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1、(10)申请公布号 CN 103749292 A (43)申请公布日 2014.04.30 CN 103749292 A (21)申请号 201410031668.2 (22)申请日 2014.01.23 A01H 1/08(2006.01) (71)申请人 程钰翔 地址 135200 吉林省白山市靖宇县财政公寓 5 单元 302 室 (72)发明人 程钰翔 (54) 发明名称 刺五加四倍体的培育方法 (57) 摘要 本发明涉及一种刺五加四倍体的培育方法， 以0.01%秋水仙素和0.3%二甲基亚砜的水溶液为 诱导剂， 对刺五加种子进行诱导， 获得了刺五加四 倍体植株， 该诱导方法刺五加的成活率。
2、为 91.3%， 诱导率为 84.6%。四倍体刺五加的根、 茎、 叶、 株高 等都明显大或高于原二倍体刺五加， 大幅度提高 了药材产量， 四倍体刺五加中刺五加甙含量比同 源二倍体增加超过 20%。本发明是对刺五加进行 了遗传改良， 建立了四倍体刺五加的培育方法， 用 秋水仙素和二甲基亚砜对种子进行诱变处理， 不 仅方法简单易行， 而且诱变率较高， 满足了多倍体 选种之用， 使多倍体育种成为刺五加遗传改良、 新 品种培育的重要方法。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布。
3、号 CN 103749292 A CN 103749292 A 1/1 页 2 1. 刺五加四倍体的培育方法， 其特征是 ： 该方法包括如下步骤 ： （1） 预处理阶段 ： 选取发育完好、 健康饱满的普通二倍体刺五加种子， 用自来水冲洗 3060min， 在无菌操作台上用 70% 酒精消毒 24min， 用无菌水冲洗 34 次， 再用浓度为 0.05%0.1% 的升汞消毒 715min， 最后用无菌水冲洗 46 次 ； （2） 萌发阶段 ： 将步骤 （1） 预处理后的刺五加种子在温度为 2326条件下均布于发芽 床， 彼此之间保持一定的距离， 以适量净水为萌发剂， 净水的量以半浸种子为宜， 直。
4、至种芽 破壳 ； （3） 诱导阶段 ： 将步骤 （2） 中破壳的刺五加种子取出， 移入诱导床上， 在温度为 2529 条件下， 加入诱导液， 诱导液组分为0.01%秋水仙素和0.3%二甲基亚砜的水溶液， 其用量以 半浸种子为宜， 诱导至芽长为 22.5mm 时结束 ； （4）后处理阶段 ： 将步骤 （3）中诱导后的刺五加种子从诱导液中取出， 用净水冲洗 3-5min。 权 利 要 求 书 CN 103749292 A 2 1/2 页 3 刺五加四倍体的培育方法 技术领域 0001 本发明涉及一种药用植物的培育方法， 特别是刺五加四倍体的培育方法。 背景技术 0002 刺五加为五加科五加属灌木，。
5、 根、 茎、 叶、 皮、 果实均可人药。刺五加具有调节机体 紊乱， 补中、 益精、 强意志、 祛风湿、 壮筋骨、 活血去瘀、 健胃利尿等功能。刺五加中的重要成 分刺五加甙为良好的强壮剂， 可增加肌体的防御功能， 有抗疲劳和防止记忆衰退等功效。 以 刺五加为原料的药品和食品深受国内外的欢迎， 但近二十年来掠夺式的采挖， 使野生刺五 加资源遭到严重破坏， 天然资源趋于枯竭。 现有的刺五加二倍体种， 生长缓慢， 产量很低。 植 物四倍体的显著特征是， 植物的根、 茎、 叶等营养器官变大， 次生代谢产物含量提高。因此， 培育四倍体刺五加， 可以较大幅度的提高刺五加药材产量。 发明内容 0003 本发明。
6、要解决的技术问题是 ： 针对现有刺五加产量和刺五加甙含量较低的缺陷， 提出一种刺五加四倍体的培育方法， 提高刺五加产量和刺五加甙含量。 0004 本发明所采用的技术方案是 ： 刺五加四倍体的培育方法， 其特征是 ： 该方法包括 如下步骤 ： （1） 预处理阶段 ： 选取发育完好、 健康饱满的普通二倍体刺五加种子， 用自来水冲洗 3060min， 在无菌操作台上用 70% 酒精消毒 24min， 用无菌水冲洗 34 次， 再用浓度为 0.05%0.1% 的升汞消毒 715min， 最后用无菌水冲洗 46 次 ； （2） 萌发阶段 ： 将步骤 （1） 预处理后的刺五加种子在温度为 2326条件下均。
7、布于发芽 床， 彼此之间保持一定的距离， 以适量净水为萌发剂， 净水的量以半浸种子为宜， 直至种芽 破壳 ； （3） 诱导阶段 ： 将步骤 （2） 中破壳的刺五加种子取出， 移入诱导床上， 在温度为 2529 条件下， 加入诱导液， 诱导液组分为0.01%秋水仙素和0.3%二甲基亚砜的水溶液， 其用量以 半浸种子为宜， 诱导至芽长为 22.5mm 时结束 ； （4）后处理阶段 ： 将步骤 （3）中诱导后的刺五加种子从诱导液中取出， 用净水冲洗 3-5min， 即完成刺五加四倍体的诱导。 0005 本发明的有益效果 ： 获得了刺五加四倍体植株， 该诱导方法刺五加的成活率为 91.3%， 诱导率为。
8、 84.6%。四倍体刺五加的根、 茎、 叶、 株高等都明显大或高于原二倍体刺五 加， 大幅度提高了药材产量， 四倍体刺五加中刺五加甙含量比同源二倍体增加超过 20%。本 发明是对刺五加进行了遗传改良， 建立了四倍体刺五加的培育方法， 用秋水仙素和二甲基 亚砜对种子进行诱变处理， 不仅方法简单易行， 而且诱变率较高， 满足了多倍体选种之用， 使多倍体育种成为刺五加遗传改良、 新品种培育的重要方法。 具体实施方式 说 明 书 CN 103749292 A 3 2/2 页 4 0006 下面结合具体实例对本发明作进一步说明。 0007 刺五加四倍体的培育方法， 包括以下步骤 ： （1） 预处理阶段 。
9、： 选取发育完好、 健康饱满的普通二倍体刺五加种子， 用自来水冲洗 60min， 在无菌操作台上用 70% 酒精消毒 4min， 用无菌水冲洗 4 次， 再用浓度为 0.1% 的升汞 消毒 15min， 最后用无菌水冲洗 6 次 ； （2） 萌发阶段 ： 将步骤 （1） 预处理后的刺五加种子在温度为 25条件下均布于发芽床， 彼此之间保持一定的距离， 以适量净水为萌发剂， 净水的量以半浸种子为宜， 直至种芽破 壳 ； （3） 诱导阶段 ： 将步骤 （2） 中破壳的刺五加种子取出， 移入诱导床上， 在温度为 25条 件下， 加入诱导液， 诱导液组分为0.01%秋水仙素和0.3%二甲基亚砜的水溶液， 其用量以半 浸种子为宜， 诱导至芽长为 2mm 时结束 ； （4）后处理阶段 ： 将步骤 （3）中诱导后的刺五加种子从诱导液中取出， 用净水冲洗 5min， 即完成刺五加四倍体的诱导。 说 明 书 CN 103749292 A 4 。