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1、10申请公布号CN104193734A43申请公布日20141210CN104193734A21申请号201410445690122申请日20140904C07D407/0420060171申请人南京标科生物科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边东108号1幢701室72发明人张金芳杨存54发明名称一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法57摘要本发明涉及一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法,具体涉及一种应用闪提技术与酶解超声波辅助提取相结合提取异牡荆苷的方法。其处理步骤包括将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入7080的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取510MIN;取出。
2、,调PH值至4055,酶解,超声波辅助提取;过滤,滤液加碱中和,大孔吸附树脂纯化,重结晶得到高纯度的异牡荆苷。本发明工艺简单,采用两种技术联用,可以优势互补,大大缩短了提取时间,成本低、更利于环保,适合工业化生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104193734ACN104193734A1/1页21一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法,其特征在于,包括以下步骤将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入510倍的7080的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取510MIN,取出,醋酸/醋酸钠调PH值至4。
3、055,加入12的纤维素酶,置于超声波装置中,于250400W、4060下酶解4060MIN,过滤,滤液加碱中和至PH70,大孔吸附树脂纯化,810BV的4050的乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩,甲醇重结晶2次,得到高纯度的异牡荆苷。2根据权利要求1所述的一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法,其特征在于,所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠。3根据权利要求1所述的一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法,其特征在于,所述的大孔吸附树脂型号为AB8、D140、ADS5等。权利要求书CN104193734A1/2页3一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法技术领域0001本发明涉及一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法,。
4、具体涉及一种应用闪提技术与酶解超声波辅助提取相结合提取异牡荆苷的方法,属于天然产物分离领域。背景技术0002小叶榕叶,又名小榕叶、落地金钱,来源于桑科榕属植物榕树的叶。小叶榕叶为民间常用中草药,其味淡、性凉,具有清热发表、解毒消肿、去湿止痛的功效。用于治疗哮喘和慢性支气管炎,在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果。其中主要含黄酮、三萜类和甾体化合物等化学成分,黄酮类成分以异牡荆苷为主。异牡荆苷,黄色状干粉,熔点228,不溶于水,溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂,属于碳苷黄酮,结构稳定,不易降解,并具有抗氧化、抗菌等活性。0003目前关于提取异牡荆苷的方法主要是传统的浸渍法、。
5、渗漉法、回流提取法等,这些提取法均存在诸多不足,如杂质多,提取时间长,提取率低,溶剂消耗和残留大,成本高等。专利CN1289470C“白花败酱草中几种高纯度药用物质的快速制备方法”,采用乙醇提取,有机溶剂萃取、高效逆流色谱分离纯化等步骤,该方法提取时间长、有机溶剂用量大,并受到仪器设备的制约,成本高,不适合大规模生产。发明内容0004本发明的目的在于提供一种快速、高效的提取高纯度异牡荆苷的方法,该方法具有操作简单、反应条件温和、无毒性、对环境友好的优点,易于实现工业化生产。0005本发明包括以下步骤A将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入510倍的7080的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎。
6、提取510MIN;B取出,醋酸/醋酸钠调PH值至4055,加入12的纤维素酶,置于超声波装置中,于250400W、4060下酶解4060MIN;C过滤,滤液加碱中和至PH70,大孔吸附树脂纯化,810BV的4050的乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩,得粗品;D乙醇重结晶2次,得到高纯度的异牡荆苷。0006步骤C中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠。0007步骤C中所述的大孔吸附树脂型号为AB8、D140、ADS5等。0008本发明的优点在于应用闪提技术对植物进行破碎,使物料高速粉碎至适当粒度,同时伴有高速搅拌、振动等外力,充分提高了提取效率;再结合纤维素酶酶解植物的细胞壁,使细胞破碎,在超声作用下,。
7、加速有效成分的溶出,从而提高了提取的速度和产率。本发明具有操作简单、周期短、产品得率高、纯度高的优点,可实现大规模的产业化生产。0009下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。说明书CN104193734A2/2页4具体实施方式0010实施例1将1000G新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入5倍的80的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取5MIN,取出,醋酸/醋酸钠调PH值至40,加入1的纤维素酶,置于超声波装置中,于250W、40下酶解40MIN,过滤,滤液加氢氧化钠中和至PH70,AB8大孔吸附树脂纯化,8BV的50的乙醇洗脱,洗脱液减。
8、压浓缩,甲醇重结晶2次,得到53G异牡荆苷,经HPLC检测,纯度为923。0011实施例2将1000G新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入8倍的75的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取8MIN,取出,醋酸/醋酸钠调PH值至50,加入15的纤维素酶,置于超声波装置中,于300W、50下酶解50MIN,过滤,滤液加氢氧化钠中和至PH70,ADS5大孔吸附树脂纯化,10BV的40的乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩,甲醇重结晶2次,得到62G异牡荆苷,经HPLC检测,纯度为956。0012实施例3将1000G新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中,加入10倍的70的乙醇,置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取10MIN,取出,醋酸/醋酸钠调PH值至55,加入2的纤维素酶,置于超声波装置中,于400W、60下酶解60MIN,过滤,滤液加氢氧化钠中和至PH70,AB8大孔吸附树脂纯化,9BV的45的乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩,甲醇重结晶2次,得到58G异牡荆苷,经HPLC检测,纯度为938。说明书CN104193734A。