技术领域
本发明涉及中药提取物的制备方法，具体是一种利用亚临界流体分级制备黄芪提取物的方法。
背景技术
黄芪(耆)素以“补气诸药之最”著称，是一种名贵的中药材，也是一种最常用中药材。《中国药典》收载的黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。黄芪性微温，味甘，有补气固表、止汗脱毒、生肌、利尿、退肿之功效。用于治疗气虚乏力，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴，慢性肾炎，蛋白尿，糖尿病等。炙黄芪益气补中，生用固表托疮。经现代医药研究发现，黄芪中主要含黄酮、黄芪多糖、皂甙类成分。皂甙类成分有黄芪皂甙Ⅰ～Ⅷ及大豆皂甙Ⅰ，是药用黄芪的有效成分；而其中黄芪甲甙（黄芪甲苷，也即黄芪皂甙Ⅳ）更是药用黄芪最主要的有效成分，并被作为黄芪提取物最主要的质量指标。
目前市面上常见的黄芪提取物中黄芪甲苷的含量在0.3%－98%之间，而其价格也根据黄芪提取物中黄芪甲苷含量不同而相差甚远，常见的黄芪甲苷含量为5～10%的黄芪提取物价格为1300－2600元/ Kg，主要用于生产颗粒剂、片剂、口服液、保健食品、化妆品等；黄芪甲苷含量为30%－40%的黄芪提取物价格为8000元以上/ Kg，主要用于生产注射液和制备黄芪甲苷含量为90%以上的黄芪提取物；黄芪甲苷含量为90%以上的黄芪提取物由于其制备困难，生产成本高，很多厂家的生产工艺根本难以生产出来，其价格更是高达16万－30万元/Kg，其主要用于科研用途、标准品制备和生产环黄芪醇的原料，环黄芪醇具有增强机体免疫力、清除自由基、保护心肌细胞、增强心肌活力，减轻心肌缺血、抗心力衰竭等作用，在临床上很受欢迎，但是由于其价格昂贵，很多人虽然对其疗效非常满意，也只能望而却步。由于受生产工艺限制，很多厂家生产的黄芪提取物大都是黄芪甲苷含量为0.3%－10%的产品，杂质含量较高，且生产工艺落后，生产成本高，利润空间不大，而生产高纯度黄芪甲苷的厂家则由于受其工艺限制，不能大规模生产，且原料利用率低，导致高纯度黄芪甲苷生产成本高，其价格也居高不下。
目前已知的制备黄芪提取物的方法有常规提取法、超临界流体提取法、超声波提取法。
常规提取法：浸渍法和渗漉法一般提取温度较低，提取物中所含杂质较少,但提取周期较长，提取效率低，溶剂消耗量大；煎煮法、回流提取法在较高温度下对中药活性成分进行提取，提取效率较低，只有50-60%，原料利用率低，所提取出的产物杂质也较多，溶剂消耗量较多。目前工业大生产中常用的方法为回流法制备黄芪提取物，其具体过程为：1、将黄芪粉末用乙醇浸泡回流提取3次，合并提取液；2、利用双效浓缩器将提取液浓缩；3、将浓缩液进行醇沉；4、醇沉上清液再进行浓缩；5、将醇沉浓缩液进行大孔树脂分离；6、大孔树脂洗脱液浓缩干燥即得黄芪提取物。用上述制备方法提纯黄芪提取物存在浓缩周期过长、能耗较高、乙醇消耗量大、人工成本高、收率低，产品杂质含量高等缺点。
超临界流体提取法：其原理是利用超临界流体作为萃取剂在高于临界温度和压力下，从目标物中萃取有效成分，当恢复到常压常温时，溶解在流体中的成分立即以溶于吸收液的液体状态与气态流体分开。超临界提取的优点是选择性强，提取有针对性，可选择性地提取各种类型化合物；缺点是压力过高，设备制造与运行成本过高，不易实现大生产。
超声波提取法：利用超声波产生的强烈振动、高加速度、空化效应、热效应、搅拌等作用，可以加速植物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短时间，且避免了高温对所提成分的破坏，缺点是不易实现大生产。
亚临界萃取(Sub-critical fluid extraction technology) 是利用亚临界流体作为萃取剂， 在密闭、无氧、低压的压力容器内，依据有机物相似相溶的原理，通过萃取物料与萃取剂在浸泡过程中的分子扩散过程，达到固体物料中的脂溶性成分转移到液态的萃取剂中，再通过减压蒸发的过程将萃取剂与目的产物分离，最终得到目的产物的一种新型萃取与分离技术。亚临界流体萃取相比其它分离方法有许多优点： 无毒、无害，环保、无污染、非热加工、保留提取物的活性产品不破坏、不氧化，产能大、可工业化大规模生产，节能、运行成本低，易于和产物分离。
近年来亚临界提取技术迅速发展，成为一种很有潜力，符合工业化生产的绿色提取技术，并在一些物质的提纯方面应用成功，但是目前还没有人研究出利用亚临界萃取技术提纯黄芪提取物，尤其是黄芪甲苷的提纯方法。
发明内容
本发明的目的就是针对现有传统制备黄芪提取物的方法存在生产周期长、能耗较高、乙醇消耗量大、人工成本高等缺点，而超临界流体提取法和超声波提取法又存在设备制造与运行成本高，均不易实现工业大生产的问题，提供一种高效率、节能环保的利用亚临界萃取技术分级制备黄芪提取物的方法；同时，本发明还提供了一种大规模生产不同含量黄芪提取物的方法，为大力推进黄芪提取物医药用途拓展、新药研发等方面提供了有利条件。
本发明的一种分级制备黄芪提取物的方法，包括以下步骤：
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材，称量后粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入黄芪质量0.2～2倍、体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为20～50℃下浸润10～60分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入黄芪质量3～8倍的1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力0.3～1.6Mpa，温度20～60℃条件下，萃取20～60分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.04～0.1Mpa压力下，萃取剂蒸发回收，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程2～6次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.05～0.09Mpa，温度为50～80℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥后所得粉末即为黄芪提取物Ⅰ，其中黄芪甲苷含量为5～10%，含水量≤5%，黄芪甲苷收率≥90%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）中制得的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量2～4%的食品级氢氧化钠，碱化1～6小时，用无机酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的大孔树脂柱，上柱速度为1～3 BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3～5 BV/H，当流出液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为1～3%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱1～2BV；
f.20～50%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.60～80%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的60～80%的醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，所得粉末即为黄芪提取物Ⅱ，其中黄芪甲苷含量为30～40%，含水量≤5%，黄芪甲苷收率≥85%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的60～80%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为5～15%，在温度为2～10℃条件下静置3～5天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，即得黄芪提取物Ⅲ，其中黄芪甲苷含量≥90%，黄芪甲苷收率≥80%。
本发明中优选的一种分级制备黄芪提取物的方法，包括以下步骤：
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材，称量后粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入黄芪质量0.2～0.8倍、体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为30～40℃下浸润20～40分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入黄芪质量3～6倍的1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力0.8～1.6Mpa，温度30～60℃条件下，萃取20～40分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.04～0.1Mpa压力下，萃取剂蒸发回收，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程2～6次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.05～0.09Mpa，温度为50～80℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥后所得粉末即为黄芪提取物Ⅰ，其中黄芪甲苷含量为7.3～9.5%，含水量≤5%，黄芪甲苷收率≥90%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）中制得的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量2～4%的食品级氢氧化钠，碱化2～4小时，用无机酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的大孔树脂柱，上柱速度为1～3 BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3～5 BV/H，当流出液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为1～3%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱1～2BV；
f.30～40%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.60～70%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为2～4 BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的60～70%的醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥后所得粉末即为黄芪提取物Ⅱ，其中黄芪甲苷含量为34.5～39.8%，含水量≤5%，黄芪甲苷收率≥86.7%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的60～70%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为5～15%，在温度为3～8℃条件下静置3～5天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，即得黄芪提取物Ⅲ，其中黄芪甲苷含量≥92%，黄芪甲苷收率≥82.7%。
本发明中所述步骤（5）a.中所述的无机酸为盐酸或硝酸或硫酸或磷酸中的任意一种；使用的大孔树脂柱为AB-8型或D101型或LS-300型大孔树脂柱。
本发明所制备的黄芪提取物有三种规格，即黄芪提取物Ⅰ、黄芪提取物Ⅱ、黄芪提取物Ⅲ，其中黄芪提取物Ⅰ中黄芪甲苷含量为5～10%，含水量≤5%；黄芪提取物Ⅱ中黄芪甲苷含量为30～40%，含水量≤5%；黄芪提取物Ⅲ中黄芪甲苷含量为90%以上，含水量＜2%，生产时可根据客户需求，制备不同含量的黄芪提取物后制成符合要求的产品。由于本发明是采用亚临界流体1,1,1,2-四氟乙烷（即R134a），在亚临界条件下用乙醇做夹带剂提取药材中的黄芪甲苷有效成分，所提取出的黄芪提取液杂质含量低，大大简化了后续纯化精制得到更高含量黄芪甲苷的生产工艺，而且降低了高含量黄芪甲苷的生产成本，又提供了制备高含量黄芪甲苷的大规模生产的工艺方法，为大力推进黄芪提取物医药用途拓展、新药研发等提供了有利条件，具有极高的经济效益和社会效益。
本发明以亚临界溶剂1,1,1,2-四氟乙烷（即R134a）为萃取剂，体积分数≥95%的食用酒精为夹带剂，实现对黄芪有效成分尤其是黄芪甲苷的提取，并在分离釜中完成夹带剂与萃取剂的分离，所得分离液经浓缩纯化干燥即可得黄芪提取物；其中气态R134a经压缩机压缩、冷凝回收后，可反复循环使用，提取过程是一个密闭的环境，无溶剂损失。
本发明中所使用的萃取剂为1,1,1,2-四氟乙烷 (R134a)，它具有以下优点：（1）R134a是惰性溶剂，不易燃，无色，无毒，无味，无溶剂残留，对酸碱稳定，20℃条件下，在水中的溶解度仅为1500ppm；(2) R134a属于中等极性物质，具有弱可极化性和酸碱性；（3）R134a为中极性溶剂，用于萃取挥发油、黄酮苷元、皂苷苷元效果较好。而本次萃取对象为黄芪甲苷，为极性较大的化合物，所以需要使用强极性物质来调节混合萃取剂的极性，以提高萃取效果。而本发明中是选用体积分数≥95%乙醇(食用酒精)做夹带剂，它具有以下优点：(1)能与R134a互溶，从而调节溶剂极性，以实现对中高极性有效成分的萃取。(2)乙醇是我们最常规的溶剂，广泛用于食品行业之中。（3）安全性更高：相比乙酸乙酯、丙酮、甲醇，有高全性优势。
本发明中没有选用丙烷、丁烷做萃取剂的原因是他们均为易燃物质，且极性较低，不容易被极化，因而不适合做黄芪甲苷的萃取剂。而之所以不选用六氟化硫做萃取剂，是因为它极性较低，同样不易被极化，用来萃取黄芪甲苷效率较低。
本发明与现有技术相比，具有以下优点：
1.提供了分级制备黄芪提取物的方法：本发明首次提出在一套生产工艺中分级制备黄芪甲苷含量不同的黄芪提取物，并借助亚临界萃取技术提取出的黄芪提取液杂质成分少，纯度高，为大规模生产高含量黄芪甲苷提供了前提条件，为黄芪提取物更深层次的开发利用提供了可能，也为能同时适应不同市场需求开创了先河。
2.提取物制备周期短：传统黄芪提取物制备时，在提取之后还需经过浓缩、醇沉、二次浓缩等步骤，从而导致提取时间长，一个生产周期大约需一个星期左右，而亚临界流体萃取是将提取与浓缩同步进行，因为R134a在常压下为气体，提取完成后可以使用压缩机短时间内实现提取液的同步浓缩。
3.高压提取效率高：常压提取条件下，溶剂的渗透作用较慢，对有效成分萃取率较低；而亚临界提取方法在3-20个大气压下进行提取，在高压条件下，提取溶剂能快速进入细胞内，对黄芪有效成分进行提取。
4.提取纯度高：由于黄芪为根茎类药材，其中含有大量的淀粉、蛋白质及鞣质等杂质成分，因此常规提取物杂质含量较多；而亚临界流体提取是在高压条件下，以液态R134a为萃取剂，以乙醇作夹带剂，对黄芪中的有效成分进行提取，提取出来的提取物杂质成分少，纯度较高。
5.生产成本低：由于本发明采用亚临界萃取技术，提取出的黄芪提取液杂质成分少，纯度较高，为大规模生产高含量黄芪甲苷提供了前提条件，并且后续纯化精制过程简单，极大的降低了高含量黄芪甲苷的生产成本。
附图说明
图1是本发明的工艺流程方框图。
具体实施方式
下面结合附图1及具体实施例对本发明方法进行进一步解释，但是它们不能限制本发明。
实施例1
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成30～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入50L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为30℃下浸润30分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入500L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力1Mpa，温度40℃条件下，萃取30分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.04Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程4次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.6Mpa，温度为60℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ3.85kg，其中黄芪甲苷含量为9.5%，含水量3.5%，黄芪甲苷收率为91.50%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量3%的食品级氢氧化钠，碱化4小时，用盐酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的AB-8型树脂柱，上柱速度为2BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3 BV/H，当流出液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为2%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为2 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
f.30%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.70%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的70%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥后得黄芪提取物Ⅱ0.885kg，其中黄芪甲苷含量为39.2%，含水量2.6%，黄芪甲苷收率为86.75%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的70%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为10%，在温度为5℃条件下静置4天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.348kg，其中黄芪甲苷含量为96.3%，黄芪甲苷收率为83.75%。
其中，黄芪甲苷收率 =（黄芪提取物质量×提取物中黄芪甲苷含量）÷（黄芪药材质量×药材中黄芪甲苷含量）×100%，下同。
本发明中制得的不同含量的黄芪提取物，根据市场需求，分别制备成市场所需的标准规格的产品出售。
实施例2
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入20L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为50℃下浸润60分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入600L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力1.2Mpa，温度40℃条件下，萃取40分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.04Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程3次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.09Mpa，温度为50℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ4.27kg，其中黄芪甲苷含量为8.5%，含水量3.1%，黄芪甲苷收率为90.75%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量1%的食品级氢氧化钠，碱化4小时，用盐酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的AB-8型树脂柱，上柱速度为1BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为4 BV/H，当流出液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为2%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为3 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3BV/H，洗脱1BV；
f.20%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.80%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的80%醇洗液减压浓缩后置于雾化干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ0.945kg，其中黄芪甲苷含量为36.3%，含水量2.9%，黄芪甲苷收率为85.75%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的80%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为5%，在温度为10℃条件下静置5天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.359kg，其中黄芪甲苷含量为92.2%，黄芪甲苷收率为82.75%。
实施例3
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入150L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为30℃下浸润20分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入400L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力0.8Mpa，温度40℃条件下，萃取40分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.08Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程5次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.08Mpa，温度为70℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ5.03kg，其中黄芪甲苷含量为7.3%，含水量3.3%，黄芪甲苷收率为91.75%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a. 将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量3%的食品级氢氧化钠，碱化5小时，用盐酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的AB-8型树脂柱，上柱速度为3BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为5 BV/H，当醇洗液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为3%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为3 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为4BV/H，洗脱2BV；
f.40%醇洗：洗脱速度为4BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.60%醇洗：洗脱速度为4BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为4BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）收集的60%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ0.989kg，其中黄芪甲苷含量为35.5%，含水量2.7%，黄芪甲苷收率为87.75%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的60%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为8%，在温度为6℃条件下静置5天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.345kg，其中黄芪甲苷含量为94.6%，黄芪甲苷收率为81.50%。
实施例4
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成20～50目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入80L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为40℃下浸润10分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入500L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力1.6Mpa，温度50℃条件下，萃取30分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.06Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程5次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.06Mpa，温度为60℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ4.46kg，其中黄芪甲苷含量为8.5%，含水量3.6%，黄芪甲苷收率为94.75%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量3%的食品级氢氧化钠，碱化3小时，用硫酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的AB-8型树脂柱，上柱速度为2 BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3 BV/H，当醇洗液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为2%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为2 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
f.45%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.65%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）收集的65%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ0.877kg，其中黄芪甲苷含量为39.8%，含水量2.2%，黄芪甲苷收率为87.25%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的65%醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为12%，在温度为2℃条件下静置3天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.344kg，其中黄芪甲苷含量为96.1%，黄芪甲苷收率为82.75%。
实施例5
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入50L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为30℃下浸润30分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入300L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力1.0Mpa，温度30℃条件下，萃取20分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.1Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程4次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.09Mpa，温度为70℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ4.21kg，其中黄芪甲苷含量为8.6%，含水量3.5%，黄芪甲苷收率为90.5%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a. 将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量2%的食品级氢氧化钠，碱化6小时，用盐酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的D101型树脂柱，上柱速度为1BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为5 BV/H，当醇洗液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为3%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为4 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为3BV/H，洗脱2BV；
f.20%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.80%醇洗：洗脱速度为4BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的80%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ1.006kg，其中黄芪甲苷含量为34.9%，含水量2.8%，黄芪甲苷收率为87.75%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的80%醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为15%，在温度为5℃条件下静置3天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.355kg，其中黄芪甲苷含量为93.7%，黄芪甲苷收率为83.25%。
实施例6
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入110L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为20℃下浸润40分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入800L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力0.3Mpa，温度60℃条件下，萃取50分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.05Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液；重复上述萃取过程2次，合并每次黄芪提取液；
（4）减压浓缩：将步骤（3）中得到黄芪提取液在压力为0.06Mpa，温度为60℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ4.10kg，其中黄芪甲苷含量为8.9%，含水量3.9%，黄芪甲苷收率为91.25%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a. 将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量4%的食品级氢氧化钠，碱化1小时，用硝酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的LS-300型树脂柱，上柱速度为3BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为4 BV/H，当醇洗液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为1%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为3 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为1BV/H，洗脱2BV；
f.50%醇洗：洗脱速度为3BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.60%醇洗：洗脱速度为1BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为1BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）中收集的60%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ1.063kg，其中黄芪甲苷含量为33.2%，含水量2.3%，黄芪甲苷收率为88.25%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的60%醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为8%，在温度为7℃条件下静置4天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.360kg，其中黄芪甲苷含量为92.8%，黄芪甲苷收率为83.5%。
实施例7
（1）原材料处理：取干燥的黄芪药材100kg，检测其中黄芪甲苷含量为0.4%，将其粉碎成10～60目的粗粉，放入100目滤袋中，再将滤袋装入亚临界萃取釜的物料栏中；
（2）原材料浸润：在萃取釜中加入200L体积分数≥95%的食用酒精做夹带剂，在温度为20℃下浸润50分钟；
（3）亚临界萃取：在萃取釜中加入700L 1,1,1,2-四氟乙烷做萃取剂，在压力1.4Mpa，温度20℃条件下，萃取60分钟，将萃取液放入分离釜中，在0.07Mpa压力下，萃取剂蒸发回收套用，余液即为黄芪提取液，重复上述萃取过程6次，合并每次黄芪提取液；
（4）分离：将步骤（3）中得到的黄芪提取液在压力为0.07Mpa，温度为60℃条件下减压浓缩至浓缩液中乙醇含量＜5%，得浓缩液；
（5）制备黄芪提取物Ⅰ：将步骤（4）中得到的浓缩液置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅰ4.85kg，其中黄芪甲苷含量为7.8%，含水量3.2%，黄芪甲苷收率为94.5%；或
制备黄芪提取物Ⅱ，步骤如下：
a.将步骤（4）得到的浓缩液碱化：向浓缩液中加入浓缩液质量3%的食品级氢氧化钠，碱化4小时，用磷酸调节浓缩液pH至中性；
b.上柱：将步骤（a）碱化后的浓缩液上已活化处理的D101型树脂柱，上柱速度为3BV/H，直至浓缩液全部上柱；
c.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为4 BV/H，当醇洗液从混浊变为无色时，停止水洗；
d.碱洗：用质量分数为3%的氢氧化钠溶液顶洗树脂柱，洗脱速度为2 BV/H，洗脱2BV；
e.水洗：以纯水顶洗树脂柱，洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
f.35%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止；
g.75%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱至流出液为浅黄色为止，收集醇洗液；
h.95%醇洗：洗脱速度为2BV/H，洗脱2BV；
i.将步骤（g）收集的75%醇洗液减压浓缩后置于喷雾干燥器中，设置雾化器转速40MHz,蠕动泵进料速度10～20Hz,旋风分离压差0.6MPa,药液相对密度为1.05～1.10，进风口温度为140～165℃，出风口温度为80～90℃，干燥得黄芪提取物Ⅱ1.036kg，其中黄芪甲苷含量为32.9%，含水量2.2%，黄芪甲苷收率为85.25%；或
制备黄芪提取物Ⅲ：将步骤（g）中收集的75%的醇洗液减压浓缩至相对密度为1.3～1.4，乙醇含量为6%，在温度为5℃条件下静置4天，水洗过滤后将结晶物在70℃条件下烘干至含水量＜2%后粉碎，得黄芪提取物Ⅲ0.356kg，其中黄芪甲苷含量为91.9%，黄芪甲苷收率为81.75%。