一种蚯蚓抗菌肽水解液及含有该抗菌肽水解液的饲料.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 102406052 B (45)授权公告日 2013.08.14 CN 102406052 B *CN102406052B* (21)申请号 201110317906.2 (22)申请日 2011.10.19 A23K 1/10(2006.01) (73)专利权人 冯耀民 地址 529101 广东省江门市新会区会城振兴 三路 33 号 201 专利权人 黄惠花 黄国伦 (72)发明人 冯耀民 黄惠花 黄国伦 (74)专利代理机构 广州新诺专利商标事务所有 限公司 44100 代理人 华辉 刘婉 CN 1087817 A,1994.06.15, 说明书 1-2 页 . 。

2、CN 1623412 A,2005.06.08, 第 5 页 . CN 102091098 A,2011.06.15, 第 3 页 . CN 1163932 A,1997.11.05, 全文 . CN 1566356 A,2005.01.19, 第 2 页 . (54) 发明名称 一种蚯蚓抗菌肽水解液及含有该抗菌肽水解 液的饲料 (57) 摘要 本发明提供了一种蚯蚓抗菌肽水解液， 由以 下步骤制得 ： 1) 收集新鲜蚯蚓， 清洗、 滤干 ； 2) 将 步骤 1) 中处理好的蚯蚓和红糖、 水、 防腐剂按照 1 0.2 1.1 1 10 0.007 0.036 的 重量比例在水浴恒温 40 60条。

3、件下进行水解 16 20 小时 ； 3) 过滤杂质， 得到蚯蚓抗菌肽水解 液。本发明提供的蚯蚓抗菌肽水解液含有适合水 产动物的十多种氨基酸、 消化酶、 多种小肽， 是多 种蚯蚓抗菌肽、 多种消化酶及其氨基酸的混合物， 能够对病源菌起到协同作用， 具有广谱抗菌性， 提 高饲料利用率， 使料肉比降低， 增强水产动物的机 体免疫力， 促进水产动物生长， 改良水产品质量， 而且生产工艺简单， 能够降低生产成本。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 牛力轩 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 (10)授权公。

4、告号 CN 102406052 B CN 102406052 B *CN102406052B* 1/1 页 2 1. 一种蚯蚓抗菌肽水解液， 其特征在于由以下步骤制成 ： 1） 收集新鲜蚯蚓， 清洗、 滤干 ； 将蚯蚓滤干之后进行暴晒， 制成生晒蚯蚓干 ； 2） 将步骤 1） 中处理好的蚯蚓和红糖、 水、 防腐剂按照 1 ： 1.1 ： 10 ： 0.036 的重量比例在 水浴恒温 40 60条件下进行水解 16 20 小时 ； 3） 过滤杂质， 得到蚯蚓抗菌肽水解液 ； 其中， 在所述步骤 1） 中将新鲜蚯蚓收集之后， 将其置于阳光下， 使其钻入底层， 然后刮 去表层蚓粪， 直至蚯蚓成团， 。

5、只余少量蚓粪， 再将蚯蚓用水浸泡、 搅动， 清洗35次至干净， 滤去水分。 2. 根据权利要求 1 所述的蚯蚓抗菌肽水解液， 其特征在于 ： 所述防腐剂为山梨酸、 山梨 酸钾、 苯甲酸钠、 苯甲酸钾中的任意一种。 3. 一种饲料， 其特征在于含有权利要求 1 所述的蚯蚓抗菌肽水解液。 4. 根据权利要求 3 所述的饲料， 其特征在于 ： 所述蚯蚓抗菌肽水解液占饲料总重量的 百分比为 2.5%。 权 利 要 求 书 CN 102406052 B 2 1/4 页 3 一种蚯蚓抗菌肽水解液及含有该抗菌肽水解液的饲料 技术领域 0001 本发明属于动物食品添加剂领域， 具体涉及一种蚯蚓抗菌肽水解液。 。

6、背景技术 0002 随着水产养殖业的不断发展， 往往由于病害及应激而导致养殖失败， 给生产者带 来较大的经济损失。抗生素在水产养殖上的应用越来越广泛， 能起到防治疾病、 促进生长、 节约营养成分的作用。 抗生素的应用有效地控制了许多水产疾病的发生， 如鱼类的烂鳃病、 肠炎病、 水霉病、 中华绒螫水肿病， 对虾的烂肢病等等， 极大地促进了水产养殖业的发展。 但 是， 由于抗生素的使用容易产生耐药菌株， 存在药物残留以及容易破坏水生动物微生态平 衡， 使得水产养殖病害防治工作越加困难， 水产品安全得不到保证。例如， 某种曾经有效的 抗生素在生产上低剂量、 长时期使用后， 会出现药效减弱或完全消失的。

7、现象， 这是因为病原 菌对抗生素产生了抗性或耐药性， 即产生了耐药菌株。耐药菌株的产生使得生产上用药量 越来越大， 药效越来越差， 既增加了生产成本， 又增加了防治难度。抗生素使用后进入水产 动物的血液循环， 长期多次使用会在体内残留， 产品摄入到人体， 会引起过敏， 严重危害人 们的生命安全。同时， 也影响水产养殖业自身的可持续发展。如近年时有发生抗生素类药 物在水产品中残留超标事件， 直接影响了产品出口和行业发展。过量的抗生素残留在现代 医学已证实对人类具有直接或间接的危害， 但在水产养殖上， 对养殖群体进行病害防治也 是现实存在的。据此， 开发生物抗菌肽制剂， 减少使用抗生素， 是水产健。

8、康养殖急待解决的 问题。 0003 公开号为 CN 1623412 的中国专利申请公开了一种蚯蚓活性肽抗菌饲料原料及其 生产方法， 其技术方案是 ： 用盐水提取蚯蚓排放的体腔液， 制成蚓肽粉， 加入蚯蚓活性肽抗 菌饲料原料的生产中， 具体包括 (1) 蚯蚓体腔液的提取， 用盐水轻刷蚯蚓表皮， 蚯蚓受到盐 水刺激， 会排出体腔液， 收集起来 ； (2) 蚓肽粉的制作， 把提取的蚯蚓体腔液与杀菌后的蚯 蚓粪或麸皮混合搅拌， 晾干备用， 由于蚯蚓的体腔液含有大量的抗菌肽， 该混合物称为蚓肽 粉 ； (3) 将蚓肽粉加入生产蚯蚓活性肽抗菌饲料原料中， 制成蚯蚓活性肽抗菌饲料原料产 品。该发明具有一定的。

9、抗菌抑菌作用， 然而生产工艺较为复杂， 单位效价生产成本高。其 次， 其产品的形态为固体饲料原料， 蚯蚓粪的吸附功能将蚯蚓液的特殊味道吸附了， 影响了 其诱食性。 再次， 虽然能用于饲料厂生产， 但在制备饲料的生产过程中的制粒和后熟化工序 会降低抗菌肽的抗菌活性和消化酶的活性， 从而影响其使用效果。 发明内容 0004 本发明的目的是针对以上要解决的技术问题， 提供一种能够有效促进水产品食 欲， 从而提高饲料转化率， 降低成本， 并提高水产品免疫力的生物抗菌肽制剂。 0005 本发明的另一个目的是提供一种制备上述生物抗菌肽制剂的方法。 0006 本发明的再一个目的是提供一种含有该生物抗菌肽制剂。

10、的饲料。 0007 为了达到以上目的， 本发明提供了以下技术方案 ： 说 明 书 CN 102406052 B 3 2/4 页 4 0008 一种蚯蚓抗菌肽水解液， 由以下步骤制得 ： 0009 1) 收集新鲜蚯蚓， 清洗、 滤干 ； 0010 2) 将步骤 1) 中处理好的蚯蚓和红糖、 水、 防腐剂按照 1 0.2 1.1 1 10 0.007 0.036 的重量比例在水浴恒温 40 60条件下进行水解 16 20 小时 ； 0011 3) 过滤杂质， 得到蚯蚓抗菌肽水解液。 0012 作为本发明的一个优选实施例， 所述步骤 2) 中蚯蚓和红糖、 水、 防腐剂的重量比 例为 1 0.2 1 。

11、0.007。 0013 作为本发明的另一个优选实施例， 在所述步骤 1) 中将蚯蚓滤干之后进行暴晒， 制 成生晒蚯蚓干。 0014 作为本发明的另一个优选实施例， 所述步骤 2) 中蚯蚓干和红糖、 水、 防腐剂的重 量比例为 1 1.1 10 0.036。 0015 作为本发明的再一个优选实施例， 在所述步骤 1) 中将新鲜蚯蚓收集之后， 将其置 于阳光下， 使其钻入底层， 然后刮去表层蚓粪， 直至蚯蚓成团， 只余少量蚓粪， 再将蚯蚓用水 浸泡、 搅动， 清洗多次， 滤去水分。 0016 本发明提供的制备方法中， 所述防腐剂为山梨酸、 山梨酸钾、 苯甲酸钠、 苯甲酸钾 中的任意一种。 0017。

12、 本发明还提供了一种饲料， 其含有所述的蚯蚓抗菌肽水解液。 0018 在本发明提供的饲料中， 所述蚯蚓抗菌肽水解液占饲料总重量的百分比为 2.5。 0019 蚯蚓营养价值高， 体内含有抗菌肽， 丰富的易消化动物蛋白、 酶类、 糖类物质以及 某些促生长因子等生命活性物质， 具有抗病和提高免疫力的作用。本项目就是利用了蚯蚓 抗菌肽特殊的抗菌、 抑菌功能和蚯蚓体内含多种有益活性物质的特点， 通过优化酶解方法 使蚯蚓水解， 配制成蚯蚓抗菌肽多功能水解液。改进了基因表达工艺和提纯工艺生产多肽 类的方法， 大大降低生产成本。 产品作为精料补充料与饲料混合使用， 能够有效地增进鱼虾 食欲， 从而提高饲料转化。

13、率， 降低成本， 并提高鱼虾的免疫力。 在提高经济效益的同时， 改善 生产环境， 提高产品质量。产品在生产中进行试验示范， 对虾产品质量明显提高， 有效推动 水产品加工质量安全从源头上控制， 促进生产可持续发展。 0020 与现有技术相比， 本发明提供的制备蚯蚓抗菌肽水解液的方法利用蚯蚓体内自带 溶纤酶的特点， 能够在一定的温度范围内， 通过优化酶解方法使蚯蚓水解， 制成蚯蚓抗菌肽 水解液。该水解液含有适合水产动物的十多种氨基酸、 消化酶、 多种小肽， 是多种蚯蚓抗菌 肽、 多种消化酶及其氨基酸的混合物。 其中多种小肽能对病源菌起到协同作用， 具有广谱抗 菌性， 消化酶能帮助水产动物充分利用饲。

14、料， 使料肉比降低， 十多种氨基酸令水产动物的体 质增强， 抗病力得到提高， 而肽类的抗菌作用更能帮助水产动物抵抗生活环境的病原因子， 同时多种氨基酸被水产养殖动物吸收利用， 能增强水产动物的机体免疫力， 促进水产动物 生长， 改良水产品质量， 能够通过膜结合型抗菌肽抗菌机理、 非膜结合型抗菌肽抗菌机理和 激活免疫功能， 从而刺激免疫因子等起作用， 具有广谱抗菌性、 无残留、 促生长、 提高水产动 物免疫力、 对环境无污染的特性， 而且生产工艺简单， 能够大幅度降低生产成本， 易于普及 使用， 在生产应用上可以作为一种精料补充料拌料使用， 对抗菌肽和消化酶的活性影响少， 诱食性好。 说 明 书。

15、 CN 102406052 B 4 3/4 页 5 具体实施方式 0021 下面结合具体实施例对本发明提供的蚯蚓抗菌肽水解液及其制备方法作进一步 的详述， 但本发明并不限于以下实施例。 0022 实施例 1 0023 按照以下具体步骤制备蚯蚓抗菌肽水解液 ： 0024 1. 收集新鲜蚯蚓， 将混有蚓粪的蚯蚓置于阳光下， 由于蚯蚓怕光会钻入底层， 刮去 表层蚓粪， 然后蚯蚓继续往下钻， 再刮表层蚓粪， 直至蚯蚓成团， 只余少量蚓粪 ； 0025 2. 将步骤 1 中得到的新鲜蚯蚓放入水中浸泡， 搅动， 清洗 3 5 次至干净之后， 滤 去水分 ； 0026 3.将滤干水分的蚯蚓和红糖、 水、 山。

16、梨酸按照10.210.007的重量比例在 水浴恒温 40条件下进行水解 20 小时 ； 0027 4. 过滤杂质， 得到蚯蚓抗菌肽水解液。 0028 实施例 2 0029 按照以下具体步骤制备蚯蚓抗菌肽水解液 ： 0030 1. 收集新鲜蚯蚓， 将混有蚓粪的蚯蚓置于阳光下， 由于蚯蚓怕光会钻入底层， 刮去 表层蚓粪， 然后蚯蚓继续往下钻， 再刮表层蚓粪， 直至蚯蚓成团， 只余少量蚓粪 ； 0031 2. 将步骤 1 中得到的新鲜蚯蚓放入水中浸泡， 搅动， 清洗 3 5 次至干净之后， 滤 去水分 ； 0032 3. 将滤干水分的蚯蚓置于阳光下暴晒， 制成蚯蚓干 ； 0033 4. 将制得的蚯蚓。

17、干和红糖、 水、 山梨酸钾按照 1 1.1 10 0.036 的重量比例 在水浴恒温 60条件下进行水解 16 小时 ； 0034 5. 过滤杂质， 得到蚯蚓抗菌肽水解液。 0035 本实施例中， 制备蚯蚓干的方法包括但不限于在阳光下暴晒， 其他技术手段例如 烘干等方式， 也可制得本发明所需的蚯蚓干， 并达到本发明的目的。值得注意的是， 如果采 用烘干方式， 温度应当控制在 80内， 以避免蚯蚓纤溶酶失活。 0036 检验实施例 0037 为了验证本发明制得的蚯蚓抗菌肽水解液的效果， 特进行以下试验。本试验选取 了南美白对虾作为试验对象， 但需要进一步说明的是， 本发明的应用并不限于南美白对虾。

18、， 而对于其他各种水产动物均有良好效果， 这里以南美白对虾作为典型例子进行说明。 0038 本试验设置两口试验塘和一口对照塘， 试验前先对三口塘进行常规清塘、 消毒、 肥 水操作， 隔天投放虾苗。投放情况如下 ： 0039 说 明 书 CN 102406052 B 5 4/4 页 6 0040 试验塘与对照塘采用同一厂家同一种饲料， 前半个月少量投喂， 主要饵料来源于 水中的浮游动物。15 天后逐步加料。 0041 A 试验塘组用实施例 1 所制得蚯蚓抗菌肽水解液拌料投喂 ： 放苗至投喂粒料后早 晚投料按2.5(占饲料重量百分比)添加量拌料投喂， 中午不添加蚯蚓抗菌肽水解液直接 喂料， 直到捕。

19、获完成。 0042 B 试验塘组用实施例 2 所制得蚯蚓抗菌肽水解液拌料投喂 ： 放苗至投喂粒料后早 晚投料按2.5(占饲料重量百分比)添加量拌料投喂， 中午不添加蚯蚓抗菌肽水解液直接 喂料， 直到捕获完成。 0043 对照塘组不添加蚯蚓抗菌肽水解液直接投喂， 直至捕获完成。 0044 养殖两个月后， 南美白对虾捕获上市， A 试验塘产量 13450 市斤， 亩产 1345 市 斤， 虾成活率 68.42， 饲料系数为 1.35 ； B 试验塘产量 14120 市斤， 亩产 1412 市斤， 虾成 活率 70.36， 饲料系数为 1.23 ； 而对照塘组产量 10820 市斤， 亩产 1082。

20、 市斤， 虾成活率 58.60， 饲料系数为 1.49。 0045 试验结果表明， 添加本发明明显增强虾体的抗病能力， 提高其成活率， 如 A 试验组 中成活率比对照组提高了16.8， 而B试验组中成活率比对照组提高了20.1。 其次， 本发 明能够改善饲料的利用水平， 提高利用率， 降低饲料系数， 如 A 试验组的饲料系数比对照组 降低了 9.4， B 试验组的饲料系数比对照组降低了 17.4。再次， 本发明实施例 1 和实施 例 2 提供的蚯蚓抗菌肽水解液对虾体的生长有促进作用， 捕获时试验组的平均虾体重均高 于对照组的平均虾体重。此外， 在试验过程中发现， 用本发明实施例 1 和实施例 2 提供的蚯 蚓抗菌肽水解液拌料投喂虾吃料快， 具有强烈的诱食效果， 而虾体的颜色更接近自然体色， 活力明显增强。在口感方面， 试验组的对虾煮熟后味道鲜甜， 虾肉结实， 虾体表面溢出大量 的白色膏状物， 虾肉与虾壳间隙不大 ； 而对照塘的对虾煮熟后味道远不如试验组的对虾鲜 甜， 虾肉与虾壳间隙较大， 白色膏状物少。 说 明 书 CN 102406052 B 6 。