技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，尤其涉及一种植物组织培养中外植体消毒的方法。
背景技术
植物组织培养用的外植体大部分取自田间，表面上附着大量的微生物，这是组织培养的一大障碍。因此在材料接种培养前必须要消毒处理，消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。
现有的消毒方法，消毒效果不好，材料上的微生物不能最大限度的被杀死，并且，现有的消毒方法，外植体易受到损害，大大降低了植物组织培养的成活率。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有植物组织培养中外植体消毒方法中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明其中目的是提供一种植物组织培养中外植体消毒的方法，该消毒方法，其消毒容易、消毒效果好，毒性小，不易损伤材料。
为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：一种植物组织培养中外植体消毒的方法，采用自来水对外植体材料进行清洗，然后采用抗生素对清洗后的外植体材料进行浸泡，最后对浸泡后的材料进行消毒液处理。
作为本发明一个优选的实施例，所述消毒液为升汞和吐温的混合溶液。
作为本发明一个优选的实施例，其具体包括如下步骤：
步骤一：在自来水冲洗下利用毛刷将外植体材料表面附着的泥沙及杂质清除；
步骤二：用含有0.5～1％抗生素的自来水浸泡外植体材料15～30min，自来 水冲洗5～10min；
步骤三：用含有0.025％的升汞和0.05～0.15％吐温混合液浸泡外植体材料10～20min，无菌水清洗5～8次。
作为本发明一个优选的实施例，所述抗生素为青霉素或链霉素。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤二中，用含有0.8％抗生素的自来水浸泡外植体材料30min。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤二中，自来水冲洗的时间为10min。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤三中，用含有0.025％的升汞和0.05％吐温混合液浸泡外植体材料10min。
作为本发明一个优选的实施例，所述步骤三中，采用无菌水清洗的次数为8次。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法，其杀菌容易、杀菌效果好，毒性小，外植体材料不易损伤。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
本发明提供了一种植物组织培养中外植体消毒的方法，首先采用自来水对外植体材料进行清洗，然后采用抗生素对清洗后的外植体材料进行浸泡，最后对浸泡后的材料进行消毒液处理。
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
需要说明的是，本发明使用的抗生素为但不限于青霉素或链霉素。使用的消毒液为升汞和吐温的混合溶液。
实施例1
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：在自来水冲洗下利用毛刷将外植体材料表面附着的泥沙及杂质清除；
步骤二：将步骤一预处理后的外植体材料用含有0.5％抗生素的自来水浸泡30min，自来水冲洗10min；
步骤三：用含有0.025％的升汞和0.05％吐温混合液浸泡外植体材料10min，无菌水清洗8次，完成消毒。
实施例2
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：在自来水冲洗下利用毛刷将外植体材料表面附着的泥沙及杂质清除；
步骤二：将步骤一预处理后的外植体材料用含有0.8％抗生素的自来水浸泡30min，自来水冲洗10min；
步骤三：用含有0.025％的升汞和0.05％吐温混合液浸泡外植体材料10min，无菌水清洗8次，完成消毒。
实施例3
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：在自来水冲洗下利用毛刷将外植体材料表面附着的泥沙及杂质清除；
步骤二：将步骤一预处理后的外植体材料用含有1％抗生素的自来水浸泡15min，自来水冲洗5min；
步骤三：用含有0.025％的升汞和0.15％吐温混合液浸泡外植体材料20min，无菌水清洗5次，完成消毒。
实施例4
将外植体材料切成小段或小块或片状或丝状，然后按以下步骤进行消毒：
步骤一：在自来水冲洗下利用毛刷将外植体材料表面附着的泥沙及杂质清除；
步骤二：将步骤一预处理后的外植体材料用含有1％抗生素的自来水浸泡20min，自来水冲洗8min；
步骤三：用含有0.025％的升汞和0.05％吐温混合液浸泡外植体材料10min，无菌水清洗8次，完成消毒。
本发明在消毒过程中所使用的升汞含量为0.025％，其含量仅为传统消毒中升汞含量的20％左右，由于该含量较少，对环境危害较小，对外植体材料的损伤也较小，同时消毒效果大大提高。
灭菌效果
选用本发明实施例1～4的消毒方法和传统的灭菌方法对外植体进行组织培养实验，其无菌率对比表见表1：
表1 本发明的消毒方法和传统的杀菌方法对细菌和真菌的杀灭效果
序号 杀菌难易程度 无菌率(％) 实施例1 易 97 实施例2 最易 100 实施例3 最易 100 实施例4 易 99 传统杀菌方法 不易 20.1
需要说明的是，本发明对外植体的种类和部位不做限制。
由此可见，本发明的植物组织培养中外植体消毒的方法，其杀菌容易、杀菌效果好，毒性小，不易损伤外植体材料。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。