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1、(10)申请公布号 CN 103749429 A (43)申请公布日 2014.04.30 CN 103749429 A (21)申请号 201310586430.1 (22)申请日 2013.11.21 A01N 1/02(2006.01) (71)申请人 青岛德瑞骏发生物科技有限公司 地址 266200 山东省青岛市即墨市文化路 号 申请人 伊犁德瑞骏发生物科技有限公司 青岛德瑞鳌蓝马术有限公司 (72)发明人 邹敬清 荣美洁 孙腾飞 (54) 发明名称 一种马属动物精液获能液 (57) 摘要 本发明公开了一种马属动物精液获能液， 其 中， 获能液包括A液和脱脂奶， A液包括葡萄糖、 棉 。
2、子糖、 D- 乳糖单水合物、 柠檬酸三钠、 柠檬酸钾和 HEPES。获能液的配制方法为 ： 称取 A 液的各种组 分放入无菌烧杯中， 加双蒸水溶解后， 定容、 过滤、 分装、 灭菌、 密封， 即得 A 液， 向 A 液加入等量的脱 脂奶混合均匀即可得到获能液， 其适用于马属动 物精液体外获能。本发明的有益效果是 ： 配制简 单， 使用方便， 马属动物精液的获能效果好， 适于 规模化生产和应用。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布号 CN 103749429 A CN。
3、 103749429 A 1/1 页 2 1. 一种马属动物精液获能液， 其特征在于， 所述获能液包括 A 液和脱脂奶， 所述 A 液包 括葡萄糖、 棉子糖、 D- 乳糖单水合物、 柠檬酸三钠、 柠檬酸钾和 HEPES。 2.根据权利要求1所述的马属动物精液获能液， 其特征在于， 所述A液和所述脱脂奶的 混合体积比例为 1:1。 3. 根据权利要求 1 所述的马属动物精液获能液， 其特征在于， 每 500ml 的所述 A 液中， 各组分的含量为 ： 葡萄糖2226g、 棉子糖1.51.7g、 D-乳糖单水合物1.51.7g、 柠檬酸三钠 Na3C6H5O72H2O 0.20.25g、 柠檬酸钾。
4、 0.350.45g、 HEPES 4.64.8g。 4. 根据权利要求 1-3 任意一项所述的马属动物精液获能液， 其特征在于， 所述葡萄糖 为无水葡萄糖， 其分子式为 C6H12O6； 所述棉子糖的分子式为 C18H32O6 5H2O ； 所述 D- 乳糖单水 合物的分子式为 C12H22O11H2O ； 所述柠檬酸钾的分子式为 K3C6H5O7H2O ； 所述 HEPES 的分子 式为 C8H18N2O4S。 权 利 要 求 书 CN 103749429 A 2 1/2 页 3 一种马属动物精液获能液 技术领域 0001 本发明涉及动物精液保存的技术领域， 特别涉及一种马属动物精液获能液。
5、。 背景技术 0002 精液稀释是向精液中加入适宜精子体外存活并保持精子活力的稀释保护液， 其目 的在于扩大精液的容量， 延长精子的存活时间， 保证精子的活率和精子顶体完整率， 增强受 精能力， 充分提高精液的利用率和优良公畜配种的效率。 精液稀释应在采集后尽快进行， 不 经稀释的精液不利于精子存活， 特别是精液处于温度较低时 （20以下） ， 精子受低温打击， 易出现冷休克。 只有经过稀释的精子才适于保存、 运输及输精等， 所以精液稀释处理是动物 人工授精中的一个重要技术环节。 0003 目前， 我国马属动物的繁育主要以自然交配和人工辅助两种方式进行， 但是在自 然交配或人工辅助交配的情况下。
6、， 一般一匹种公马只能配 20-30 匹母马， 优秀种公马的利 用率严重受限。因此， 精液稀释、 保存和人工授精技术的发展和应用就显得非常重要。 0004 近年来， 家畜精液稀释液的研究不断取得可喜的成果， 尤其是在牛、 羊等反刍动物 方面。 马属动物精液稀释液的研究也日渐成效， 但是仍然存在诸多弊端， 主要表现在精液稀 释液对精子活力的保存时间短， 比如常温保存时间不足 24 小时 （活率低于 0.3） ， 低温保存 时间不足 96 小时 （活率低于 0.3） ； 受胎率低 ； 精液稀释液需新鲜， 必须现用现配， 所以操作 繁琐复杂。因此开发出保存时间长， 保存效果好， 成本低， 受胎效果好。
7、的精液稀释液对人工 授精而言有重要的经济效益。 发明内容 0005 为了解决传统的精液稀释液对精子活力的保存时间短、 受胎率低及现用现配等问 题， 本发明提供了一种马属动物精液获能液。 0006 为了实现上述发明目的， 本发明提供了一种马属动物精液获能液， 所述获能液包 括 A 液和脱脂奶， 所述 A 液包括葡萄糖、 棉子糖、 D- 乳糖单水合物、 柠檬酸三钠、 柠檬酸钾和 HEPES。 0007 其中， 所述 A 液和所述脱脂奶的混合体积比例优选为 1:1。 0008 每 500ml 的所述 A 液中， 各组分的含量为 ： 葡萄糖 2226g、 棉子糖 1.51.7g、 D- 乳 糖单水合物。
8、1.51.7g、 柠檬酸三钠Na3C6H5O7 2H2O 0.20.25g、 柠檬酸钾0.350.45g、 HEPES 4.64.8g。 0009 所述葡萄糖为无水葡萄糖， 其分子式为 C6H12O6； 所述棉子糖的分子式为 C18H32O65H2O ； 所述 D- 乳糖单水合物的分子式为 C12H22O11H2O ； 所述柠檬酸钾的分子式为 K3C6H5O7H2O ； 所述 HEPES 的分子式为 C8H18N2O4S。 0010 本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是 ： 使用本发明马属动物精液获 能液进行精液的体外保存， 效果明显优于传统的稀释液， 马属动物精液的保存效果好， 延长 。
9、了稀释精液中精子的存活时间， 保证精子的活率和精子顶体完整率， 增强受精能力， 充分提 说 明 书 CN 103749429 A 3 2/2 页 4 高了精液的利用率和优良公畜配种的效率 ； 本发明的获能液配制简单， 使用方便， 可置于 0-5保存， 随用随取， 省时省力， 适于规模化生产和应用。 具体实施方式 0011 下面结合实施例对本发明做进一步描述。 0012 实施例 1 称取葡萄糖 24g、 棉子糖 1.6g、 D- 乳糖单水合物 1.6g、 柠檬酸三钠 Na3C6H5O72H2O 0.24g、 柠檬酸钾 0.4g 和 HEPES 4.7g， 放入无菌烧杯中， 加双蒸水溶解后， 定容。
10、、 过滤、 分装、 灭菌、 密封， 即得 A 液 ； 将经过严格灭菌、 密封的 A 液标记配制时间， 置于 05保存， 随用随 取 ； 取适量的 A 液加入等量体积的脱脂奶混合均匀后， 得到本实施例 1 的获能液。 0013 向获能液中分别按 1000 单位 /ml 的量添加青霉素和 1000ug/ml 的量添加双氢链 霉素混合均匀后即可。 0014 对比试验 1 将传统的稀释液葡萄糖 - 卵黄稀释液 （对照组 1） 和牛奶稀释液 （对照组 2） ， 与实施例 1 的稀释液 （实施例组 1） 分别稀释马的精液。其中， 将实施例 1 的稀释液置于 37恒温水浴 锅中 1 小时后， 按体积比 1:。
11、5 对马的新鲜精液 （活率 0.8） 进行稀释， 然后将稀释后的精液 置于常温 （1525） 下保存。在 048 小时内观察对照组 1、 对照组 2 和实施例组 1 的精子 活力， 每隔 12 个小时测定精子的活率， 结果如表 1 所示。 0015 表 1 ： 不同稀释液常温保存 （1525） 精液对马精子活率的影响 组别0h 活率12h 活率24h 活率36h 活率48h 活率 对照组 10.850.020.550.030.250.0400 对照组 20.850.030.400.040.100.0200 实施例组 1 0.850.020.750.020.650.030.500.030.40.04 由表 1 的数据可知， 在常温保存的条件下， 与传统精液稀释液相比， 利用本发明的马属 动物精液获能液保存的精子活率明显较高， 保存时间显著延长， 保存 48h 时精子的活率仍 维持在 0.4 左右。 0016 综上， 使用本发明马属动物精液获能液进行精液的稀释保存， 效果明显优于传统 的稀释液。 0017 以上所述仅为本发明的较佳实施例， 并不用以限制本发明， 凡在本发明的精神和 原则之内， 所作的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 明 书 CN 103749429 A 4 。