一种菌根真菌子实体及其在抗肿瘤中的应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710771284.8 (22)申请日 2017.08.31 (83)生物保藏信息 CCTCC M2017185 2017.04.10 (71)申请人 广东省微生物研究所 地址 510075 广东省广州市越秀区先烈中 路100号大院 申请人 广东粤微食用菌技术有限公司 (72)发明人 胡惠萍 刘远超 黄志勇 黄龙花 谢意珍 吴清平 (74)专利代理机构 广州弘邦专利商标事务所有 限公司 44236 代理人 张钇斌 (51)Int.Cl. A61K 36/07(2006.01。

2、) A61P 35/00(2006.01) A01G 1/04(2006.01) (54)发明名称 一种菌根真菌子实体及其在抗肿瘤中的应 用 (57)摘要 本发明公开一种菌根真菌子实体在制备抗 肿瘤药物中的应用， 所述菌根真菌子实体为紫褶 口蘑， 所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞 菌目口蘑科紫褶口蘑属。 本发明所述菌根真菌子 实体， 可通过组织分离法得到纯培养菌种， 然后 将菌种的菌丝体进行发酵得到发酵液， 最后对发 酵液进行提取得到提取物， 经过试验， 所得提取 物具有显著的抑制肿瘤细胞作用， 因此， 本发明 为肿瘤的治疗提供了新的选择。 权利要求书2页 说明书5页 附图2页 CN 10。

3、7519212 A 2017.12.29 CN 107519212 A 1.一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述菌根真菌子实 体为紫褶口蘑， 所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。 2.如权利要求1所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述 子实体的rDNA-ITS序列为： GGAAGGATCATTATTGAATGAACTTGGTCCAAGTTGTTGCTGGCTCCTTGGAGCATATATGTGTGCACGCTTG GTACTCATTCTATTTACCCACCTGTGCACTCTTTTGTAGAGCCCTGAGATAT。

4、TTAGTTATTCAGGTGTTTCCTGAGT TGAAGGTTTGCTGTGCGAAAGTCAGCTTTCCTTTATTTTTTATCTCTAGGGATTCTATGTATTCTTATATACTCCTA ATGAATGTAACAGAATGTTATGTTGGTTTTAAAAAAACACAATATACAACTTTCAACAATGGATCTCTTGGCTCTCG CATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGC ATCTTGCGCCCCTTGGTATTCCGAGGAGCATGCCTGTTTG。

5、AGTGTCATTAAATTTCTCAATCCTTCCTTTCGTTCTC AATGAATGAAAGAGGTTGGCATTGGAATGTGGAAGCTGCAGGCTTTTTATTATTATAATAAAGTCAGCTCTTCTAAA AAGCATTAGCTAAATGTTTTGAGAATTAAACTAGCATTGGTGTGATAATTATCTACGCCATTTGTTAAATCTCTTCA TAGTTTAGCTTCTAATATAACATTGGTCTTTGGGACCTTGTTTTGATAATTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCC GCTGAACTTAAGCATATCAA。 3.如权利要。

6、求1所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述 菌根真菌子实体先通过组织分离法得到纯培养菌种， 然后将菌种的菌丝体进行发酵得到发 酵液， 最后对发酵液进行提取得到提取物用于制备抗肿瘤药物。 4.如权利要求3所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述 采用组织分离法进行培养时， 采用的培养基包含： 玉米粉水提物、 麦芽提取物、 酵母提取物、 琼脂粉和去离子水。 5.如权利要求4所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述 培养基中， 各组分的质量浓度为： 玉米粉水提物50g/L、 麦芽提取物20g/L、 酵母提取物3g/L、 。

7、琼脂粉20g/L。 6.如权利要求4或5所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述培养基采用如下方法配置而成： 称取玉米粉， 溶解至一部分去离子水， 煮沸， 15min后使 用3层纱布过滤， 保存滤液， 然后称取麦芽提取物、 酵母提取物， 溶解至玉米粉提取液， 继续 添加一部分去离子水， 加热并完全溶解后， 称取琼脂粉并不断搅拌至完全溶解， 然后添加剩 余去离子水定容， 分装至三角瓶或试管中， 加胶塞密封， 121高压灭菌20分钟， 灭菌完成后 待温度降至60后取出， 洁净条件下倒平板或摆斜面， 制成平板或斜面试管培养基。 7.如权利要求3所述的菌根真菌子实体在制备抗肿。

8、瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述 菌丝体发酵液采用如下方法制备而成： 首先制备发酵培养基， 称取玉米粉， 溶解至一部分去 离子水， 煮沸， 15min后使用3层纱布过滤， 保存滤液， 然后称取麦芽提取物、 酵母提取物， 溶 解至玉米粉提取液， 继续添加一部分去离子水， 加热并完全溶解后， 称取琼脂粉并不断搅拌 至完全溶解， 然后添加剩余去离子水定容， 分装至三角瓶或试管中， 加胶塞密封， 121高压 灭菌20分钟， 灭菌完成后待温度降至60后取出， 洁净条件下倒平板或摆斜面， 制成平板或 斜面试管培养基； 所述发酵培养基中含以下质量浓度的组分： 玉米粉水提物50g/L、 麦芽提取物20g/。

9、L、 酵 母提取物3g/L、 琼脂粉20g/L； 发酵培养基的温度降至室温后， 接种5-8块3-5mm菌丝块， 然后180rpm避光培养30d， 取 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 107519212 A 2 出后用超声提取30min， 然后使用3层无菌纱布过滤， 得到发酵液。 8.如权利要求3或7所述的菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述采用无水乙醇对菌丝体发酵液进行提取， 提取方法为： 按照体积比为1:10的比例将无 水乙醇加入到发酵液中， 4冰箱存放处理12h， 然后50、 40rpm条件下旋转蒸发减压浓缩， 产物在-80、 0.008mBAR条件下使用。

10、低温冷冻干燥机干燥， 冻干完成后即得菌丝体醇提物。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 107519212 A 3 一种菌根真菌子实体及其在抗肿瘤中的应用 技术领域 0001 本发明涉及一种真菌及其应用， 尤其是一种自真菌界 (Fungi)担子菌门 (Basidiomycota) 伞菌纲 (Agaricomycetes) 伞菌目 (Agaricales)口蘑科 (Tricholomataceae)紫褶口蘑属的紫褶口蘑及其在抗肿瘤中的应用。 背景技术 0002 恶性肿瘤是一类严重危害人类健康和生命的疾病， 在所有死亡原因中已经超过心 脑血管疾病、 成为排名第一的死亡原因。 随着自然生态的失。

11、衡和环境污染的加剧， 恶性肿瘤 的发病率和死亡率在世界范围内呈现着上升趋势。 0003 大型真菌代谢产物含有丰富的活性物质， 如具有抗肿瘤功效的真菌多糖、 甾醇类、 核苷类、 萜类化合物、 真菌蛋白等， 现有报道具有抗肿瘤活性的大型真菌有香菇(Lentinus edodes)、 灵芝(Ganoderma spp)、 茯苓(Poria cocos)、 金针菇 (Flammulina velutipes)、 黑木耳(Auricularia auricular)、 鸡油菌(Cantharellus spp)、 珊瑚菌(Clavaria spp)、 齿菌(Hydnum spp)、 香蘑(Lepista。

12、 nuda)、 松茸(Tricholoma matsutake)、 双孢蘑菇 (Agaricus bisporus)、 墨汁鬼伞(Coprinus atramentarius)、 滑菇(Pholiota nameko)、 栓 菌(Tremella spp)、 灰树花(Grifola frondosa)、 桦褐孔菌(Inonotus obliquus)等多孔 菌， 这些大型真菌子实体或发酵液的提取物所具有的活性成分， 已经开始被开发， 特别是香 菇多糖、 灵芝多糖、 灵芝三萜等功效显著的化合物已经被明晰， 因而从大型真菌中继续寻找 有新的作用机制和特殊化学结构的细胞药物具有重大潜力， 成为癌症防。

13、治研究的一个新的 热点。 发明内容 0004 本发明的目的在于结合上述背景技术寻找一种新的具有抗肿瘤效果的菌根真菌 子实体。 0005 为实现上述目的， 本发明采取的技术方案为： 一种菌根真菌子实体在制备抗肿瘤 药物中的应用， 所述菌根真菌子实体为紫褶口蘑， 所述紫褶口蘑为真菌界担子菌门伞菌纲 伞菌目口蘑科紫褶口蘑属。 0006 本发明中的菌根真菌子实体为紫褶口蘑， 来自真菌界 (Fungi)担子菌门 (Basidiomycota) 伞菌纲 (Agaricomycetes) 伞菌目 (Agaricales)口蘑科 (Tricholomataceae)紫褶口蘑属。 紫褶口蘑(Tricholosp。

14、orum sp .)为口蘑科 (Tricholomataceae)、 紫褶口蘑属(Tricholosporum)的一个新物种， 采自辽宁阜新三塔沟 风景区内玉米地旁的腐殖层。 子实体群生于阔叶林腐殖层上， 常形成蘑菇圈， 菌盖平展， 淡 黄色至橙色， 带部分紫色， 中部略凸起， 菌盖边缘撕裂状， 有绒毛状附属物， 并呈波浪状， 干 燥时部分内卷， 菌褶淡紫色， 直生至弯生， 不等长， 褶缘近似锯齿状， 菌柄圆柱形， 下部稍粗， 有绒毛状附属物， 中下部颜色稍深， 颜色近菌盖， 上部白色， 菌柄实心， 纤维质， 菌肉白色。 担 孢子十字型， 6.16.55.55.9 m。 说 明 书 1/5 页。

15、 4 CN 107519212 A 4 0007 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述子实体的rDNA-ITS序列为： 0008 GGAAGGATCATTATTGAATGAACTTGGTCCAAGTTGTTGCTGGCTCCTTGG A G C A T A T A T G T G T G C A C G C T T G G T A C T C A T T C T A T T T A C C C A C C T G T G C A C T C T T T T G T A G A G C C C T G A G A T A T T T A G T T A T。

16、 T C A G G T G T T T C C T G A G T T G A A G G T T T G C T G T G C G A A A G T C A G C T T T C C T T T A T T T T T T A T C T C T A G G G A T T C T A T G T A T T C T T A T A T A C T C C T A A T G A A T G T A A C A G A A T G T T A T G T T G G T T T T A A A A A A A C A C A A T A T A C A A C T T T C A A。

17、 C A A T G G A T C T C T T G G C T C T C G C A T C G A T G A A G A A C G C A G C G A A A T G C G A T A A G T A A T G T G A A T T G C A G A A T T C A G T G A A T C A T C G A A T C T T T G A A C G C A T C T T G C G C C C C T T G G T A T T C C G A G G A G C A T G C C T G T T T G A G T G T C A T T A A A。

18、 T T T C T C A A T C C T T C C T T T C G T T C T C A A T G A A T G A A A G A G G T T G G C A T T G G A A T G T G G A A G C T G C A G G C T T T T T A T T A T T A T A A T A A A G T C A G C T C T T C T A A A A A G C A T T A G C T A A A T G T T T T G A G A A T T A A A C T A G C A T T G G T G T G A T A A。

19、 T T A T C T A C G C C A T T T G T T A A A T C T C T T C A T A G T T T A G C T T C T A A T A T A A C A T T G G T C T T T G G G A C C T T G T T T T G A T A A T T T G A C C T C A A A T CAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA。 0009 子实体及菌丝体经试剂盒提取DNA， 并以ITS1/ITS4引物扩增和测序， 子实体和菌 丝体共同的rDNA-ITS序列如上所示。 0010 作为本发明。

20、所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述菌根真菌子实体先通过组织分离法得到纯培养菌种， 然后将菌种的菌丝体进行发酵得到 发酵液， 最后对发酵液进行提取得到提取物用于制备抗肿瘤药物。 0011 本发明所述菌根子实体通过组织分离法进行多次纯化培养， 得到菌根真菌， 所得 菌根真菌已于2017年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址： 中国， 武汉， 武汉大 学， 邮编430072)， 保藏编号： CCTCC NO:M 2017185， 保藏菌 株号： HMGIM-D160241， 拉丁文分 类命名为： Tricholosporum sp.， 子实体及菌 种的rDNA。

21、-ITS序列已提交至NCBI， 登记号分 别为： MF538720， MF538721。 0012 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述采用组织分离法进行培养时， 采用的培养基包含： 玉米粉水提物、 麦芽提取物、 酵母提取 物、 琼脂粉和去离子水。 采用组织分离方法在MMN、 PDA 等通用培养基上接种组织块无法萌 发获得纯培养， 而在改良的复合培养基上生长情况较好， 其配方包含： 玉米粉水提物、 麦芽 提取物、 酵母提取物、 琼脂粉和去离子水。 0013 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述培养基中， 各组分的质。

22、量浓度为： 玉米粉水提物50g/L、 麦芽提取物 20g/L、 酵母提取物 3g/L、 琼脂粉20g/L。 0014 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述培养基采用如下方法配置而成： 称取玉米粉， 溶解至一部分去离子水， 煮沸， 15min后使用 3层纱布过滤， 保存滤液， 然后称取麦芽提取物、 酵母提取物， 溶解至玉米粉提取液， 继续添 加一部分去离子水， 加热并完全溶解后， 称取琼脂粉并不断搅拌至完全溶解， 然后添加剩余 去离子水定容， 分装至三角瓶或试管中， 加胶塞密封， 121高压灭菌20分钟， 灭菌完成后待 说 明 书 2/5 页 5 CN 1。

23、07519212 A 5 温度降至60后取出， 洁净条件下倒平板或摆斜面， 制成平板或斜面试管培养基。 在该培养 基上菌丝呈现淡紫色、 有气生菌丝， 基内菌丝较弱， 且生长一段时间(10d)后形成拧结状， 质 地绒状。 0015 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述菌丝体发酵液采用如下方法制备而成： 首先制备发酵培养基， 称取玉米粉， 溶解至一部分 去离子水， 煮沸， 15min后使用3层纱布过滤， 保存滤液， 然后称取麦芽提取物、 酵母提取物， 溶解至玉米粉提取液， 继续添加一部分去离子水， 加热并完全溶解后， 称取琼脂粉并不断搅 拌至完全溶解， 然后。

24、添加剩余去离子水定容， 分装至三角瓶或试管中， 加胶塞密封， 121高 压灭菌20分钟， 灭菌完成后待温度降至60后取出， 洁净条件下倒平板或摆斜面， 制成平板 或斜面试管培养基； 0016 所述发酵培养基中含以下质量浓度的组分： 玉米粉水提物50g/L、 麦芽提取物20g/ L、 酵母提取物3g/L、 琼脂粉20g/L； 0017 发酵培养基的温度降至室温后， 接种5-8块3-5mm菌丝块， 然后180rpm避光培养 30d， 取出后用超声提取30min， 然后使用3层无菌纱布过滤， 得到发酵液。 0018 作为本发明所述菌根真菌子实体在制备抗肿瘤药物中的应用的优选实施方式， 所 述采用无水。

25、乙醇对菌丝体发酵液进行提取， 提取方法为： 按照体积比为 1:10的比例将无水 乙醇加入到发酵液中， 4冰箱存放处理12h， 然后50、 40rpm 条件下旋转蒸发减压浓缩， 产物在-80、 0.008mBAR条件下使用低温冷冻干燥机干燥， 冻干完成后即得菌丝体醇提物。 0019 本发明所述菌根真菌子实体， 可通过组织分离法得到纯培养菌种， 然后将菌种的 菌丝体进行发酵得到发酵液， 最后对发酵液进行提取得到提取物， 经过试验， 所得提取物具 有显著的抑制肿瘤细胞作用， 因此， 本发明为肿瘤的治疗提供了新的选择。 附图说明 0020 图1为本发明菌根真菌子实体的照片图。 0021 图2为本发明菌。

26、根真菌子实体的担孢子扫描电镜图。 0022 图3为本发明菌根真菌培养10天的生长状况图。 具体实施方式 0023 为更好的说明本发明的目的、 技术方案和有益效果， 下面将结合附图和具体实施 例对本发明作进一步说明。 0024 实施例1 0025 本发明菌根真菌子实体的一种实施例， 本实施例所述菌根真菌子实体为紫褶口 蘑 ， 所 述 紫 褶口 蘑来自 真 菌界 (F ung i) 担 子 菌门 (Ba s id i om y co ta) 伞菌 纲 (Agaricomycetes)伞菌目(Agaricales)口蘑科(Tricholomataceae)紫褶口蘑属， 是口蘑科 (Tricholom。

27、ataceae)、 紫褶口蘑属(Tricholosporum)的一个新物种， 采自辽宁阜新三塔沟 风景区内玉米地旁的腐殖层。 0026 子实体群生于阔叶林腐殖层上， 常形成蘑菇圈， 菌盖平展， 淡黄色至橙色， 带部分 紫色， 中部略凸起， 菌盖边缘撕裂状， 有绒毛状附属物， 并呈波浪状， 干燥时部分内卷， 菌褶 淡紫色， 直生至弯生， 不等长， 褶缘近似锯齿状， 菌柄圆柱形， 下部稍粗， 有绒毛状附属物， 中 说 明 书 3/5 页 6 CN 107519212 A 6 下部颜色稍深， 颜色近菌盖， 上部白色， 菌柄实心， 纤维质， 菌肉白色， 如附图1所示。 担孢子 十字型， 6.16.5 。

28、5.55.9 m， 担孢子扫描电镜图如附图2所示。 此种的主要特点是担孢 子呈十字型。 0027 该新种是通过野外采集得到， 依据形态学和分子生物学鉴定， 菌种是分离自新鲜 的子实体， 经过多次纯化培养获得， 并使用ITS序列验证与子实体一致， 纯化培养基配置方 法如下： 称取玉米粉50g， 溶解至500ml去离子水， 煮沸， 15min 后使用3层纱布过滤， 保存滤 液， 然后称取麦芽提取物20.0g， 酵母提取物3.0g， 溶解至玉米粉提取液， 继续添加400ml去 离子水， 加热并完全溶解后， 称取琼脂粉20.0g并不断搅拌至完全溶解， 然后添加去离子水 定容至1000ml， 分装至 2。

29、50ml三角瓶或试管中， 加胶塞密封， 121高压灭菌20分钟， 灭菌完 成后待温度降至60后取出， 洁净条件下倒平板或摆斜面， 制成平板或斜面试管培养基。 0028 子实体及菌丝体经试剂盒提取DNA， 并以ITS1/ITS4引物扩增和测序， 子实体和菌 丝体共同的rDNA-ITS序列如下： 0029 G G A A G G A T C A T T A T T G A A T G A A C T T G G T C C A A G T T G T T G C T G G C T C C T T G G A G C A T A T A T G T G T G C A C G C T T G G 。

30、T A C T C A T T C T A T T T A C C C A C C T G T G C A C T C T T T T G T A G A G C C C T G A G A T A T T T A G T T A T T C A G G T G T T T C C T G A G T T G A A G G T T T G C T G T G C G A A A G T C A G C T T T C C T T T A T T T T T T A T C T C T A G G G A T T C T A T G T A T T C T T A T A T A C T C 。

31、C T A A T G A A T G T A A C A G A A T G T T A T G T T G G T T T T A A A A A A A C A C A A T A T A C A A C T T T C A A C A A T G G A T C T C T T G G C T C T C G C A T C G A T G A A G A A C G C A G C G A A A T G C G A T A A G T A A T G T G A A T T G C A G A A T T C A G T G A A T C A T C G A A T C T T 。

32、T G A A C G C A T C T T G C G C C C C T T G G T A T T C C G A G G A G C A T G C C T G T T T G A G T G T C A T T A A A T T T C T C A A T C C T T C C T T T C G T T C T C A A T G A A T G A A A G A G G T T G G C A T T G G A A T G T G G A A G C T G C A G G C T T T T T A T T A T T A T A A T A A A G T C A 。

33、G C T C T T C T A A A A A G C A T T A G C T A A A T G T T T T G A G A A T T A A A C T A G C A T T G G T G T G A T A A T T A T C T A C G C C A T T T G T T A A A T C T C T T C A T A G T T T A G C T T C T A A T A T A A C A T T G G T C T T T G G G A C C T T G T T T T G A T A A T T T G A C C T C AAATCAGG。

34、TAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAA 0030 采用组织分离法得到的纯培养菌种即为菌根真菌， 已于2017年4月10日 保藏于中 国典型培养物保藏中心(地址： 中国， 武汉， 武汉大学， 邮编430072)， 保藏编号： CCTCC NO:M 2017185， 保藏菌株号： HMGIM-D160241， 拉丁文分类命 名为： Tricholosporum sp.， 子实体 及菌种的rDNA-ITS序列已提交至NCBI， 登 记号分别为： MF538720， MF538721。 0031 实施例2本发明菌根真菌子实体用于抗肿瘤的效果试验 0032 采用组织分离方法在MM。

35、N、 PDA等通用培养基上接种组织块无法萌发获得纯培养， 而在改良的复合培养基上生长情况较好， 其配方为： 玉米粉50g水提物， 麦芽提取物20.0g， 酵母提取物3.0g， 琼脂粉20.0g， 去离子水1000ml， 121高压灭菌15分钟。 在该培养基上菌 丝呈现淡紫色、 有气生菌丝， 基内菌丝较弱， 且生长一段时间(10d)后形成拧结状， 质地绒 状， 如附图3所示。 0033 菌丝体发酵液的制备方法： 首先准备发酵培养基： 称取玉米粉50g， 溶解至500ml去 离子水， 煮沸， 15min后使用3层纱布过滤， 保存滤液， 然后称取麦芽提取物20.0g， 酵母提取 物3.0g， 溶解至。

36、玉米粉提取液， 继续添加400ml去离子水， 加热并完全溶解后， 添加去离子水 说 明 书 4/5 页 7 CN 107519212 A 7 定容至1000ml， 分装至250ml三角瓶中， 每个三角瓶定量100ml， 加胶塞密封， 121高压灭菌 20分钟， 灭菌完成后待温度降至50时取出三角瓶并转移至洁净台， 待温度降至室温时接 种5-8块3-5mm 菌丝块， 然后180rpm避光培养30d， 取出后用超声提取30min， 然后使用3层无 菌纱布过滤， 得到发酵液。 0034 醇提物制备方法： 按照1： 10的比例加入无水乙醇至发酵液中， 4冰箱存放处理 12h， 然后50、 40rpm条。

37、件下旋转蒸发减压浓缩， 产物在-80、 0.008mBAR条件下使用低温 冷冻干燥机干燥， 冻干完成后使用无菌密封袋低温保存。 0035 方法： 0036 1.消化对数生长期Du145， NIH3T3细胞， 种24孔板， 8000个/孔， 每孔500 L； 0037 2.各样品称量30mg溶于300 L DMSO,完全溶解后加300 L DMEM (10FBS)， 设置 以下浓度100， 250， 300， 350， 400 g/ml， 加药； 0038 3.培养48h， 观察细胞致死率， 结果如表1所示。 0039 表1细胞致死率结果 0040 0041 由表1结果可看出， 发酵液的醇提物的。

38、IC50在300-350 g/mL之间， 在浓度为400 g/ mL时， Du145细胞死亡率为90， NIH3T3细胞死亡率为100， 由此可说明， 本发明所述菌根真 菌子实体， 经过分离纯化培养后得到菌根真菌， 采用该菌根真菌的菌丝体发酵液醇提物能 够有效抑制肿瘤细胞， 可用于制备抗肿瘤药物等。 0042 最后所应当说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保 护范围的限制， 尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明， 本领域的普通技术人员应当 理解， 可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质 和范围。 说 明 书 5/5 页 8 CN 107519212 A 8 图1 图2 说 明 书 附 图 1/2 页 9 CN 107519212 A 9 图3 说 明 书 附 图 2/2 页 10 CN 107519212 A 10 。