技术领域
本发明属于中药制备技术领域，具体涉及一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用。
背景技术
高血压病、高血压病导致的靶器官损害，如脑血管病、高血压性心脏病、高血压性肾损害，临床主要表现为头昏、眩晕，眠差、心烦，口干口苦，面红目赤，大便干结，尿浊或有泡沫，舌暗、苔薄黄，脉细弦者。本系列症状临床内科最为常见，且部份患者不能用一西医病名而定，甚至部份归入心理性疾病，严重者可进行性发展出现器质性疾病。西医对于控制高血压有很多类药物，但其症状改善效果并不尽人意，部分血压虽已控制正常但上述症状仍然持续存在，且大部分药物价格昂贵。本中药组合物长期临床使用未发现副反应，并发现对于高血压、高血压早期肾损害有肾脏保护作用。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种药物组合物；第二目的在于提供所述药物组合物的制备方法；第三目的在于提供所述药物组合物的制剂；第四目的在于提供所述药物组合物的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，包括原料药重量份桑寄生15~24份、黄芪15~24份、制首乌10~15份、生白芍8~15份、炒杜仲12~18份、当归8~12份、川芎3~8份、丹参8~12份、天麻8~12份、钩藤15~20份、夜交藤15~20份份，经提取、浓缩、干燥后得到。
本发明的第二目的是这样实现的，具体为：
A：钩藤加乙醇提取、浓缩、干燥至干膏，滤渣备用；
B：秫米粉碎成细粉，备用；
C：剩余的秫米和钩藤药渣与剩余原料药混合，加水提取、滤过、浓缩至稠膏，干燥至干膏后加入钩藤干膏，混匀，粉碎成细粉即得所述药物组合物。
本发明的第三目的是这样实现的，在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成片剂、散剂、口服液、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。
本发明的第四目的是这样实现的，所述药物组合物在制备高高血压病、高血压病导致的靶器官损害，如脑血管病、高血压性心脏病、高血压性肾损害中的应用。
本发明中所述药物组合物包括桑寄生、黄芪、制首乌、炒杜仲、生白芍、当归、川芎、丹参、天麻、钩藤、夜交藤、黄柏、火麻仁、秫米、炒谷芽、炒麦芽、三七须根。方中桑寄生、黄芪为君药，补肾填精，养阴益气；制首乌、炒杜仲、生白芍益肾柔肝，当归、川芎、丹参（彝药：呆乃色）养血行血活血，天麻、钩藤、夜交藤祛肝风化痰浊，三组药共为臣药，达养肝阴平肝阳、行气血化瘀滞、祛风痰宁心神之力；秫米、炒谷芽、炒麦芽、黄柏为佐药，可顾脾胃、清虚烦；火麻仁、三七须根（壮药：三七绒根）为使药，调和诸药，使全方补而不滞。全方共奏填精益气、活血行滞、宁心安神、健脾化浊之效。广泛适用于高血压病、高血压病导致的靶器官损害，如脑血管病、高血压性心脏病、高血压性肾损害，肝肾不足，阴虚则阳盛，气虚则血滞之证候，表现为头昏、眩晕，眠差、心烦，口干口苦，面红目赤，大便干结，尿浊或有泡沫，舌暗、苔薄黄，脉细弦者。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的药物组合物，包括原料药重量份桑寄生15~24份、黄芪15~24份、制首乌10~15份、生白芍8~15份、炒杜仲12~18份、当归8~12份、川芎3~8份、丹参8~12份、天麻8~12份、钩藤15~20份、夜交藤15~20份份经提取、浓缩、干燥后得到。
所述的原料药还包括秫米15~20份、炒谷芽12~18份、炒麦芽12~18份、黄柏3~8份。
所述的原料药还包括火麻仁8~12份、三七须根3~8份。
所述的药物组合物的制备方法，包括提取、浓缩、干燥步骤，具体为：
A：钩藤加乙醇提取、浓缩、干燥至干膏，滤渣备用；
B：秫米粉碎成细粉，备用；
C：剩余的秫米和钩藤药渣与剩余原料药混合，加水提取、滤过、浓缩至稠膏，干燥至干膏后加入钩藤干膏，混匀，粉碎成细粉即得所述药物组合物。
药物组合物的制剂为在所述的药物组合物中加入药学上接受的辅料制备成片剂、散剂、口服液、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。
所述药物组合物在制备高高血压病、高血压病导致的靶器官损害，如脑血管病、高血压性心脏病、高血压性肾损害中的应用。
下面以具体实施案例对本发明做进一步说明：
实施例1
准备桑寄生15~24份、黄芪15~24份、制首乌10~15份、生白芍8~15份、炒杜仲12~18份、当归8~12份、川芎3~8份、丹参8~12份、天麻8~12份、钩藤15~20份、夜交藤15~20份。钩藤采用乙醇提取干燥至干膏，滤渣备用；秫米粉碎成细粉，备用；剩余的秫米和钩藤药渣与其余九味混合，加5~10倍量水提取2~4次，每次1~2小时，滤过，浓缩至稠膏。采用真空箱式干燥法干燥至干膏后加入钩藤干膏，混匀，粉碎成细粉即得目标药物组合物。
实施例2
准备桑寄生15~24份、黄芪15~24份、制首乌10~15份、生白芍8~15份、炒杜仲12~18份、当归8~12份、川芎3~8份、丹参8~12份、天麻8~12份、钩藤15~20份、夜交藤15~20份，秫米15~20份、炒谷芽12~18份、炒麦芽12~18份、黄柏3~8份。钩藤采用乙醇提取干燥至干膏，滤渣备用；秫米粉碎成细粉，备用；剩余的秫米和钩藤药渣与其余十三味混合，加5~10倍量水提取2~4次，每次1~2小时，滤过，浓缩至稠膏。采用真空箱式干燥法干燥至干膏后加入钩藤干膏，混匀，粉碎成细粉即得目标药物组合物。
实施例3
准备桑寄生15~24份、黄芪15~24份、制首乌10~15份、生白芍8~15份、炒杜仲12~18份、当归8~12份、川芎3~8份、丹参8~12份、天麻8~12份、钩藤15~20份、夜交藤15~20份，秫米15~20份、炒谷芽12~18份、炒麦芽12~18份、黄柏3~8份，火麻仁8~12份、三七须根3~8份。钩藤采用乙醇提取干燥至干膏，滤渣备用；秫米粉碎成细粉，备用；剩余的秫米和钩藤药渣与其余十五味混合，加5~10倍量水提取2~4次，每次1~2小时，滤过，浓缩至稠膏。采用真空箱式干燥法干燥至干膏后加入钩藤干膏，混匀，粉碎成细粉即得目标药物组合物。
实施例4
取实施例1、2或3制备的药物组合物装袋成为散剂。
实施例5
取实施例2制备的药物组合物装袋成为散剂。
实施例6
取实施例3制备的药物组合物装袋成为散剂。
实施例7
取实施例1制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成口服液。
实施例8
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成口服液。
实施例9
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成口服液。
实施例10
取实施例1制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。
实施例11
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。
实施例12
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。
实施例13
取实施例1 制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。
实施例14
取实施例2 制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。
实施例15
取实施例3 制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。
实施例16
取实施例1制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。
实施例17
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。
实施例18
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。
实施例19
取实施例1制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂。
实施例20
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂。
实施例21
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂
试验例
以实施例3的药物组合物（以下简称桑芪首乌片）进行试验，其结果如下：
一、急性毒性试验
1实验材料
1.1供试品
桑芪首乌片（桑寄生、黄芪、制首乌、炒杜仲、生白芍等中药组成），由昆明市中医医院提供。配制方法：取一定量的桑芪首乌片，加水（量）研磨均匀，根据实际情况药物用于灌胃的最高可配置浓度为1.5275g原生药/ml(1.222g原生药/20g /d，20g小鼠灌胃可承受的最大体积为每10g体重0.4ml）。
1.2溶剂对照 0.5 %羧甲基纤维素钠溶液（上海展云化工有限公司）
1.3受试动物
受试动物：ICR小鼠35只（由昆明医科大学实验动物中心提供），动物许可证号：SCXK(滇2011-0004）。清洁级，体重24-28g，自由饮水、进食。实验前在动物实验室适应性观察饲养一周。本动物观察室温度20～23℃，相对湿度50～60%。
1.4主要仪器设备
YP2001电子天平（上海精密仪器表有限公司）。
2实验方法
2.1预实验
在进行正式实验之前，首先进行预实验，以便为正式试验提供依据。将15只ICR雄性小鼠随机分为3组，雄性，每组5只，分别为3倍生药量（0.3666g/20g），6倍生药量（0.7332g/20g），9倍生药量（1.0998g/20g），灌胃前禁食、不禁水12h。给药后常规饲养，观察3d。结果：无小鼠死亡，提示毒性很低，无法测出该制剂的LD50。故，本实验采用灌胃最高浓度（1.222g原生药/20g/d及小鼠灌胃可承受的最大体积（每10g体重0.4ml）进行单日最大给药量的测定。
2.2正式实验
取ICR小鼠20只，雌雄各半，把小鼠配对随机分为2组，给药组（桑芪首乌片1.222g/d）和对照组（生盐水），每组10只，禁食、不禁水，按0.8ml/20g/d给予受试样品，24小时内分4次给药，给药后连续观察14d。
2.3观察指标
2.3.1小鼠一般情况和体重变化：
记录小鼠的外观、行为、饮食、活动、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应（中毒反应的症状、严重程度、起始时间、持续时间、是否可逆）等。实验前后各称每只小鼠体重1次，记录动物的体重变化。
2.3.2小鼠主要脏器和组织的变化：
于14d后颈椎脱臼法处死小鼠，大体解剖，肉眼观察其心、肝、脾、肺、肾、肠等重要脏器和组织的体积、颜色、质地等改变，当发现有变化时，则对改变的器官进行组织病理学检查。
2.4统计学分析
使用spss统计软件进行方差分析，检验水准α=0.05。
3实验结果
3.1小鼠体重增长情况比较
给药14d后两组体重增重比较未见显著性差异。结果见表1
表1 小鼠体重增长情况（ s）组别n体重（g）对照组105.17±1.92给药组107.81±1.81
经检验，小鼠体重增长组间差异没有统计学意义，P>0.05。
3.2对小鼠一般情况比较
在整个观察期间，两组小鼠皮毛光滑、反应机敏、活动自如，其外观、行为、饮食、活动、分泌物、排泄物等情况均未见异常，无一只小鼠死亡，亦未发现步态、睡眠异常及震颤、痉挛等神经毒性反应。呼吸平稳，无呕吐，粪便形状正常。
3.3对小鼠主要脏器和组织的影响
14d后处死小鼠，两组小鼠大体解剖，心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等主要脏器和组织未见不良病变相比无明显差异。
3.4小鼠口服给药的单日最大给药量
按小鼠可灌胃体积（0.4mL/10g）灌胃给药，根据配置的实际情况得出桑芪首乌片单日最大给药浓度为1.5275g原生药量/ml（1.222g原生药量/20g/d=61.1 g原生药/kg/d），相当于临床成人日用量的92.72倍。（成人每日口服生药量为46.15g，成人体重按 70kg计，折合原生药0.659g /kg/d）。
4试验小结
以小鼠最大浓度1.5275g原生药/ml及小鼠可灌胃体积0.8ml/20g，24小时内分4次给药，给药后连续观察14d，动物未发生死亡，体重有所增长，观察未见明显毒性反应。
小鼠口服给药的单日最大给药量61.1 g原生药量/kg/d，相当于临床人用量的92.72倍未见毒性反应。
5结论
桑芪首乌片小鼠急性毒性实验中灌胃给药的单日最大给药量1.222g原生药量/20g/d（ 61.1 g原生药量/kg/d），相当于临床人用量的92.72倍未见毒性反应。
二、效果试验
（一）本发明所述药物组合物治疗高血压病患者临床观察
1 对象与方法
1.1 临床资料
1.1.1 病例来源
所有病例均来源于昆明市中医医院门诊患者，为2012年1月至2014年10月符合纳入标准的72例患者。
1.1.2 诊断标准
西医诊断标准：参照《中国高血压病防治指南(2005年修订版)》[1]中的血压定义和分类标准确定。中医辨证标准：参照《中药新药临床研究指导原则》的标准而拟定[2]。主要证候为头昏、眩晕，眠差、烦躁易怒，口干苦，面红目赤，大便干结，舌红少津苔薄黄，脉弦，即可辨为阴虚阳亢证。
1.1.3 纳入标准
符合1级、2级原发性高血压者；符合中医辨证标准者；年龄40~75岁，自愿参加试验者。
1.1.4 排除标准
合并严重的心、肝、肾功能障碍、恶性肿瘤、精神病患者；妊娠或哺乳期妇女；对中药过敏的患者。
1.2 方法
1.2.1 分组
采取随机数字表方法将符合纳入标准的72例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组37例，其中男18例，女19例，年龄45～74岁，平均（62.1±4.2）岁，病程：1～15年，平均（7.7±3.5）年。对照组35例，其中男17例，女18例，年龄47～75岁，平均（63.2±3.8）岁，病程：1～17年，平均（6.9±2.8）年。2组患者性别、年龄、病程方面等情况均无显著性差异（P＞0.05）。
1.2.2 治疗方法
对照组：口服苯磺酸氨氯地平片，每片5mg，每日一次，每次一片。治疗组：在对照组的基础上口服本发明所述药物组合物（由昆明市中医医院制剂中心统一煎制）。每袋20ml，每次一袋，每日三次。 两组共治疗14天。
1.2.3 观察指标
在治疗前及治疗结束后，观察记录患者症状、舌脉象的变化，计分赋值；测量血压、心率，于早晨服药后3~4h测量，每日测3次，取其平均值；同时在治疗前后检测患者血、尿、大便常规，肝、肾功能检查。
1.2.4 疗效判定标准
1.2.4.1 临床降压疗效评定标准[2]：参照《中药新药临床研究指导原则》制订。显效：舒张压下降l0mmHg以上，并达到正常范围；舒张压虽未降至正常但己下降20mmHg或以上。须具备其中一项。有效：舒张压下降不及l0mmHg，但已达到正常范围；舒张压较治疗前下降10~l9mmHg，但未达到正常范围。须具备其中一项。无效：未达到以上标准者。
1.2.4.2 中医证候疗效评定标准[2]：参照《中药新药临床研究指导原则》评定中医证候，制定中医临床证候分级量化积分标准。评出治疗前后总分，判断疗效用疗效指数：疗效指数为n=（治疗前积分－治疗后积分）/治疗前积分×100%。显效：治疗后较治疗前症状积分减少，n≥66.7%；有效：治疗后较治疗前症状积分减少，33.3%≤n<66.7%；无效：治疗后较治疗前症状积分减少，n<33.3%。
1.2.5 统计学方法
采用SPSS（13.0）统计软件进行统计学分析。计数资料采用率表示，组间采用χ2检验，计量资料用均数±标准差表示，组间比较采用t检验。检验水准α=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。
结果
2.1 两组患者临床降压疗效比较
治疗后，治疗组临床降压疗效总有效率78.37%，对照组临床降压疗效总有效率54.28%。治疗组患者疗效较对照组有显著性差异（P <0.05）。见表1。
表 1 两组患者临床降压疗效比较 组别n显效有效无效总有效率治疗组371514878.37%*对照组359101654.28%
注：与对照组比较，*P <0.05
2.1 两组患者中医证候疗效比较
治疗后，治疗组中医证候疗效总有效率83.78%，对照组中医证候疗效总有效率51.42%。治疗组患者疗效较对照组有非常显著性差异（P <0.01）。见表2。
表 2 两组患者中医证候疗效比较 组别n显效有效无效总有效率治疗组371912683.78%**对照组358101751.42%
注：与对照组比较，**P <0.01
3.3 不良反应
治疗过程中，两组患者治疗前后均未出现恶心、胃脘不适等不良反应，肝、肾功能，血、尿、大便常规检查，前后比较无异常。
参考文献
[1] 中国髙血压防治指南修订委员会.中国髙血压防治指南(2005年修订版)[S].髙血压杂志,2006. 11-12.
[2] 中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则(试行)[S].第1版.北京:中国医药科技出版社,2002. 73-76.
（二）本发明所述药物组合物对缺血性脑卒中患者临床疗效的观察
1．对象与方法
1.1 临床资料
1.1.1 病例来源：所有病例均来源于昆明市中医医院康复科住院，为2013年1月至2015年5月收治的符合纳入标准的73例患者。
1.1.2 诊断标准[1-2]：缺血性脑卒中诊断标准：参照1996年中华医学会第四届全国脑血管病学术会议通过的《各类脑血管疾病诊断要点》，其中关于脑梗塞的诊断要点，并经过头部CT或MRI检查确诊。中医病名诊断：参照国家药品监督管理局2002年颁发的《中药新药临床研究指导原则》所载的《中药新药治疗中风病的临床研究指导原则》的标准执行。疾病分期标准：恢复期：发病2周至6个月。证类诊断标准：证候分型属肝肾阴虚。主要证候为：半身不遂，口舌歪斜、言语赛涩、偏身麻木、眩晕耳鸣、腰膝酸软、咽干口燥、心烦易怒、便干便秘、气短乏力、自汗、食少、失眠，舌红少津、苔薄黄、脉弦。
1.1.3 纳入标准：（1）西医诊断符合995年全国第四届脑血管病学术会议通过的各类脑血管病诊断要点；中医诊断符合《中药新药治疗中风病的临床研究指导原则》，疾病分期符合恢复期，证类诊断符合肝肾阴虚型。（2）存在肢体运动功能障碍，偏瘫肢体肌力0～4级，（3）神志清楚，生命体征平稳，无发热和肺部感染；（4）40岁≤年龄≤80岁；（5）患者本人或直系亲属知情同意。
1.1.4 排除标准：（1）中西医诊断不符合，证类诊断不符合肝肾阴虚型；（2）意识不清，MMSE量表评定提示痴呆，合并感觉性失语或精神障碍等疾患，不能配合检查及治疗的患者；（3）合并有心、肝、肾和造血系统等重要脏器功能衰竭或病情危重的脑卒中患者以及癌症等对患者生存质量的影响超过缺血性脑卒中后偏瘫肢体功能障碍的疾病或状态；（4）有肢体骨关节疾病所致的运动功能障碍；（5）对中药过敏者；（6）不能完成基本疗程，依从性可能不好者（即不能坚持治疗）；（7）患者本人或其直系亲属不同意参加临床观察者；（8）80岁以上，40岁以下，妊娠期或哺乳期妇女。
1.2 方法
1.2.1 分组
采取随机数字表方法将符合纳入标准的73例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组39例，其中男23例，女16例，年龄平均：65.2±3.9岁，病程平均：3.9±2.1月，简化Fugl-Meyer运动功能评分平均：15.8±3. 2。对照组34例，其中男22例，女12例，年龄平均64.4±3.1岁，病程：平均：3.5±1.9月，简化Fugl-Meyer运动功能评分平均：15. 1±2. 9。2组患者性别、年龄、病程、简化Fugl-Meyer运动功能评分均无显著性差异（P＞0.05）。
1.2.2 治疗方法
对照组予以常规西医基础药物，针对不同基础疾病，采用个体化治疗，如：控制血压、血糖、血脂，抗血小板聚集等。同时予以常规康复训练，包括：良肢位的摆放，运动训练，如：各关节主被动训练、坐位训练、坐位平衡训练行走训练等，作业治疗，物理因子治疗等。治疗组：在对照组的基础上口服本发明所述药物组合物（由昆明市中医医院制剂中心统一煎制）。每次50ml，每日三次。 两组共治疗14天。
1.2.3 观察指标
在治疗前及治疗结束后，观察记录患者中医症候含舌脉象的变化，计分赋值；同时采用目前国际上通用的简化Fugl-Meyer运动功能评定量表评估脑卒中后偏瘫患者运动功能。血、尿、大便常规、肝、肾功能、心电图检查。
1.2.4 中医证候疗效评定标准[2]
参照《中药新药临床研究指导原则》评定中医证候，制定中医临床证候分级量化积分标准。评出治疗前后总分，判断疗效用疗效指数：疗效指数为n=（治疗前积分﹣治疗后积分）/治疗前积分×100%。显效：治疗后较治疗前症状积分减少，n≥66.7%；有效：治疗后较治疗前症状积分减少，33.3%≤n<66.7%；无效：治疗后较治疗前症状积分减少，n<33.3%。
1.2.5 统计学方法
采用SPSS（13.0）统计软件进行统计学分析。计数资料采用率表示，组间采用χ2检验，计量资料用均数±标准差表示，组间比较采用t检验。检验水准α=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 两组患者中医证候疗效比较
治疗后，治疗组中医证候疗效总有效率85.29%，对照组中医证候疗效总有效率66.67%。治疗组患者疗效较对照组有显著性差异（P <0.05）。见表1。
表 1 两组患者中医证候疗效比较 组别n显效有效无效总有效率治疗组34821585.29%*对照组393231366.67%
注：与对照组比较，*P <0.05
2.2 两组患者简化Fugl-Meyer运动功能评分比较，见表2。
表 2 两组患者简化Fugl-Meyer运动功能评分比较 组别n治疗前治疗后治疗组3415.8±3. 226. 1±2. 8**对照组3915. 1±2. 920. 9±3. 2
注：与对照组比较，**P <0.05
2.3 不良反应
治疗过程中，两组患者治疗前后均未出现恶心、胃脘不适等不良反应，肝、肾功能，血、尿、大便常规检查，前后比较无异常。