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1、(10)申请公布号 CN 102172173 A (43)申请公布日 2011.09.07 CN 102172173 A *CN102172173A* (21)申请号 201110051847.9 (22)申请日 2011.03.04 A01G 1/04(2006.01) (71)申请人 广东省微生物研究所 地址 510070 广东省广州市先烈中路 100 号 (72)发明人 邹方伦 宋斌 吴兴亮 李泰辉 (74)专利代理机构 广州科粤专利商标代理有限 公司 44001 代理人 潘伟健 (54) 发明名称 一种杂色竹荪子实体的栽培生产方法 (57) 摘要 本发明涉及一种杂色竹荪 (Dictyo。
2、phora multicolor Berk.& Broome(1882) 子实体的栽 培生产方法, 其特征是先将野生的杂色竹荪新鲜 子实体进行组织分离, 接至综合 PDA 斜面培养基 或松针浸汁培养基培养至菌丝长满斜面得到斜面 母种, 把斜面母种接种至麦粒培养基培养至菌丝 长满培养基, 选取菌丝呈白色、 粗壮的菌种作为原 种, 将原种分层播种到生产用培养基里并覆土, 培 养至菌丝长出覆土表面, 然后使菌丝形成大量菌 索, 菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾, 继续培养至 菌裙达到最大开张度, 便可采收杂色竹荪新鲜子 实体。本发明的栽培生产方法可以使杂色竹荪子 实体生物效率达到 1.5 2.5kg/m。
3、2, 这些杂色竹 荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 2 页 说明书 5 页 CN 102172175 A1/2 页 2 1. 一种杂色竹荪子实体的栽培生产方法, 其特征包括以下的步骤 : (1)将野生的杂色竹荪Dictyophora multicolor Berk.& Broome新鲜子实体进行组织 分离, 接至综合PDA斜面培养基或松针浸汁培养基, 温度1032, 湿度5090, 培养 20 50 天, 菌丝长满斜面即得到斜面母种, 所述的综合 PDA 斜面培养基 pH 5.0 7.0, 其。
4、 原料组成为每 1000mL 水中加入马铃薯 150 250g, 葡萄糖 15 25g, 磷酸二氢钾 1 2g, 硫酸镁 0.3 0.8g, VB15 15mg 和琼脂 17 20g, 其制备方法是原料按所述组成分别称重 后, 先将马铃薯洗净去皮切碎, 按上述量加水煮沸 25 30min, 纱布过滤, 取滤汁再加入葡 萄糖、 磷酸二氢钾、 硫酸镁、 VB1和琼脂, 充分溶解后趁热纱布过滤, 分装试管灭菌后取出试 管摆斜面, 冷却贮存备用, 所述的松针浸汁培养基pH 5.07.0, 其原料组成为每1000mL水 中加入松针 50 150g, 马铃薯 150 250g, 蔗糖 15 25g, 琼脂。
5、 15 25g, 其制备方法是 原料按所述组成分别称重后, 将马铃薯洗净去皮切碎, 和松针一起按上述量加水煮沸 25 30min, 纱布过滤, 取滤汁再加入蔗糖和琼脂, 充分溶解后趁热纱布过滤, 取滤汁分装试管灭 菌后取出试管摆斜面, 冷却贮存备用 ; (2) 将步骤 (1) 得到的斜面母种按培养基质量 2 3的接种量接入麦粒培养基, 置 温度 10 32, 湿度 60 70, 培养 25 70d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌丝呈白 色、 粗壮的菌种作为原种, 所述的麦粒培养基 pH 5.0 7.0, 其原料组成按质量分数 100 计, 由小麦 75 85, 棉子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草。
6、粉 10 20, 蔗糖 1 3, 过磷酸钙 1 2, 石膏粉 0.5 1.5和石灰 0.3 0.8组成, 所述的麦粒培养基 的制备方法是先把小麦用水浸泡 20 30h, 再用自来水冲洗干净, 用锅煮熟 20 38min, 过 滤滴干备用, 棉子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草粉用热水浸泡 2 3h 后堆沤发酵 4 5d 备 用, 将所有组份混合拌匀, 此时含水量为 50 60, 用手握培养料放开后料不散, 将培养 料装入培养瓶里灭菌冷却后即可作接种用 ; (3) 将步骤 (2) 得到的原种按培养基质量 3 6的接种量分层播种到生产用培养 基里并覆土, 于温度1032, 空气相对湿度5090, 培养25。
7、70d菌丝长出覆土表 面, 所述的生产用培养基 pH 5.0 7.0, 其干料组成按质量份数计为竹片 8 12 份, 木片 20 30 份, 过磷酸钙 0.2 0.3 份, 石膏 0.2 0.3 份和竹叶 0.2 0.3 份, 所述的生产 用培养基的制备方法是将上述干料中的竹片、 木片和竹叶切成碎片, 再与过磷酸钙和石膏 混合堆积成堆, 不断用清水或 0.2尿素液浇淋, 使其充分吸水, 每平方米的堆用干料 15 20kg, 以经过 2 3的石灰水浸泡 23 25h 或煮沸 15 25min 后用流水冲洗的木屑或 玉米秆粉作填充料, 然后堆沤发酵 4 5d 至料面呈白色, 得到生产用培养基 ; 。
8、(4) 将步骤 (3) 得到的菌丝于温度 10 32, 空气相对湿度 70 95, 光照强度在 100 300lx, 每天通气 1 次, 每次 0.5 1h, 培养 20 55d 则形成大量菌索, 至菌索末端膨 大形成幼原基和菌蕾后以相对湿度 70 95, 10C 32, 光照强度在 100 300lx, 每 天通气 1 2 次, 每次 0.5 1h, 培养 20 35d 至菌裙达到最大开张度, 即可采收杂色竹荪 子实体。 2. 根据权利要求 1 所述的一种杂色竹荪子实体的栽培生产方法, 其特征是步骤 (1) 所 述的野生的杂色竹荪新鲜子实体进行组织分离, 接至综合 PDA 斜面培养基或松针浸。
9、汁培养 基, 温度 23 26, 湿度 60 65, 培养 25 35d, 所述的综合 PDA 斜面培养基的原料 组成为每1000mL水中加入马铃薯200g, 葡萄糖20g, 磷酸二氢钾1.5g, 硫酸镁0.5g, VB110mg 权 利 要 求 书 CN 102172173 A CN 102172175 A2/2 页 3 和琼脂 17g 20g, 所述的松针浸汁培养基的原料组成为每 1000mL 水中加入松针 100g, 马 铃薯 200g, 蔗糖 20g, 琼脂 20g ; 步骤 (2) 所述温度 23 26, 培养 23 40d, 所述的麦粒 培养基其原料组成按质量分数 100计, 由小。
10、麦 80, 棉子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草粉 15, 蔗糖 2, 过磷酸钙 1.5, 石膏粉 1和石灰 0.5组成, 步骤 (3) 所述的生产用培养 基其干料组成按质量份数计为竹片 10 份, 木片 25 份, 过磷酸钙 0.25 份, 石膏 0.25 份和竹 叶 0.25 份, 所述的温度 23 26, 所述的湿度 60 80, 培养 30 45d, 所述的分层播 种是先将三分之二的菌种均匀撒在料面上, 抓料抖动, 把撒上的菌种均匀的分布在三分之 二的料层中, 稍为平整料面, 再把三分之一的菌种均匀混播在上面三分之一的料层里, 不要 让菌种外露, 步骤 (4) 所述的菌丝的培养温度 22 27。
11、, 培养 35 55d, 所述的形成幼原 基和菌蕾后的培养温度 20 26, 湿度 75 90。 权 利 要 求 书 CN 102172173 A CN 102172175 A1/5 页 4 一种杂色竹荪子实体的栽培生产方法 技术领域 0001 本发明涉及一种杂色竹荪的生产方法, 具体来说涉及一种杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 子实体的栽培生产方法。 背景技术 0002 杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 又称黄裙竹荪, 在分类上 隶属于真菌界 (Fungi)、 担子菌门 (Basidi。
12、omycota)、 伞菌纲 (Agaricomycetes)、 鬼笔亚纲 (Phallomycetidae)、 鬼笔目 (Phallales)、 鬼笔科 (Phallaceae), 是一种夏季多在竹林、 阔 叶林地上散生的腐生菌, 在江苏、 安徽、 福建、 台湾、 湖南、 广东、 广西、 海南、 贵州、 云南等热 带亚热带省份均有分布。杂色竹荪有微毒, 不宜采食, 但可供药用。据研究, 将其子实体浸 泡于浓度为70的酒精中, 作为外涂药用, 可治疗脚癣、 脚气, 增强免疫力, 抑菌, 抗衰老。 但 野生杂色竹荪子实体的资源极其有限, 且受季节气候的制约, 因此, 杂色竹荪子实体的人工 栽培研究。
13、是十分必要的。 发明内容 0003 本发明的目的在于开发出一种杂色竹荪子实体的人工栽培生产方法。 0004 我们通过将野生的杂色竹荪新鲜子实体经过母种制作, 原种制作, 栽培种制作, 培 菌, 出菇, 采收等步骤, 得到了人工栽培的杂色竹荪子实体, 从而实现了本发明的目的。 0005 本发明的杂色竹荪子实体的栽培生产方法, 其特征包括以下的步骤 : 0006 (1)将野生的杂色竹荪(Dictyophora multicolor Berk.& Broome)新鲜子实体进 行组织分离, 接入综合 PDA 斜面培养基或松针浸汁培养基, 10 32, 湿度 50 90, 培 养2050天, 菌丝长满斜。
14、面即得到斜面母种, 所述的综合PDA斜面培养基pH 5.07.0, 其 原料组成为每 1000mL 水中加入马铃薯 150 250g, 葡萄糖 15 25g, 磷酸二氢钾 1 2g, 硫酸镁 0.3 0.8g, VB15 15mg 和琼脂 17 20g, 其制备方法是原料按所述组成分别称重 后, 先将马铃薯洗净去皮切碎, 按上述量加水煮沸 25 30min, 纱布过滤, 取滤汁再加入葡 萄糖、 磷酸二氢钾、 硫酸镁、 VB1和琼脂, 充分溶解后趁热纱布过滤, 分装试管灭菌后取出试 管摆斜面, 冷却贮存备用, 所述的松针浸汁培养基pH 5.07.0, 其原料组成为每1000mL水 中加入松针 5。
15、0 150g, 马铃薯 150 250g, 蔗糖 15 25g, 琼脂 15 25g, 其制备方法是 原料按所述组成分别称重后, 将马铃薯洗净去皮切碎, 和松针一起按上述量加水煮沸 25 30min, 纱布过滤, 取滤汁再加入蔗糖和琼脂, 充分溶解后趁热纱布过滤, 取滤汁分装试管灭 菌后取出试管摆斜面, 冷却贮存备用 ; 0007 (2) 将步骤 (1) 得到的斜面母种按培养基质量 2 3的接种量接入麦粒培养 基, 置 10 32培养, 湿度 60 70, 培养 25 70d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌 丝呈白色、 粗壮的菌种作为原种, 所述的麦粒培养基 pH 5.0 7.0, 其原料。
16、组成按质量分数 100计, 由小麦 75 85, 棉子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草粉 10 20, 蔗糖 1 3, 过磷酸钙 1 2, 石膏粉 0.5 1.5和石灰 0.3 0.8组成, 所述的麦粒 说 明 书 CN 102172173 A CN 102172175 A2/5 页 5 培养基的制备方法是先把小麦用水浸泡 20 30h, 再用自来水冲洗干净, 用锅煮熟 20 38min, 过滤滴干备用, 棉子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草粉用热水浸泡 2 3h 后堆沤发酵 4 5d 备用, 将所有组份混合拌匀, 此时含水量为 50 60, 用手握培养料放开后料不 散, 将培养料装入培养瓶里灭菌冷却后即可作。
17、接种用 ; 0008 (3)将步骤(2)得到的原种按培养基质量36的接种量分层播种到生产用培 养基里并覆土, 于温度1032, 空气相对湿度5090, 培养2570d菌丝长出覆土 表面, 所述的生产用培养基pH 5.07.0, 其干料组成按质量份数计为竹片812份, 木片 20 30 份, 过磷酸钙 0.2 0.3 份, 石膏 0.2 0.3 份和竹叶 0.2 0.3 份, 所述的生产 用培养基的制备方法是将上述干料中的竹片、 木片和竹叶切成碎片, 再与过磷酸钙和石膏 混合堆积成堆, 不断用清水或 0.2尿素液浇淋, 使其充分吸水, 每平方米的堆用干料 15 20kg, 以经过 2 3的石灰水。
18、浸泡 23 25h 或煮沸 15 25min 后用流水冲洗的木屑或 玉米秆粉作填充料, 然后堆沤发酵 4 5d 至料面呈白色, 得到生产用培养基 ; 0009 (4) 将步骤 (3) 得到的菌丝于温度 10 32, 空气相对湿度 70 95, 光照 强度在 100 300lx, 每天通气 1 次, 每次 0.5 1h, 培养 20 55d 则形成大量菌索, 至菌 索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相对湿度 70 95, 10C 32, 光照强度在 100 300lx, 每天通气 1 2 次, 每次 0.5 1h, 20 35d 至菌裙达到最大开张度, 即可采收杂色 竹荪子实体。 0010 步骤 (。
19、1) 所述的野生的杂色竹荪新鲜子实体进行组织分离, 接至综合 PDA 斜面培 养基或松针浸汁培养基最好是温度 23 26, 湿度 60 65, 培养 25 35d ; 最好的 综合 PDA 斜面培养基其原料组成为每 1000mL 水中加入马铃薯 200g, 葡萄糖 20g, 磷酸二氢 钾 1.5g, 硫酸镁 0.5g, VB110mg 和琼脂 17g 20g, 最好的松针浸汁培养基其原料组成为每 1000mL 水中加入松针 100g, 马铃薯 200g, 蔗糖 20g, 琼脂 20g ; 0011 步骤(2)所述的斜面母种接种至麦粒培养基最好的培养温度是2326, 最好的 培养时间是 23 4。
20、0d ; 最好的麦粒培养基其原料组成按质量分数 100计, 由小麦 80, 棉 子壳或竹枝丫粉或杂木屑或草粉 15, 蔗糖 2, 过磷酸钙 1.5, 石膏粉 1和石灰 0.5 组成 ; 0012 步骤 (3) 所述的生产用培养基的培养温度最好是 23 26, 湿度 60 80, 培养时间 30 45d ; 所述最好的生产用培养基其干料组成按质量份数计为竹片 10 份, 木片 25 份, 过磷酸钙 0.25 份, 石膏 0.25 份和竹叶 0.25 份 ; 所述的分层播种是先将三分之二的 菌种均匀撒在料面上, 抓料抖动, 把撒上的菌种均匀地分布在三分之二的料层中, 稍为平整 料面, 再把三分之一。
21、的菌种均匀混播在上面三分之一的料层里, 不要让菌种外露, 然后覆土 并用薄膜覆盖调温 ; 0013 步骤 (4) 所述的菌丝的培养温度最好是 22 27, 培养时间 35 55d, 所述的形 成幼原基和菌蕾后的培养温度最好是 20 26, 湿度 75 90, 杂色竹荪子实体采收 后立即去掉菌帽和菌托, 以免污染洁白的菌裙, 将菌裙在日光下晒干或炭火烤干或于 40 60烘箱烘干, 放置 20min, 使菌裙回潮变软, 方可包装或于室温保藏或用于研究等用途。 0014 本发明的栽培生产方法可以使杂色竹荪子实体生物效率达到 1.5 2.5kg/m2, 即 每平方米生产用培养料可得 1.5 2.5kg。
22、 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可 用作药物原料或研究材料使用。 说 明 书 CN 102172173 A CN 102172175 A3/5 页 6 具体实施方式 0015 以下实施例是对本发明的进一步说明, 不是对本发明的限制。 0016 实施例 1 : 0017 综合 PDA 斜面培养基原料组成为马铃薯 200g, 葡萄糖 20g, 磷酸二氢钾 1.5g, 硫酸 镁 0.5g, VB110mg, 琼脂 17g 与 1000mL 水, pH 6.0, 制备方法是称取马铃薯 200g, 洗净去皮 切碎, 加水 1000mL 煮沸 30min, 纱布过滤, 取滤汁再加葡萄糖 20g。
23、、 磷酸二氢钾 1.5g、 硫酸镁 0.5、 VB110mg、 琼脂 17g, 充分溶解后趁热纱布过滤, 取滤汁分装试管, 视试管大小而定每试 管约 8mL, 15 磅蒸气 121灭菌 20 分钟左右后取出试管摆斜面, 冷却贮存备用 ; 0018 将野生的杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 新鲜子实体进行 组织分离, 按约 0.5cm0.5cm 大小的量接至综合 PDA 斜面培养基, 24, 湿度 50, 培养 30d, 菌丝长满斜面即得到斜面母种。 0019 称取小麦80kg(用水浸泡20h, 再用自来水冲洗干净, 用锅煮熟20min, 过。
24、滤滴干), 棉子壳 15kg( 用热水浸泡 2h 后堆沤发酵 4 天 ), 蔗糖 2kg, 过磷酸钙 1.5kg, 石膏粉 1kg 和石 灰 0.5kg 混合拌匀, 调整 pH 至 6.0, 此时含水量为 50 60, 用手握培养料放开后料不 散, 将培养料装入培养瓶里, 塞上棉塞, 包上油纸, 于温度 126, 蒸汽压 20 磅, 保持 2h 灭菌 冷却后, 得到麦粒培养基。 0020 将斜面母种按培养基质量的 2接种至麦粒培养基, 置 26培养, 湿度 60, 培养 25d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌丝呈白色、 粗壮的菌种作为原种。 0021 取竹片 10kg, 木片 25kg, 。
25、过磷酸钙 0.25kg, 石膏 0.25kg 和竹叶 0.25kg 堆积成堆, 其中竹片、 木片和竹叶切成约 20mm300mm 的碎片, 不断用清水浇淋堆, 使其充分吸水, 每 平方米的堆用干料15kg, 用经过2的石灰水浸泡24h后流水冲洗的木屑作填充料, 然堆沤 发酵 4d, 料面呈白色, 就得到生产用培养基。 0022 原种按培养基质量 3的接种量并先将三分之二的均匀撒在生产用培养基上, 抓 料抖动, 把撒上的菌种均匀的分布在三分之二的生产用培养基中, 稍为平整料面, 再把三分 之一的菌种均匀混播在上面三分之一的生产用培养基里, 不要让菌种外露, 然后覆土并用 薄膜覆盖调温。在温度 2。
26、6, 空气相对湿度 60的条件下, 培养 70d 后菌丝长出覆土表面。 0023 将菌丝于温度 10 20, 空气相对湿度 50 70, 光照强度在 300lx, 每天通 气 1 次, 每次 0.5h, 培养 55d 则形成大量菌索, 至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相对 湿度 70, 10, 光照强度在 300lx, 每天通气 1 次, 每次 0.5h, 35d 至菌裙达到最大开张度, 即可采收杂色竹荪子实体。 采收后立即去掉菌帽和菌托, 将菌裙在日光下晒干, 放置20min, 使菌裙回潮变软, 室温保藏。 0024 此次栽培的杂色竹荪子实体生物效率达到 2.5kg/m2, 即每平方米生产。
27、用培养料可 得 2.5Kg 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 0025 实施例 2 : 0026 将野生的杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 新鲜子实体进行 组织分离, 按约 0.5cm0.5cm 大小的量接至综合 PDA 斜面培养基, 10, 湿度 50, 培养 20d, 菌丝长满斜面即得到斜面母种, 所述的综合 PDA 斜面培养基 pH 7.0, 其原料组成为每 1000mL 水中加入马铃薯 150g, 葡萄糖 25g, 磷酸二氢钾 2g, 硫酸镁 0.8g, VB115mg, 琼脂 20g, 说 。
28、明 书 CN 102172173 A CN 102172175 A4/5 页 7 其制备方法同实施例 1。 0027 把 75kg 小麦 ( 用水浸泡 30h, 再用自来水冲洗干净, 用锅煮熟 38min, 过滤滴干 ), 竹枝丫粉 20kg( 用热水浸泡 3h 后堆沤发酵 5d), 蔗糖 1kg, 过磷酸钙 2kg, 石膏粉 1.5kg, 石 灰 0.5kg 混合拌匀, pH 为 7.0, 此时含水量为 50 60, 用手握培养料放开后料不散, 将 培养料装入培养瓶里, 塞上棉塞, 包上油纸, 于温度 126, 蒸汽压 20 磅, 保持 2h 灭菌冷却 后, 得到麦粒培养基。 0028 将斜。
29、面母种按培养基质量 3的接种量接种至麦粒培养基, 置 10培养, 湿度 60, 培养 70d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌丝呈白色、 粗壮的菌种作为原种。 0029 取竹片 8kg, 木片 30kg, 过磷酸钙 0.2kg, 石膏 0.2kg 和竹叶 0.2kg 堆积成堆, 其中 竹片、 木片和竹叶切成约 20mm300mm 的碎片, 不断用清水浇淋堆, 使其充分吸水, 每平方 米的堆用干料20kg, 用经过3的石灰水煮沸20min后流水冲洗的玉米秆粉作填充料, 然后 堆沤发酵 5d, 料面呈白色, 就得到生产用培养基, pH7.0。 0030 原种按培养基质量 6的接种量并先将三分之二。
30、的原种均匀撒在生产用培养基 上, 抓料抖动, 把撒上的菌种均匀的分布在三分之二的生产用培养基中, 稍为平整料面, 再 把三分之一的菌种均匀混播在上面三分之一的生产用培养基里, 不要让菌种外露, 然后覆 土并用薄膜覆盖调温。在温度 32, 空气相对湿度 90的条件下, 培养 25d 后菌丝长出覆 土表面。 0031 将菌丝于温度 32, 空气相对湿度 95, 光照强度在 100lx, 每天通气 1 次, 每 次 1h, 培养 20d 则形成大量菌索, 至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相对湿度 95, 32, 光照强度在200lx, 每天通气2次, 每次1h, 20d至菌裙达到最大开张度, 即可。
31、采收杂色 竹荪子实体 ; 采收后立即去掉菌帽和菌托, 将菌裙用炭火烤干, 放置 20min, 使菌裙回潮变 软, 进行包装。 0032 此次栽培的杂色竹荪子实体生物效率达到 1.5kg/m2, 即每平方米生产用培养料可 得 1.5Kg 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 0033 实施例 3 : 0034 除综合 PDA 斜面培养基原料组成为马铃薯 250g, 葡萄糖 15g, 磷酸二氢钾 1g, 硫酸 镁 0.3g, VB15mg, 琼脂 17g 与 1000mL 水, pH 5.0, 以及制备方法中马铃薯洗净去皮切碎, 加 水煮沸 25min 外, 其。
32、它步骤和条件同实施例 1。 0035 此次栽培的杂色竹荪子实体生物效率达到 1.8kg/m2, 即每平方米生产用培养料可 得 1.8Kg 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 0036 实施例 4 : 0037 将野生的杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 新鲜子实体进 行组织分离, 按约 0.5cm0.5cm 大小的量接至松针浸汁培养基, 10, 湿度 50 60, 培养 50d, 菌丝长满斜面即得到斜面母种, 所述的松针浸汁培养基 pH 5.0, 其原料组成为 每 1000mL 水中加入松针 50g, 马。
33、铃薯 250g, 蔗糖 15g, 琼脂 25g, 其制备方法是称取马铃薯 250g, 洗净去皮切碎, 和松针 50g 一起加水 1000mL 煮沸半个小时, 纱布过滤, 再称取蔗糖、 琼脂充分溶解于滤汁后趁热纱布过滤, 取滤汁分装试管, 视试管大小而定每试管约 10mL, 15 磅蒸气 121灭菌 20 分钟左右后取出试管摆斜面, 冷却贮存备用 ; 0038 按照实施例 1 的方法制备麦粒培养基, 其原料组成按质量分数 100计, 由小麦 说 明 书 CN 102172173 A CN 102172175 A5/5 页 8 85, 杂木屑 10, 蔗糖 3, 过磷酸钙 1, 石膏粉 0.7和石。
34、灰 0.3组成, pH 5.0。 0039 得到的斜面母种按培养基质量 2的接种量接种至麦粒培养基, 置 23培养, 湿 度 60, 培养 40d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌丝呈白色、 粗壮的菌种作为原种。 0040 按照实施例 1 的方法制备生产用培养基, 其干料组成按质量份数计为竹片 12 份, 木片 20 份, 过磷酸钙 0.3 份, 石膏 0.3 份和竹叶 0.3 份。 0041 原种按培养基质量的 3的接种量并先将三分之二的原种均匀撒在生产用培养基 上, 抓料抖动, 把撒上的菌种均匀的分布在三分之二的生产用培养基中, 稍为平整料面, 再 把三分之一的菌种均匀混播在上面三分之一。
35、的生产用培养基里, 不要让菌种外露, 然后覆 土并用薄膜覆盖调温。在温度 23, 空气相对湿度 60的条件下, 培养 45d 后菌丝长出覆 土表面。 0042 将菌丝于温度 22, 空气相对湿度 80, 光照强度在 100lx, 每天通气 1 次, 每次 0.5h时, 培养55d则形成大量菌索, 至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相对湿度75, 20, 光照强度在200-300lx, 每天通气1次, 每次0.5h, 35d至菌裙达到最大开张度, 即可采 收杂色竹荪子实体。采收后立即去掉菌帽和菌托, 将菌裙在 40烘箱烘干, 放置 20min, 使 菌裙回潮变软, 室温保藏。 0043 此次栽培。
36、的杂色竹荪子实体生物效率达到 2kg/m2, 即每平方米生产用培养料可得 2Kg 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 0044 实施例 5 : 0045 将野生的杂色竹荪 (Dictyophora multicolor Berk.& Broome) 新鲜子实体进行 组织分离, 按约0.5em0.5em大小的量接至松针浸汁培养基, 26, 湿度65, 培养25d, 菌 丝长满斜面即得到斜面母种, 所述的松针浸汁培养基 pH 7.0, 其原料组成为每 1000mL 水中 加入松针 150g, 马铃薯 150g, 蔗糖 25g, 琼脂 15g, 其制备方法是同实。
37、例 4 ; 0046 按照实施例 2 的方法制备麦粒培养基, 其原料组成按质量分数 100计, 由小麦 84, 草粉 10, 蔗糖 3, 过磷酸钙 1.7, 石膏粉 0.5和石灰 0.8组成。 0047 得到的斜面母种按培养基质量 2的接种量接种至麦粒培养基, 置 26培养, 湿 度 70, 培养 23d 后, 菌丝长满麦粒培养基, 选取菌丝呈白色、 粗壮的菌种作为原种。 0048 按照实施例 2 的方法制备生产用培养基。 0049 原种按培养基质量 5的接种量并先将三分之二的原种均匀撒在生产用培养基 上, 抓料抖动, 把撒上的菌种均匀的分布在三分之二的生产用培养基中, 稍为平整料面, 再 把。
38、三分之一的菌种均匀混播在上面三分之一的生产用培养基里, 不要让菌种外露, 然后覆 土并用薄膜覆盖调温。在温度 26, 空气相对湿度 80的条件下, 培养 30d 后菌丝长出覆 土表面。 0050 将菌丝于温度 23, 空气相对湿度 70 90, 光照强度在 100lx, 每天通气 1 次, 每次 1h, 培养 35d 则形成大量菌索, 至菌索末端膨大形成幼原基和菌蕾后以相对湿度 90, 26, 光照强度在 200lx, 每天通气 2 次, 每次 1h, 20d 至菌裙达到最大开张度, 即可采 收杂色竹荪子实体。采收后立即去掉菌帽和菌托, 将菌裙用 60烘箱烘干, 放置 20min, 使 菌裙回潮变软, 进行包装。 0051 此次栽培的杂色竹荪子实体生物效率达到 2.3kg/m2, 即每平方米生产用培养料可 得 2.3Kg 新鲜的杂色竹荪子实体, 这些杂色竹荪子实体可用作药物原料或研究材料使用。 说 明 书 CN 102172173 A 。