 嗜酸乳杆菌经过 10 14h 扩大培养后转入发酵罐中进 行进一步扩大培养, 绿色木霉、 班图酒香酵母经过 22 26h 扩大培养后转入发酵罐中进行 进一步扩大培养 ; 扩大培养过程中从发酵罐中取样进行革兰氏染色于显微镜下观察确定是 否为目的菌种, 同时进行涂布观察菌落形态及菌落数确定菌种的活性。 6. 根据权利要求 3。
7、 所述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 酒糟培养 基的配制及灭菌 : 按鲜白酒糟 50% 70%、 玉米粉 5% 15 %、 菜籽粕 5% 15 %、 水 15% 25 %, 此处的百分比指各配方占酒糟培养基的总重量之比 ; 且每 80 120 g 酒糟培养基中 另加硫酸亚铁 12 18 mg、 硫酸锌 10 15 mg、 硫酸锰 8 12 mg、 硫酸铜 12 18 mg、 磷 酸氢钙 1 3g, 加石灰水将 pH 调至 6 7, 翻拌混匀, 常压堆积进行灭菌。 7. 根据权利要求 3 所述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 酒糟微生 物固态发酵 : 待酒糟。
8、培养基温度降至 32 38时将发酵罐中扩大培养的 4 种菌以相等比 例, 总接种量为 5% 7% 的比例接种到酒糟培养基中 ; 枯草芽孢杆菌活菌数为 1.01011 1.51011cfu/mL, 绿色木霉菌活菌数为6.810107.21010cfu/mL, 嗜酸乳杆菌活菌数为 2.01010 2.21010cfu/mL, 班图酒香酵母菌活菌数为 3.21011 3.61011 cfu/mL ; 接种后待温度降为 28 32时将酒糟培养基转入酒糟发酵池中, 酒糟发酵池的大小为 : 长 250 300cm, 宽 180 210cm, 地面以上高度为 120 180cm, 地面以下高度为 35 45。
9、cm, 其中 1 3d 为有氧发酵, 酒糟转入池中后暂不封口, 4 10d 天为厌氧发酵, 发酵到第 3 5d 将池中酒糟踩紧用粘土封好池口。 8.根据权利要求3所述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 911d后 权 利 要 求 书 CN 102919516 A 2 2/2 页 3 酒糟生物饲料的处理 : 9 11d 后将发酵好的酒糟生物料搭配全价配合饲料饲喂牛、 羊, 全 价配合饲料与酒糟生物料的比例为 1:2 1:4 ; 用不完的酒糟生物料进行低温烘干温度为 50 70、 粉碎、 包装好至于阴凉低温干燥处, 此饲料可用于添加到猪、 鸡、 鸭的饲料中。 权 利 要 求 书 C。
10、N 102919516 A 3 1/4 页 4 一种酒糟新型生物饲料及其生产工艺 技术领域 0001 本发明涉及一种处理酒糟生产酒糟新型生物饲料的生产工艺。 背景技术 0002 我国每年白酒糟产量高达 2100 多万吨, 基于酒糟中含有一定的蛋白质, 丰富的氨 基酸、 维生素和多种微量元素等, 传统的做法是将鲜酒糟直接饲喂牲畜当饲料原料, 此方法 有两个弊端 : 一是鲜酒糟内粗纤维含量高、 家畜适口性差、 消化率低, 霉烂酒糟易产生病虫 害 ; 二是鲜酒糟含水率高, 难运输, 酸度高, 易腐败变质。为此, 人们对其资源化问题进行了 多方面的研究, 如 : 利用白酒糟制取甘油, 培养食用菌, 提。
11、取复合氨基酸及微量元素, 提取植 酸和植酸钙, 酿醋 ; 利用酒精糟厌氧发酵回收沼气, 提取蛋白质, 生产干全饲料 (DDGS), 制 取单细胞蛋白 (SCP) 饲料, 酒糟发酵生产燃料乙醇, 生产粗酶制剂等。 以上方法由于规模小、 能源消耗大、 营养物质转化不充分等问题多数处于停顿状态。 发明内容 0003 本发明要解决的技术问题在于, 提供一种有效发酵白酒糟生产酒糟生物饲料的生 产工艺, 以克服现有技术存在的能源消耗大、 营养物质转化不充分等不足。 0004 本发明的技术方案 : 一种酒糟新型生物饲料, 包括酒糟培养基和菌种, 其特征在 于 : 酒糟培养基的配方为 : 鲜白酒糟 50% 7。
12、0%、 玉米粉 5% 15%、 菜籽粕 5% 15 %、 水 15% 25 %, 此处的百分比指各配方占酒糟培养基的总重量之比 ; 且每 80 120 g 酒糟培 养基中另加硫酸亚铁 12 18 mg、 硫酸锌 10 15 mg、 硫酸锰 8 12 mg、 硫酸铜 12 18 mg、 磷酸氢钙 1 3g ; 菌种包括枯草芽孢杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母。 0005 所述的每 80 120 g 酒糟培养基接种枯草芽孢杆菌菌液 1 3mL, 活菌数为 1.01011 1.51011cfu/mL。 0006 所述的每 80 120g 酒糟培养基接种绿色木霉菌菌液 1 3mL, 活菌数。
13、为 6.81010 7.21010cfu/mL。 0007 所述的每 80 120 g 酒糟培养基接种嗜酸乳杆菌菌液 1 3mL, 活菌数为 2.01010 2.21010cfu/mL。 0008 所述的每 80 120 g 酒糟培养基接种班图酒香酵母菌液 1 3mL, 活菌数为 3.21011 3.61011cfu/mL。 0009 如上述的一种酒糟新型生物饲料的生产工艺, 其特征在于 : 包括以下过程 : 进行 拮抗试验, 菌种扩大培养、 纯度及活性检查, 酒糟培养基的配制及灭菌, 酒糟微生物固态发 酵和 9 11 d 后酒糟生物饲料的处理。 0010 所述的拮抗试验 : 将班图酒香酵母、。
14、 枯草芽孢杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌 4 种菌 两两组合分组, 将每组的其中一种菌以812 mm的间隔划线接种于普通培养基上, 然后取 另外一种菌垂直划一条直线, 2832培养2226 h, 观察十字交叉处是否有被抑制而发 生菌落萎缩和消失的现象。 说 明 书 CN 102919516 A 4 2/4 页 5 0011 所述的菌种扩大培养、 纯度及活性检查 : 将所选 4 种菌分别接种一环斜面菌于 100mL液体培养基中, 150r/min、 30摇菌, 其中枯草芽孢杆菌、 嗜酸乳杆菌经过1014h扩 大培养后转入发酵罐中进行进一步扩大培养, 绿色木霉、 班图酒香酵母经过 22 26h 扩。
15、大 培养后转入发酵罐中进行进一步扩大培养。 扩大培养过程中从发酵罐中取样进行革兰氏染 色于显微镜下观察确定是否为目的菌种, 同时进行涂布观察菌落形态及菌落数确定菌种的 活性。 0012 所述的酒糟培养基的配制及灭菌 : 按鲜白酒糟 50% 70%、 玉米粉 5% 15 %、 菜 籽粕 5% 15 %、 水 15% 25 %, 此处的百分比指各配方占酒糟培养基的总重量之比 ; 且每 80 120 g 酒糟培养基中另加硫酸亚铁 12 18 mg、 硫酸锌 10 15 mg、 硫酸锰 8 12 mg、 硫酸铜 12 18 mg、 磷酸氢钙 1 3g, 加石灰水将 pH 调至 6 7, 翻拌混匀, 常。
16、压堆积进 行灭菌。 0013 所述的酒糟微生物固态发酵 : 待酒糟培养基温度降至 32 38时将发酵罐中 扩大培养的 4 种菌以相等比例, 总接种量为 5% 7% 的比例接种到酒糟培养基中。枯 草芽孢杆菌活菌数为 1.01011 1.51011cfu/mL, 绿色木霉菌活菌数为 6.81010 7.21010cfu/mL, 嗜酸乳杆菌活菌数为 2.01010 2.21010cfu/mL, 班图酒香酵母菌活 菌数为 3.21011 3.61011 cfu/mL。接种后待温度降为 28 32时将酒糟培养基转 入酒糟发酵池中, 酒糟发酵池的大小为 : 长 250 300cm, 宽 180 210cm。
17、, 地面以上高度为 120180cm, 地面以下高度为3545cm, 其中13d为有氧发酵, 酒糟转入池中后暂不封 口, 4 10d 天为厌氧发酵, 发酵到第 3 5d 将池中酒糟踩紧用粘土封好池口。 0014 所述的 9 11d 后酒糟生物饲料的处理 : 9 11d 后将发酵好的酒糟生物料搭配 全价配合饲料饲喂牛、 羊, 全价配合饲料与酒糟生物料的比例为 1:2 1:4。用不完的酒糟 生物料进行低温烘干温度为 50 70、 粉碎、 包装好至于阴凉低温干燥处, 此饲料可用于 添加到猪、 鸡、 鸭的饲料中。 0015 本发明有益效果 : 本发明能将酒糟原料转化为微生物菌体蛋白、 生物活性小肽类 。
18、氨基酸、 功能性脂肪酸、 微生物活性益生菌、 复合酶制剂为一体的生物发酵饲料。该饲料产 品不但可以弥补常规饲料中容易缺乏的氨基酸、 脂肪酸, 而且能使其中不易吸收等原料营 养成份迅速转化, 达到提高家畜适口性增强消化吸收利用效果。解决了酒糟对环境污染造 成的压力、 提高了酒糟的适口性及营养成分, 解决了人畜争粮的问题、 为酒糟资源化利用提 供具体工艺流程、 为酒糟实际利用提供了解决方案。具有以下的技术优势和积极效果 : (1) 微生物生长速度快, 周期短、 蛋白质含量高, 含丰富的必需氨基酸、 B 族维生素、 辅 酶等。 0016 (2) 生产不受气候条件、 生产季节变化的影响, 工艺简单、 。
19、对设备要求低、 成本低, 仅需少量土地和劳动力、 能源消耗低, 酒糟中营养物质得到有效的利用。 附图说明 0017 图 1 本发明的生产工艺 ; 具体实施方式 0018 本发明的实施例 : 本发明的处理酒糟生产酒糟生物饲料的生产工艺的菌种组 说 明 书 CN 102919516 A 5 3/4 页 6 合配方为 : 菌种包括枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn) 、 绿色木 霉 (Trichoderma viride) 、 嗜酸乳杆菌 (Lactobacillus acidophilus) 、 班图酒香酵母 (Brettanomyces cust。
20、ersianus) ; 酒糟培养基的配方为 : 鲜白酒糟 60 %、 玉米粉 10 %、 菜籽 粕 10 %、 水 20 %, 且每 100g 酒糟培养基中另加硫酸亚铁 15mg、 硫酸锌 12mg、 硫酸锰 10 mg、 硫酸铜 15 mg、 磷酸氢钙 2 g。 0019 枯草芽孢杆菌接种量为每 100g 酒糟培养基接种其菌液 1.5mL, 活菌数为 1.331011cfu/mL。 0020 绿色木霉接种量为每 100g 酒糟培养基接种其菌液 1.5mL, 活菌数为 7.01010 cfu/mL。 0021 嗜酸乳杆菌接种量为每 100g 酒糟培养基接种其菌液 1.5mL, 活菌数为 2.1。
21、1010 cfu/mL。 0022 班图酒香酵母接种量为每100g酒糟培养基接种其菌液1.5mL, 活菌数为3.51011 cfu/mL。 0023 如附图 1 所示意, 处理酒糟生产酒糟生物饲料的生产工艺, 包括以下过程 : 进行菌 种的选择及拮抗试验确定所选 4 种菌是否适合混合添加不产生拮抗, 菌种扩大培养、 纯度 及活性检查, 酒糟培养基的配制及灭菌, 酒糟微生物固态发酵, 10d 后酒糟生物饲料的处理。 0024 所选菌种的确定。针对发酵后酒糟要达到的目的 : 弥补常规饲料中容易缺乏的氨 基酸、 脂肪酸, 使其中不易吸收等原料营养成份迅速转化, 达到提高家畜适口性增强消化吸 收利用效。
22、果, 即干物质、 粗蛋白、 多不饱和脂肪酸、 氨基酸含量的提高 ; 粗纤维含量降低。确 定所选菌种。 0025 拮抗试验 : 将班图酒香酵母、 枯草芽孢杆菌、 绿色木霉、 嗜酸乳杆菌 4 种菌两两组 合分组, 将每组的其中一种菌以 10mm 的间隔划线接种于普通培养基上, 然后取另外一种菌 垂直划一条直线, 30培养 24 h, 观察十字交叉处是否有被抑制而发生菌落萎缩和消失的 现象。各组菌种十字交叉处均未出现菌落萎缩和消失的现象, 得出结论各菌种间均不存在 拮抗效应, 适合组合发酵酒糟培养基。 0026 菌种扩大培养、 纯度及活性检查 : 将所选4种菌分别接种一环斜面菌于100mL液体 培养。
23、基中, 150r/min、 30摇菌, 其中枯草芽孢杆菌、 嗜酸乳杆菌经过 12h 扩大培养后转入 发酵罐中进行进一步扩大培养, 绿色木霉、 班图酒香酵母经过 24h 扩大培养后转入发酵罐 中进行进一步扩大培养。 扩大培养过程中从发酵罐中取样进行革兰氏染色于显微镜下观察 确定是否为目的菌种, 同时进行涂布观察菌落形态及菌落数确定菌种的活性。 0027 酒糟培养基的配制及灭菌 : 酒糟为新鲜酒糟, 酒厂刚出炉的酒糟待温度降为 80 时按鲜白酒糟60 %、 玉米粉10 %、 菜籽粕10 %、 水20 %, 此处的百分比指各配方占酒糟培养 基的总重量之比 ; 且每100g酒糟培养基中另加硫酸亚铁15。
24、 mg、 硫酸锌12 mg、 硫酸锰10mg、 硫酸铜15mg、 磷酸氢钙2g的比例配制酒糟培养基将其它原料与其充分混合, 加石灰水将pH 调至 6.5, 翻拌混匀, 常压堆积进行灭菌。 0028 酒糟微生物固态发酵 : 待酒糟培养基温度降至 35时将发酵罐中扩大培养的 4 种菌以相等比例, 总接种量为 6% 的比例接种到酒糟培养基中。绿色木霉菌液活菌数达到 7.01010cfu/mL、 班图酒香酵母菌液活菌数达到 3.51011cfu/mL、 嗜酸乳杆菌菌液活菌数 达到 2.11010cfu/mL、 枯草芽孢杆菌菌液活菌数达到 1.331011cfu/mL。接种后待温度 说 明 书 CN 1。
25、02919516 A 6 4/4 页 7 降为 30时将酒糟培养基转入酒糟发酵池中, 酒糟发酵池的大小为 : 长 200cm, 宽 190cm, 地 面以上高度为150cm, 地面以下高度为40cm, 其中13d为有氧发酵, 酒糟转入池中后暂不封 口, 410d天为厌氧发酵, 发酵到第4d将池中酒糟踩紧用粘土封好池口10d后酒糟生物饲料 的处理 : 10d 后将发酵好的酒糟生物料搭配全价配合饲料饲喂牛、 羊, 全价配合饲料与酒糟 生物料的比例为 1:3。用不完的酒糟生物料可进行 5070低温烘干、 粉碎、 包装好至于阴 凉低温干燥处, 此饲料可用于添加到猪、 鸡、 鸭的饲料中。 说 明 书 CN 102919516 A 7 1/1 页 8 图 1 说 明 书 附 图 CN 102919516 A 8 。