技术领域
本发明属于食品加工技术领域；具体涉及具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂及其制备方法。
背景技术
从菊芋中提取的天然菊粉是由不同聚合度的低聚糖组成的混合物，为白色无定形，易吸湿的粉末。菊粉在水中易分散，吸湿性强，易于结块，微带甜味。在溶液中菊糖可以降低水的冰点，提高水的沸点。菊粉难以被人体消化。菊糖在口腔、胃、小肠中均不会发生消化分解，只能在结肠中被双歧杆菌等部分发酵分解产生少量热量，由于其热值低，所以可以作为糖尿病患者的甜味剂。另外，菊粉能抑制肝脏中脂肪酸和胆固醇的合成，也具有降低血脂、血糖和改善能量代谢的作用，其次，菊糖抑制有害菌生长，从而有益于宿主健康的益生素作用。菊糖还可以促进金属离子如钙、镁等的吸收，并且还有助于改善肠道环境，减少肠道内腐败物质的产生，能增强肠胃蠕动，提高肠胃功能，增加消化和食欲，提高机体免疫功能。
壳寡糖又叫壳聚寡糖、几丁寡糖、低聚壳聚糖，学名β-1，4-寡糖-葡萄糖胺，是将壳聚糖经特殊的生物酶技术降解得到的一种聚合度在2～20之间寡糖产品，是水溶性较好、功能作用大、生物活性高的低分子量产品。壳寡糖的氨基碱性基团能中和癌细胞释放出的酸性物质，改变癌细胞生存所依赖的微环境，使人体PH值向碱性方向移动0.5(即恢复至7.35—7.45水平)，提高了巨噬细胞的活性，增加了巨噬细胞的数量，因此能够有效的消灭癌细胞。同时，相关研究也表明：壳寡糖是自然界中唯一带正电荷的膳食纤维，壳寡糖作为益生元在肠道中促进益生菌生长，可使体内乳酸菌、双歧杆菌等有益菌大量增殖，抑制大肠杆菌、沙门菌属、金黄色葡萄球菌等有害菌的生长，使体内微生态达到自然平衡，以提高胃肠道的正常生理机能。
现今市面上的产品为单纯的菊糖、单纯的壳寡糖，但能够将两者的制备过程综合在一起，并制成多功能复合多糖冲剂的还没有报道。
发明内容
本发明目的是提供了一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂及其制备方法。
本发明通过以下技术方案实现：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、按照重量份数分别称取50～1000份的甲壳素、50～1000份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：10～20L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于90～100℃的恒温水浴下1～2h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入8～12％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤3～5次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中2～5min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中10～60s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：10～1：20加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0～5.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入25mg/l～28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.15～0.3mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为3～4.5，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比0.5～1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为2～4％，搅拌10～30min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤2中高剪切分散机处理为2500～3000r/min的转速剪切分散处理20～30min；酶解反应中壳聚糖酶的酶活度为200～300U/ml，反应温度45～50℃，搅拌转速200～500rad/min，反应时间3～4h，酶解反应过程中用碳酸钠溶液调解pH7.4～7.6；机离心机转速12000～20000rad/min，离心10～20min。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤3中乙醇溶液中维生素E的含量为10～30g/l；高剪切分散机处理为2500～3000r/min的转速剪切分散处理20～30min；酶解条件为70～75℃处理1～2h。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤4中过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％；减压蒸馏的压强为-100～-85kPa、减压蒸馏的温度为40～45℃、时间为20～60min；所述的菊粉浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35～40％。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤5中高剪切分散机处理为温度为45～50℃，以2500～3000r/min的转速剪切分散处理3～6h。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤6中减压蒸馏的压强为-100～-85kPa、减压蒸馏的温度为30～35℃、时间为20～60min；所述的壳寡糖浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35～40％。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤7中冷冻干燥条件为在-20℃下预冻2h，之后置于真空冷冻干燥机内，抽真空至10～100Pa，冷肼温度-35～-40℃，冷冻时间4～8h。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，所述的超滤膜采用截留分子量为20～50KD的卷式超滤膜进行分离，所述卷式超滤膜为由聚苯乙烯或聚醚砜树脂或聚偏氟乙烯制成的耐酸超滤膜。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，所述的纳滤膜采用截留分子量为300～1000Da的卷式纳滤膜进行分离，所述卷式纳滤膜为由聚酰胺制成的耐酸纳滤膜。
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂由50～1000份的甲壳素、50～1000份的新鲜菊苣制成；所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂由以下方法制成：
步骤1、按照重量份数分别称取100～150份的甲壳素、500～700份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：10～20L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于90～100℃的恒温水浴下1～2h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入8～12％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤3～5次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中2～5min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中10～60s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：10～1：20加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0～5.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入25mg/l～28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.15～0.3mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为3～4.5，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比0.5～1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为2～4％，搅拌10～30min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，其中壳寡糖与菊粉的质量比为1～20：1～20。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，其中壳寡糖与菊粉的质量比为1：2、1：4、1：7、1：10、1：15、1：20。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，其中壳寡糖与菊粉的质量比为2：1、4：1、7：1、10：1、15：1、20：1。
有益效果：
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，菊粉的制备采用高剪切分散机中分散处理，高剪切分散机的利用能够提高菊粉的溶解性，提高提取率，降低溶解时间，防止菊苣中的淀粉转化成小分子糊精，降低了菊粉中的杂质含量，以利于降低后续纯化工艺难度，而且能耗低，采用pH值4.0-4.5的提取条件，可是蛋白质因等电沉积而降低溶解度，从而降低原料中的蛋白质溶出，降低了提取液中的杂质量，之后采用超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，避免了常规的石灰乳除杂处理，工艺简化，使反应条件在相对低的温度和缓和的酸碱范围，降低了设备及相关成本，降低了能耗和酸碱引起的污染。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，壳寡糖的制备；利用了黑曲霉对壳聚糖进行酶解反应，酶解反应在高剪切分散机中分散处理，高剪切分散机的利用能够提高壳寡糖的溶解性，提高酶解率，降低酶解时间，而且酶解过程及降解产物相对分子量的分布更容易控制，制备的壳聚糖生物活性高，产物过程容易控制，且不对环境造成污染，壳聚糖酶解后之后采用超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，提高了产物的纯度，壳寡糖的分子量<3000，脱乙酰度>92％，而且两种方法所用的设备相同，能够降低了设备及相关成本。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，所述的菊粉提取率最高能够达到91.5％，菊粉纯度达到96.6％，菊粉晶体直接从含有色素和盐离子的溶液中析出，菊粉产品纯度高，脱色脱盐效果好。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，通过对比试验证明，所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂相比于单一的壳聚糖或菊粉具有更优越的调节肠道菌群结构的作用，说明了所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂中壳聚糖和菊粉具有良好的协同增效作用。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，通过服用前后的对比试验证明，服用了壳寡糖对照组、菊粉对照组、所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂相对于未服用前，试食四周后，体内脂肪重量和体内脂肪百分率均有明显降低，而且试用所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂内脂肪含量降低最为明显，说明了所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对调节人体肥胖具有显著效果，能够预防和治疗肥胖并调节由于肥胖引起的肠道紊乱，而且复合多糖之间具有明显的协同作用。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，壳聚糖与菊粉按一定配比组合，对多种原因导致的肠道菌群紊乱具有良好的调节作用，并且本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，对调节肥胖引起的肠道紊乱具有很好的效果。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，能够日常添加于食品、药品，在改善口感的基础上具有保健的作用。
具体实施方式
具体实施方式一：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、按照重量份数分别称取100份的甲壳素、500份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：10L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于90℃的恒温水浴下1h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入8％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤3次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中2min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中10s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：10加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入25mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.15mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为3，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比0.5：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为2％，搅拌10min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤2中高剪切分散机处理为2500r/min的转速剪切分散处理20min；酶解反应中壳聚糖酶的酶活度为200U/ml，反应温度45℃，搅拌转速200rad/min，反应时间3h，酶解反应过程中用碳酸钠溶液调解pH7.4；机离心机转速12000rad/min，离心10min。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤3中乙醇溶液中维生素E的含量为10g/l；高剪切分散机处理为2500r/min的转速剪切分散处理30min；酶解条件为70℃处理1h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤4中过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20％；减压蒸馏的压强为-100kPa、减压蒸馏的温度为40℃、时间为20min；所述的菊粉浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤5中高剪切分散机处理为温度为45℃，以2500r/min的转速剪切分散处理3h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤6中减压蒸馏的压强为-100kPa、减压蒸馏的温度为30℃、时间为20min；所述的壳寡糖浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤7中冷冻干燥条件为在-20℃下预冻2h，之后置于真空冷冻干燥机内，抽真空至10Pa，冷肼温度-35℃，冷冻时间4h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，壳寡糖与菊粉的质量比为1：10。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，进行肥胖小鼠肠道菌群组成影响的对比试验，选取50只试验专用雄性小鼠，小鼠体重20±2g，随机分为5组，每组10只，分别为空白组、模型对照组、阳性壳寡糖组、阳性菊粉组、本实施方式组。空白组给予普通饲料，其余四组给予高脂肪饲料喂养8周后，阳性壳寡糖组、阳性菊粉组、本实施方式组的动物分别连续给予壳寡糖、菊粉、具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂灌胃4周，空白组和模型对照组给予等容积的生理盐水，测量给药前、给药结束后各小鼠体质量，实验结束时于无菌条件下取小鼠粪便，采用16S-rRNA对小鼠粪便肠道菌进行测序分析，比较组间肠道菌群组成的变化情况，小鼠体重变化如表1所示，具有显著性差异的菌属的相对丰度如表2所示：
表1小鼠体重变化对比表
注：与空白对照组相比*P<0.05；与模型对照组相比*P<0.05。
通过表1能够明显看出，各肥胖组小鼠的初始体重并无明显差异，当给予壳寡糖、菊粉、具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂灌胃4周后，小鼠体重相比于模型对照组都有明显下降，但本实施方式具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂效果最为显著，几乎能够降低到空白组小鼠体重达到同一标准，恢复标准的体重。
表2菌属的相对丰度对比表
注：与空白对照组相比*P<0.05；与模型对照组相比*P<0.05。
从表2中能够看出，模型对照组的厚壁菌门和变形菌门发生明显升高，拟杆菌门发生明显降低，给予壳寡糖、菊粉、具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂灌胃4周后，拟杆菌门水平显著增加，厚壁菌门和变形菌门水平显著降低，而且具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂与空白组的菌属丰度最为接近，说明具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对高脂饮食诱导的小鼠肠道菌群失调具有调节作用，而且具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂比单一的壳寡糖、菊粉具有更好的回调效果，说明具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂发挥了明显的协同作用。
具体实施方式二：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、按照重量份数分别称取700份的甲壳素、50份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：20L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于100℃的恒温水浴下1h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入12％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活30min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤5次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中5min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中60s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：20加水混匀，用稀盐酸调整pH值为5.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.3mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为4.5，将步骤2制备的壳聚糖按照质量1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为4％，搅拌30min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活30min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤2中高剪切分散机处理为3000r/min的转速剪切分散处理30min；酶解反应中壳聚糖酶的酶活度为300U/ml，反应温度50℃，搅拌转速500rad/min，反应时间4h，酶解反应过程中用碳酸钠溶液调解pH7.6；机离心机转速20000rad/min，离心20min。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤3中乙醇溶液中维生素E的含量为30g/l；高剪切分散机处理为3000r/min的转速剪切分散处理30min；酶解条件为75℃处理2h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤4中过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数25％；减压蒸馏的压强为-85kPa、减压蒸馏的温度为45℃、时间为60min；所述的菊粉浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数40％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤5中高剪切分散机处理为温度为50℃，以3000r/min的转速剪切分散处理6h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤6中减压蒸馏的压强为-85kPa、减压蒸馏的温度为35℃、时间为60min；所述的壳寡糖浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数40％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤7中冷冻干燥条件为在-20℃下预冻2h，之后置于真空冷冻干燥机内，抽真空至100Pa，冷肼温度-40℃，冷冻时间8h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，壳寡糖与菊粉的质量比为7：1。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范2003》的调节肠道菌群功能人体试食实验评价办法，对壳寡糖、菊粉、具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂进行评价，
160位志愿者进行效果测试，160位志愿者为80位男性，80位女性，每组40人，随机4组为模型对照组、壳寡糖对照组、菊粉对照组、本实施方式组，在受试者试食之前，均无菌采取受试者粪便，16s rDNA测序检验肠道菌群，作为本底水平的参照。壳寡糖对照组每天服用壳寡糖6g、菊粉对照组每天服用菊粉6g、本实施方式组相应每天服用6g具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，连续服用4周，模型对照组服用相应体积的生理盐水。4周后，采取受试者粪便，16s rDNA测序检验肠道菌群，与本底水平相比，对比其相对丰度增加的倍数，结果如表3所示：
表3人体受试肠道菌群测序丰度对比
注：与模型对照组相比*P<0.05；
从表3中能够看出，与食用前相比，服用了壳寡糖对照组、菊粉对照组、本实施方式组相对于模型对照组，试食四周后，双歧杆菌。丁酸弧菌、乳杆菌、乳球菌、罗斯式菌、栖粪杆菌、真杆菌均有明显增加，而且试用本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂增加数量最为明显，说明了本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对调节肠道菌群具有显著效果，复合多糖之间具有明显的协同作用。
具体实施方式三：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、按照重量份数分别称取500份的甲壳素、500份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：15L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于100℃的恒温水浴下1h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入10％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活20min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤4次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中3min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中30s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：15加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.2mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为4，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为3％，搅拌20min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤2中高剪切分散机处理为3000r/min的转速剪切分散处理20min；酶解反应中壳聚糖酶的酶活度为200U/ml，反应温度45℃，搅拌转速300rad/min，反应时间4h，酶解反应过程中用碳酸钠溶液调解pH7.5；机离心机转速15000rad/min，离心15min。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤3中乙醇溶液中维生素E的含量为20g/l；高剪切分散机处理为3000r/min的转速剪切分散处理30min；酶解条件为75℃处理2h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤4中过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数25％；减压蒸馏的压强为-85kPa、减压蒸馏的温度为45℃、时间为30min；所述的菊粉浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数40％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤5中高剪切分散机处理为温度为50℃，以3000r/min的转速剪切分散处理5h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤6中减压蒸馏的压强为-85kPa、减压蒸馏的温度为35℃、时间为30min；所述的壳寡糖浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数40％。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤7中冷冻干燥条件为在-20℃下预冻2h，之后置于真空冷冻干燥机内，抽真空至100Pa，冷肼温度-40℃，冷冻时间5h。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，壳寡糖与菊粉的质量比为1：2。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，采用自身对照设计，对壳寡糖、菊粉、具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂进行人体指标评价，120位志愿者进行效果测试，120为志愿者均为体重超过80kg的男士，随机分为3组为壳寡糖对照组、菊粉对照组、本实施方式组。壳寡糖对照组每天服用壳寡糖6g、菊粉对照组每天服用菊粉6g、本实施方式组相应每天服用6g具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，连续服用4周。试食期间日常饮食及运动量与试验前保持一致，各项指标于试食开始及结束时各测试一次。体重测试结果如表4所示，体内脂肪总量及脂肪百分率测试结果如表5所示：
表4体重测试对比表(kg，)
注：与试食前相比*P<0.05；
从表4中能够看出，服用与食用前相比，服用了壳寡糖对照组、菊粉对照组、本实施方式组相对于未服用前，试食四周后，体重均有明显降低，而且试用本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂体重降低最为明显，说明了本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对调节人体肥胖具有显著效果，能够预防和治疗肥胖并调节由于肥胖引起的肠道紊乱，而且复合多糖之间具有明显的协同作用。
表5体内脂肪总量及脂肪百分率测试对比表
注：与试食前相比*P<0.05；
从表5中能够看出，服用与食用前相比，服用了壳寡糖对照组、菊粉对照组、本实施方式组相对于未服用前，试食四周后，体内脂肪重量和体内脂肪百分率均有明显降低，而且试用本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂内脂肪含量降低最为明显，说明了本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对调节人体肥胖具有显著效果，能够预防和治疗肥胖并调节由于肥胖引起的肠道紊乱，而且复合多糖之间具有明显的协同作用。
具体实施方式四：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1、按照重量份数分别称取100～150份的甲壳素、500～700份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：10～20L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于90～100℃的恒温水浴下1～2h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入8～12％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤3～5次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中2～5min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中10～60s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：10～1：20加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0～5.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入25mg/l～28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.15～0.3mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为3～4.5，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比0.5～1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为2～4％，搅拌10～30min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，菊粉的制备采用高剪切分散机中分散处理，高剪切分散机的利用能够提高菊粉的溶解性，提高提取率，降低溶解时间，防止菊苣中的淀粉转化成小分子糊精，降低了菊粉中的杂质含量，以利于降低后续纯化工艺难度，而且能耗低，采用pH值4.0-4.5的提取条件，可是蛋白质因等电沉积而降低溶解度，从而降低原料中的蛋白质溶出，降低了提取液中的杂质量，之后采用超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，避免了常规的石灰乳除杂处理，工艺简化，使反应条件在相对低的温度和缓和的酸碱范围，降低了设备及相关成本，降低了能耗和酸碱引起的污染。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，壳寡糖的制备；利用了黑曲霉对壳聚糖进行酶解反应，酶解反应在高剪切分散机中分散处理，高剪切分散机的利用能够提高壳寡糖的溶解性，提高酶解率，降低酶解时间，而且酶解过程及降解产物相对分子量的分布更容易控制，制备的壳聚糖生物活性高，产物过程容易控制，且不对环境造成污染，壳聚糖酶解后之后采用超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，提高了产物的纯度，壳寡糖的分子量<3000，脱乙酰度>92％，而且两种方法所用的设备相同，能够降低了设备及相关成本。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的复合多糖冲剂，壳聚糖与菊粉按一定配比组合，对多种原因导致的肠道菌群紊乱具有良好的调节作用，并且本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，对调节肥胖引起的肠道紊乱具有很好的效果。
本发明所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法制备的复合多糖冲剂，能够日常添加于食品、药品，在改善口感的基础上具有保健的作用。
具体实施方式五：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤2中高剪切分散机处理为2500～3000r/min的转速剪切分散处理20～30min；酶解反应中壳聚糖酶的酶活度为200～300U/ml，反应温度45～50℃，搅拌转速200～500rad/min，反应时间3～4h，酶解反应过程中用碳酸钠溶液调解pH7.4～7.6；机离心机转速12000～20000rad/min，离心10～20min。
具体实施方式六：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤3中乙醇溶液中维生素E的含量为10～30g/l；高剪切分散机处理为2500～3000r/min的转速剪切分散处理20～30min；酶解条件为70～75℃处理1～2h。
具体实施方式七：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤4中过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％；减压蒸馏的压强为-100～-85kPa、减压蒸馏的温度为40～45℃、时间为20～60min；所述的菊粉浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35～40％。
具体实施方式八：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤5中高剪切分散机处理为温度为45～50℃，以2500～3000r/min的转速剪切分散处理3～6h。
具体实施方式九：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤6中减压蒸馏的压强为-100～-85kPa、减压蒸馏的温度为30～35℃、时间为20～60min；所述的壳寡糖浓缩液的浓度为可溶性固形物含量为质量分数35～40％。
具体实施方式十：
根据具体实施方式四所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂的制备方法，步骤7中冷冻干燥条件为在-20℃下预冻2h，之后置于真空冷冻干燥机内，抽真空至10～100Pa，冷肼温度-35～-40℃，冷冻时间4～8h。
具体实施方式十一：
一种具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂由50～1000份的甲壳素、50～1000份的新鲜菊苣制成；所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂由以下方法制成：
步骤1、按照重量份数分别称取50～1000份的甲壳素、50～1000份的新鲜菊苣；
步骤2、将步骤1中的甲壳素过100目筛后，按照料液比为1000g：10～20L称取后加入蒸馏水中，搅拌均匀后置于90～100℃的恒温水浴下1～2h后，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，按照体积比加入8～12％的壳聚糖酶，在加热恒温搅拌下进行酶解反应，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，离心，得到的沉淀物用蒸馏水洗涤3～5次，沉淀物烘干制得壳聚糖；
步骤3、将步骤1中的新鲜菊苣清洗后，置于沸水中2～5min，取出冷却至室温，切片后，浸泡到溶有维生素E的乙醇溶液中10～60s，取出后干燥、粉碎，过筛后得到的粗粉原料按照料夜比1：10～1：20加水混匀，用稀盐酸调整pH值为4.0～5.0，然后转移到高剪切分散机中分散处理，然后转移到酶解罐中，加入25mg/l～28mg/l的中性蛋白酶酶解，之后过滤除去滤渣，得到菊粉第一浸提液；
步骤4、将步骤3制得的菊粉第一浸提液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的菊粉浓缩液，待用；
步骤5、配置浓度为0.15～0.3mol/l的乙酸钠溶液，然后用醋酸调节PH值为3～4.5，将步骤2制备的壳聚糖按照质量比0.5～1：10加入到乙酸钠溶液，然后加入质量浓度为1.0％的黑曲霉，使酶底比为2～4％，搅拌10～30min后，全部转移到高剪切分散机中分散处理，反应结束后升高温度到100℃，连续热灭活15～30min，然后迅速冷却至室温，过滤得到壳寡糖第一滤液；
步骤6、将步骤5制得的壳寡糖第一滤液经过超滤膜分离设备进行过滤，过滤后的滤液再进入纳滤膜分离设备进行过滤，过滤后的截留液为可溶性固形物含量为质量分数20～25％，将过滤后的截留液减压蒸馏后得到的壳寡糖浓缩液，待用；
步骤7、将步骤5得到的菊粉浓缩液和步骤6得到的壳寡糖浓缩液混合均匀后，冷冻干燥，真空密封袋包装、制得具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂。
本实施方式所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂，通过服用前后的对比试验证明，服用了壳寡糖对照组、菊粉对照组、所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂相对于未服用前，试食四周后，体内脂肪重量和体内脂肪百分率均有明显降低，而且试用所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂内脂肪含量降低最为明显，说明了所述的具有调节肠道菌群功能的复合多糖冲剂对调节人体肥胖具有显著效果，能够预防和治疗肥胖并调节由于肥胖引起的肠道紊乱，而且复合多糖之间具有明显的协同作用。