技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，尤其涉及一种固体饮料及其制备方法，具体涉及槟榔牡丹籽咖啡及其制备方法。
背景技术
鲜槟榔(Areca catechu L)是棕榈科槟榔属植物槟榔的成熟果实。槟榔具有特别的食用效果：一是提神，表现为精神兴奋，面颊酡红，身上微微发汗，有喝过酒感觉，令人陶醉。二是消疲，表现为心情愉快，让人感觉体力充沛，反应灵敏和消除疲劳。三是驱寒，寒冷的天气可以御寒，体内充满温暖。目前全世界约有7亿人食用槟榔。槟榔在我国同样深受广大消费者的喜爱，被誉为“中国的绿箭口香糖”。
槟榔还有着丰富的药用价值，是我国著名的四大南药之一。槟榔含有多种人体所需的营养元素和有益物质，同时也含有多种药理活性成分。槟榔具有抗老化作用，降低胆固醇作用，提神抗疲劳作用。牡丹籽是牡丹植株的精华结晶，传承了牡丹本身具有的一切特性外，它更有自己独特的医药和营养成分，其富含人体需要的氨基酸、维生素、多糖和多种不饱和脂肪酸。牡丹种子是受果壳和种壳双层保护的坚果，具有天然的“长寿”基因，具有促进血液循环、抗氧化、延缓皮肤衰老等功效。
咖啡含有咖啡因、脂肪、纤维素、钙、铁、蛋白质等多种营养成分，具有美容皮肤、防止心血管疾病、消除疲劳、改善肝脏功能、熄风止痉等功效。咖啡具有口感香醇、苦中带甘的口感，深受人们的喜爱，是人类社会流行范围最为广泛的饮料之一，与香烟、酒精饮料和槟榔一起被称为当今世界上的四大嗜好品。
专利申请号为201410141623.0，公开了“一种牡丹籽咖啡及其制备方法”，是由牡丹粉和咖啡豆混合磨粉后制成，说明书中记载咖啡含量30～60％，因此牡丹粉用量较大，涩味十分明显，需要外加大量甜味剂或大量水稀释，进而影响了咖啡风味，不能被大众接受。
目前，尚未见槟榔成分及口味的牡丹籽咖啡食品的有关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种槟榔牡丹籽咖啡，该槟榔牡丹籽咖啡体现了咖啡、槟榔和牡丹籽的协同功效，具有显著的提神、消疲效果，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种槟榔牡丹籽咖啡，由以下重量百分数的原料经混合均匀、粉碎、过筛、真空干燥制备而成：槟榔提取物0.1～5％、牡丹籽粉0.5～5％、咖啡粉70～99％、甜味剂0～20％。
进一步地，所述槟榔提取物的制备方法如下：
a、将槟榔鲜果分拣，清洗干净，破碎，压榨，获得澄清果汁和槟榔残渣；
b、将食用乙醇加入澄清果汁中，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、果汁溶液采用低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，获得果汁提取液；
d、槟榔残渣中加入其重量3～10倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.01％～0.8％，柠檬酸调节pH值3～6，超声提取1～6h，离心6000～12000rpm，获得残渣提取液；
e、果汁提取液与残渣提取液合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，粉碎，检验，得槟榔提取物。
进一步地，所述牡丹籽粉是从牡丹籽粉碎得到。
进一步地，所述咖啡粉为现磨咖啡粉。
进一步地，所述甜味剂包括有糖甜味剂或无糖甜味剂；其中，有糖甜味剂为葡萄糖、红糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、糖浆、低聚糖、白砂糖中的至少一种；无糖甜味剂为安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、甜叶菊糖、三氯蔗糖、木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、乳糖醇中的至少一种。
本发明的另一目的在于提供槟榔牡丹籽咖啡的制备方法，包括以下步骤：
(1)槟榔提取物制备：
a、压榨提取：将槟榔鲜果分拣，清洗干净，破碎，用物理方法进行压榨获得果汁，果汁经过处理获得澄清果汁；合并槟榔残渣，待用；
b、去除鞣质：将食用乙醇加入澄清果汁中，使混合后乙醇终浓度为45～85％，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、去除部分生物碱：果汁溶液采用低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，并用1～10倍体积水淋洗固体柱，收集所有液体，获得果汁提取液；所述固相柱内装有作为固定相的槟榔碱分子烙印聚合物；
d、残渣提取：槟榔残渣中加入其重量3～10倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.01％～0.8％，柠檬酸调节pH值3～6，超声提取1～6h，离心6000～12000rpm，获得残渣提取液；
e、脱水：果汁提取液与残渣提取液进行合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，过30～120目粉碎，检验，得槟榔提取物；
(2)牡丹籽粉的制备：精选的牡丹籽在100～120℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的牡丹籽粉碎(先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎)，过50～100目筛，获得牡丹籽粉；
(3)咖啡粉的制备：精选的咖啡豆在100～150℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的咖啡豆粉碎(先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎)，过50～100目筛，获得咖啡粉；
(4)原料混合：按配比将槟榔提取物，牡丹籽粉，咖啡粉，甜味剂充分混合均匀；
(5)包装：将步骤(4)混合均匀的原料用超微粉碎机粉碎，过50～100目筛，经真空干燥后包装，获得槟榔牡丹籽咖啡。
本发明槟榔牡丹籽咖啡及其制备方法具备以下的有益效果：
1、本发明采用槟榔鲜果压榨技术，最大可能保留咀嚼槟榔时所摄取的全部营养成分；采用醇沉方式去除压榨果汁中的鞣质，减少其带给后续食品中的涩味，从而提高口感；同时利用酶生物裂解方式对压榨残渣进行进一步提取，全方位提取槟榔粗纤维细胞中的有效营养成分。
2、本发明采用分子烙印技术，旨在去除槟榔中部分不安全因子，在保留槟榔功效部位和特色风味的同时，减弱其产生的细胞毒性。
3、本发明将槟榔鲜果迅速转变成槟榔提取物干粉，解决鲜果难于保存的问题；槟榔提取物干粉制备全过程均在低温进行，对功效成分进行最大程度保护。
4、本发明通过槟榔提取物、牡丹籽粉与咖啡粉的合理配比，在咖啡中加入适量能够提升咖啡香味的槟榔提取物，再通过牡丹籽粉的调和，使得槟榔牡丹籽咖啡口感浓郁醇美，香气袭人。本发明槟榔牡丹籽咖啡体现了咖啡、槟榔和牡丹籽的协同功效，具有显著的提神、消疲效果，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
具体实施方式
实施例1
本发明槟榔牡丹籽咖啡具有提神、抗疲劳、提高免疫力功效，同时具有槟榔的典型风味，使得咖啡味更浓香，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
以下介绍其制备方法：
(1)槟榔提取物制备：
a、取槟榔鲜果100kg，分拣，清洗干净，破碎，压榨，压榨液离心6000rpm，获得澄清果汁，合并槟榔残渣，待用；
b、将食用乙醇加入澄清果汁中，使混合后乙醇终浓度为65％，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、果汁溶液低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，并用8倍体积水淋洗固体柱，收集所有液体，获得果汁提取液；所述固相柱内装有作为固定相的槟榔碱分子烙印聚合物；
d、残渣提取：槟榔残渣中加入其重量5倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.25％，柠檬酸调节pH值4.8，超声提取3h，离心6000rpm，获得残渣提取液；
e、脱水：果汁提取液与残渣提取液进行合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，过60目粉碎，检验，得槟榔提取物；
(2)牡丹籽粉的制备：精选的牡丹籽在120℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的牡丹籽先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过100目筛，获得牡丹籽粉；
(3)咖啡粉的制备：精选的咖啡豆在120℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的咖啡豆先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过100目筛，获得咖啡粉。
(4)原料混合：将槟榔提取物0.2kg，牡丹籽粉0.5kg，咖啡粉95kg，蔗糖4.3kg充分混合均匀。
(5)包装：将步骤(4)混合均匀的原料用超微粉碎机粉碎，过100目筛，经真空干燥后包装，获得槟榔牡丹籽咖啡。
实施例2
本发明槟榔牡丹籽咖啡具有提神、抗疲劳、提高免疫力功效，同时具有槟榔的典型风味，使得咖啡味更浓香，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
以下介绍其制备方法：
(1)槟榔提取物制备：
a、取槟榔鲜果100kg，分拣，清洗干净，破碎，压榨，压榨液离心8000rpm，获得澄清果汁，合并槟榔残渣，待用；
b、将食用乙醇加入澄清果汁中，使混合后乙醇终浓度为75％，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、果汁溶液低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，并用10倍体积水淋洗固体柱，收集所有液体，获得果汁提取液；所述固相柱内装有作为固定相的槟榔碱分子烙印聚合物；
d、残渣提取：槟榔残渣中加入其重量7倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.5％，柠檬酸调节pH值4.5，超声提取6h，离心12000rpm，获得残渣提取液；
e、脱水：果汁提取液与残渣提取液进行合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，过100目粉碎，检验，得槟榔提取物；
(2)牡丹籽粉的制备：精选的牡丹籽在110℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的牡丹籽先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过80目筛，获得牡丹籽粉；
(3)咖啡粉的制备：精选的咖啡豆在130℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的咖啡豆先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过100目筛，获得咖啡粉；
(4)原料混合：将槟榔提取物0.3kg，牡丹籽粉0.4kg，咖啡粉91.3kg，木糖醇8kg，充分混合均匀；
(5)包装：将步骤(4)混合均匀的原料用超微粉碎机粉碎，过90目筛，经真空干燥后包装，获得槟榔牡丹籽咖啡。
实施例3
本发明槟榔牡丹籽咖啡具有提神、抗疲劳、提高免疫力功效，同时具有槟榔的典型风味，使得咖啡味更浓香，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
以下介绍其制备方法：
(1)槟榔提取物制备：
a、取槟榔鲜果100kg，分拣，清洗干净，破碎，压榨，压榨液离心9000rpm，获得澄清果汁，合并槟榔残渣，待用；
b、将食用乙醇加入澄清果汁中，使混合后乙醇终浓度为50％，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、果汁溶液低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，并用5倍体积水淋洗固体柱，收集所有液体，获得果汁提取液；所述固相柱内装有作为固定相的槟榔碱分子烙印聚合物；
d、残渣提取：槟榔残渣中加入其重量8倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.4％，柠檬酸调节pH值4.8，超声提取3h，离心6000rpm，获得残渣提取液；
e、脱水：果汁提取液与残渣提取液进行合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，过60目粉碎，检验，得槟榔提取物；
(2)牡丹籽粉的制备：精选的牡丹籽在100℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的牡丹籽先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过80目筛，获得牡丹籽粉；
(3)咖啡粉的制备：精选的咖啡豆在130℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的咖啡豆先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过100目筛，获得咖啡粉；
(4)原料混合：将槟榔提取物1kg，牡丹籽粉2kg，咖啡粉90kg，蔗糖7kg充分混合均匀充分混合均匀；
(5)包装：将步骤(4)混合均匀的原料用超微粉碎机粉碎，过100目筛，经真空干燥后包装，获得槟榔牡丹籽咖啡。
实施例4
本发明槟榔牡丹籽咖啡具有提神、抗疲劳、提高免疫力功效，同时具有槟榔的典型风味，使得咖啡味更浓香，是一款集体闲、养生于一体的保健咖啡。
以下介绍其制备方法：
(1)槟榔提取物制备：
a、取槟榔鲜果100kg，分拣，清洗干净，破碎，压榨，压榨液离心12000rpm，获得澄清果汁，合并槟榔残渣，待用；
b、将食用乙醇加入澄清果汁中，使混合后乙醇终浓度为70％，静置过夜，取上清液，获得果汁溶液；
c、果汁溶液低温减压浓缩除去乙醇，浓缩后的果汁溶液通过固相柱，并用8倍固相柱体积水淋洗固体柱，收集所有液体，获得果汁提取液；所述固相柱内装有作为固定相的槟榔碱分子烙印聚合物；
d、残渣提取：槟榔残渣中加入其重量6倍水和纤维素酶进行生物裂解，混合后纤维素酶终浓度为0.5％，柠檬酸调节pH值4.5，超声提取4h，离心12000rpm，获得残渣提取液；
e、脱水：果汁提取液与残渣提取液进行合并，采用低温减压浓缩进行脱水，得固体物，过100目粉碎，检验，得槟榔提取物；
(2)牡丹籽粉的制备：精选的牡丹籽在110℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的牡丹籽先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过80目筛，获得牡丹籽粉；
(3)咖啡粉的制备：精选的咖啡豆在130℃的条件下焙烤至水分质量含量<5.0％，然后将焙炒好的咖啡豆先用万用粉碎机进行初粉，再用超微粉碎机粉碎，过100目筛，获得咖啡粉；
(4)原料混合：将槟榔提取物1kg，牡丹籽粉2kg，咖啡粉97kg充分混合均匀；
(5)包装：将步骤(4)混合均匀的原料用超微粉碎机粉碎，过80目筛，经真空干燥后包装，获得槟榔牡丹籽咖啡。
试验过程：
(1)采用分光光度法测定本发明槟榔提取物中总多酚：
主要试剂及仪器：没食子酸(生化试剂，中国食品药品检定研究院)；甲醇；7.5％碳酸钠溶液；福林酚试液；DUV–2450型紫外—可见分光光度计(日本岛津)。
1)线性试验以不加没食子酸为空白，采用分光光度法在765nm波长处测定吸光度，以没食子酸浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，计算线性回归方程。
2)结果计算
根据没食子酸的线性回归方程，计算出被测定供试品溶液中的多酚浓度C1。槟榔提取物中多酚以质量分数W1计，数值以％表示：
w1——供试品中多酚组分的质量分数；
C1——供试品溶液中多酚组分浓度，单位为mg/mL；
V1——供试品溶液的稀释体积，单位为毫升(mL)；
m1-——供试品的称样量，单位为毫克(mg)；
D——稀释倍数。
统计结果如表1所示：
表1本发明槟榔提取物中总多酚含量与常规提取数据比较
(2)采用分光光度法测定本发明槟榔提取物中总多糖
主要试剂及仪器：葡萄糖(生化试剂，中国食品药品检定研究院)；5％苯酚溶液；浓硫酸溶液；DUV–2450型紫外—可见分光光度计(日本岛津)。
1)线性试验以不加葡萄糖为空白，采用分光光度法在490nm波长处测定吸光度，以葡萄糖浓度(mg/ml)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，计算线性回归方程。
2)结果计算
根据葡萄糖的线性回归方程，计算出被测定供试品溶液中的多糖浓度C2。槟榔提取物中多糖以质量分数W2计，数值以％表示：
w2——供试品中多糖组分的质量分数；
C2——供试品溶液中多糖组分浓度，单位为mg/mL；
V2——供试品溶液的稀释体积，单位为毫升(mL)；
m2——供试品的称样量，单位为毫克(mg)；
D——稀释倍数；
统计结果如表2所示：
表2本发明槟榔提取物中总多糖含量与常规提取数据比较
表1和表2数据表明，与常规槟榔提取物相比，本发明制备所得槟榔提取物中有效成分(多酚和多糖)含量更高。
(3)体外毒性实验(人口腔黏膜角质形成细胞模型)
主要仪器和试剂：人口腔黏膜角质形成细胞(KC)无血清培养基(K-SFM)，KC完全培养基，DMEM培养基，鼠抗人角蛋白抗体及鼠抗人波形丝蛋白单克隆抗体，SABC免疫组化试剂盒，荧光显微镜。
实验方法：将体外培养的KC随机分为3组：阴性对照组：K-SFM+KC；常规槟榔提取物处理组(AW)：AW+KC；本发明槟榔提取物处理组：实施例(1、2、3、4)+KC。
检测指标：荧光显微镜观察细胞数。凋亡百分率＝凋亡细胞/总细胞数×100％。
统计结果如表3所示：
表3本发明四个实施例与常规提取KC凋亡率数据比较
表3数据得出，常规槟榔提取物(将槟榔鲜果切开，乙醇提取)具有明显诱导KC凋亡的作用，实施例1、2、3、4槟榔提取物(采用分子烙印技术去除部分槟榔碱)能够显著减少KC凋亡率，与阴性对照组(无槟榔干预)无显著差异。因此证明了本发明采用分子烙印技术去除槟榔鲜果中部分槟榔碱，可以减弱其产生的细胞毒性，使其降低损害人口腔黏膜结构风险，保证槟榔产品的食用安全。
(4)采用高效液相色谱(HPLC)法测定本发明槟榔提取物中的槟榔碱含量。
日本高效液相色谱系统(日本HITACHI系列)；以强阳离子交换键合硅胶为填充剂(SCX-强阳离子交换树脂柱)；以乙腈-磷酸溶液(2→1000，浓氨试液调节pH值至3.8)(55：45)为流动相；检测波长为215nm。
统计结果如下：
实施例1：槟榔碱含量0.16％；实施例2：槟榔碱含量0.14％；实施例3：槟榔碱含量0.15％；实施例4：槟榔碱含量0.13％。
结合体外毒性实验结果，采用本发明槟榔提取物制备槟榔牡丹籽咖啡，在保持槟榔独特风味的同时，能够明显减弱其产生的细胞毒性，在咖啡中加入适量能够提升咖啡香味的槟榔提取物，再通过牡丹籽粉的调和，使得槟榔牡丹籽咖啡口感浓郁醇美，香气袭人。
以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。