技术领域
本发明涉及一种凝冻食品及生产工艺，具体涉及一种富含石斛水提物的凝冻食品及生产 工艺，属于保健食品生产技术领域。
背景技术
快节奏的生活方式，使我国处于亚健康的人群日益增加。据权威机构统计，我国有70％ 的成年人处于亚健康状态，15％处于疾病状态，健康人群只有15％。亚健康是人体介于健康 与疾病之间的边缘状态，机体自身并无器质性病变，但该类人群患各种疾病的风险大大增加。 亚健康的常见症状有：浑身无力、头晕眼涩、心悸气短、免疫力低下，容易患感冒和流行病。 西医对某些亚健康人群无法诊断出具体病因，因此无法进行有效治疗。如阴虚体质和免疫力 低下体质，西医并无明确的定义，而中医疗法耗时长，中药药剂服用较为繁琐，口感接受度 差。
石斛是我国传统阴补中药材，被誉为“千金草”、“药中黄金”，名列“中华九大仙草”之首。 现代研究表明，石斛所含的石斛多糖、石斛碱、石斛酚、氨基酸等功效成分，具有滋阴清热、 益胃生津、润肺益肾、明目强腰之功效。目前国内从事石斛研究和开发的企业众多，但产品 主要以初加工的枫斗为主，技术含量较低。石斛枫斗经反复煎煮，活性成分仍不能充分溶出， 石斛的营养保健功效得不到充分利用，造成了资源的浪费。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种富含石斛水提物的凝冻食品，以石斛功 效为核心，按照现代中医药配伍原则，优选药食同源性药材与之相配伍，开发出具有特殊保 健功效的石斛类保健食品，该食品可以滋阴补益、增强免疫力，通过长期服用，有益于改善 阴虚体质，提高免疫功能。
为了实现上述发明目的，本发明是通过如下技术方案实现的：
一种富含石斛水提物的凝冻食品，包括下列重量份的原料：
石斛15-30份、麦冬5-10份、菊花5-10份、阿胶3-8份、西洋参1-5份、枸杞子1-5份、 五味子1-5、天麻1-5、生地黄1-3、白芍1-3、绞股蓝1-3、蒲黄1-3份；
原料重量份优选为：石斛20份、麦冬9份、菊花6份、阿胶5份、西洋参3份、枸杞子 3份、五味子3、天麻3、生地黄2、白芍2、绞股蓝2、蒲黄1份；
石斛15-30份、麦冬5-10份、菊花5-10份、阿胶3-8份、西洋参1-5份、枸杞子1-5份、 五味子1-5、天麻1-5、生地黄1-3、白芍1-3、绞股蓝1-3、蒲黄1-3份、木糖醇1-5份、柠檬 酸1-5份；
重量份优选为石斛20份、麦冬9份、菊花6份、阿胶5份、西洋参3份、枸杞子3份、 五味子3、天麻3、生地黄2、白芍2、绞股蓝2、蒲黄1份、木糖醇3份、柠檬酸1份；
本发明另一目的在于提供该凝冻食品的生产工艺，该生产工艺如下：
(1)称取上述重量份的石斛、麦冬、菊花、西洋参、枸杞子、五味子、天麻、生地黄、 白芍、绞股蓝、蒲黄，粗粉碎成40目的细粉，加入普通蒸馏水，加水量为原料重量的8-10 倍，采用湿法超微粉碎技术打浆，使原料粒度达到200～300目，调节浆料pH2.5-4.5，于60-80℃ 条件下萃取1-2小时，滤过；然后加pH5.0-7.5的水，加水量为原料重量的8-10倍，85-100℃ 加热提取1-2小时，滤过；再调节pH8.0-9.0，于60-80℃条件下萃取0.5-1h小时，合并滤液， 调节pH为6.0-7.5，减压浓缩至相对密度1.15～1.25的浓缩液备用；
(2)取上述重量份的阿胶粉碎成细粉，与上述步骤(1)制备的浓缩液混合，还可以加 入木糖醇、柠檬酸，加热至完全溶化，进一步减压浓缩至相对密度1.30-1.40凝冻状稠膏，制 成富含石斛水提物的凝冻食品。
上述富含石斛水提物的凝冻食品的质量标准，满足如下质量要求：采用苯酚-硫酸比色法 测得粗多糖含量，每100g样品粗多糖含量不低于350mg。
上述富含石斛水提物的凝冻食品，对阴虚和免疫力低下人群具有改善体质作用，阴虚体 质人群主要体征表现为：潮热、盗汗、脸色苍白，疲倦心烦或热盛伤津而见舌红、口燥等症； 免疫力低下人群体易于被感染或患癌。
本发明主要具有以下创造性的有益技术效果：
1.原料活性成分富集方面：
本发明原料由石斛、麦冬、菊花、西洋参、枸杞子、五味子、天麻、生地黄、白芍、绞 股蓝、蒲黄、阿胶组成，搭配得当、效果突出；
配方中石斛为主料，味甘、性微寒。入肺、胃、肾经，能滋阴、养胃、生津，用于热病 伤阴、口感燥渴，或病后津亏虚热、胃阴不足等症。
麦冬、菊花、西洋参、枸杞子、五味子、天麻、生地黄、白芍、绞股蓝、蒲黄、阿胶为 辅料，加强石斛滋阴补益、增强免疫力之功效。麦冬，味甘，微苦，微寒。归心、肺、胃经， 具有养阴生津，润肺清心的功能。枸杞子，味甘、性平。入肝、肾经。能补肾益精，养肝明 目。西洋参性寒，味甘微苦，入肺、脾经，具有补气养阴、泻火除烦、养胃生津之功能。阿 胶，补血滋阴，润燥，止血，此配方中阿胶还具有作为凝胶剂的作用。该配方是在我国中医 理论的指导下，坚持“有成分论，不惟成分论，重在机体药效学反应”的观点，并继承中国医 学“药食同源”的传统理论，对中药材原料中的活性成分富集方法进行创造性的摸索，兼顾原 料物理特性、化学特性和工艺的产业化可行性，主要有以下几点突破：(1)采用湿法超细微 破碎技术对原料进行预处理，获得有益于萃取的粒径，促进中草药中有效成分的溶出；(2) 本发明根据原料活性组分理化特性，创造性引入现代生物药剂学最新手段-“半仿生提取法 (Semi Bionic Extraction Method，简称SBE法)”。“半仿生提取法”是模仿口服药物在胃肠道的 转运过程而提出的一种中药提取新技术，原料经特定pH值酸性水和碱性水连续提取后，实 现“活性混合物”的富集。该方法以原料中多种有效成分、总浸出物及不同极性部分或主要功 能作为优选提取工艺的基本原则，既能充分发挥混合物成分的综合作用特点，又有利于用单 一成分控制萃取液质量，如本发明以活性多糖的含量作为主要质量指标。(3)在本发明中， 原料在萃取前先经过湿法超细微粉碎处理，通过强烈剪切、撞击、研磨和空穴作用，使物料 达到显著的粉碎效果，获得颗粒细度200～300目混合浆液，更加有利于有效成分的溶出；(4) 湿法粉碎辅助SEB联用技术用于萃取石斛及组合物中的活性成分，工艺流程简单、成本低廉， 生产周期短，提取过程温和，无“三废”排放，适合工业化生产。
2.调理阴虚火旺体质方面：
阴虚火旺证是中医临床常见证型，主要表现为食欲亢进，形体消瘦，口干喜饮，烦躁易 怒，五心烦热，心悸等特征。文献报道，采用甲状腺素造模能够诱导动物表现为：躁动不安、 活动频繁，皮毛光泽度差；体重减轻，进食量、饮水量改变；体温升高，疼痛反应敏感以及 对疲劳、低温和缺氧的耐受能力降低等，与阴虚火旺证临床表现相似。因此，本发明基于甲 状腺素诱导大鼠表观指征变化与阴虚火旺证中医临床表现的一致性建立病理模型。
现有技术中具有调理阴虚体质的药膳较多，同仁堂知柏地黄丸应用效果较好。为体现本 发明制备得到石斛凝冻食品具有预料不到的技术效果，本发明给大鼠灌胃甲状腺素，构建阴 虚火旺模型，通过将本发明制备得到的产品与以上产品进行对比试验研究，从而阐明本发明 产品的显著效果。具体试验如下：
(一)材料和方法
(1)实验动物：雄性Wistar大鼠，SPF级，体重(200±20)g，购自维通利华实验动物中 心，合格证号：SCXK(京)2002-2003；
(2)本申请实施例1制备的富含石斛水提物的凝冻食品；
(3)主要试剂：
甲状腺素：浙江尖峰药业有限公司(批号：110603)；知柏地黄丸(北京同仁堂科技发 展股份有限公司制药厂，批号：国药准字Z11020152)；
(4)造模方法
本发明中将甲状腺片研磨至粉末，配制一定浓度的甲状腺片混悬液备用，给药剂量为 60mg/kg，连续给药两周，正常对照组灌服等体积的生理盐水；
(5)试验分组
大鼠随机分为6组，正常组、阴虚模型组，阳性对照组及本申请制备物的高、中、低剂 量组，每组10只。阴虚模型组、阳性对照组及本发明高、中、低剂量组，每天上午用甲状腺 素灌胃(60mg/kg)，正常对照组灌胃等体积生理盐水；每天下午阳性对照组灌胃知柏地黄丸 悬浮液(0.5g/kg)，本发明高、中、低剂量组分别灌胃本申请制备物混悬液(浓度1.5g/kg， 1.0g/kg，0.5g/kg)，正常组灌胃等体积生理盐水，实验持续两周后进行各项试验；
(6)试验方法
主要检测以下指标：(1)体重：试验期间，分别于0、3、6、9、12、14天称量大鼠体 重，记录大鼠体重变化趋势；(2)肛温：分别于实验第0、6、14天下午14-16时测量肛温并 作记录。测定时，将大鼠抓起，腹部向上，将肛温计插入肛内1cm为标准进行测定，测量时 保持肛温计与大鼠身体平行；(3)抓力：于给药第7、14天测定，抓持大鼠尾根处，置于仪 器上，选用大鼠抓力用的抓力板进行测定；以上测定重复三次，结果取平均值。
(二)结果
(1)阴虚大鼠体重变化：与正常对照组相比，模型组大鼠用甲状腺素灌胃2周后，体重 显著降低(p＜0.05)，并且表现出躁动不安、活动频繁，皮毛光泽度差，大便干结，饮水量与 饮食量增加的体征变化，表明造模成功。与阴虚组相比，本发明高、中、低剂量组对于甲状 腺素引起的体重减轻，具有显著的抑制作用(p＜0.01)。灌胃2周后，体重与阳性对照组相当， 表明本发明所制备组合物在一定程度上能缓解体重减轻症状，效果与六味地黄丸阳性对照无 显著差别(p＞0.05)。结果见表1。
表1 不同组别大鼠体重变化趋势(单位：g)
注：与正常组对比，#p＜0.05；与阴虚组对比，*p＜0.05，**p＜0.01。
(2)阴虚大鼠体温变化：与正常对照组相比，灌胃甲状腺素两周后，模型组大鼠肛温显著 升高(p＜0.05)。与阴虚组相比，灌胃两周后，本发明高剂量组大鼠肛温显著降低(p＜0.05)， 显示本发明组合物对阴虚大鼠肛温升高具有改善作用，且与阳性对照无显著差别(p＞0.05)。 结果见表2。
表2 不同组别大鼠肛温变化趋势(单位：℃)
注：与正常组对比，#p＜0.05；与阴虚组对比，*p＜0.05。
(3)阴虚大鼠抓力变化：与正常对照组相比，灌胃甲状腺素两周后，模型组大鼠抓力显著 降低(p＜0.05)。与阴虚组相比，灌胃两周后，本发明高、中剂量组大鼠抓力显著升高(p＜0.05)， 表明本发明制备物能增加阴虚大鼠抓力。本发明高、中剂量组与阳性对照无显著差别 (p＞0.05)。结果见表3。
表3 不同组别大鼠抓力变化趋势(单位：g)
注：与正常组对比，#p＜0.05；与阴虚组对比，*p＜0.05。
3.增强机体免疫功能活性方面：
为体现本发明制备得到石斛凝冻食品具有预料不到的技术效果，本发明选择已报到的具 有免疫增强作用的无限极增健口服液为阳性对照，将本发明制备得到的产品与该产品进行对 比试验研究，以期阐明本发明产品的显著保健功效，说明本发明所达到的显著有益技术效果。 具体试验如下：
(一)材料和方法
(1)试验动物：BALB/c小鼠6-8周龄，单一性别，豚鼠，购自维通利华实验动物中心， 合格证号：SCXK(京)2002-2003。
(2)经本申请实施例2制备的富含石斛水提物的凝冻食品
(3)主要试剂
刀豆素A(ConA)，美国SIGMA公司产品；无限极增健口服液(阳性对照)，无限极(中 国)有限公司，批号：卫食健字(1997)第121号；小牛血清、胎牛血清，杭州四季青公司产品
(4)试验分组
小鼠随机分为5组，正常组、阳性对照组及本申请制备物的高、中、低剂量组，每组10 只。阳性对照组灌胃增健口服液浓缩液(粗多糖50mg/kg)，本发明高、中、低剂量分别灌胃 本申请组合物混悬液，高剂量组(粗多糖150mg/kg)、中剂量组(粗多糖100mg/kg)、低剂 量组(粗多糖50mg/kg)，连续灌胃2周后进行各项试验。
(5)试验方法
实验程序参照《保健食品检验与评价技术规范》(卫生部2003年)的方法对昆明种小 鼠进行免疫调节功能测定。检测指标包括：1.小鼠脾淋巴细胞转化试验测定淋巴细胞增殖情 况；2.绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠DTH(足趾部厚度法)迟发型变态反应(DTH)；3.血 凝法测定血清溶血素抗体积数(血凝法)；4小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体 内法)测定吞噬率及吞噬指数。具体方法和计算公式可见上述规范。
(二)实验结果
(1)脾淋巴细胞增殖试验：与正常组相比，本发明高剂量组和中剂量组在加刺激剂 ConA时均可显著促进脾淋巴细胞增殖，其作用强度接近阳性对照组，结果见表4。
表4 对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响
注：*p＜0.05，与对照组比较。
(2)迟发型变态反应：与正常组相比，本发明高、中、低剂量组均能增强绵羊红细胞诱 导的小鼠迟发型变态反应，即可增强细胞免疫功能，其中等剂量组促进作用最为明显，效果 与对照组相当。结果见表5。
表5 对绵羊红细胞(SRBC)诱导迟发型变态反应(DTH)的影响
注：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001与对照组比较。
(3)血清溶血素测定：与正常组相比，本发明所制备组合物的中剂量组能显著提高小 鼠血清半数溶血值HC50(P＜0.05)，表明按照实施例1制备的产品可促进小鼠血清抗体的 产生，可以增强机体体液免疫功能。结果见表6。
表6 对小鼠血清溶血素的影响
注：*p＜0.05，与对照组比较。
(4)单核巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验：与正常组相比，高、中、低剂量组均能增强小 鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能(P＜0.05)，尤以中剂量组最为明显，与阳性对照 作用强度相当。
表4 对腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响
注：*p＜0.05，**p＜0.01与对照组比较。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法 如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
实施例1
(1)称取石斛150g、麦冬50g、菊花50g、西洋参10g、枸杞子10g、五味子10g、天 麻10g、生地黄10g、白芍10g、绞股蓝10g、蒲黄10g，混合后粉碎成40目的细粉，加入蒸 馏水，加水量为原料重量的8倍，经湿法超微粉碎打浆，使原料粒度达到200目，调节pH2.5， 于60℃条件下萃取1小时，滤过；然后加pH5.0的水，加水量为原料重量的8倍，85℃加热 提取1小时，滤过；再调节pH8.0，于70℃条件下萃取0.5h小时，合并滤液，调节pH为6.0， 减压浓缩至相对密度1.15的浓缩液备用；
(2)取阿胶30g粉碎成细粉，与步骤(1)制备的浓缩液混合，加热至完全溶化，减压 浓缩至相对密度1.30，制成凝冻状稠膏，即获得本发明所述富含石斛水提物的凝冻食品。
实施例2
(1)称取石斛300g、麦冬100g、菊花100g、西洋参50g、枸杞子50g、五味子50g、天 麻50g、生地黄30g、白芍30g、绞股蓝30g、蒲黄30g，混合后粉碎成40目的细粉，加入蒸 馏水，加水量为原料重量的10倍，经湿法超微粉碎打浆，使原料粒度达到300目，调节pH4.5， 于80℃条件下萃取2小时，滤过；然后加pH7.5的水，加水量为原料重量的10倍，100℃加 热提取2小时，滤过；再调节pH9.0，于80℃条件下萃取1h小时，合并滤液，调节pH为7.5， 减压浓缩至相对密度1.25的浓缩液备用；
(2)取阿胶80g粉碎成细粉，与步骤(1)制备的浓缩液混合，加热至完全溶化，加入 30g木糖醇，10g柠檬酸减压浓缩至相对密度1.40，制成凝冻状稠膏，即获得本发明所述富含 石斛水提物的凝冻食品。
实施例3
(1)称取石斛200g、麦冬90g、菊花60g、西洋参30g、枸杞子30g、五味子30g、天 麻30g、生地黄20g、白芍20g、绞股蓝20g、蒲黄10g，混合后粉碎成40目的细粉，加入蒸 馏水，加水量为原料重量的9倍，经湿法超微粉碎打浆，使原料粒度达到250目，调节pH4.0， 于70℃条件下萃取1.5小时，滤过；然后加pH6.5的水，加水量为原料重量的9倍，90℃加 热提取0.5小时，滤过；再调节pH8.5，于70℃条件下萃取1h小时，合并滤液，调节pH为 7.0，减压浓缩至相对密度1.20的浓缩液备用；
(2)取阿胶50g粉碎成细粉，与步骤(1)制备的浓缩液混合，加入30g木糖醇、10g 柠檬酸，加热至完全溶化，减压浓缩至相对密度1.40，制成凝冻状稠膏，即获得本发明所述 富含石斛水提物的凝冻食品。
实施例4
(1)称取石斛150g、麦冬50g、菊花50g、西洋参30g、枸杞子10g、五味子10g、天 麻10g、生地黄10g、白芍10g、绞股蓝15g、蒲黄10g，混合后粉碎成40目的细粉，加入蒸 馏水，加水量为原料重量的8倍，经湿法超微粉碎打浆，使原料粒度达到250目，调节pH4.0， 于70℃条件下萃取1.5小时，滤过；然后加pH6.5的水，加水量为原料重量的8倍，90℃加 热提取0.5小时，滤过；再调节pH8.5，于70℃条件下萃取1h小时，合并滤液，调节pH为 7.0，减压浓缩至相对密度1.15的浓缩液备用；
(2)取阿胶65g粉碎成细粉，与步骤(1)制备的浓缩液混合，加入50g木糖醇、10g 柠檬酸，加热至完全溶化，减压浓缩至相对密度1.40，制成凝冻状稠膏，即获得本发明所述 富含石斛水提物的凝冻食品。
实施例5
(1)称取石斛300g、麦冬100g、菊花60g、西洋50g、枸杞子30g、五味子25g、天麻 10g、生地黄30g、白芍15g、绞股蓝30g、蒲黄15g，混合后粉碎成40目的细粉，加入蒸馏 水，加水量为原料重量的10倍，经湿法超微粉碎打浆，使原料粒度达到250目，调节pH4.0， 于70℃条件下萃取1.5小时，滤过；然后加pH6.5的水，加水量为原料重量的8倍，90℃加 热提取0.5小时，滤过；再调节pH8.5，于70℃条件下萃取1h小时，合并滤液，调节pH为 7.0，减压浓缩至相对密度1.25的浓缩液备用；
(2)取阿胶65g粉碎成细粉，与步骤(1)制备的浓缩液混合，加入50g木糖醇、50g 柠檬酸，加热至完全溶化，减压浓缩至相对密度1.30，制成凝冻状稠膏，即获得本发明所述 富含石斛水提物的凝冻食品。