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一种可预防羔羊胃肠道胀气的代乳粉和开食料及饲喂方法.pdf

  • 上传人:v****
  • 文档编号:6969439
  • 上传时间:2019-09-17
  • 格式:PDF
  • 页数:17
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  • 摘要
    申请专利号:

    CN201610481528.4

    申请日:

    20160627

    公开号:

    CN106107074A

    公开日:

    20161116

    当前法律状态:

    有效性:

    审查中

    法律详情:

    IPC分类号:

    A23K50/10,A23K50/60,A23K20/147,A23K20/163,A23K10/30,A23K10/20,A23K20/158,A23K20/20,A23K20/26,A23K20/174,A23K10/18,A23K10/33,A23K10/37,A23K40/10,A01K67/02

    主分类号:

    A23K50/10,A23K50/60,A23K20/147,A23K20/163,A23K10/30,A23K10/20,A23K20/158,A23K20/20,A23K20/26,A23K20/174,A23K10/18,A23K10/33,A23K10/37,A23K40/10,A01K67/02

    申请人:

    北京三元禾丰牧业有限公司

    发明人:

    乔国华,邵彩梅,高全利,姚巧粉,王俊,栗文钰

    地址:

    100085 北京市海淀区上地信息路2号上地国际科技创业园2号楼9B

    优先权:

    CN201610481528A

    专利代理机构:

    代理人:

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    内容摘要

    本发明涉及一种羔羊代乳粉和一种羔羊开食料及制备方法,并涉及使用羔羊代乳粉和羔羊开食料饲喂羔羊的方法,属于畜牧业养殖技术领域。羔羊代乳粉的主要组成为:乳清浓缩蛋白40‑50、葡萄糖6‑15、膨化大米粉6‑10、全鸡蛋粉3‑8、棕榈油脂肪粉20‑30、椰子油脂肪粉0.5‑1.5、预混合饲料0.1‑0.2;羔羊开食料,由如下重量份数的原料制备:大麦30‑40、玉米30‑40、燕麦5‑20、糖蜜3‑10、豆粕10‑18、女贞子提取物0.15。本发明产品及羔羊饲喂方法,使羔羊体重和平均日增重得到了明显的提高,并能够显著提高羔羊的血清抗体浓度,对提高羔羊的抗病能力,提高存活率具有显著的效果。

    权利要求书

    1.一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄羔羊自由采食母羊的初乳;从第4天停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数为:4-10日龄,4次/天,228克/次;11-18日龄,3次/天,354克/次;19-42日龄,2次/天,456克/次;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食,保证开食料不被污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变。 2.根据权利要求1所述的羔羊饲喂方法,其特征在于,所述羔羊代乳粉的溶解方法为:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用。 3.一种用于权利要求1或2所述羔羊饲喂方法的羔羊代乳粉,包括如下重量份数的原料组成:乳清浓缩蛋白40-50份、葡萄糖6-15份、膨化大米粉6-10份、全鸡蛋粉3-8份、棕榈油脂肪粉20-30份、椰子油脂肪粉0.5-1.5份、预混合饲料0.1-0.2份;其中预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A60000IU、维生素D20000IU、维生素E150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。 4.根据权利要求3所述的羔羊代乳粉,由如下重量份数的原料组成:乳清浓缩蛋白48.18份、葡萄糖11.41份、膨化大米粉8.62份、全鸡蛋粉5.17份、棕榈油脂肪粉25.66份、椰子油脂肪粉0.86份、预混合饲料0.1份;其中,预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A60000IU、维生素D20000IU、维生素E150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。 5.根据权利要求3所述的羔羊代乳粉,还包括重量份数为1-3的植物乳杆菌菌粉;所述植物乳杆菌为保藏菌种CGMCCNo.11763。 6.根据权利要求5所述的羔羊代乳粉,所述植物乳杆菌菌粉的制备方法如下:将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到需要的体积;将扩培得到的菌液离心分离,收集沉淀菌体;向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释;干燥制备粉状菌剂,上述方法制得植物乳杆菌菌粉中活细胞数为(0.1~9.0)×10个/克;所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖15-25份,(NH)SO4-6份,半胱氨酸2-3份。 7.制备权利要求3-6任一所述羔羊代乳粉的方法,按照配方混合均匀即得。 8.一种用于权利要求1所述羔羊饲喂方法的羔羊开食料,所述开食料由如下重量份数的原料制备:大麦30-40份、玉米30-40份、燕麦5-20份、糖蜜3-10份、豆粕10-18份,女贞子提取物0.15份。 9.制备权利要求8所述羔羊开食料的方法,包括如下步骤:将大麦、玉米、燕麦和豆粕经粉碎机粉碎后,过40目筛片;使用调质机将水蒸汽调整到3个大气压,温度为80℃,螺杆转速为120转/分钟,将粉碎后的大麦、玉米、燕麦、豆粕加入到调质机后,加入糖蜜和女贞子提取物;调质机出来的物料直接进入制粒机,制粒机的环膜比为16∶1,制备出的开食料颗粒直径为0.4厘米,长度为0.8厘米。 10.根据权利要求9所述羔羊开食料的制备方法,所述女贞子提取物制备方法包括如下步骤:女贞子经清理去杂,加入乙醇,料液比1:8-10,提取温度80-90℃,提取时间100-120min,乙醇体积分数90%,提取次数2次;降至常温,调整乙醇体积分数为75%,常温下提取3次,每次2h;调整乙醇体积分数为70%;料液比1:20;超声波功率200W;提取温度60℃;提取时间为30-60min;调整乙醇体积分数为50%,料液比为1:70,超声功率600W,提取20min;合并提取液,将上述提取液精密过滤,除去固体杂质得澄清滤液;回收乙醇,水浴蒸干,65℃干燥,即得女贞子提取物;上述料液比单位为:g/mL。

    说明书

    技术领域

    本发明属于畜牧业养殖技术领域,特别涉及一种羔羊代乳粉和一种羔羊开食料及制备方法,并涉及羔羊代乳粉和羔羊开食料的具体使用方法。

    背景技术

    早期的羔羊代乳粉和开食料的研究源于上个世纪四五十年代(Miller,1955)。在传统的犊牛饲养中只是在羔羊出生后2周开始饲喂干草,为的是促进瘤胃的发育和反刍能力。在羔羊出生后第7天开始饲喂开食料是近些年新发展出来的饲喂技术。在欧美等畜牧业发达国家比较推崇在羔羊哺乳期逐渐的加大饲喂开口料的数量,在断奶时开食料的饲喂量可以达到0.15公斤为断奶的标准。到底应不应该饲喂开食料一直是学术界争论的科学问题。羔羊胃肠道的发育肯定是受到多个方面因素的影响的,各个因素之间是互相制约的。但是,也可能其发育有独立的方面。总体来讲,代乳料和开食料的构成差异较大,同时又缺乏各种饲喂模式下的饲喂效果试验数据。另外,基于羔羊采食行为方面的数据,其中包括羊奶(粉)或者是代乳料饲喂的数量、采食干草的数量、采食开食料的数量以及羔羊增重数据等更是寥寥可数。有关数据表明,羔羊在出生后第7天瘤胃内的需氧菌大幅度下降,厌氧菌占优势地位,这时瘤胃就可以降解纤维素了,瘤胃内有挥发性脂肪酸的生成。羔羊在出生后第9天便有了反刍的能力(Huber,1975)。更多的学者比较支持开食料可以促进瘤胃和其它肠道各段的发育,尤其是促进瘤胃的发育这一说法。有试验数据表明,羔羊从出生后第7天开始一直到断奶期间采食开食料可以促进瘤胃的发育,其中包括生肌化(瘤胃壁增厚、瘤胃壁表面皱褶增多和瘤胃绒毛的发育)和颜色变化(颜色变黑)。但是,具体瘤胃的吸收功能怎么变化并没有进行深入的研究,瘤胃的吸收功能主要是对挥发性脂肪酸等单羧酸的吸收,其中主要包括乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、碳酸和酮体。

    国内对羔羊料的研究也日益增多,但多见为颗粒料,申请公布号CN 103947895 A的中国发明《一种山羊羔羊代乳料及其应用》公开了一种山羊羔羊专用代乳料及其应用,其组分包括:玉米粉、膨化大豆、面粉、脂肪粉、蔗糖、葡萄糖、血浆蛋白粉、大米蛋白粉、乳清粉、盐、石粉、磷酸氢钙、1%复合预混料、复合酶、抗氧化剂、酵母、胆碱、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸,以上组分混合后制成膨化颗粒,然后在调质过程中喷涂添加豆油和加热后液化猪油。该专利公开的代乳料为膨化颗粒,溶解性差,口感和状态不适合羔羊食用。

    申请公布号CN 102919550 A的中国发明《一种羔羊用饲料添加剂》公开了一种羔羊用饲料添加剂,该饲料添加剂由质量百分比为28%-32%的山楂粉、质量百分比为28%-32%的杜仲叶 粉、质量百分比为18%-22%的绞股蓝粉、质量百分比为18%-22%的杨树花和加入量为山楂粉、杜仲叶粉、绞股蓝粉和杨树花加入总量的1%-1.5%的纳米氧化锌组成,所述的山楂粉由质量比为3:1的山楂肉粉和山楂核粉混合组成。虽然能够提高羔羊生产性能,提高羊肉品质,但是为超微粉碎后的粉状,口感和食用方式不能满足羔羊的需求。

    申请公布号CN 102835599 A的中国发明《一种代乳料》公开了一种羔羊代乳料,所述的羔羊代乳料包括以下组分,各组分的质量百分比为:全脂奶粉为40%-60%,高蛋白豆粕为0-20%,膨化大豆为0-20%,鱼粉为10%,乳清粉为17%,猪油为10%,磷酸氢钙为0.4%-1%,石粉为0.4%-0.6%,大豆卵磷脂为2%。该发明不仅能大大降低母羊的饲养成本,缩短羔羊生产周期,而且可以提高肉羊生产效率。但是其配方中奶粉含量过高,导致乳糖含量过高,易引起羔羊肠胃胀气,且膨化大豆等原料溶解性差,导致该代乳料不能完全溶解给羔羊饮用,影响羔羊的采食。

    公开号CN 101331919A的中国发明《肉用羔羊快速育肥饲料》公开了一种动物饲料,具体是一种肉用羔羊快速育肥饲料。有下述重量份的原料经干燥、粉碎后混合造粒加工制成:白酒渣180-210份、酒精渣200-250份、果渣200-250份、豆饼170-185份、麸皮110-130份、磷酸氢钙18-20份、食盐5份、碳酸氢钠18-20份、微量元素0.25份和亚硒酸钠VE0.5份。本发明的有益效果是:成本低,营养成分高、热量高,与已有技术相比饲喂的羔羊料肉比高、生长快、羊肉肥瘦适中、无膻味。该发明关注的重点在于羔羊的育肥。

    授权公告号CN 101642193 B的中国发明《羔羊用葎草生物活性饲料添加剂的工艺方法》公开了一种能快速促进羔羊生长的具有生物活性的中草药饲料添加剂及加工工艺,即采用HSEE原料开发的富含促生长因子、多种维生素及微量元素的天然植物源羔羊生物活性饲料添加剂。这种HSEE添加剂是一种中草药经过粉碎、醇提、加工后而制成的生物活性羔羊饲料添加剂。HSEE物质作为配合饲料的活性物质添加剂,既能补充营养素,又可作为营养的调节剂和载体,具有抗菌消炎,健胃抑菌的作用,可显著提高羔羊的免疫力,减少发病率,提高生长发育速度,改善羔羊肉品质。该发明关注的是羔羊如何提高羔羊的免疫力,减少发病率。

    随着国家对母羊场建设扶持力度的加大,母羊场对集约化饲养及饲料技术的要求也呈现了相应提高的趋势。发明人在山西省,山东省和内蒙古自治区等地做过多次调查研究,对我国母羊场的母羊饲养和羔羊饲养基本情况有一定的了解。

    目前的羊育种体系下,多羔性是一个非常重要的经济追求目标。因此,一只母羊通常情况下的繁殖率都比较高,3羔和4羔的都比较多见。一般来讲,母羊正常可以靠哺乳成功饲喂2只羔羊,其它的羔羊会因为饥饿而死。这给养殖带来很大的经济损失。为了避免这种情况的发生,一些养殖业者开始使用牛乳制品(奶粉等)人工饲喂羔羊。但是,通常并不能够 取得成功,因为牛乳制品中含有大量的乳糖。羔羊的消化生理比较特殊,不能承受过多的乳糖,因为其在肠道中分解产生大量的气体,引起胃肠道鼓气现象,最终死亡。据资料表明,羔羊代乳料中的乳糖含量必须低于25%,否则引发胃肠道鼓气的几率就会很高。

    下面以一个山东省莘县天牧股份有限公司的母羊场为例进行介绍:

    1.母羊场的基本情况介绍

    这个母羊场共有基础母羊800只(品种为湖羊,这种羊起源于内蒙,体况评分在3.5-4(母羊的体况评分为9分制,以5分为宜,这个评分是在母羊剪毛后作出的,比较准确)。母羊不分群,不同胎次(一胎和多胎)和不同生产阶段(妊娠前期,后期,泌乳前期,后期)的母羊都在一起,采食一种配方下的饲料。繁殖方式为本交,一只公羊与10只母羊混栏饲养。

    经过统计,这个母羊场现有母羊的产羔率为285%,达到了湖羊的产羔率标准。产3羔以上的母羊的羔羊成活率在80%以下,其中体弱的羔子死亡率超过了40%(母羊产3羔,则必有一只体弱;产4羔则必有2只体弱;产5羔,则必有3只体弱,以此类推;所有品种的母羊都如此)。

    2.羊场的技术分析

    以NRC 2007小反刍动物营养需要为标准,产2羔及以上,体重43公斤为母羊饲养标准类型。不难得出结论,传统母羊日粮的蛋白质含量(8-9%)基本为其需要量(16%)的一半,严重不足!能量也不足。这是造成母羊体况评分低,产羔后乳房偏小,奶水不足,奶水主要营养成分偏低的主要原因。饲料配制的优劣与奶水的量和营养成分的浓度是有一定的关系的)。据报道,母羊的奶水仅够给2只羔羊哺乳的。在以上日粮条件下,初生重较大的羔子也不能获得充足的奶水,体弱的羔子就只能因为饥饿而死亡了。这大大的降低了母羊场的养殖效益。同时也不利于我国养羊业的可持续发展。

    每成功的养活一个羔羊就可以分摊母羊的部分饲养成本,羔羊本身又有价值。对于母羊场而言,养活羔羊就是一箭双雕的大好事。

    上述发明虽然也是羔羊饲养方面的研究,但均未关注到如何提高羔羊的成活率,开发可以代替羊母乳的完全溶解,并且不发生胀气的代乳粉。上述发明,虽然均有各自的优点,但是配方组成不够合理,对组分的溶解性、对羔羊的适用性等关注度不够,配方中含有奶粉,且奶粉含量过高,导致乳糖含量过高,易引起羔羊肠胃胀气,且膨化大豆等原料溶解性差,导致上述发明的代乳料不能完全溶解给羔羊饮用,影响羔羊的采食。

    针对以上在母羊场发现的实际情况,确定了以羔羊代乳粉进行切入的技术路线,配合使用羔羊开食料,实施羔羊人工饲喂和早期断奶。达到在羔羊早期获得较快日增重和提高母羊繁殖效率,缩短生产周期的目的。

    发明内容

    为解决上述问题,本发明提供一种羔羊代乳粉,所述羔羊代乳粉溶解后为乳状,且营养组成合理,能够满足羔羊的营养需求,并符合羔羊的采食习惯。

    所述羔羊代乳粉,包括如下重量份数的原料组成:

    乳清浓缩蛋白40-50份、葡萄糖6-15份、膨化大米粉6-10份、全鸡蛋粉3-8份、棕榈油脂肪粉20-30份、椰子油脂肪粉0.5-1.5份、预混合饲料0.1-0.2份;其中预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A 60000IU、维生素D3 20000IU、维生素E 150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。

    破碎后的稻壳末能够很好地将预混合饲料中的各组分分散。

    优选的,所述羔羊代乳粉还可以包括重量份数为1-3的植物乳杆菌菌粉;

    优选的,所述植物乳杆菌菌粉的制备方法如下:

    将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到需要的体积;将扩培得到的菌液离心分离,收集沉淀菌体;向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释;干燥制备粉状菌剂,上述方法制得植物乳杆菌菌粉中活细胞数为(0.1~9.0)×1010个/克;

    所述植物乳杆菌为保藏菌种CGMCC No.11763;

    所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖15-25份,(NH4)2SO44-6份,半胱氨酸2-3份。

    所述羔羊代乳粉制备方法为:按照上述配方混合均匀即可。

    一种羔羊开食料,所述开食料为颗粒状,由如下重量份数的原料制备:大麦30-40份、玉米30-40份、燕麦5-20份、糖蜜3-10份、豆粕10-18份、女贞子提取物0.15份。

    所述开食料制备方法包括如下步骤:

    将大麦、玉米、燕麦和豆粕经粉碎机粉碎后,过40目筛片;

    使用调质机将水蒸汽调整到3个大气压,温度为80℃,螺杆转速为120转/分钟,将粉碎后的大麦、玉米、燕麦、豆粕加入到调质机后,加入糖蜜和女贞子提取物;

    调质机出来的物料直接进入制粒机,制粒机的环膜比为16∶1,制备出的开食料颗粒直径为0.4厘米,长度为0.8厘米。

    优选的,所述女贞子提取物制备方法包括如下步骤:

    女贞子经清理去杂,加入乙醇,料液比1:8-10,提取温度80-90℃,提取时间100-120min,乙醇体积分数90%,提取次数2次;降至常温,调整乙醇体积分数为75%,常温下提取3次, 每次2h;调整乙醇体积分数为70%;料液比1:20;超声波功率200W;提取温度60℃;提取时间为30-60min;调整乙醇体积分数为50%,料液比为1:70,超声功率600W,提取20min;合并提取液,将上述提取液精密过滤,除去固体杂质得澄清滤液;回收乙醇,水浴蒸干,65℃干燥,即得女贞子提取物;上述料液比单位为:g/mL。

    一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:

    环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄自由采食母羊的初乳;从第4天停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数见下表;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食。要保证开食料不被羔羊的粪尿污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变,国产苜蓿或者进口的苜蓿都可以。断奶后,按照本领域常规方法饲喂即可。

    1.羔羊代乳粉的使用方法如下:

    ①羔羊代乳粉溶解方法:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    ②羔羊代乳粉的用量及饲喂次数见下表:

    羔羊日龄 每天饲喂次数 每次饲喂代乳粉的数量 1-3 自由采食 初乳 4-10 4 228克 11-18 3 354克 19-42 2 456克

    在第42天饲喂代乳粉结束后,断奶,停止饲喂代乳粉。

    所述羔羊开食料为颗粒状,从第4日龄开始补饲,自由采食。

    有益效果

    传统的养殖技术中认为,羊跟牛采食习惯类似,故传统的代乳料均包含较大量的牛奶类制品,但本发明经多年研究发现:羊跟牛的生理结构、消化方式均存在较大的差异,羔羊采食传统的羔羊代乳料,不能吸收利用其中的乳糖,容易引起肠胃胀气,本发明以乳清浓缩蛋白、葡萄糖、膨化大米粉、全鸡蛋粉、棕榈油脂肪粉、椰子油脂肪粉为主要原料,按照一定比例进行组合,配方科学合理,乳糖含量低、蛋白质含量高,羔羊食用后不胀气,容易消化并吸收利用,另外本发明的代乳粉完全溶解,与动物乳液类似,适口性好,利于羔羊采食。本产品还配合配比良好的羔羊开食料(颗粒饲料)使用,其中含有中草药女贞子,可以显著的提高羔羊的免疫功能。二者配合可以起到提高羔羊增重速度和减少疫病的双重良好效果。

    女贞子为木犀科植物女贞(Ligustrum Lucidum Ait)的干燥成熟果实,始载于《神农本草 经》,列为上品,谓其能“主补中,安五脏,养精神,除百病,久服肥健,轻身不老”。《本草纲目》说:“女贞实乃上品无毒妙药。”女贞子味甘、苦,性凉,归肝、肾经,具有滋补肝肾,明目乌发的功效,用于肝肾阴虚,眩晕耳呜,腰膝酸软,须发早白,内热消渴,骨蒸潮热等。具有滋补肝肾,明目乌发的功能。女贞子的特点在于药性较平和,作用缓慢,久服始能见效。其药用价值很高,根据《本草经疏》记载:“女贞子,气味俱阴,正入肾除热补精之要品,肾得补,则五脏自安,精神自足,百病去而身肥健矣。”现代医学认为:女贞子能镇咳缓下;对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有抑制作用;有强心利尿作用,可用于治疗冠心病;对大鼠肝、肾、心、脑匀浆脂质过氧化反应有显著的抑制作用。女贞子药材资源分布广泛,目前己成为临床广泛使用和做原料药使用的大宗药材。其主要成分有三萜类、醚萜类、黄酮类、苯乙醇苷类化合物以及多糖、氨基酸、挥发油、脂肪酸、色素、矿物质等成分。本发明采用特殊工艺制备女贞子提取物,生物活性物质含量高,工艺简单、能耗小、容易实现。

    附图说明

    图1为本发明饲喂方法与自然哺乳方法对羔羊免疫功能(血清抗体浓度)影响的对比示意图;

    图中:1-本发明饲喂方法,饲喂一至四周羔羊血清抗体浓度变化曲线;

    2-自然哺乳方法,饲喂一至四周羔羊血清抗体浓度变化曲线。

    具体实施方式

    所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2015于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏号为CGMCC No.11763,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。

    植物乳杆菌益生特性如下:

    本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC No.11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活,在1%胆盐培养4小时后仍处于存活状态;植物乳杆菌CGMCC No.11763降解亚硝酸盐速度快,分解能力达到10.9mg/h/kg,该菌种在生产泡菜时,整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/kg以下;CGMCC No.11763在发酵60h小时后,对胆固醇降解率可达到64.76%。CGMCC No.11763黏附能力测定的自凝集率为95.71%。

    CGMCC No.11763菌株对胆固醇降解能力研究和测定:

    取1mlCGMCC No.11763母液接种于10mL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量0.1mg/ml,pH 6.2)中,37℃的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用,以接入1mL无菌水的MRS胆固醇培养基为对照,取以上培养不同时间的菌液样品及对照液各1ml,9000r/min,4℃下 离心10min,得到发酵上清液,邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为:取各上清液0.1ml于相应的试管中,加冰醋酸0.3ml,1mg/ml的邻苯二甲醛0.15ml,缓缓加入浓硫酸1.0ml,混合均匀。室温静置10min,于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复,以同样方法制作胆固醇标准曲线,计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知,CGMCC No.11763对胆固醇有很好的降解作用,在发酵60h小时后,降解率可达到64.76%。

    表1对胆固醇的降解情况

    CGMCC No.11763菌株的耐胆盐试验:

    取CGMCC No.11763菌液1mL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1%)的10mL MRS液体培养基(PH=6.4),置于37℃下分别培养0、2、4h,每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀,制备稀释度溶液,取0.1ml稀释液于MRS中涂布,于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1%处理4h后菌的生长量依然达到0.59±0.92×107(cfu/ml),有很好的耐胆盐能力。

    表2耐胆盐能力检测[(±s)×107cfu/ml]

    CGMCC No.11763菌株的耐酸试验

    取CGMCC No.11763母液按1ml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的10mL MRS液体培养基,置于37℃下分别培养0、2、4h,每一处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀,制备稀释溶液,取0.1ml稀释液于MRS中涂布,于37℃生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有很强的耐酸能力。

    表3耐酸能力检测[(±s)×107cfu/ml]

    CGMCC No.11763菌株的黏附能力测定

    培养CGMCC No.11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH 5α(LB液体培养基)24h得发酵液,分别置于3000r/min、4℃下离心10min,收集菌泥,分别用pH=7.0的无菌磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS,震荡混合均匀后,置于3000r/min、4℃下离心10min,收集菌体)。自凝集率(%):用无菌的PBS将菌泥CGMCC No.11763制成在波长600nm处的吸光值为0.4±0.1(A0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A 24,自凝集率(%)公式为(A0—A24)/A0;他凝集率(%):将CGMCC No.11763和大肠杆菌DH5α的悬菌液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A0)的混合悬浮菌液。静置24h后测定吸光值A24,他凝集率(%)公式为(A0—A24)/A0。测定结果见表4,可知CGMCC No.11763的自凝集率为95.71%,有很强的黏附能力。

    表4黏附能力表

    类别 A0平均值±s A24平均值±s 凝聚率% HLX37磷酸盐混合液 0.5131±0.0045 0.0220±0.0369 95.71 HLX37+大肠杆菌磷酸盐混合液 0.5143±0.0082 0.3698±0.0355 28.09

    菌株生理特性

    所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2015于2015年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏号为CGMCC No.11763,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。

    该菌株特点如下:在显微镜下观察,该菌株为短杆状,革兰氏染色呈阳性,无鞭毛,不产芽孢;在固体培养基上,该菌菌落为白色,表面光滑,致密,形态为圆形,边缘较整齐。理化特征为:过氧化氢酶(-),明胶液化(-),吲哚实验(+),运动性(-),发酵产气(-),亚硝酸盐还原(-),发酵产气(-),产硫化氢气体(-),pH4.0MRS培养基中生长(+)。经过生理生化鉴定为为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2015。

    该菌株能够在57℃下生长良好,葡萄糖耐受能力为275g/L。

    本发明植物乳杆菌由采集人李建树,从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到,采集时间2015年6月2日。

    5L发酵罐试验

    (1)取斜面上的植物乳杆菌CGMCC No.11763一环,接入装有50mL培养基MRS(无琼脂)(葡萄糖浓度为150g/L)培养基的250mL三角瓶中,200rpm,37℃培养12h左右,使菌体处于对数生长中期。

    (2)将对数期的菌种接入装有3L MRS液体培养基(初始葡萄糖为150g/L)的5L发酵罐中。接种量为10%,37℃下100rpm培养8小时,对数前期溶氧控制10%(通气0.5L/min),后期厌氧培养63小时。发酵结束后,植物乳杆菌CGMCC No.11763的乳酸产量达到110g/L。这样的产乳酸速率利于泡菜的快速发酵。

    (3)将对数期的菌种接入装有3L亚硝酸钠液体筛选培养基(单一氮源为2g/L亚硝酸钠的改性MRS筛选培养基)的5L发酵罐中。接种量为10%,37℃下100rpm培养8小时,对数前期溶氧控制10%(通气0.5L/min),后期厌氧,发酵过程根据亚硝酸盐的消耗速率流加20g/L的亚硝酸钠溶液,培养2-3天。发酵结束后,计算发酵过程植物乳杆菌CGMCC No.11763对亚硝酸钠的降解速率。结果发现:在该条件下,tlj-2015对亚硝酸钠的降解速率可以达到653mg/h/L。

    (4)将对数期的菌种10mL接入装有2kg预处理过的白菜中,按照传统泡菜方法进行加工,每12小时测定泡菜中的亚硝酸盐含量。结果发现,在整个发酵过程中,tlj-2015菌对亚硝酸钠的分解速率为10.9mg/h/kg白菜。泡菜中的亚硝酸钠含量始终低于4.8mg/kg,远低于国家标准GB2714-2003中规定的含量(20mg/kg)。

    实施例1

    一种羔羊代乳粉,由如下重量份数的原料组成:

    乳清浓缩蛋白48.18份、葡萄糖11.41份、膨化大米粉8.62份、全鸡蛋粉5.17份、棕榈油脂肪粉25.66份、椰子油脂肪粉0.86份、预混合饲料0.1份;其中,预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A 60000IU、维生素D3 20000IU、维生素E 150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。

    代乳粉的化学组分为:蛋白质23.48%、脂肪29.46%、乳糖24.20%、粗纤维0.1%、水分6.0%、灰分5.9%、钙0.67%、磷0.69%、铜(ppm)2、硒(ppm)0.4、锌(ppm)1.1、铁(ppm) 4、锰(ppm)0.2、镁(ppm)0.7、碘(ppm)0.2、钴(ppm)0.1、维生素A(IU/千克)60000、维生素D3(IU/千克)20000、维生素E(IU/千克)150;

    所述羔羊代乳粉制备方法为:按照上述配方混合均匀即可。

    一种羔羊开食料,所述开食料为颗粒状,由如下重量份数的原料制备:

    大麦35份、玉米35份、燕麦10份、糖蜜6份、豆粕14份、女贞子提取物0.15份。

    所述羔羊开食料制备方法包括如下步骤:

    将大麦、玉米、燕麦和豆粕经粉碎机粉碎后,过40目筛片;

    使用调质机将水蒸汽调整到3个大气压,温度为80℃,螺杆转速为120转/分钟,将粉碎后的大麦、玉米、燕麦、豆粕加入到调质机后,开始加入糖蜜和女贞子提取物;

    调质机出来的物料直接进入制粒机,制粒机的环膜比为16∶1,制备出的开食料颗粒直径为0.4厘米,长度为0.8厘米。

    所述女贞子提取物由本领域常规方法制备;

    一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:

    环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄自由采食母羊的初乳;从第4天停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数见下表;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食,要保证开食料不被羔羊的粪尿污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变,国产苜蓿或者进口的苜蓿都可以。断奶后,按照本领域常规方法继续饲喂即可。

    1.羔羊代乳粉的使用方法如下:

    ①羔羊代乳粉溶解方法:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    例如,取113.4克羔羊代乳粉,溶于285毫升,60℃热水中,再加入285毫升,15.5℃水中,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    ②羔羊代乳粉的用量及饲喂次数见下表:

    羔羊日龄 每天饲喂次数 每次饲喂代乳粉的数量 1-3 自由采食 初乳 4-10 4 228克 11-18 3 354克 19-42 2 456克

    在第42天饲喂代乳粉结束后,断奶,停止饲喂代乳粉。

    所述羔羊开食料为颗粒状,从第4日龄开始补饲,自由采食。

    实施例2

    一种羔羊代乳粉,由如下重量份数的原料组成:

    乳清浓缩蛋白40份、葡萄糖15份、膨化大米粉6份、全鸡蛋粉8份、棕榈油脂肪粉20份、椰子油脂肪粉1.5份、预混合饲料0.2份、植物乳杆菌菌粉3份;其中预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A 60000IU、维生素D3 20000IU、维生素E 150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。

    所述植物乳杆菌菌粉的制备方法如下:

    将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到需要的体积;将扩培得到的菌液离心分离,收集沉淀菌体;向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释;干燥制备粉状菌剂,上述方法制得植物乳杆菌菌粉中活细胞数为(0.1~9.0)×1010个/克;

    所述植物乳杆菌为保藏菌种CGMCC No.11763;

    所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖15-25份,(NH4)2SO44-6份,半胱氨酸2-3份。

    所述羔羊代乳粉制备方法为:按照上述配方混合均匀即可。

    一种羔羊开食料,所述开食料为颗粒状,由如下重量份数的原料制备:大麦30份、玉米40份、燕麦5份、糖蜜10份、豆粕10份、女贞子提取物0.15份。

    所述开食料制备方法包括如下步骤:

    将大麦、玉米、燕麦和豆粕经粉碎机粉碎后,过40目筛片;

    使用调质机将水蒸汽调整到3个大气压,温度为80℃,螺杆转速为120转/分钟,将粉碎后的大麦、玉米、燕麦、豆粕加入到调质机后,加入糖蜜和女贞子提取物;

    调质机出来的物料直接进入制粒机,制粒机的环膜比为16∶1,制备出的开食料颗粒直径为0.4厘米,长度为0.8厘米。

    所述女贞子提取物制备方法包括如下步骤:

    女贞子经清理去杂,加入乙醇,料液比1:9,提取温度80℃,提取时间120min,乙醇体积分数90%,提取次数2次;降至常温,调整乙醇体积分数为75%,常温下提取3次,每次2h;调整乙醇体积分数为70%;料液比1:20;超声波功率200W;提取温度60℃;提取时间为40min;调整乙醇体积分数为50%,料液比为1:70,超声功率600W,提取20min;合并提取液,将上述提取液精密过滤,除去固体杂质得澄清滤液;回收乙醇,水浴蒸干,65℃干燥,即得女贞子提取物;上述料液比单位为:g/mL。

    一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:

    环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄自由采食母羊的初乳;从第4天停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数见下表;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食。要保证开食料不被羔羊的粪尿污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变,国产苜蓿或者进口的苜蓿都可以。断奶后,按照本领域常规方法饲喂即可。

    1.羔羊代乳粉的使用方法如下:

    ①羔羊代乳粉溶解方法:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    例如,150g羔羊代乳粉,加入450mL60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入300mL20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    ②羔羊代乳粉的用量及饲喂次数见下表:

    羔羊日龄 每天饲喂次数 每次饲喂代乳粉的数量 1-3 自由采食 初乳 4-10 4 228克 11-18 3 354克 19-42 2 456克

    在第42天饲喂代乳粉结束后,断奶,停止饲喂代乳粉。

    所述羔羊开食料为颗粒状,从第4日龄开始补饲,自由采食。

    实施例3

    一种羔羊代乳粉,包括如下重量份数的原料组成:

    乳清浓缩蛋白45、葡萄糖10、膨化大米粉8、全鸡蛋粉5、棕榈油脂肪粉25、椰子油脂肪粉0.5、预混合饲料0.1、植物乳杆菌菌粉2;其中,预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A 60000IU、维生素D3 20000IU、维生素E 150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。

    所述植物乳杆菌菌粉的制备方法如下:

    将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到需要的体积;将扩培得到的菌液离心分离,收集沉淀菌体;向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释;干燥制备粉状菌剂,上述方法制得植物乳杆菌菌粉中活细胞数为(0.1~9.0)×1010个/克;

    所述植物乳杆菌为保藏菌种CGMCC No.11763;

    所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖15-25份,(NH4)2SO44-6份,半胱氨酸2-3份。

    所述羔羊代乳粉制备方法为:按照上述配方混合均匀即可。

    一种羔羊开食料,所述开食料为颗粒状,由如下重量份数的原料制备:大麦32份、玉米35份、燕麦15份、糖蜜6份、豆粕12份、女贞子提取物0.15份。

    所述开食料制备方法同实施例2;

    所述女贞子提取物制备方法包括如下步骤:

    女贞子经清理去杂,加入乙醇,料液比1:9,提取温度85℃,提取时间110min,乙醇体积分数90%,提取次数2次;降至常温,调整乙醇体积分数为75%,常温下提取3次,每次2h;调整乙醇体积分数为70%;料液比1:20;超声波功率200W;提取温度60℃;提取时间为45min;调整乙醇体积分数为50%,料液比为1:70,超声功率600W,提取20min;合并提取液,将上述提取液精密过滤,除去固体杂质得澄清滤液;回收乙醇,水浴蒸干,65℃干燥,即得女贞子提取物;上述料液比单位为:g/mL。

    一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:

    环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄自由采食母羊的初乳;从第4天停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数见下表;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食。要保证开食料不被羔羊的粪尿污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变,国产苜蓿或者进口的苜蓿都可以。断奶后,按照本领域常规方法继续饲喂即可。

    1.羔羊代乳粉的使用方法如下:

    ①羔羊代乳粉溶解方法:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    例如228g羔羊代乳粉,加入500mL60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入600mL15℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    ②羔羊代乳粉的用量及饲喂次数见下表:

    羔羊日龄 每天饲喂次数 每次饲喂代乳粉的数量 1-3 自由采食 初乳 4-10 4 228克 11-18 3 354克 19-42 2 456克

    在第42天饲喂代乳粉结束后,断奶,停止饲喂代乳粉。

    实施例4

    一种羔羊代乳粉,包括如下重量份数的原料组成:

    乳清浓缩蛋白50、葡萄糖15、膨化大米粉10、全鸡蛋粉3、棕榈油脂肪粉30、椰子油脂肪粉1.5、预混合饲料0.1、植物乳杆菌菌粉3;其中,预混合饲料的组成为:每公斤预混合饲料中含有硫酸铜5毫克、氧化锌1.4毫克、硫酸亚铁11毫克、磷酸二氢钙4克、硫酸锰0.55毫克、硫酸镁3.5毫克、亚硒酸钠0.88毫克、碘酸钙0.6毫克、硫酸钴0.45毫克、维生素A 60000IU、维生素D3 20000IU、维生素E 150IU,载体为破碎后过10目筛的稻壳末。

    所述植物乳杆菌菌粉的制备方法如下:

    将斜面菌种转接到液体培养基并逐级扩培到需要的体积;将扩培得到的菌液离心分离,收集沉淀菌体;向沉淀菌体中加入保护剂并进行稀释;干燥制备粉状菌剂,上述方法制得植物乳杆菌菌粉中活细胞数为(0.1~9.0)×1010个/克;

    所述植物乳杆菌为保藏菌种CGMCC No.11763;

    所述保护剂由以下重量份数的原料组成:海藻糖15-25份,(NH4)2SO44-6份,半胱氨酸2-3份。

    所述羔羊代乳粉制备方法为:按照上述配方混合均匀即可。

    一种羔羊开食料,所述开食料为颗粒状,由如下重量份数的原料制备:大麦40份、玉米40份、燕麦5份、糖蜜10份、豆粕18份、女贞子提取物0.15份。

    所述开食料制备方法同实施例1;

    所述女贞子提取物制备方法包括如下步骤:

    女贞子经清理去杂,加入乙醇,料液比1:10,提取温度90℃,提取时间100min,乙醇体积分数90%,提取次数2次;降至常温,调整乙醇体积分数为75%,常温下提取3次,每次2h;调整乙醇体积分数为70%;料液比1:20;超声波功率200W;提取温度60℃;提取时间为60min;调整乙醇体积分数为50%,料液比为1:70,超声功率600W,提取20min;合并提取液,将上述提取液精密过滤,除去固体杂质得澄清滤液;回收乙醇,水浴蒸干,65℃干燥,即得女贞子提取物;上述料液比单位为:g/mL。

    一种羔羊饲喂方法,包括如下步骤:

    环境温度要求保持在18-22℃,1-3日龄自由采食母羊的初乳;从第4天,停止饲喂母乳,开始自由饮水,要求饮水洁净,无污染,饲喂羔羊代乳粉,用量及饲喂次数见下表;同时,从第4日龄开始补饲羔羊开食料,自由采食。要保证开食料不被羔羊的粪尿污染,并从第4天开始自由采食紫花苜蓿干草,一直到断奶,要求干草无污染和霉变,国产苜蓿或者进口的苜蓿都可以。断奶后,按照本领域常规方法继续饲喂即可。

    1.羔羊代乳粉的使用方法如下:

    ①羔羊代乳粉溶解方法:以羔羊代乳粉质量计,2-3倍60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入2-3倍10-20℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    例如,将500g羔羊代乳粉,加入1000mL60℃热水中搅拌直到完全溶解,再加入1500mL10℃的水,混匀,冷却至37.7℃,使用;

    ②羔羊代乳粉的用量及饲喂次数见下表:

    羔羊日龄 每天饲喂次数 每次饲喂代乳粉的数量 1-3 自由采食 初乳 4-10 4 228克 11-18 3 354克 19-42 2 456克

    在第42天饲喂代乳粉结束后,断奶,停止饲喂代乳粉。

    所述羔羊开食料为颗粒状,从第4日龄开始补饲,自由采食。

    试验例:

    本发明的使用效果试验

    羔羊选自山东省莘县天牧股份有限公司养殖场,选择出生体重接近,刚出生的湖羊羔羊60只,随机分成2组,每组30只。试验组的羔羊按照本发明的产品操作程序严格进行(人工饲喂)、对照组羔羊自由吸食母乳(自然哺乳)。

    试验地点和时间:本试验在山东省莘县天牧股份有限公司养殖场进行;试验期(2015年5月1日至6月20日)。

    测定项目及记录每日观察试验羔羊的食欲和健康状况,于试验结束时(出生后第42天)称量并记录每只羔羊的体重。在试验期的第一周、第二周、第三周和第四周分别在羔羊颈静脉处采血,斜面37℃,水浴1.5小时,取上清液。使用意大利折射计(Milwaukee)测定抗体水平(此折射计可以直接读数),此读数即为血清免疫球蛋白的浓度,浓度越高说明免疫功能越好。

    结果说明:

    采食及健康情况观察:试验期内处理组(人工饲喂组)和对照组(自然哺乳组)的羔羊健康情况都正常,未出现因胃肠道胀气而死亡的现象,也无伤病等异常现象。但是,人工饲喂组的羔羊在采食代乳粉和羔羊开食料的情况下,体重和平均日增重得到了明显的提高,达到了差异显著的水平。具体见下表。人工饲喂组的羔羊在采食代乳粉和羔羊开食料的情况下,与自然哺乳组相比,血清抗体的浓度在出生后1到4周有显著的提高,结果如下表,

    具体变化趋势见附图1。上述数据说明:本发明产品及羔羊饲喂方法,能够显著提高羔羊的血清抗体浓度,对提高羔羊的抗病能力,提高存活率具有显著的效果。

    发明产品对羔羊体重变化的影响

    注:表中数据肩标字母不同者差异显著(p<0.05)。

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