一种化合物的应用.pdf

《一种化合物的应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种化合物的应用.pdf（11页完整版）》请在专利查询网上搜索。

1、(10)申请公布号 CN 102319243 A (43)申请公布日 2012.01.18 CN 102319243 A *CN102319243A* (21)申请号 201110227286.3 (22)申请日 2011.08.09 A61K 31/423(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (71)申请人 中国科学院长春应用化学研究所 地址 130000 吉林省长春市人民大街 5625 号 (72)发明人 刘作家 李丹 郑喜亮 汪劲 汪尔康 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 代理人 魏晓波 逯长明 (54) 发明名称 一种化合物的应用 。

2、(57) 摘要 本发明涉及生物医药技术领域， 公开了 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己 氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制备抗肿 瘤药物中的应用。 本发明通过药物筛选实验发现， 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己 氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐具有抑制胰 腺癌细胞CFPAC-1、 MiaPaCa-2和BxPC-3生长并诱 导其凋亡的作用， 同时， 其对人正常细胞 HEK-293 和 HL-7702 生长无毒性或有较低的毒性。因此本 发明提供了 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基。

3、甲 基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸 盐在制备抗肿瘤药物中的应用， 所述肿瘤具体为 胰腺癌。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 3 页 CN 102319246 A1/1 页 2 1.2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸 盐在制备抗肿瘤药物中的应用。 2. 根据权利要求 1 所述应用， 其特征在于， 所述肿瘤为胰腺癌。 3. 一种抗肿瘤药物制剂， 其特征在于， 包括治疗有效量的 2-( 苯并 。

4、d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐和药学上可接受的辅料。 4. 根据权利要求 3 所述药物制剂， 其特征在于， 其为冻干剂、 片剂、 颗粒剂或胶囊剂。 权 利 要 求 书 CN 102319243 A CN 102319246 A1/6 页 3 一种化合物的应用 技术领域 0001 本发明涉及生物医药技术领域， 具体的说是涉及 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基 甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用。 背景技术 0002 胰腺癌是恶性程度最高的实体肿瘤之一。。

5、近年来， 全球范围内的胰腺癌发病率有 升高趋势。在美国， 其死亡率占恶性肿瘤的第四位， 2008 年美国新增胰腺癌 37680 例， 死亡 34290 例。在我国， 胰腺癌的发病率已居恶性肿瘤的第 5 7 位， 年发病率约为 511/10 万， 估计每年新增 5 6 万例。据报道， 胰腺癌确诊后 1 年生存率约 12， 5 年生存率小于 4， 手术后的 5 年生存率只在 12 20之间， 且其发病率与死亡率十分接近 (0.99 1)。目 前， 手术治疗是胰腺癌最有效的治疗方法， 但由于胰腺癌起病隐匿， 发展快， 向周围侵袭转 移早， 且缺乏早期诊断手段， 因而就诊时大多数病例已属中晚期， 错失。

6、了根治性手术时机， 中位生存期仅34个月， 故目前仍有7080的病人必须通过非手术治疗来改善生活质 量和延长生存期。 0003 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐 酸盐， 英文名为 2-(1， 3-benzoxazol-3(2H)-ylmethyl)-5-(cyclohexylamino)methyl)-1， 4-benzenediol， dihydrochloride， 分子式为 C21H28Cl2N2O3， 分子量 427.0， 为白色针状晶体， 熔点 286 288， 不易溶于水， 易溶于二甲基亚砜等有机溶剂，。

7、 结构式如下 ： 0004 0005 然而， 目前还未见其在制备抗肿瘤药物方面相关研究报道。 发明内容 0006 本发明提供了一种化合物的新应用， 即 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲 基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用。 0007 本发明通过药效学试验发现， 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨 基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐可通过线粒体途径诱导胰腺癌细胞的凋亡以实现胰腺癌 细胞的生长抑制作用， 不同剂量2-(苯并d噁唑-3(2氢)-基甲基-5-(环己氨基)甲基) 苯 。

8、-1， 4- 二醇二盐酸盐对 k-ras 突变激活型胰腺癌细胞株 CFPAC-1 和 MiaPaCa-2(RasG12V) 和野生型胰腺癌细胞株 BxPC-3(RasWT) 均有较好的生长抑制作用。同时， 其对人正常细胞 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A2/6 页 4 HEK-293和HL-7702生长无毒性或有较低的毒性。 因此本发明提供了2-(苯并d噁唑-3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用， 其中， 所述肿瘤具体为胰腺癌。 0008 当前胰腺癌的治疗主要是采用吉西他滨和以吉。

9、西他滨为主的联合用药方案， 但 疗效并不能令临床医生满意， 而且吉西他滨对人体正常细胞毒性较大。本发明通过药效 学试验发现， 与临床用药吉西他滨相比， 本发明所述 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲 基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对 k-ras 突变激活型人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 的抑制作用更加明显， 但对人体正常细胞的生长抑制作用较 弱， 无毒或仅有较低毒性， 能够更好地应用在制备抗胰腺癌的药物中。 并且与临床用药吉西 他滨通过细胞周期阻滞来实现胰腺癌细胞的生长抑制作用的药物作用机制不同， 本发明。

10、所 述 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐抑 制胰腺癌细胞生长的作用是通过线粒体途径诱导胰腺癌细胞凋亡实现的。 0009 本发明所述 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐是一种药物活性成分， 按照常规的制剂工艺， 可以以其为主要活性组分， 加 入常规的赋形剂、 调味剂、 崩解剂、 防腐剂、 润滑剂、 湿润剂、 粘合剂、 溶剂、 增稠剂、 增溶剂等 药物辅料， 制成任何一种适合临床上使用的剂型。因此本发明还提供了一种抗肿瘤药物制 剂， 。

11、包括治疗有效量的 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐和药学上可接受的辅料。 0010 本发明所述制剂中的2-(苯并d噁唑-3(2氢)-基甲基-5-(环己氨基)甲基) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制剂中所占重量百分比可以是 0.1-99.9， 余量为药学上可接受 的辅料药物。 本领域技术人员可将其直接或间接加入制备不同剂型时所需的药学上可接受 的各种常用辅料， 如填充剂、 崩解剂、 润滑剂、 粘合剂等， 以常规药物制剂方法， 制成常用制 剂如片剂、 胶囊剂、 注射液、 口服液、 颗粒剂、 丸剂、 散剂和滴丸剂等。

12、。 其中， 填充剂如淀粉， 乳 糖， 蔗糖， 葡萄糖， 甘露醇和硅酸 ； 崩解剂如琼脂， 碳酸钙， 土豆淀粉或木薯淀粉， 海藻酸， 某 些硅酸盐和碳酸钠， 低取代羟丙基纤维素 ； 润滑剂如滑石粉， 硬脂酸钙， 硬脂酸镁， 固体聚乙 二醇， 月桂硫酸钠 ； 粘合剂如羧甲基纤维素， 藻酸盐， 明胶， 聚乙烯吡咯酮， 蔗糖和阿拉伯胶。 0011 优选的， 所述药物制剂为冻干剂、 片剂、 颗粒剂或胶囊剂。 0012 本发明所述 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐药物制剂的使用剂量在使用时可根据服用方式、 病人的年龄、 体。

13、重及病情 严重程度在医生指导下确定具体的用法与用量。 附图说明 0013 图 1 示本发明实施例 12-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 活性影响的折线 图 ； 0014 图 2 示本发明实施例 22-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对人正常细胞 HEK-293 和 HL-7702 活性影响的折线图 ； 0015 图3示本发明实施例3不同浓度吉西他滨对人胰腺癌细胞及。

14、正常细胞活性影响的 折线图 ； 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A3/6 页 5 0016 图 4 示本发明实施例 42-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对胰腺癌细胞 CFPAC-1 凋亡影响的流式二维点图， 其中， a 为 NSC48693 处理后 0h 细胞分布图， b 为 NSC48693 处理后 24h 细胞分布图， c 为 NSC48693 处 理后 48h 细胞分布图， 图中第一象限代表细胞碎片， 第二象限代表死亡细胞， 第三象限代表 正常细胞， 第四象限代表凋亡细。

15、胞 ； 0017 图 5 示本发明实施例 42-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对胰腺癌细胞 MiaPaCa-2 凋亡影响的流式二维点图， 其中， a 为 NSC48693 处理后 0h 细胞分布图， b 为 NSC48693 处理后 24h 细胞分布图， c 为 NSC48693 处 理后 48h 细胞分布图， 图中第一象限代表细胞碎片， 第二象限代表死亡细胞， 第三象限代表 正常细胞， 第四象限代表凋亡细胞 ； 0018 图 6 示本发明实施例 42-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 。

16、环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐对胰腺癌细胞 BxPC-3 凋亡影响的流式二维点图， 其中， a 为 NSC48693 处理后 0h 细胞分布图， b 为 NSC48693 处理后 24h 细胞分布图， c 为 NSC48693 处 理后 48h 细胞分布图， 图中第一象限代表细胞碎片， 第二象限代表死亡细胞， 第三象限代表 正常细胞， 第四象限代表凋亡细胞。 具体实施方式 0019 本发明实施例公开了 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲 基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐在制备抗肿瘤药物中的应用。本领域技术人员可以借鉴本。

17、文内 容， 适当改进工艺参数实现。 特别需要指出的是， 所有类似的替换和改动对本领域技术人员 来说是显而易见的， 它们都被视为包括在本发明。本发明的应用已经通过较佳实施例进行 了描述， 相关人员明显能在不脱离本发明内容、 精神和范围内对本文所述的应用进行改动 或适当变更与组合， 来实现和应用本发明技术。 0020 为了进一步理解本发明， 下面结合实施例对本发明进行详细说明。 其中， 本发明所 述 2-( 苯并 d 噁唑 -3(2 氢 )- 基甲基 -5-( 环己氨基 ) 甲基 ) 苯 -1， 4- 二醇二盐酸盐均 简写为 NSC48693。 0021 实施例 1 ： NSC48693 对胰腺癌。

18、细胞的生长抑制作用 0022 实验材料 ： 受试药物 NSC48693 由 NIH 提供， 溶于二甲基亚砜 (DMSO) 中配成 10mg/ mL储存液， 用含10DMSO的双蒸水稀释成不同浓度的新鲜溶液备用 ； 肿瘤细胞人胰腺癌细 胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 购于美国模式培养物集存库 (ATCC)。 0023 试 剂 与 仪 器 ： DMEM 细 胞 培 养 基、 IMDM 细 胞 培 养 基 和 胎 牛 血 清 FBS 购 于 Gibico(Grand island， NY， USA) ； CO2培 养 箱 (Jouan， France) ；酶 标 仪 (B。

19、iotech Instruments， New York， USA) ； 噻唑蓝 MTT(Sigma， USA)。 0024 实验方法 ： 分别取 4000 个对数生长期胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 于 96 孔平板过夜培养， 待细胞贴壁， 吸去上清液， 每孔加入 90L 新鲜培养液， 同时加入 4 个不同浓度梯度的 NSC48693 溶液各 10L， 每一浓度均设 5 个复孔， 对照组中加入含 10 DMSO 的双蒸水。置于 CO2培养箱中培养 48h 后， 每孔加入 10L MTT(1mg/mL) 于 37培养 4h， 吸弃上清液加入 100L DMS。

20、O 于室温振荡 10min， 用酶标仪于 490nm 波长检测各孔的光 密度值 (OD)， 计算人胰腺癌细胞的存活率及抑制率， 结果见图 1。其中， 癌细胞的存活率及 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A4/6 页 6 抑制率的计算公式如下 ： 0025 细胞存活率 ( 实验组 OD/ 对照组 OD)100 0026 细胞抑制率 1-( 实验组 OD/ 对照组 OD)100 0027 由图 1 可见， 不同剂量受试药物 NSC48693 对人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和BxPC-3的生长具有明显抑制作用， 当加入0.3906g/mLNS。

21、C48693培养后， 人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2和BxPC-3细胞均出现明显死亡， 存活率小于85。 并且NSC48693以剂 量依赖的方式抑制人胰腺癌细胞CFPAC-1、 MiaPaCa-2和BxPC-3的生长， 随着加入NSC48693 浓度的增加， 人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 细胞的存活率明显降低， 当加入 NSC48693 的浓度为 25g/mL 时胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 细胞的抑制率 均大于 70， 表明化合物 NSC48693 具有抑制胰腺癌细胞生长的作用。 0028 实验。

22、例 2 ： NSC48693 对人正常细胞生长的抑制作用 0029 实验材料 ： 受试药物 NSC48693 由 NIH 提供， 溶于二甲基亚砜 (DMSO) 中配成 10mg/ mL 储存液， 用含 10 DMSO 的双蒸水稀释成不同浓度的新鲜溶液待用 ； 人正常肾细胞 HEK-293 和人正常肝细胞 HL-7702 购于上海细胞库。 0030 试剂与仪器 ： DMEM 细胞培养基和胎牛血清 FBS 购于 Gibico(Grand island， NY， USA) ； CO2培 养 箱 (Jouan， France) ； 酶 标 仪 (Biotech Instruments， New Yor。

23、k， USA) ； MTT(Sigma， USA)。 0031 实验方法 ： 分别取 5000 个对数生长期细胞人正常细胞 HEK-293 和 HL-7702， 于 96 孔平板过夜培养， 待细胞贴壁， 吸去上清液， 每孔加入90L新鲜培养液， 同时加入4个不同 浓度梯度的 NSC48693 溶液各 10L， 每一浓度均设 5 个复孔， 对照组中加入含 10 DMSO 的 双蒸水。置于 CO2培养箱中培养 48h 后， 每孔加入 10L MTT(1mg/mL) 于 37培养 4h， 吸 弃上清液加入 100L DMSO 于室温振荡 10min， 用酶标仪于 490nm 波长检测各孔的光密度 值。

24、 (OD)， 计算人正常细胞的存活率及抑制率， 结果见图 2。其中， 细胞存活率及抑制率的计 算公式同实施例 1。 0032 由图 2 可见， 不同剂量受试药物 NSC48693 对人正常肾细胞 HEK-293 的生长基本无 影响， 加入 50g/mL NSC48693 培养后， 人正常肾细胞 HEK-293 的细胞存活率仍大于 80。 而受试药物 NSC48693 影响人正常肝细胞 HL-7702 的生长， 但 NSC48693 对人正常肝细胞 HL-7702 的细胞生长影响较低， 当加入 50g/mL NSC48693 培养后， 人正常肝细胞 HL-7702 的细胞存活率仍大于 50。结果。

25、表明， NSC48693 对人正常肾细胞 HEK-293 和人正常肝细胞 HL-7702 生长无毒性或有较低的毒性。 0033 实施例 3 ： 吉西他滨对胰腺癌细胞和人正常细胞活性的抑制作用 0034 实验材料 ： 受试药物吉西他滨购自于 Sigma， 溶于 DMSO 中配成 10mg/mL 的母液， 用含 10 DMSO 的双蒸水稀释成不同浓度的溶液备用 ； 人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 购于美国模式培养物集存库 (ATCC) ； 人正常肾细胞 HEK-293 和人正常肝细胞 HL-7702 购自于上海细胞库。 0035 试剂及仪器 ： DMEM 细胞。

26、培养基、 IMDM 细胞培养基和胎牛血清 (FBS) 购自于 Gibico(Grand island， NY， USA)， 四 氮 唑 盐 (MTT) 购 自 于 Sigma ； CO2培 养 箱 (Jouan， France) ； 酶标仪 (Biotech Instruments， New York， USA)。 0036 实验方法 ： 分别取 4000 个对数生长期人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A5/6 页 7 BxPC-3及人正常细胞HEK-293和HL-7702于96孔平板过夜培养， 待细胞贴。

27、壁， 吸去上清液， 每孔加入 90L 新鲜培养液， 同时加入 5 个不同浓度梯度的吉西他滨溶液各 10L， 每一浓 度均设5个复孔， 对照组中加入含10DMSO的双蒸水。 置于CO2培养箱中培养48h后， 每孔 加入10L MTT(1mg/mL)于37培养4h， 吸弃上清液加入100L DMSO于室温振荡10min， 用酶标仪于490nm波长检测各孔的光密度值(OD)。 计算人胰腺癌细胞和正常细胞的存活率 及抑制率。其中， 细胞存活率及抑制率的计算公式同实施例 1。 0037 由图 3 可见， 吉西他滨对 k-ras 突变激活型人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-。

28、3的抑制作用较弱。 结合图1比较吉西他滨与NSC48693对人胰腺癌细胞MiaPaCa-2的 抑制作用， 结果可见在浓度为 6.25g/mL 时， NSC48693 和吉西他滨对 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 的抑制作用差别不大， 但是随着浓度的增加， NSC48693 对 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 的抑制作用显著增强， 而吉西他滨对 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 的抑制作用仍 然较弱。在 100.0g/mL 时， 吉西他滨对 MiaPaCa-2 抑制作用仅达到 36.5， 对 CFPAC-1 的 抑制作用仅达到。

29、 22.4， 对 BxPC-3 的抑制作用也仅达到 36.2。 0038 在对人正常细胞的抑制作用中， 吉西他滨对人正常肝细胞 HL-7702 和人正常肾细 胞 HEK-293 均有抑制作用， 尤其是对人正常肝细胞 HL-7702 的抑制作用最为显著。结合 图 2 比较吉西他滨与 NSC48693 对人正常肝细胞 HL-7702 和人正常肾细胞 HEK-293 的抑制 作用， 结果可见吉西他滨对人正常肝细胞 HL-7702 和人正常肾细胞 HEK-293 的抑制作用较 NSC48693强， 吉西他滨浓度为6.25g/mL时即出现抑制作用， 表明NSC48693比吉西他滨更 加安全， 对正常细胞。

30、毒性低。 0039 实施例 4 ： 凋亡实验 0040 实验材料 ： 受试药物 NSC48693 由 NIH 提供， 溶于二甲基亚砜 (DMSO) 中配成 10mg/ mL储存液， 用含10DMSO的双蒸水稀释成不同浓度的新鲜溶液备用 ； 肿瘤细胞人胰腺癌细 胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 购于美国模式培养物集存库 (ATCC)。 0041 试 剂 与 仪 器 ： DMEM 细 胞 培 养 基、 IMDM 细 胞 培 养 基 和 胎 牛 血 清 FBS 购 于 Gibico(Grand i sland， NY， USA) ； CO2培养箱(Jouan， France。

31、) ； AnnexinV-FITC/PI凋亡检测 试剂盒购于南京凯基生物有限公司 ； 流式细胞仪 FACSAria 购于美国 BD(Becton Dickinson Immunochemical Systems， Mountain View， USA) ； 分析软件 Diva 6.0 购于美国 BD(Becton Dickinson， Mountain View， USA)。 0042 实验方法 ： 分别取 4000 个对数生长期胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 于24孔平板过夜培养， 待细胞贴壁， 吸去上清液， 每孔加入450L新鲜培养液， 同时加入不 同浓。

32、度的 NSC48693 溶液各 50L， 每一浓度均设 5 个复孔， 对照组中加入含 10 DMSO 的 双蒸水。置于 CO2培养箱中培养 24h 或 48h 后， 用 PBS 洗涤两次， 分别加入凋亡检测试剂 Annexin V-FITC 和 PI 各 5L 于室温下孵育 30 分钟。用 PBS 洗涤两次后上机检测。每个 样品收集 10000 个细胞进行分析。结果见图 4 6。 0043 由图 4 6 可见， 不同剂量受试药物 NSC48693 对人胰腺癌细胞 CFPAC-1、 MiaPaCa-2 和 BxPC-3 具有明显的凋亡诱导作用。CFPAC-1 由 12.5g/mLNSC48693。

33、 处理后， 24h 的凋亡率为 37.12.0， 48h 的凋亡率增加为 50.53.1。MiaPaCa-2 由 50.0g/ mL NSC48693 处理 24h 或 48h 后， 凋亡率分别为 73.11.0和 82.72.8。BxPC-3 由 6.25g/mL NSC48693 处理 24h 或 48h 后， 凋亡率分别为 46.42.4和 55.01.1。实 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A6/6 页 8 验结果表明， 化合物 NSC48693 主要是通过诱导胰腺癌细胞凋亡以抑制其生长作用。 0044 实施例 5 ： NSC48693 冻干剂的制备。

34、 0045 取 NSC48693 加入葡甲胺， 100加热 1h， 加入甘露醇， 经过滤、 定容、 脱色、 除菌、 灌 装、 冻干工艺制备冻干剂。 0046 实施例 6 ： NSC48693 片剂的制备 0047 取 NSC48693、 蔗糖和糊精按重量比 1 3 1 的比例， 按常规方法制成片剂。 0048 实施例 7 ： NSC48693 颗粒剂的制备 0049 取 NSC48693、 蔗糖和糊精按重量比 1 3 1 的比例， 按常规方法制成颗粒。 0050 实施例 8 ： NSC48693 胶囊剂的制备 0051 取 NSC48693、 蔗糖和糊精按重量比 1 3 1 的比例， 按常规方。

35、法制成颗粒， 按常 规方法灌制胶囊。 0052 以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出， 对 于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理的前提下， 还可以对本发明进行 若干改进和修饰， 这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。 说 明 书 CN 102319243 A CN 102319246 A1/3 页 9 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102319243 A CN 102319246 A2/3 页 10 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 102319243 A CN 102319246 A3/3 页 11 图 5 图 6 说 明 书 附 图 CN 102319243 A 。