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1、(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201410011742.4 (22)申请日 2014.01.10 A01G 7/00(2006.01) (73)专利权人 浙江师范大学 地址 321004 浙江省金华市北山路 299 号 (72)发明人 金海如 蒋立琴 杨炯 赵鹏程 项主 周易 周端頊 (74)专利代理机构 杭州浙科专利事务所 ( 普通 合伙 ) 33213 代理人 吴秉中 US 005085682 A,1992.02.04, CN 102057833 A,2011.05.18, CN 1843073 A,2006.10.11, 王林闯等 .AM 真菌对不同栽培基质甜椒。
2、生长 及产量品质的影响 .中国蔬菜 .2010,( 第 16 期 ),32-37. 王林闯等 .AM 真菌对不同栽培基质甜椒生长 及产量品质的影响 .中国蔬菜 .2010,( 第 16 期 ),32-37. 赵建波等 .AM 真菌对油菜的侵染及增产潜力 研究 .西南大学学报 (自然科学版) .2011, 第 33 卷 ( 第 4 期 ), 田萌萌等 . 葡萄糖、 根浸出液对丛枝菌根真 菌吸收不同外源氮产生精氨酸的影响 .微生物 学通报 .2011, 第 38 卷 ( 第 1 期 ),14-20. (54) 发明名称 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法 (57) 摘要 AM 真菌在提高作物产量。
3、中的应用方法, 属于 农业微生物应用技术领域。该应用方法包括 : 1) 将作物种子种入培养盆中 ; 2) 将 AM 真菌接种于作 物种子表面 ; 3) 种子播种出苗后第 10 15 天, 将 AM 真菌侵染的作物幼苗移栽至试验田 ; 4) 至试验 田 15 20 天后, 在每株幼苗根部施加复合肥, 此 后注意保墒, 适当起垄培土 ; 5) 待作物成熟后, 收 获作物。 本发明通过加入AM真菌与作物根系建立 共生体, 扩张了作物根系的吸收面积, 具有充分利 用土壤中的无机和有机肥, 降低肥料的流失, 减少 环境污染、 操作方便、 农业成本低、 修复板结土壤 等优点。 并且通过对比试验可知, 本发。
4、明可以显著 提高作物的产量。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 李勇 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书4页 CN 103782817 B 2016.03.23 CN 103782817 B 1/1 页 2 1.AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于包括以下步骤 : 1) 将作物种子种入培养盆中, 所述的培养盆中培养基质由泥土 15 20 重量份和草木 灰 0.5 3 重量份混合而成 ; 2) 将 AM 真菌接种于作物种子表面, 接种量为 10 20 个孢子 / 每粒, 同时每粒作物种 子喷洒 0.5 2.0mL AM 真。
5、菌孢子萌发及菌丝生长促进剂, 该促进剂为胡萝卜根分泌液 ; 3) 种子播种出苗后第 10 15 天, 将 AM 真菌侵染的作物幼苗移栽至试验田 ; 4) 至试验田 15 20 天后, 在每株幼苗根部施加 5 10g 复合肥, 采用圈施, 施肥时先 开沟, 不要伤及植物根系, 沟深 5 10cm, 施肥后覆土, 所述的复合肥为氮磷钾混合肥, 其中 氮磷钾比例为 10 20:10 15:8 15, 此后注意保墒, 适当起垄培土 ; 5) 待作物成熟后, 收获作物。 2.如权利要求1所述的AM真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 1) 中培养基质由泥土 16 19 重量份和草木灰 。
6、1 2 重量份混合而成。 3.如权利要求1所述的AM真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 2) 中接种量为 12 18 个孢子 / 每粒。 权 利 要 求 书 CN 103782817 B 2 1/4 页 3 AM真菌在提高作物产量中的应用方法 技术领域 0001 本发明属于农业微生物应用技术领域, 具体涉及 AM 真菌在提高作物产量中的应 用及应用方法。 背景技术 0002 施用肥料是提高植物产量的有效途径之一, 然而植物对土壤中大部分有机肥和无 机肥却不能充分吸收利用, 大部分农田都存在施肥过剩的现象, 长此以往, 土壤出现肥效下 降、 肥料利用率降低的情况。 0003 。
7、随着社会的发展, 生态农业和绿色食品越来越受到人们的关注。土壤中的菌根真 菌菌丝能与高等植物营养根系形成的一种互惠共生体, 在缺矿物质和氮磷等的土壤上, 能 将庞大的根外菌丝网分布到根外更加广泛的土壤空间, 借此扩大对土壤养分的吸收面积从 而增强宿主植物吸营养物质的能力, 改善植物营养水平, 是一种十分环保健康的绿色真菌 肥料。 0004 本发明采用的 AM 真菌是丛枝菌根真菌的简称, 它能与玉米和绿豆的根系共生而 形成菌根结构 ; 菌根化的玉米和绿豆可以改善植物磷素、 氮素和矿质营养等。 多年的田间试 验和应用表明在促进植物生长上有重要作用, 可以作为一种生物肥料提高农作物产量, 培 肥地力。
8、, 而且还可减少化肥用量, 将城市的废弃物再生利用, 减少环境污染。 发明内容 0005 针对现有技术存在的问题, 本发明的目的在于设计提供 AM 真菌在提高作物产量 中的应用及应用方法的技术方案, 该方法操作简单、 可行性强、 减少环境污染、 减少化肥使 用量。 0006 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于包括以下步骤 : 0007 1) 将作物种子种入培养盆中, 所述的培养盆中培养基质由泥土 15 20 重量份和 草木灰 0.5 3 重量份混合而成 ; 0008 2) 将 AM 真菌接种于作物种子表面, 接种量为 10 20 个孢子 / 每粒, 同时每粒作 物种子喷。
9、洒 0.5 2.0mL AM 真菌孢子萌发及菌丝生长促进剂, 该促进剂为胡萝卜根分泌 液 ; 0009 3) 种子播种出苗后第 10 15 天, 将 AM 真菌侵染的作物幼苗移栽至试验田 ; 0010 4) 至试验田 15 20 天后, 在每株幼苗根部施加复合肥, 此后注意保墒, 适当起垄 培土 ; 0011 5) 待作物成熟后, 收获作物。 0012 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 1) 中培养 基质由泥土 16 19 重量份和草木灰 1 2 重量份混合而成。 0013 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 2) 中接种 。
10、量为 12 18 个孢子 / 每粒。 说 明 书 CN 103782817 B 3 2/4 页 4 0014 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 4) 中复合 肥为氮磷钾混合肥, 其中氮磷钾比例为 10 20:10 15:8 15。 0015 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用方法, 其特征在于所述的步骤 4) 中在每 株幼苗根部施加 5 10g 复合肥, 采用环状实施、 圈施, 施肥时先开沟, 不要伤及植物根系, 沟深 5 10cm, 施肥后覆土。 0016 所述的 AM 真菌在提高作物产量中的应用。 0017 本发明中 AM 真菌通过公开号 CN10。
11、1565689A 的发明专利公开的方法培养得到。 0018 本发明通过加入 AM 真菌与作物根系建立共生体, 扩张了作物根系的吸收面积, 具 有充分利用土壤中的无机和有机肥, 降低肥料的流失, 减少环境污染、 操作方便、 农业成本 低、 修复板结土壤等优点。并且通过对比试验可知, 本发明可以显著提高作物的产量。本发 明适用作物为高粱、 绿豆、 玉米、 大豆、 烟草、 三七、 土豆、 辣椒、 棉花、 西瓜、 草莓等。 具体实施方式 0019 以下结合实施例来进一步说明本发明。 0020 实施例 1 : 0021 1) 将绿豆种子种入培养盆中, 所述的培养盆中培养基质由泥土 19 重量份和草木 灰。
12、 1 重量份混合而成 ; 0022 2) 将 AM 真菌接种于绿豆种子表面, 接种量为 10 20 个孢子 / 每粒, 同时每粒作 物种子喷洒 1mL AM 真菌孢子萌发及菌丝生长促进剂, 该促进剂为胡萝卜根分泌液 ; 0023 3) 绿豆种子播种出苗后第 10 天, 将 AM 真菌侵染的绿豆幼苗移栽至试验田 ; 0024 4) 至试验田 15 天后, 在每株幼苗根部施加 5g 复合肥, 此后注意保墒, 适当起垄培 土, 采用环状实施、 圈施, 施肥时先开沟, 不要伤及植物根系, 沟深 5 10cm, 施肥后覆土, 复 合肥为氮磷钾混合肥, 其中氮磷钾比例为 10 20:10 15:8 15 。
13、; 0025 5) 2 个月后, 收获作物。 0026 胡萝卜根分泌液 : 将毛根农杆菌质粒 DNA 转化的胡萝卜根的培养在固体培养基的 培养皿中 (该固体培养基含有 : 硫酸镁 720-740mg/L、 硝酸钾 70-90 mg/L、 氯化钾 55-75 mg/ L、 硝酸钙270-290mg/L、 EDTA铁钠盐5-12mg/L、 肌醇 40-60 mg/L、 硫酸锰 0.01-0.08 mg/L、 硫酸铜 0.01-0.03 mg/L、 硼酸 0.3-0.6 mg/L、 硫酸锌 0.1-0.4 mg/L、 碘化钾 0.01-0.03mg/ L、 钼 酸 钠 0.01-0.03 mg/L、。
14、 氯 化 钴 0.01-0.04 mg/L、 维 生 素 B0.1-0.3mg/L、 咇 哆 醇 0.1-0.3mg/L、 烟酸 0.2-0.8 mg/L、 蔗糖 7500-8500mg/L、 葡萄糖 4500-5500mg/L 和植物胶 3500-4500mg/L) , 一个月后, 小心将根移到含有 3% 蔗糖的液体培养基中 (该液体培养基含 有 : 硫酸镁 720-740mg/L、 硝酸钾 70-90 mg/L、 氯化钾 55-75 mg/L、 硝酸钙 270-290mg/L、 EDTA铁钠盐5-12mg/L、 肌醇 40-60 mg/L、 硫酸锰 0.01-0.08 mg/L、 硫酸铜 。
15、0.01-0.03 mg/ L、 硼酸0.3-0.6 mg/L、 硫酸锌0.1-0.4 mg/L、 碘化钾0.01-0.03mg/L、 钼酸钠0.01-0.03 mg/ L、 氯化钴 0.01-0.04 mg/L、 维生素 B0.1-0.3mg/L、 咇哆醇 0.1-0.3mg/L、 烟酸 0.2-0.8 mg/ L 和葡萄糖 4500-5500mg/L) , 24生长 4 周 , 无菌环境下用去离子水清洗 2 次 , 随后在 无菌去离子水中 24生长 1 周 , 收集根浸出液, 即得到胡萝卜根分泌液。 0027 实施例 1 中育种移栽 60 天后的绿豆的性状与只施加复合肥育种移栽 60 天后。
16、的绿 豆进行比较, 结果见表 1 : 说 明 书 CN 103782817 B 4 3/4 页 5 0028 表 1 AM 真菌生物肥料对绿豆生长及磷的影响 0029 0030 实施例 2 : 0031 1) 将东糯 4 玉米或东甜玉米种子种入培养盆中, 所述的培养盆中培养基质由泥土 15 重量份和草木灰 3 重量份混合而成 ; 0032 2) 将 AM 真菌接种于东糯 4 玉米或东甜玉米种子表面, 接种量为 12 18 个孢子 / 每粒, 同时每粒作物种子喷洒 0.5 或 2.0mL AM 真菌孢子萌发及菌丝生长促进剂, 该促进剂 为胡萝卜根分泌液 ; 0033 3) 东糯 4 玉米或东甜玉。
17、米种子播种出苗后第 10 15 天, 将 AM 菌侵染的东糯 4 玉 米或东甜玉米幼苗移栽至试验田 ; 0034 4) 至试验田 15 20 天后, 在每株幼苗根部施加 10g 复合肥, 此后注意保墒, 适当 起垄培土, 采用环状实施、 圈施, 施肥时先开沟, 不要伤及植物根系, 沟深 5 10cm, 施肥后 覆土, 复合肥为氮磷钾混合肥, 其中氮磷钾比例为 10 20:10 15:8 15 ; 0035 5) 2 个月后, 收获作物。 0036 实施例 2 中育种移栽 60 天后的东糯 4 玉米或东甜玉米的性状与只施加复合肥育 种移栽 60 天后的东糯 4 玉米或东甜玉米进行比较, 结果见表。
18、 2 和 3 : 0037 表 2 AM 真菌生物肥料对东糯 4 玉米和东甜玉米生长及产量影响 0038 0039 表 3 AM 真菌生物肥料对东糯 4 玉米生长影响 0040 说 明 书 CN 103782817 B 5 4/4 页 6 0041 从以上实施例可以看出, 施加 AM 真菌所育的玉米和绿豆移栽培养 60 天后, 绿豆 的株高比未加 AM 菌的绿豆降低了 2.05%, 有效提高绿豆的抗倒伏力 ; 同时, 其叶长、 叶宽、 磷 含量以及吸光度值比未加 AM 菌的绿豆提高了 5.26%、 1.97%、 40.22% 和 48.67% ; 施加 AM 真 菌比未加AM真菌的的东糯4和东。
19、甜玉米在玉米棒质量、 总氮含量和干重糖含量明显提高了 7.65% 和 9.14%、 16.84% 和 5.73%、 6.15% 和 24.71% ; 其中施加 AM 真菌的东糯 4 玉米的茎叶 质量比未加 AM 菌的东糯 4 玉米明显提高了 18.03% ; 实验结果表明, 施加 AM 真菌的绿豆和 玉米的茎、 叶、 总氮总磷含量和玉米棒质量明显优于未加 AM 真菌的绿豆和玉米。 0042 通过试验田种植绿豆和玉米的实验结果表明, 加入 AM 真菌比传统直接施加肥料 相比, 施加 AM 真菌具有充分利用肥料, 提高作物产量, 减少肥料流失的同时可以有效降低 因农业施肥过量而造成的海洋湖泊的富营养化污染。 0043 如将实施例 1 和 2 中的作物改成大豆、 烟草、 三七、 土豆、 辣椒、 棉花、 西瓜、 草莓等 其它作物, 最后也能达到与实施例 1 和 2 相似的技术效果。 说 明 书 CN 103782817 B 6 。