相关申请的交叉引用
本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2015年3月5日提交的美国临时专利申请序列号62/128,647的优先权，其全部内容通过引用结合在此。
发明领域
本发明总体上涉及用于减少衰老迹象和/或改进人皮肤健康的方法。更具体地说，本发明涉及轮流、连续或交替使用两种或更多种不同的处理来改进皮肤的外观，包括修复衰老迹象。两种或更多种不同的处理模式可以包括但不限于局部施用含有护肤活性物质的组合物，使用装置，例如以赋予皮肤机械或电磁能量，施用面膜(其可以是主动洗脱的)，皮下注射，口服给予活性物质和化学换肤。处理模式可以每天至少进行一次，处理时间可以在1-31天范围内，并且然后处理模式是连续交替的或连续轮流的。
背景
已经开发了许多护肤产品来改进人皮肤的外观。许多更有效的方法使用含有已知有益地影响皮肤的一种或多种活性成分的局部施用组合物。例如，含有类视黄醇，特别是视黄醇的组合物已被证明能有效地对抗细纹、皱纹和其他皮肤衰老指征，如下垂。局部施用类视黄醇促进皮肤中胶原和弹性蛋白的形成。具有类视黄醇的组合物可用于处理无数的不想要的皮肤状况，如痤疮和皱纹。然而，在一些个体中长期使用的情况下，已知视黄醇疗法的好处达到稳定时期。
植醇是另一种已知可促进皮肤健康并补救或减少皮肤衰老迹象的活性剂。用于增强皮肤外观的、包含植醇和视黄醇的组合物被描述于Menon的美国公开2003/0198657，其披露内容通过引用结合在此。
已经认识到，皮肤可能已经习惯于化妆品，并且在初期处理后可观察到对皮肤的益处可能开始下降。皮肤科医师在临床试验中也观察到，皮肤可以增加对类视黄醇的耐受性，并且经一段时间后可能需要使用含较高浓度类视黄醇的组合物以在一些个体中维持所期望效果。这种现象类似于适应，这在生物系统中有很好的描述。例如，在细胞水平上，受体的刺激导致脱敏和减少的应答。在再次看到同样的应答水平之前，需要进行一段时间的复敏或“休息”。
因此，本发明的目的是提供处理皮肤的方法，这些方法克服了耐受性问题和/或提供了增强的功效和/或改进了人皮肤的健康和/或外观。本发明的另一个目的是提供对人皮肤的处理，这些处理涉及至少两种不同的处理模式的轮流、连续和/或交替使用。本发明的另一个目的是提供改进人皮肤健康和/或外观的方法，这些方法涉及至少两种护肤组合物的轮流、连续和/或交替局部施用。
介绍上述讨论仅仅是为了更好地理解本领域所面临的问题的性质，并且不应以任何方式解释为对现有技术的承认，也不应将在此引用的任何参考文献视为承认这样的参考文献构成了本申请的“现有技术”。
发明概述
根据上述目的和其他目的，本发明提供了用于改进人皮肤的皮肤病衰老的一种或多种迹象和/或改进人皮肤健康的方法，这些方法包括在多个(例如，二、三、四、五、六、七、或更多个)不同的处理模式之间的交替/轮换。给予每种处理模式一段时间(例如，至少每日一次，持续1-31天)，其可以与每个其他处理模式的处理的时间段相同或不同。处理模式可以包括将局部用组合物施用于皮肤、将机械或电磁能量(例如，超声、振动、光(可见光、红外线等))施用于皮肤、机械或化学脱屑(例如，微晶换肤，化学换肤等)、将面膜施用于皮肤(其可以任选地将皮肤活性物质洗脱到皮肤上)、口服给予活性物质等。除了常规的洗涤和/或保湿之外，该处理模式可以包括通过不以任何特定的模式处理以允许皮肤“休息”。在一些实施方式中，多种处理模式中的至少一种需要将护肤活性成分局部施用于皮肤区域(例如，脸部)至少每天一次，持续1-31天。在一些实施方式中，多种处理模式中的至少两种需要将护肤活性成分局部施用于皮肤区域(例如，脸部)至少每天一次，持续1-31天，其中这些护肤活性物质和处理时间段可能彼此不同。在一些实施方式中，多种处理模式中的至少一种需要将机械或电磁能量施用于皮肤区域(例如，脸部)至少每天一次，持续1-31天。在一些实施方式中，多种处理模式中的至少一种必需每天至少一次使皮肤区域(例如脸部)去角质(例如，化学或机械的)持续1-31天的时间，例如使用化学换肤(例如，苯酚)、微晶换肤、或用包含有效量的脱屑剂的局部用组合物。在一些实施方式中，该方法包括使用至少两种处理模式，其中将第一组合物局部施用于皮肤区域(例如，脸部)，每天一次或多次持续第一时间段(例如，1-31天)，随后将第二组合物局部施用于相同皮肤区域，每天一次或多次持续第二时间段(例如，1-31天)。
不希望受任何特定理论的束缚，据信轮流处理方案至少部分克服了适应和/或耐受现象，由此某些活性物质或处理的作用随着时间的推移而减弱或达到稳定时期。还有一种理论是，轮流处理可以协作地和/或协同地起作用，由此一种处理模式增强其他处理模式的功效。例如，预期脱屑处理可改进随后施用的活性物质的渗透，或者预期抗炎处理减少与视黄醇使用相关的红斑，并因此允许更高水平或更频繁地施用类视黄醇。
在本发明的一方面，提供了处理皮肤以改进其健康和/或外观的方法，该方法包括将第一处理模式(例如，局部施用包括活性剂的第一组合物)施用到有对其有需要的皮肤区域至少每天一次持续第一段时间(例如，预定时间段)，通常为从1-31天、或从2-31天、或从3-31天、或从4-31天、或从5-31天、或从6-31天、或从7-31天、或从1-7天、或从2-7天、或从3-7天、或从4-7天、或从5-7天、或7天等。该时间段可以是“预定的”，这意味着在开始方案之前，用户确定或得到指示(例如，通过伴随产品的或者在计算机上以电子方式获得的书面说明书)来每天使用该处理模式(例如，局部施用护肤组合物)持续连续固定天数。可替代地，该时间段可以由用户对第一处理模式的每天使用(例如，第一组合物的局部施用)的应答和/或反应来确定。例如，第一时间段可以在给予/施用的第一天开始，并且在出现刺激和/或发红时结束，或者可以在有可观察到的皮肤衰老的迹象的改进和/或减少时结束，或者可以在功效稳定水平的开始时结束等。在一些实施方式中，在相同的皮肤区域上使用第一处理模式(例如，护肤组合物的局部施用)持续至少两天、三天、四天、五天、六天、七天或更多连续天。在其他实施方式中，第一处理模式(例如，护肤组合物的局部施用)仅使用一天。在其他实施方式中，第一处理模式(例如，护肤组合物的局部施用)每天使用持续七天。
第一时间段之后可以是停止第一处理模式和/或开始使用第二处理模式的第二时间段。例如，第一处理模式可以包括局部施用第一组合物(包含第一活性剂)持续第一时间段，并且此后：(i)该第一组合物每天不施用到相同皮肤区域持续第二时间段，(ii)该第一种组合物每天继续施用于相同的皮肤区域，但以改变的量(例如，剂量(mg/cm2)相对于第一时间段是增加的或减少的)或以改变的频率(例如，相对于第一时间段，每天施用更多次数或更少次数)，持续第二时间段，和/或(iii)将第二组合物局部施用(例如，每天至少一次)于相同皮肤区域持续第二时间段。在一个实施例中，第一处理模式在第二时间段期间停止。
第二时间段通常为从1-31天、或从2-31天、或从3-31天、或从4-31天、或从5-31天、或从6-31天、或从7-31天、或从10-31天、或从14-31天、或从5-31天、或从6-31天、或从7-31天、或从1-7天、或从2-7天、或从3-7天、或从4-7天、或从5-7天、或从7天等。在一些实施方式中，将第二处理模式(例如，护肤组合物的局部施用)给予至相同的皮肤区域持续至少两天、三天、四天、五天、六天、七天或更多连续天。在一些实施例中，第二时间段短于、等于、或长于第一时间段。在一些实施例中，第二时间段是一天。在一些实施例中，第二时间段是七天。第二时间段可以是预定的(例如，根据书面说明书)，或者可以由用户对每天使用/施用第二处理模式的应答和/或反应来确定。第二时间段通常在第一时间段的最后一天之后的那天开始，虽然可以预期第一时间段的结束和第二时间段的开始可以分开一天、二天、三天、四天、五天、六天、七天或更多天，这可能是预定的时间段，以使皮肤在不用第一或第二处理模式处理的情况下“休息”。这可能需要仅用没有皮肤活性物质的组合物(例如，只有增湿处理)或者在该时间内完全不施加任何组合物。还预期第二时间段可以部分地(但不是完全地)与第一时间段重叠，使得第一和第二模式每天给予至相同皮肤区域数天(例如，一天、两天、三天等)。因此，第二时间段可能与第一时间段重叠、嵌入其、或是连续的，或者可能在第一时间段后一天或更长时间间隔之后。第二处理模式可以包括局部施用与第一护肤组合物不同的第二护肤组合物。例如，如果第一护肤组合物包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)，则在一些实施例中，第二护肤组合物可以包括不同的类视黄醇，不同量的相同类视黄醇，或者可以不含类视黄醇(例如，视黄醇)。在一些实施方式中，第二处理方案可能不需要处理，这意味着没有组合物局部施用于皮肤。举例而言，根据本发明的一种处理方案可以包括：在包括局部施用视黄醇配制品的第一模式，随后是包括局部施用不包括视黄醇(或任何类视黄醇)的第二配制品的第二模式之间交替，并且此后再重复这些步骤一次或多次。
在完成第二处理模式后，该方案可以继续将第一处理模式再次给予至相同皮肤区域持续所述第一时间段。第一时间段可以在第二时间段的最后一天之后的那天开始。可替代地，在开始第一处理模式之前第二时间段之后可以是“休息”时段(如上所述)。在另一个实施例中，第二处理模式之后(在第二天或在任何“休息”时段后)可以是第三处理模式，持续第三时间段。
该方案可以使用任何数量的处理模式，以这种方式继续。例如，在本发明的一个实施例中，将七种不同的处理模式依次给予至个体持续七个时间段。根据该实施例的时间段范围可以是从1-31天，更典型地为从1-7天，或从1-3天，或1天。在一个实施例中，处理方案包括七种不同的处理模式，将每种处理模式在连续七天的时间段内给予至少一天(或仅一天)，条件是没有两天具有相同的处理方案。
在使用两种处理模式的各种实施例中，分别可以将模式表示为“A”和“B”，其中“A”、“B”可以各自表示局部用组合物，标识一种处理材料或多种处理材料和/或以不同间隔重复(每次施用、每天、每周等)进行的处理给予、持续时间、强度等的模式。在一些实施例中，处理方案可以表示为(AB)n，其中模式A和B依次使用，并且然后该过程重复n-1次(其中n通常大于2、或大于3、或大于4、或大于8、或大于12等)。例如，在n＝4的情况下，这可以表示为ABABABAB。还可以包括另外的处理模式。例如，在包括第三处理模式“C”的情况下，方案可以表示为(ABC)n，其中模式A、B和C被顺序地使用，并且然后该过程重复n-1次。例如，在n＝4的情况下，这可以表示为ABCABCABCABC。还可以包括另外的处理模式。在另一个实施例中，处理模式可以穿插其中不使用活性物质或非活性皮肤护理配制品的休息期。
在一些实施例中，多种处理模式中的至少一种包括局部施用包含有效量的至少一种护肤活性物质的组合物。活性物质通常溶解或分散在生理上相容的载体(例如乳剂、油、凝胶、精华液等)中。活性物质的有效量可以基于整个组合物的重量例如占从约0.0001％至约25％(w/w)，更典型地按重量计为从约0.001％至约5％(或按重量计从约0.01-1％或0.1-0.5％)。组合物可以包括另外的佐剂和赋形剂，如成膜剂、油、树脂、弹性体、蜡、增稠剂和流变改性剂、胶凝剂、稳定剂、柔润剂、调节剂、保湿剂、螯合剂、pH调节剂、防腐剂、香料、填料和粉末、着色剂和光学改性剂、防晒剂等。媒介物可以包括水，或者它可以是无水的或基本上无水的。媒介物可以包括一种或多种油，包括酯油、植物油、脂肪醇、烃油、矿物油、聚烯烃油、硅油等。
在一个实施例中，多种处理模式中的至少一种包括局部施用组合物，该组合物包含有效量(例如，从约0.05％至约5％(w/w))类视黄醇(例如，视黄醇、视黄醛、视黄醇棕榈酸酯等)，该局部施用为至少每天一次(或每天一次等)，持续第一时间段：从1天至31天，更典型地，从2-31天，或从3-14天，或从5-10天，或持续7天。在一个实施方式中，第一组合物包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)。在另一个实施方式中，第二组合物包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)。在一个实施方式中，第一组合物包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)，并且第二组合物不包含有效量(例如，从约0.05％至约5％(w/w))的类视黄醇(例如，视黄醇)。在另一个实施方式中，第二组合物包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)，并且第一组合物不包含有效量(例如，从约0.05％至约5％(w/w))的类视黄醇(例如，视黄醇)。
在一些实施方式中，多种处理模式中的至少一种需要局部施用有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)每天至少一次(或每天一次)持续第一时间段：从约1天至31天、或从2-31天、或从3-14天、或从5-10天、或从1-7天或从1-5天、或从1-3天，或持续一天。在一个实施方式中，多种处理模式中的至少一种需要局部施用有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)每天至少一次(或每天一次，例如在夜间)持续连续七天。
在一个实施方式中，每天给予第一处理模式(例如，局部施用包括护肤活性物质的第一组合物)持续连续五天(例如，星期一至星期五)，并且每天给予第二处理模式(例如，局部施用包括不同护肤活性物质的第二组合物)(该第二处理模式与该第一处理模式不同)持续随后的两天(例如，星期六和星期天)。在另一个实施方式中，每天给予第一处理模式(例如，局部施用包括护肤活性物质的第一组合物)持续连续七天(例如，星期一至星期天)，并且每天给予第二处理模式(例如，局部施用包括不同护肤活性物质的第二组合物)(该第二处理模式与该第一处理模式不同)持续随后的连续七天(例如，星期一至星期天)。该方案可以重复多次，这些次数包括另外的至少一次、二次、三次、四次或更多次，并且通常直到注意到皮肤健康和/或外观的改进为止。第一处理模式可以涉及局部施用组合物，该组合物包含有效量(例如，按重量计0.05％至5％)的类视黄醇，如视黄醇或棕榈酸视黄酯。第二处理模式可能涉及局部施用第二组合物，该第二组合物包含例如有效量的除类视黄醇以外的护肤活性物质。在一个实施方式中，第二组合物包含有效量的α羟基酸。在一个实施方式中，第二组合物包含有效量的抗氧化剂。在一个实施方式中，第二组合物包含有效量的植物提取物(例如，三药香料藤(Tiliacora triandra)提取物，包括水培生长的变体)。在另一个实施方式中，第二组合物包含增湿剂、柔润剂、和/或保湿剂，并且可以包含另外的活性物质，或可以不含另外的活性物质(例如植醇、乙醇酸、和/或烟酰胺)。在另一个实施方式中，第二组合物不包含有效量的类视黄醇(例如，视黄醇)或不含有类视黄醇(例如，视黄醇)。
在一些实施例中，第一局部化妆品组合物可以包括至少一种皮肤活性物质，该皮肤活性物质具有改进皮肤外观和/或健康的作用，包括但不限于减少皮肤衰老迹象的出现(例如，自然衰老、激素衰老、环境衰老、和/或光衰老)。在一些实施例中，第一活性剂可以是增加胶原、前胶原、弹性蛋白、葡糖胺聚糖(GAG)和/或皮肤中透明质酸产生的，和/或减少皮肤色素沉着和/或调节(增加或减少)脂肪细胞脂肪分解或脂肪生成的物质。活性剂可以是但不限于改进皮肤紧致度(例如，减少下垂)，减少皱纹和/或细纹(例如，鱼尾纹，羽状皱纹等)的外观，增厚变薄的皮肤，改进(例如，均匀)肤色，减少局部的色素沉着区域的外观(例如，太阳斑、雀斑、褐黄斑、老年斑等)，减少眼睛下方黑眼圈的外观，和/或减少脂肪团的外观等。在一些实施例中，第一组合物可以包括以下各项中的一种或多种：胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、胶原上调剂/刺激剂、前胶原上调剂/刺激剂、弹性蛋白酶上调剂/刺激剂、透明质酸上调剂/刺激剂、酪氨酸酶抑制剂、黑素体转移酶抑制剂、黑素生成抑制剂。
在一些实施例中，这些活性剂可包含以下各项中的一种或多种：类视黄醇(例如，视黄醇及其C2-20酯，如视黄醇棕榈酸酯、视黄醇乙酸酯和视黄醇丙酸酯、视黄醛、9-顺式视黄酸、13-顺式视黄酸、全反式视黄酸、植烷酸、维生素A、和这些中任一种的酯和盐等)，α-羟基酸(例如，乙醇酸、乳酸、柠檬酸等)，β-羟基酸(例如，水杨酸)，水杨酸酯，5-α-还原酶抑制剂(亚麻酸、亚油酸、非那雄胺等)，维生素(例如，维生素A、B、C、E等，及其C2-20酯)，PPAR-γ抑制剂，抗炎药(例如，TNF-α抑制剂)，抗氧化剂(例如，抗坏血酸，虾青素，β-胡萝卜素，儿茶素，姜黄素，鞣花酸和没食子酸衍生物(例如，没食子酸丙酯)，阿魏酸衍生物(例如，阿魏酸乙酯，阿魏酸钠)，谷胱甘肽(GSH)，绿茶提取物，己基间苯二酚，艾地苯醌，α-硫辛酸，番茄红素，植醇，植烷酸，TDPA及其酯(例如，二月桂基)，巯基乙酸，还原酸；迷迭香酸；丹宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，泛醌，尿酸及其中任一种的C2-20酯)，植物化学成分(例如，黄酮类化合物和类葫萝卜素)，植物抗毒素，茋类(例如，白藜芦醇)，植物成分，高级糖基化终产物(AGE)抑制剂/反向调节剂(reverser)(例如，TDPA)，嘌呤；雌激素合成酶刺激化合物(例如，咖啡因和衍生物)，氨基酸(例如，L-精氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酰胺、L-甘氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸、L-丙氨酸、L-苏氨酸、L-谷氨酸、L-牛磺酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸等，或其C2-20酯或酰胺和衍生物，包括对映异构体)及其衍生物(例如，肉毒碱、N-乙酰酪氨酰胺等)，二肽(例如，肌肽)，及其低聚肽和C2-20(例如，棕榈酰)酯或酰胺(例如，棕榈酰寡肽)，脱屑剂(例如，乙醇酸、水杨酸、亚氨基过羧酸(imidopercarboxylic acid)、茉莉酸、龙胆酸、3,6,9-三噁十一烷二酸等，及这些中任一种的衍生物)，角质层分离剂(例如，尿囊素、乳酸、尿素等)，收敛剂(例如，金缕梅(Witch hazel))，止痒剂(例如，樟脑、薄荷脑等)，抗痤疮剂(例如，水杨酸，硫，过氧化苯甲酰，三氯生等)，类固醇，包括皮质类固醇(例如，氢化可的松)和甾醇(例如，β-谷甾醇，植物甾醇，如野大豆甾醇(Glycine soja sterol)、石榴甾醇、油菜甾醇、卡诺拉甾醇等)，大豆异黄酮苷(例如，染料木苷、黄豆苷、和黄豆黄苷)和苷元(aglycone)(例如，金雀异黄素、黄豆苷元、和黄豆黄素)，脱色剂(例如，对苯二酚、甘草提取物、曲酸、烟酰胺等)，着色剂(例如，二羟基丙酮)，屏障功能增强剂(例如，神经酰胺，如神经酰胺-2，甘油酯，胆固醇及其酯，α-和ω-羟基脂肪酸及其酯等)，丝氨酸蛋白酶抑制剂(例如，大豆蛋白)，及其组合。
在各种非限制性实施例中，活性剂可以是调节(例如，上调、下调、刺激、抑制等)以下各项中的一种或多种的表达或活性的物质：视黄酸受体(RAR)、类视黄醇X受体(RXR)、肉碱棕榈酰转移酶I(CPT-1)、PLOD-2、胸腺素-β4、固生蛋白-X、WIPI-1、Nesprin-2、MAGP-1、酪氨酸酶、桥粒芯蛋白1和3、纤维母细胞生长因子(FGF)、桩蛋白、胶原1、C-反应蛋白(CRP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、去乙酰化酶(SIRT1蛋白)、原纤维蛋白-1(filbrillin-1)、PPAR(例如，α、γ等)受体、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)、脂联素、环氧酶-2(COX-2)酶、金属硫蛋白、赖氨酰基氧化酶样-1(LOXL1)、β-1-整合素、细胞因子(例如，I-CAM、IFN-γ、IL1-β、IL12、IL6、IL8、IL2、IP10、TNF-α、TNFr2等)组胺(例如，H1、H2等人)、脂肪隔(例如，受体无孢蛋白(receptorasporin)、双糖链蛋白聚糖、核心蛋白聚糖、皮连蛋白、纤维调节素、纤连蛋白、半乳凝素-1、层粘连蛋白β2、光蛋白聚糖、MAGP-4、mimecan(骨甘氨酸)、巢蛋白-1、巢蛋白-2、或prolargin)、DICKKOPF-1、桩蛋白、成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)、α-2-肾上腺素受体、β-肾上腺素受体、磷酸二酯酶、腺苷酸环化酶激活剂、丝氨酸蛋白酶(例如，胰蛋白酶抑制剂、中性白细胞弹性蛋白酶等)、基质金属蛋白酶(例如，白明胶酶B)、果糖胺-3-激酶(FN3K或FN3K Rp)、蛋白裂解酶MT/SP1、单胺氧化酶B(MAOB)、生长因子(例如，bFGF、PDGF、VEGF等)、人体组织激肽释放酶(KLK，例如，KLK-5)、钙调磷酸酶等。
在一些实施例中，第一或第二组合物包含C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)。在一些实施例中，第一或第二组合物包含类视黄醇(例如，视黄醇或视黄醇棕榈酸酯)。在一些实施例中，第一或第二组合物包含C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)，并且另一个组合物包含类视黄醇(例如，视黄醇)。
在一些实施方式中，第一或第二组合物包含C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)，并且另一个组合物包含类视黄醇(例如，视黄醇)。将第一和第二组合物以连续、顺序、轮流和/或交替方式施用。通常，交替处理在它们之间没有间隔的情况下进行，使得一个在另一个结束之后的那天开始。通常，第一时间段将为从约一天至约一个月(或从3-20天或从5-10天)，并且第二时间段将从约一天至约一个月(或从3-20天或从5-10天)。组合物能以任何顺序施用(例如，植醇处理期，随后是视黄醇处理期，或视黄醇处理期，随后是植醇处理期)，并且该方法可以重复任何另外的次数(例如，一次、两次、三次等)，以实现与所述第一和第二组合物的任何数量的交替处理，并且理想地持续足够长以实现皮肤健康和/或外观的可见改进(例如，皱纹或细纹的数量和/或深度的减少)。在一些实施方式中，处理继续持续至少4周、至少8周、至少12周、或更长时间。
在一方面，提供了用于减少衰老皮肤病学迹象(例如，细纹和/或皱纹和/或变薄的皮肤和/或减少不想要的色素沉着和色素沉着过多和/或下垂皮肤等)和/或用于改进人皮肤健康(例如，改进屏障功能等)的方法，该方法包括以下步骤：(1)向对这种处理有需要的皮肤区域局部施用有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的包含C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)的组合物，持续第一时间段(例如，1-31天、或3-20天、或5-10天、或7天)；并且此后(2)向相同皮肤区域局部施用有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的包含类视黄醇(例如，视黄醇)的组合物持续第二时间段(例如，1-31天、或3-20天、或5-10天、或7天等)。步骤能以任一顺序进行。通常，这两个时间段在连续天结束并开始，使得不存在没有处理的调整日。然而，在一些实施方式中，在两个处理期之间可能存在预定数量的调整日(例如，一天、两天、三天等)。该方法可以进一步包括重复步骤(1)和(2)持续另外的一次、两次、三次、四次或更多次，理想地直到注意到皮肤健康的改进和/或衰老的皮肤病学迹象的减少为止。该方法可以长期地或无限期地进行，以用于持续的处理和/或预防。在一些实施方式中，该方法用于减少皱纹和/或细纹的出现，包括减少这种皱纹和/或细纹的数量，减少这种皱纹和/或细纹的深度，或防止这种皱纹和/或细纹的发展或进展。在一些实施方式中，该方法用于减少皮肤中不想要的色素沉着，包括但不限于减少老年斑、雀斑、太阳斑等，或用于减少皮肤斑驳的外观和/或用于使肤色均匀。
在另一方面，提供了用于减少衰老皮肤病学迹象(例如，处理皱纹和/或细纹，和/或处理皮肤下垂/改进弹性和/或使肤色均匀和/或减少不想要的色素沉着)的方法，该方法包括以下步骤：(1)向对其有需要的皮肤区域局部施用有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的包含植醇的组合物持续第一时间段(例如，例如，1-31天、或3-20天、或5-10天、或7天等)；并且向相同皮肤区域局部施用有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的包含视黄醇的组合物持续第二时间段(例如，例如，1-31天、或3-20天、或5-10天、或7天等)，并且(3)重复步骤(1)和(2)至少另外一次(例如，两次、三次、四次或更多次)(或重复指导注意到改进)。步骤(1)和(2)能以任何顺序开始进行，并且在步骤(3)中以相同的顺序重复。这两个时间段可以在连续天结束并开始，使得不存在没有处理的调整日，或者在两个处理期之间可能存在预定数量的调整日(例如，一天、两天、三天等)。该方法可以进行至少一周、二周、四周、八周、或十二周或更长时间，直到看到益处，包括用于维持和/或预防的长期或无限期持续的处理。
在本发明的一方面，提供了一种用于减少人皮肤衰老的皮肤病学迹象的方法，该方法包括以任何顺序进行如下步骤：(1)向对其有需要的皮肤区域(例如，脸部、颈部、胸部、手部等)至少每天一次(例如，每天晚上或早上一次)局部施用第一皮肤处理组合物(在生理上相容的媒介物(例如，按重量计包括从0.01％-10％乳化剂的水包油乳液)中包含有效量(例如，按重量计0.01％至约1％)的类视黄醇(例如，视黄醇))，持续第一时间段，包括从1至31天(例如，从2-15天，或持续七天)；(2)实施第二处理模式，持续第二时间段，包括从1至31天(例如，从2-15天，或持续七天)；和(3)重复步骤(1)和(2)足够次数以减少所述皮肤衰老的皮肤病学迹象(例如，处理皱纹和/或细纹和/或减少不想要的色素沉着的外观)(例如，四次或更多次)。在一个实施方式中，第二处理模式包括：向所述相同的皮肤区域至少每天一次(例如，每天晚上或早上一次)局部施用与所述第一皮肤处理组合物不同的第二皮肤处理组合物(例如，该第二皮肤处理组合物不包含有效量的类视黄醇如视黄醇)，并且该第二皮肤处理组合物可以在生理上相容的媒介物(例如，包括按重量计从0.01％-10％的乳化剂的水包油乳液)中包含一种或多种皮肤活性剂，包括但不限于α-羟基酸(例如乙醇酸、乳酸、柠檬酸等)和/或抗氧化剂(例如，抗坏血酸、β-胡萝卜素、己基间苯二酚、生育酚及其衍生物(包括乙酸酯)、植醇、植烷酸、和硫代二丙酸及其二烷基酯(包括二月桂基酯))，像例如按重量计从约0.01％至约10％的植醇、按重量计从约0.01％至约10％的乙醇酸、和/或按重量计从约0.01％至约10％的硫代二丙酸或其酯(例如二月桂基酯)。通常，在根据本实施例的方法的实践中，第一和第二时间段是连续的，使得一个在另一个的最后一天之后的那天开始，并且在一个特定实施方式中，第一和第二时间段都是七天。
通常，该方法重复持续足以改进皮肤的健康和/或实现减少皮肤衰老迹象的所期望的益处(例如，减少皱纹和/或细纹的数量或严重程度，减少下垂/改进弹性，增厚变薄的皮肤，和/或使肤色更均匀，和/或减少不想要的色素沉着等)的一段时间。这可能需要至少每天一次局部施用，持续至少一周、至少两周、至少四周、或至少八周或更长时间。在一些实施例中，将组合物直接施用于皮肤的特定部位(即，直接施用于皱纹、定向色素沉着过多的斑点、眼睛下等)。在一些实施例中，第一和/或第二组合物将以从约0.001至约100mg/cm2，更典型地从约0.01至约20mg/cm2，或从约0.1至约10mg/cm2的量施用于皮肤。
在本发明的又另一方面，提供了一种试剂盒，该试剂盒包括：(i)第一组合物，该第一组合物包含局部可接受的媒介物(例如乳液，凝胶、或精华液)和有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的类视黄醇(例如，视黄醇或其酯，如乙酸酯、丙酸酯、棕榈酸酯等，视黄醛，视黄酸等)；和(ii)第二组合物，该第二组合物包含局部可接受的媒介物(例如乳液，凝胶、或精华液)和有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％)的皮肤活性物质，如抗氧化剂、α-羟基酸、植物成分等，包括例如植醇和/或TDPA(或其二烷基酯)和/或乙醇酸，和(iii)用于以任何顺序以交替方式局部施用所述第一和第二组合物的书面说明书，使得第一组合物至少每天一次施用，持续第一时间段，并且所述第二组合物至少每天一次施用，持续第二时间段。说明书可以进一步表明，交替处理在它们之间没有间隔的情况下进行，使得一个在另一个结束之后那天开始，或者可以在一个处理期结束和下一个处理期开始之间提供预定的间隔(例如，一天，一周等)。说明书可以表明，第一时间段将从约一天至约一个月(或从3-20天或从5-10天或7天)，并且第二时间段将从约一天至约一个月(或从3-20天或从5-10天或7天)。说明书还可以表明组合物能以任何顺序施用(例如，第一处理期，随后是第二处理期，或可替代地，第二处理期，随后是第一处理期)。说明书可以表明可能会重复处理。说明书可以指定用所述第一和第二组合物进行任意数量的交替处理(例如，一个、两个、三个、四个、或更多个)。说明书可以表明处理应该进行足够长的时间以实现皮肤健康和/或外观的明显改进(例如减少皱纹或细纹的数量和/或深度，减少不想要的色素沉着等)。在一些实施方式中，说明书表明处理继续持续至少4周、至少8周、至少12周、或更长时间。书面说明书可以包含在容器、相关包装、或网站上。在说明书在网站上的情况下，容器或包装将包括访问网站的书面说明书(包括例如QR码等)。第一和第二组合物可以彼此物理地分离，例如在分开的容器中，或在同一容器内的分开的储器内。第一和第二组合物各自能以对应于处理的相同预定数量(例如，相当的剂量数量)的量提供。第一组合物和第二组合物各自可以包含在对应于单个剂量的多个容器中。第一组合物和第二组合物各自可以包含在带有每种组合物的使用期间的书面说明书的容器中。第一和/或第二组合物可进一步包括防晒剂。
在本发明的又另一方面，提供了一种包含容器的护肤产品，该容器包括：包含第一皮肤处理组合物的第一储器和包含与所述第一皮肤处理组合物不同的第二皮肤处理组合物的第二储器，与该第一储器流体连通用于分配所述第一皮肤处理组合物的第一泵，以及与该第二储器流体连通用于分配所述第二皮肤处理组合物的第二泵，其中每个泵任选地被一个可拆卸盖覆盖。容器可以是呈细长圆柱体的形状，并具有设置在其相反两端上的第一泵和第二泵。第一和第二储器可以彼此分离，或可以彼此不分离。容器可以包括(例如，在其可见表面上或附着于其上的标签上)用于区分第一和第二储器的可见标识符。在一个实施例中，标识符可以包括字母数字符号(例如，标识一个储器/组成的数字或字母以及标识另一储器/组成的不同的数字或字母)。在另一个实施例中，标识符可以包括可见标识符，如不同颜色、图案、插图、图片等(例如，标识一个储器/组成的一种颜色和标识另一储器/组成的不同颜色)。还可以使用字母数字标识符和其他视觉标识符的组合。在另一个实施例中，标识符包括除了字母数字符号之外的符号。该产品通常包括在标签、包装、相关网站等上的书面说明书，用于向对其有需要的皮肤区域(例如，至少每天一次)局部施用一定量的所述第一皮肤处理组合物持续第一时间段，包括从1-31天或从2-15天或7天，随后向所述皮肤区域(例如，至少每天一次)局部施用所述第二皮肤处理组合物持续第二时间段，包括从1-31天或从2-15天或7天。在一些实施方式中，第一组合物可以包括局部可接受的媒介物(例如，具有按重量计0.01％-10％乳化剂的水包油乳液)和有效量(例如，按重量计从约0.00％1-5％或0.05％-1％)的类视黄醇(如视黄醇或其酯，如乙酸酯、丙酸酯、棕榈酸酯等，视黄醛，视黄酸等)，通常为视黄醇；和(ii)第二组合物，其包括局部可接受的媒介物(例如，具有按重量计0.01％-10％乳化剂的水包油乳液)和有效量(例如，按重量计从约0.001％-5％或0.05％-1％)的皮肤活性物质，如抗氧化剂、α-羟基酸、植物成分等，包括例如植醇和/或TDPA(或其二烷基酯)和/或乙醇酸。当以10s-1的剪切速率在25℃下测量时，第一和第二皮肤处理组合物可以例如各自具有在约10,000cps和250,000cps之间的粘度(例如，在25,000cps和150,000cps之间，或在50,000和100,000cps之间)，并且可以具有从触觉、气味、颜色、或其他视觉特质和/或冷却或加热的感知中选择的相似或不同的属性。在一些实施方式中，所述第二组合物的粘度在所述第一组合物的粘度的±50％或±40％或±30％或±20％或±10％或±5％之内。在一些实施例中，产品将包括指示一周中的每一天的可见标识符，例如，在附着于容器上的标签上所打印的。例如，产品可以具有贴在容器上的标签，并且标签可以具有印刷在其上的字母，如“M T W TH F SA SU”，以标识一周中的每一天。该产品可以设有贴纸，供用户放置在开始处理方案的周标签的适当的那天，作为提醒在每周特定的那天在第一和第二处理组合物之间进行交替。在相关方面，提供了一种系统，包括：包装的护肤产品和用于通过网络(例如，蜂窝网络、无线网络、有线网络、因特网、卫星网络等)发送通知的服务器，针对所述第一或第二皮肤处理组合物哪一种局部施用于所述皮肤对该包装的产品的用户进行指示。可以每天发送通知，或者可以在所述第一时间段期间至少一天，以及在所述第二时间段期间至少一天，例如在下一个处理模式开始之前发送通知。服务器还可以被配置为从用户的计算机接收处理方案的开始日期。系统还可以包括远离服务器的用户计算机(例如，智能电话等)，用于通过网络向服务器发送开始日期，以及通过网络从服务器接收通知。
参照下述详细说明和所附实施例，将更好地理解本发明的这些及其他方面。
附图简述
图1是在用(i)单独植醇(■)，或(ii)单独视黄醇(▲)持续16天处理皮肤细胞中，作为处理时间的函数的前胶原I的量的图。从图1可以看出，随着时间的推移，视黄醇和植醇均达到稳定时期。
图2是在用(i)单独植醇持续16天，(ii)单独视黄醇持续16天，(iii)单独视黄醇持续6天，随后单独植醇持续10天，(iv)单独植醇持续6天，随后单独视黄醇持续10天处理的细胞，连同(v)不处理的对照细胞中前胶原I生产的图。
图3是显示可能的轮流方案的本发明的一个实施例的样品日历。
图4和图5是本发明的包装实施例的实例。
图6是用于向用户通知根据本发明的产品的方法和系统的流程图，指出在特定的一天应该使用两种处理组合物中的哪一种。
图7和图8是在单个容器中具有两个彼此不可分离并且各自装有不同护肤组合物的两个储器的本发明的另一个包装实施例的实例。
图9-11是本发明的包装实施例的截面图，其示出了每个泵的操作，使用第一泵从第一储器分配第一化妆品组合物(图10)，并且使用第二泵从第二储器分配第二化妆品组合物(图11)。
图12A和12B示出了本发明的实施例，其中两个组合物被包含在单个容器中的分开的储器中，其中该容器用标识每个储器的字母数字符号标记(在这种情况下，是“1”和“2”)。图12A还具有指示在容器外部上可见的一周中每一天的标识符。图12B示出了图12A的实施例的变体，其中在处理方案开始的那周的那天放置了圆形贴纸。(在这种情况下，是星期一或“M”)。容器外部的包装或标签可以具有不同的颜色或图案或其他可见图像，以通过不同的影线标记标识图12A和12B中所示的储器14和16。
图13是当暴露于(A)水培三药香料藤提取物的十天处理，(B)烟酰胺的十天处理，(A+B)三药香料藤和烟酰胺的十天处理，(B/A)三药香料藤的五天处理，随后烟酰胺的五天处理，和(B/A)烟酰胺的五天处理，随后三药香料藤的五天处理时，在人真皮成纤维细胞中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图14是当暴露于(1)视黄醇的十天处理(“A”)，(2)鞘蕊花属的十天处理(“B”)，(3)视黄醇和鞘蕊花属的十天处理(“A+B”)，(4)视黄醇的五天处理，随后是鞘蕊花属的五天处理(“A/B”)，和(5)鞘蕊花属的五天处理，随后是视黄醇的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图15是当暴露于(1)烟酰胺的十天处理(“A”)，(2)乙醇酸的十天处理(“B”)，(3)烟酰胺和乙醇酸的十天处理(“A+B”)，(4)烟酰胺的五天处理，随后是乙醇酸的五天处理(“A/B”)，和(5)乙醇酸的五天处理，随后是烟酰胺的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图16是当暴露于(1)KTFK的十天处理(“A”)，(2)水培三药香料藤提取物的十天处理(“B”)，(3)KTFK和三药香料藤的十天处理(“A+B”)，(4)KTFK的五天处理，随后是三药香料藤的五天处理(“A/B”)，和(5)三药香料藤的五天处理，随后是KTFK的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。
图17是当暴露于(1)乙醇酸的十天处理(“A”)，(2)水培三药香料藤提取物的十天处理(“B”)，(3)乙醇酸和三药香料藤的十天处理(“A+B”)，(4)三药香料藤的五天处理，随后是乙醇酸的五天处理(“A/B”)，和(5)乙醇酸的五天处理，随后是三药香料藤的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图18是当暴露于(1)乙醇酸的十天处理(“A”)，(2)水培三药香料藤提取物的十天处理(“B”)，(3)乙醇酸和三药香料藤的十天处理(“A+B”)，(4)乙醇酸的五天处理，随后是三药香料藤的五天处理(“A/B”)，和(5)乙醇酸的五天处理，随后是三药香料藤的五天处理(“B/A”)时，在全层3D模型中产生的透明质酸的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图19是当暴露于(1)视黄醇的十天处理(“A”)，(2)毛喉鞘蕊花(Coleus forskohlii)的十天处理(“B”)，(3)视黄醇和毛喉鞘蕊花的十天处理(“A+B”)，和(4)毛喉鞘蕊花的五天处理，随后是视黄醇的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的I型前胶原的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
图20是当暴露于(1)植醇的十天处理(“A”)，(2)视黄醇的十天处理(“B”)，(3)植醇的五天处理，随后是视黄醇的五天处理(“A/B”)，和(4)视黄醇的五天处理，随后是植醇的五天处理(“B/A”)时，在人真皮成纤维细胞中产生的I型前胶原的量与对照相比百分比变化的图。标有“*”的列表示统计显著性。
发明详细描述
在此披露了本发明的详细实施例；然而，应当理解，所披露的实施例仅仅是能以各种形式实施的本发明的说明。此外，所给出的与本发明各种实施例相关的每个实例旨在是说明性的，而不是限制性的。因此，在此披露的特定结构和功能细节不应被解释为限制性的，而是仅作为教导本领域技术人员以不同方式应用本发明的代表性基础。
在此给出的所有百分数均是指特定组分相对于整个组合物(包括媒介物)的重量百分数，除非另有说明。应当理解，组合物中各组分的所有重量％的总和不超过100％。除非另有说明，任何成分(包括活性和非活性成分)能以按组合物的重量计从约0.0001％-50％或从0.001％-20％或从0.01％-10％或从0.1％-5％的量包含在该组合物中。
除非另有规定，在此中使用的所有术语旨在具有其普通含义。短语“生理上可接受的”或“生理上相容的”与“化妆品上可接受的”、“局部可接受的”和“皮肤病学上可接受的”可互换使用，并且旨在意指特定组分以所使用的水平施用于人类体被(例如皮肤)时通常被认为是安全和无毒的。
如在此所使用的术语“预防”包括延缓或减缓特定皮肤衰老迹象的发生或进展。
短语“对其有需要的个体”是指可以从改进的皮肤外观或健康中获益的人(包括男性或女性)。在一些实施例中，对其有需要的个体是女性。
术语“皮肤”包括但不限于嘴唇、脸部、手、手臂、颈部、头皮和胸部的皮肤。如在此所使用的，如从本说明书的阅读可以理解的，术语“基本上由...组成”旨在将本发明限制在指定的材料或步骤以及不会实质上影响要求保护的发明的基本和新特征的那些。
除非另有说明，具有某些活性的特定活性剂的鉴定并不是限制性的，并且不排除相同试剂具有另外的活性。例如，TDPA在此被列为“抗氧化剂”，但是也已知其是强效的皮肤增亮剂。同样地，己基间苯二酚在此也被鉴定为是“抗氧化剂”，但是也已知其具有抗微生物、防腐和麻醉活性，并且被认为是皮肤增亮剂。
对活性剂的“C2-20酯”的提及将被理解为包括由主题活性剂上的具有羧酸基团的C2-20烃醇形成的酯或由主题活性剂上的具有醇基团的C2-20烃羧酸形成的酯。同样地，活性剂的“C2-20酰胺”将被理解为包括由主题活性剂上的具有羧酸基团的C2-20烃胺形成的酰胺或由主题活性剂上的具有与胺基团的C2-20烃羧酸形成的酰胺。C2-20酯和酰胺包括但不限于C2-6酯和酰胺、C7-11酯和酰胺、以及C12-20酯和酰胺。烃可以是脂肪族的、芳香族的或部分芳香族的和脂肪族的。烃可以是饱和的，或包含一个或多个不饱和(例如，烯族的)键。在一些实施例中，C2-20酯或酰胺可以是乙酰基、丙基、月桂基、棕榈酸酯、棕榈酰的C2-20酯或酰胺等。在一些实施例中，“C2-20酯或酰胺”包括直链脂肪族C16烃。本发明包括在此所述的具有可衍生羟基或羧酸官能团的所有活性剂的所有C2-20酯的用途。本发明还包括在此所述的具有可衍生(即，反应性的)氨基或羧酸官能团的所有活性剂的所有C2-20酰胺的用途。
本发明还包括在此鉴定的任何活性物质的生理上可接受的盐(例如酸加成盐，羧酸盐等)。根据本发明可以使用的化合物的盐可以选自碱金属或碱土金属盐或选自锌、镁或锶盐、有机胺的盐或季铵盐。根据本发明的化合物的盐可以选自矿物或有机酸的盐，特别是盐酸盐、氢溴酸盐或柠檬酸盐。
在本发明的一些实施例中，提供了至少两种单独的组合物，每种组合物关于至少一种活性成分的特性或量而不同。活性剂(“护肤活性物质”)通常将分散或溶解在生理上可接受的载体(或稀释剂或媒介物)中。在各种实施例中，本发明的局部用组合物(包括第一和/或第二等)中任一种可包含有效量的以下各项之一：
类视黄醇，包括视黄醇及其C2-36酯(例如乙酸酯，棕榈酸酯)；
抗坏血酸及其盐和C2-36酯(例如棕榈酸酯、四己基癸基C2-36酯等)
生育酚及其C2-36酯(例如，生育酚乙酸酯)；
乙醇酸及其盐(例如，乙醇酸钠或乙醇酸铵)或C2-36酯；
乳酸及其盐(乳酸钠或乳酸铵)或C2-36酯(例如，肉豆蔻基C2-36酯)；
己基间苯二酚；
烟酰胺；
硫代二丙酸及其盐和C2-36酯(例如，单月桂基和双月桂基C2-36酯)；
植醇及其C2-36酯；
肽(例如，水解小麦面筋，水解大米蛋白，四肽-4等)
棕榈酰寡肽(例如棕榈酰四肽，棕榈酰五肽等)
棕榈酰赖氨酰氨基戊酰赖氨酸(KavaK)；
神经酰胺(例如神经酰胺-2)；
L-4-噻唑基丙氨酸；
顺式-6-壬烯醇；
N-乙酰基氨基酸(例如，N-乙酰基酪氨酰胺)；
甲磺酰氧基苄基异丁基苯磺酰胺；
肉桂酰胺苄基哌啶基乙氧基丙基苯甲酰胺；
咖啡因；
透明质酸和盐(例如，透明质酸钠)和
水杨酸及其衍生物(例如，C2-36酯)。
在一些实施例中，本发明的任何组合物(例如，第一，第二等)可以包括以下各项中的一种或多种：乙酰基六肽-3、乙酰基三氟甲基苯基缬氨酰-甘氨酸、乙酰基酪氨酰胺、腺苷、尿囊素、全反式视黄酸、α硫辛酸、α-异甲基紫罗酮、氨基酸(精氨酸、谷氨酸、甘氨酸、赖氨酸等)、乙醇酸铵、芹黄素、阿拉伯半乳聚糖、抗坏血酸、抗坏血酸葡糖苷、抗坏血酸棕榈酸酯、天冬氨酸、虾青素、去端肽胶原、甘菊环烃、β-葡聚糖、生物黄酮素、生物糖胶-1、生物素、丁苯基甲基丙醛、咖啡因、泛酰巯基乙胺磺酸钙、泛酸钙、肉毒碱、肌肽、神经酰胺-2、氯苯甘醚、肉桂酰胺苄基哌啶基乙氧基丙基苯甲酰胺、顺式-6-壬烯醇、柠檬醛、香茅醇、胶质铂、铜胜肽、香豆素、黄豆苷元、DHT(双氢睾酮或5α-双氢睾酮)、硫代二丙酸二月桂酯、二甲基乙醇胺(DMEA)、硬脂酰谷氨酸二钠、二噻茂烷-3-戊酸、鞣花酸、丁子香酚、乙酸金合欢酯、阿魏酸和衍生物(阿魏酸乙酯、阿魏酸钠等)、非那雄胺、半乳糖阿拉伯聚糖、γ-氨基丁酸(GABA)、金雀异黄素、香叶醇、葡萄糖胺、谷氨酸、谷胱甘肽、野大豆油、乙醇酸、己脒定、六胜肽-2、己基间苯二酚、HGH释放剂、透明质酸(HA)和盐、水解大米蛋白、水解大豆蛋白、水解小麦谷蛋白、水解小麦蛋白、氢醌、羟乙基哌嗪乙烷磺酸、羟异己基3-环己烯羧乙醛、6-羟基-2,5,7,四甲基色满-2-羧酸、艾地苯醌、异丁香酚、拉坦前列素、柠檬烯、芳樟醇、赖氨酸羧甲基半胱氨酸盐、四肽(例如，Lys-Thr-Phe-Lys)、赖氨酰氨基戊酰赖氨酸、磷酸抗坏血酸酯镁、孔雀石(抗氧化剂提取物)、甲氧基苄基异丁基苯磺酰胺、米诺地尔、N-羟基丁二酰亚胺、烟酰胺、壬烯醇、谷维素、氧代噻唑烷羧酸、棕榈酰赖氨酰氨基戊酰赖氨酸(Kavak)、棕榈酰寡肽、棕榈酰五肽(五胜肽)、棕榈酰五肽-3、棕榈酰五肽-4、棕榈酰四肽、棕榈酰四肽-7、棕榈酰四肽-10、泛醇、泛双硫醇三乙酸酯、季戊四醇四-二-叔丁基羟基氢化肉桂酸酯、根皮素、植醇、植物甾醇、毕赤酵母蛋白胨滤液、多酚抗氧化剂、蜂胶、碧萝芷、盐酸吡哆醇、槲皮素、白藜芦醇、视黄醛、视黄酸、视黄醇、棕榈酸视黄酯、蜂王浆、芦丁、糖异构体、水杨酸、水杨酰植物鞘氨醇、软骨素硫酸钠、透明质酸钠、土壤矿物、鞘脂、鞘氨醇、糖胺、超氧化物歧化酶、抗坏血酸四己基癸基酯、四肽-4、噻唑基丙氨酸、硫代二丙酸、生育酚、育酚乙酸酯、维甲酸、三噁十一烷二酸、泛醌(Co Q10)、维生素A、维生素B3、维生素E(生育酚)、西门木炔酸、锌、和硫氧吡啶锌。
在一些实施例中，一种组合物包含在人体组织中形成的C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)。在一些实施例中，一种组合物包含类视黄醇(例如，维生素A、视黄醇、乙酸视黄酯、视黄基丙酸酯、视黄基棕榈酸酯、维A酸、视黄酸、视黄醛等)。
在一些实施例中，第一和第二组合物将关于至少一种活性组分的存在或量而不同。然而，在一些实施例中，第一和第二组合物可以包括相同量的活性剂，其条件是它们之间存在其他差异(例如，另一种活性剂的身份或量的差异)。
在一些实施例中，至少一种组合物(例如，第一组合物)可以包括视黄醇(或酯)，并且第二组合物可以不含或基本上不含视黄醇(或酯)，这意味着它包括少于有效量的视黄醇，或者包括一定量的视黄醇(或酯)，该量多于或少于第一组合物中所含量。
两种不同的组合物形成两种不同处理模式的基础，执行每种处理模式持续一段有限的时间段，通常是预定的时间段，此后执行其他处理持续有限的、典型地是预定的时间段。该过程可重复任意次数，以改进人皮肤的健康和外观，同时理想地克服或减少随着护肤活性物质(包括类视黄醇和/或植醇)处理发展的致敏或耐受现象的影响。该方法也能以类似的方式用三种、四种、五种、六种、或七种(或更多种)不同的组合物来实施。
不希望受到任何理论的束缚，据信根据本发明的一些实施例的方法通过激活类视黄醇X受体(RXR)、过氧化物增殖物激活受体(PPAR)和/或视黄酸受体RAR提供多种皮肤护理益处。激活这些受体和应答基因刺激了皮肤多种组分(如表皮、真皮、皮脂腺、黑素细胞、朗格汉斯细胞、和毛囊)中的细胞功能，而交替施用可以使皮肤复敏。在一些实施例中，在人体组织中形成的活性剂，包括类视黄醇(例如，视黄醇)和C20-C25萜醇(例如，植醇)或其代谢产物(例如，植烷酸)共享至少一种共同作用机制，包括但不限于在RXR、PPAR和/或RAR处的活性。
植醇及其衍生物(例如，C1-20醚和酯)属于可称为C20-C25萜醇的化合物类别。本发明的植醇衍生物可以符合WO 2001/066080和美国专利号7,960,437中提供的结构式，其披露内容通过引用结合在此。植烷酸也被认为是有用的植醇衍生物。合适的植醇衍生物包括但不限于来自将植醇用C1-20羧酸酯化的C1-20烃酯，或来自将植烷酸用C1-20烃醇酯化的C1-20烃酯。本发明涵盖了植醇以及植醇衍生物(酯，醚等)、植醇前体、和植醇代谢产物(包括植烷酸)的用途。植醇的代谢前体是通过存在于人体组织，特别是皮肤中的酶的作用可以形成植醇的化合物。植醇的代谢产物是通过人体组织，特别是皮肤中存在的酶对植醇上的作用形成的化合物。
在一些实施例中，本发明的组合物将包括植醇，例如基于组合物的总重量，其量为按重量计约0.001(wt％)至约10wt％。通常，基于组合物的总重量，植醇能以约0.01wt％至约5wt％，并且最通常约0.1wt％至约1wt％的量存在。
术语“类视黄醇”包括：(1)视黄醇；(2)视黄醇与1至24个碳原子的羧酸的酯，如乙酸视黄酯、丙酸视黄酯、丁酸视黄酯、辛酸视黄酯、月桂酸视黄基酯、棕榈酸视黄酯、油酸视黄酯、亚油酸视黄酯等；(3)具有α-羟基羧酸的视黄醇的酯；(4)视黄醇的醚衍生物，包括C1-24烷基醚，衍生自乙醇酸的醚，以及乙醇酸酯和酰胺，如视黄基乙醇酰醚；(5)视黄醛；(6)视黄酸；(7)视黄酸与1至24个碳原子的醇的酯；(8)异维甲酸以及合成的类视黄醇模拟物，以及前述的衍生物，连同与RAR受体结合的其他物质；(9)上述类视黄醇的顺式和反式异构体；(10)上述类视黄醇的盐；和(11)前述化合物中任一项的混合物。用于根据本发明的组合物的优选类视黄醇是视黄醇，包括视黄醇的顺式或反式异构体，通常为反式异构体。
在一些实施例中，基于组合物的总重量，本发明的组合物可以包括约0.001wt％至约10wt％的类视黄醇(例如，视黄醇)。通常，基于组合物的总重量，类视黄醇(例如，视黄醇)以约0.01wt％至约5wt％，或约0.1wt％至约2.5wt％的量存在。在不脱离本发明的情况下，可以基于类视黄醇的效力来调整类视黄醇的量。
本发明提供了当局部施用于人类体被(皮肤、嘴唇、指甲、头发等)，特别是皮肤时，如脸部的皮肤，改进和/或支持皮肤健康和/或改进皮肤病衰老的一种或多种迹象的外观的方法。在一些实施例中，至少两种单独的组合物(其中一种组合物具有抗氧化剂，如C20-C25萜醇(例如，植醇)，并且另一种组合物具有不同的护肤活性物质，如类视黄醇(例如，视黄醇))以顺序、轮流、或交替的方式局部施用于相同的皮肤区域。
两种或更多种处理模式通常包括：(1)局部施用(典型地，至少每天一次)包含第一活性成分的第一组合物，持续第一时间段，和(2)局部施用(典型地，至少每天一次)包含第二活性成分的第二组合物，持续第二时间段，和(3)任选地重复步骤(1)和(2)一次或多次。第一和第二组合物可以包含彼此不同的，或以不同的量存在的至少一种活性成分。在一些实施例中，该第一组合物包含植醇。在一些实施例中，该第二组合物包含植醇。在一些实施例中，该第一组合物包含视黄醇。在一些实施例中，该第二组合物包含视黄醇。在一些实施例中，该第一组合物包含植醇，并且该第二组合物不包含植醇或包括比第一组合物更少量的植醇。在一些实施例中，该第一组合物包含视黄醇，并且该第二组合物不包含视黄醇或包括比第一组合物更少量的视黄醇。在一些实施例中，该第二组合物包含植醇，并且该第一组合物不包含植醇或包括比第二组合物更少量的植醇。在一些实施例中，该第二组合物包含视黄醇，并且该第一组合物不包含视黄醇或包括比第二组合物更少量的视黄醇。
在一些实施例中，将第一组合物局部施用于皮肤，至少每天一次(例如，每天一次、两次或三次等)，持续从约1-31天(或从1-5天)的时间段、或从约3-20天、或从约5-10天，或持续约一周。在一些实施例中，将第二组合物局部施用于相同皮肤区域，至少每天一次(例如，每天一次、两次或三次等)，持续从约1-31天(或从1-5天)的时间段、或从约3-20天、或从约5-10天，或持续约一周。在一些实施例中，用第二组合物进行的处理将在第一时间段结束之后的预定时间后开始，包括在第二天或在二天、三天或更多天后(例如，五天或一周之后)，在此期间，个体可以任选地不接受处理，或者可以接受不同于用第一和第二组合物的处理。在一些实施例中，用第一组合物进行的处理将在第二时间段结束之后的预定时间后开始，包括在第二天或在二天、三天或更多天后(例如，一周之后)，在此期间，个体可以任选地不接受处理，或者可以接受不同于用第一和第二组合物的处理。在一些实施例中，用第二组合物进行的处理将在第一时间段结束后的那一天开始。在一些实施例中，用第一组合物进行的处理将在第二时间段结束后的那一天开始。在各种实施例中，处理方案将包括以下各项：AB、ABA、ABAB、ABABA、或ABABAB等。在各种实施例中，处理方案将包括以下各项：BA、BAB、BABA、BABAB、BABABA等，其中“A”表示用第一组合物进行的第一处理期，“B”表示用第二组合物进行的第二处理期。处理可以持续，直到观察到皮肤受益，或可以进行更长时间。处理方案可以表示为(AB)n+1或(BA)n+1，其中“n”是指示该方法重复的次数的整数。例如，“n”可以是1、2、3等，高达100或更高。现在参考图3，示出了可能的第一处理期“A”和第二处理期“B”的时间表。在本实施例中，处理期“A”为7天长，并且处理期“B”为7天长。在另一个实施例中，处理期“A”为5天长，并且处理期“B”为2天长。
在本发明的一些实施例中，还可以按照第一和第二处理模式顺序使用第三种处理模式，如局部施用包括不同于所述第一和第二组合物的活性剂的组合物。根据上述标准，第三组合物可以至少每天一次施用，持续第三个时间段。在各种实施例中，处理方案将包括以下各项：ABC、ABCA、ABCAB、ABCABC等及其全部排列，其中“A”表示用第一处理模式进行的第一处理期，“B”表示用第二处理模式进行的第二处理期，“C”表示用第三处理模式进行的第三处理方案。对于可以采用的处理模式的数量，或使用这些处理模式的顺序的组合/排列，基本上没有限制。例如，处理可以包括两种、三种、四种、五种、六种、七种或更多种不同的处理，其中每种处理通常每天至少使用一次，持续从1-31天。
在一些实施例中，本发明的任何组合物可以包括用于处理人皮肤的任何活性物质。在一些实施例中，本发明的任何组合物可以不含本发明另一种组合物中存在的用于处理人皮肤的任何活性物质。在一些实施例中，组合物中任一种可以包括(或可以不含)选自以下的活性成分：乙醇酸(及其盐)、硫代二丙酸(TDPA)或其酯(例如，单月桂基和双月桂基醇酯)、己基间苯二酚、烟酰胺、或来自以下属植物的植物提取物：鳢肠属(Eclipta)(例如，鳢肠(Eclipta prostrata))、马齿苋属(例如，大花马齿苋(Portulaca grandiflora))、香料藤属(例如，三药香料藤)或蜜茱萸属(例如，蜜茱萸(Melicope hayesii)和/或Melicope ellyarana)等。在一些实施例中，该活性成分将激活类视黄醇X受体(RXR)、过氧化物增殖物激活受体(PPAR)和/或视黄酸受体RAR。在一些实施例中，该活性成分将不激活类视黄醇X受体(RXR)、过氧化物增殖物激活受体(PPAR)和/或视黄酸受体RAR。
在一些实施例中，本发明的组合物(例如，第一和/或第二组合物等)将包括生物提取物。提取物可以是植物、酵母、真菌等的提取物。提取物可以来自植物的根部和/或空中(arial)部分，包括但不限于茎、枝、树皮、叶、花、种子、根、果实、根茎、藤等。其他生物材料，如蜂蜜也可能是有用的。提取物包括研磨或粉碎的植物材料，连同发酵物、裂解物、和分离物。在不限制本发明的情况下，来自以下各项的提取物被认为是有用的：
印度冷杉(Abies pindrow)、Abrus fruticulosus、磨盘草(Abutilon indicum)、阿萨伊(Acai)、儿茶(Acacia catechu)、银荆(Acacia dealbata)、黑木相思(Acacia melanoxylon)、银白槭(Acer Saccharinum)、糖槭(Acer Saccharum(糖枫(Sugar Maple)))、嗜酸的(acidopholus)、七叶树属(aesculus)、欧洲七叶树种子(Aesculus hippocastanum(马栗树(horse chestnut))种子)、非洲豆蔻(Aframomum melegueata)、伞菌属(agaricus)、龙舌兰属(agave)、龙牙草属(agrimonia)、藻类(algae)、泽泻(Alisma orientale)、软枝黄蝉(Allamanda cathartica)、扁桃(almond)、芦荟(aloe)、库拉索芦荟全叶原汁(Aloe barbadensis leaf juice)、大高良姜叶(Alpinia galanga leaf)、细砂豆蔻(Amomum melegueta)、钟苞魔芋(Amorphophallus campanulatus(根茎/根(rhizome/root)))、凤梨果实(Ananas sativus菠萝(pineapple)果实)、宽叶榆绿木(Anogeissus latifolia)、白花春黄菊(Anthemis nobilis(花))、五月茶(Antidesma bunis)、苹果提取物、杏仁(Apricot kernel)、印度苦楝树(Aradirachta indica)、猴耳环(Archidendron clypearia)、白叶熊果(Arctostaphylos viscida)、摩洛哥坚果(Argania spinosa)、摩洛哥坚果内核(Argania spinosa kernel)、拟南芥(Aribodopsis Thaliana)、山金车花(Arnica flower)、泡叶藻(Ascophyllum Nodosum)、紫萁(Asmunda japonica)、海门冬属(Asparagopsis)、马齿苋滨藜(Atriplex portulacoides)、杨桃(Averrhoa carambola)、印度苦楝树(Azadirachta indica(楝树(Neem)))、落葵(Basella alba)、熊果(bearberry)、熊果提取物(bearberry extract)、铁包金(Berchemia lineata(叶))、甜菜(Beta vulgaris)、二裂酵母发酵裂解液(Bifida Ferment lysate)、桦树皮提取物(birch bark extract)、苦橙花(Bitter orange flower)、黑升麻(black cohosh(总状升麻(Cimicifuga racemosa)))、黑蜜糖(Black honey)、黑茶酵素(Black Tea Ferment)、齿叶乳香树(Boswellia serrata)、芸苔属(brassica)、欧洲油菜(Brassica Napus)、黑面神(Breynia fruticosa)、柴胡根(Bupleurum falcatum root)、紫铆花(Butea frondosa)、胶虫树(Butea monosperma)、乳油木果油(Butyrospermum Parkii Butter)、苏木(Caesalpinia sappan Linn)、Calatropis gigantean、金盏花(Calendula officinalis)、翠菊(Callistephus chinensis)、牛角瓜(Calotropis gigantea)、亚麻荠(Camelina sativa)、油茶叶(Camellia oleifera leaf)、野茶树叶(Camellia sinensis leaf)、依兰(Cananga odorata)、Capsicum amuum、观赏辣椒油树脂(Capsicum frutescens oleoresin)、番木瓜果实(Carica papaya(木瓜(papaya)果实))、胡萝卜(Carrot)、腰果(cashew)、欧洲栗(Castanea sativa)、乌蔹莓(Cayratia japonica)、香柏(cedar)、卡塔芙(Cedrelopsis grevei)、雪松(Cedrus deodara)、青箱(Celosia argentea)、积雪草(Centella asiatica)、长角豆(Ceratonia siliqua(角豆树(carob)))、大花仙人掌花(Cereus grandiflorus(仙人掌)花)、Chalara microspora、黄春菊(chamomile)、德国洋甘菊花(Chamomilla recutita(洋甘菊)花)、栗果(Chestnut seed)、小球藻(Chlorella vulgaris)、角叉菜(Chondrus crispus)、总状升麻根(Cimicifuga racemosa root)、肉桂、管花肉苁蓉(Cistanche tubulosa)、岩蔷薇(Cistus ladaniferus L.)、香茅、酸橙(Citrus aurantium)、酸橙甜果实(Citrus aurantium dulcis(柑橘)果实)、酸橙甜橙皮(Citrus aurantium dulcis peel)、柠檬果实(Citrus Limon(柠檬)果实)、香橼(Citrus Medica Limonum)、柑橘皮(Citrus Reticulata Peel)、白花牡丹(Clerodendron fragrans)、Clerodendron lindleyi、海州繁花(Clerodendrum floribundum)、鳄嘴花(Clinacanthus nutans)、黄花七筋姑(Clintonia borealis)、蝶豆提取物(Clitoria ternatea Linn extract)、丁香花(Clove flower)、红瓜(Coccinia grandis)、虎皮楠木防己(Cocculus glaucescens)、可可椰子果实(Cocos nucifera(椰子)果汁)、咖啡树种子(Coffea arabica(咖啡)种子)、可乐树(cola)、可拉种子(Cola nitida seed)、聚合草(comfrey)、毛喉鞘蕊花(Coleus forskohlii)、山麻树(Commersonia bartramia)、Commiphom、巴西棕榈树蜂蜡(Copernicia cerifera cera)、珊瑚藻(Corallina officinalis)、单子山楂果果实(Crataegus monogyna fruit)、海茴香(Crithmum maritimum)、番红花(crocus flower)、黄瓜果实(Cucumber fruit)、黄瓜果实(Cucumis sativus(黄瓜(cucumber))果实)、姜黄(Curcuma longa)、印尼莪术(Curcuma Xanthorrhiza)、曲序香茅(Cymbopogon flexuosus)、亚香茅(Cymbopogon nardus)、野胡萝卜根(Daucus carota sativa(胡萝卜)根)、神农香菊(Dendranthema indicum)、鱼藤草(Derris scandens)、伊利诺合欢草(Desmanthus illinoensis)、银边桔梗兰(Dianella ensifolia)、Dodonaea petiolaris、车桑子(Dodonaea viscosa)、Duboisa myoporoides、鳢肠(Eclipta prostrata)、火绒草(Edelweiss)、厚壳树(Ehretia acuminate)、余甘果(Emblica officinalis)、英国熏衣草(English lavender)、天然热带植物精华(Eperua falcata bark)、问荆草(Equisetum arvense)、马尾草(Equisetum Arvense(木贼(Horsetail)))、Eremophila mitchelli、Erthrina flabelliformis、刺桐(Erythina indica)、扇形刺桐(Erythrina flabelliformis)、刺桐(Erythrina indica)、丁香花(Eugenia caryophyllus flower)、岗柃(Eurya groffii)、月见草油(Evening primrose oil)、橡苔地衣(Evernia furfuracea)、扁枝衣(Evernia prunastri)、多穗艾森豆树木(Eysenhardtia polistachya(Palo Azul)wood)、欧洲山毛榉(Fagus sylvatica)、胡芦巴籽(fenugreek seed)、Fibraretinum resica Pierre、孟加拉榕(Ficus benghalensis)、榕冠(Ficus coronata)、枞叶(fir needle(银冷杉(Abies alba)))、茴香果实(Foeniculum vulgare(茴香)fruit)、毛喉鞘蕊(forskohlii)、乌梅(Fructus Mume)、天竺葵(Geranium)、银杏(Ginkgo biloba)、Glochidium wallichianum、野大豆(Glycine soja(大豆))、光果甘草(Glycyrrhiza glabra)、扶郎花(Gomphrena globosa Linn)、Goodenia ovata、扁江蓠(Gracilaria textorii)、绿茶(green tea)、多叶奇果菌(Grifola frondosa)、绞股蓝(Gymnostemma pentaphyllum)、白花菜(Gynandropsis gynandra)、巴尔干苣苔(Haberlea rhodopensis)、金缕梅(Hamamelis viginiana)、霍桑(hawthorne)、牛白藤(Hedyotis hedyotidea)、向日葵(Helianthus Annuus)、向日葵籽(Helianthus annuus(葵花)种子)、蜡菊(Helichrysum gymnocephalum)、香蜡菊(Helichrysum odoratissimum)、大尾摇(Heliotropium indicum)、木槿花(hibiscus flower)、洛神花(Hibiscus sabdriffa)、冬青树(holly(冬青属(Ilex)))、蜂蜜(honey)、大麦(Hordeum vulgare)、球兰(Hoya carnosa)、葎草(Humulus japonicus)、啤酒花(Humulus Lupulus)、五爪龙(Humulus scandens)、水解的菜秋葵(Hydrolyzed hibiscus esculentus)、水解的石莼莴苣(Hydrolyzed ulva lactuca)、黄海桐花(Hymenosporum flavum)、贯叶金丝桃(Hypericum performatum)、巴拉圭茶叶(Ilex paraguariensis leaf)、红果冬青(Ilex purpurea Hassk)、Innula racemosa、龙船花(Ixora chinensis)、虎杖(Japanese knotweed)、素方花(Jasminum officinale)、茉莉花提取物(Jasminum sambac extract)、荷荷芭种子(Jojoba seed)、Jugans regia、大果刺柏(Juniperus oxycedrus)、大驳骨丹(Justicia ventricosa)、白昆士亚(Kunzea ambigua)、劳雷尔钟藤(laurel clock vine(Thunbergia laurifloria))、醒目熏衣草(Lavandin)、薰衣草(Lavandula angustifolia(薰衣草(Lavender)))、杂熏衣草(Lavandula hybrida)、平民花葵(Lavatera plebeian)、薰衣草、兵豆种子(Lens esculenta seed)、香菇(Lentinus edodes)、Leptospermum lanigerum、欧亚甘草(Licorice)、川芎(Ligusticum chiangxiong)、川芎灵芝(Ligusticum lucidum)、欧亚甘草、Lonchocarpus capassa、檵木(Loropetalum chinense)、Lycium barbarium(西藏枸杞(tibetan wolfberry))、梨形囊巨藻(Macrocycstis pyrifera)、杜茎山(Maesa japonica)、粗糠柴(Mallotus philippinensis)、苹果果实细胞培养物(Malus domestica fruit cell culture)、曼密苹果蝰蛇(Mammea siamensis)、麦卢卡蜂蜜(Manuka Honey)、马郁兰(Marjoram(叶))、母菊属(Matricarria(花))、Medemia nobilis、紫花苜蓿(Medicago sativa(苜蓿alfalfa))、梅拉柳卡(Melaleuca quinquernervia)、Melicope hayesii、Melicpoe ellyarana、皱叶薄荷(Melissa officinalis)、皱叶薄荷(Melissa officinalis(叶))、睡菜(Menyanthes trifoliata)、含羞草茎皮(Mimosa tenuiflora bark)、牛油果(Mimusops elengi)、诺丽(Morinda citrifolia)、辣木(Moringa oleifera)、翼籽辣木(Moringa pterygosperma)、黑桑(Morus Nigra)、米赫毛霉蘑菇(mucor miehei mushroom)、MycoFusions Coriolus黑玉米生物量、MycoFusions Maitake蜡质裸大麦生物质、金盏银台(Narcissus tarzetta)、Naringi crenulata、夹竹桃(Nerium indicum)、黑种草(Nigella sativa(种子))、欧洲云杉(Norway spruce)、月见草油(Oenothera biennis oil)、油橄榄(Olea europaea(橄榄)(叶))、Olisma orientale提取物(橄榄)、Omolanthes populifolius、盒果藤(Operculina turpethum)、麦冬半夏(Ophiopogon Thunb)。P.E.、橘皮(Orange peel)、甘牛至花(Origanum heracleoticum flower)、墨角兰(Origanum majorana(叶))、Orthosiphon grandiflorus、水稻(Oryzasativa(稻))、蝶豆(Ozothamnus obcordatus)、粉团扇藻(Padina pavonica)、棕榈坚果(palm nut)、红海藻(Palmaria palmata)、人参根(Panax ginseng root)、海百合(Pancratium maritimum)、西番莲(Passiflora edulis(种子))、野西番莲花(Passiflora incarnata flower)、山胡桃(pecan)、香叶天竺葵花(Pelargonium graveolens flower)、沟鹿角菜(Pelvetia canaliculata)、紫苏属(Perilla)、紫苏油(Perilla ocymoides(种子油))、三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、西印度醋栗(Phyllanthus acidus)、余甘子果实(Phyllanthus emblica fruit)、Phyllarthron bojeranum、小酸浆(Physalis minima)、松针(pine needles)、蒌叶(Piper betel)、胡椒(Piper nigrum)、豌豆(Pisum sativum、Pea)、浮游生物、紫花丹(Plumbago indica)、鸡蛋花(Plumeria acuminata)、月下香(Polyanthes tuberosa)、阴阳莲(Polygonum Cuspidatum)、石榴(Pomegranate)、黑杨(Populus nigra)、马齿苋(Portulaca oleracea)、金马齿苋(Portulaca sativa)、五蕊雾水葛(Pouzolzia pentandra)、甜扁桃籽(Prunus amygdalus dulcis(甜杏仁)种子)、杏(Prunus armeniaca(果仁))、补骨脂(Psoralea corylifolia)、半边旗(Pteris semipinnata)、葛根共生体(Pueraria lobata symbiosome)、石榴果实(Punica granatum fruit)、非洲臀果木(Pygeum(李属(Prunus))africanum)、苹果(Pyrus malus)、苹果根(Pyrus malus(苹果(apple))root)、桔梗(Radix platycodonis)、Raphia farinifera、灵芝草(Rhinacanthus nasutus)、美洲红树树皮(Rhizophora mangle Bark)、米糠油(Rice bran oil)、罗马洋甘菊(Roman chamomile)、狗蔷薇果实(Rosa canina fruit)、玫瑰花(Rose flower)、艾菊(Rosemary(叶))、迷迭香(Rosmarinus officinalis)、蜂王浆、Rubis、Rubus ideas(树莓提取物)、皱叶酸模(Rumex crispus)、酿酒酵母、甘蔗(Saccharum officinarum(甘蔗(Sugar Cane)))、黑柳(Salix nigra)、撒尔维亚(Salvia officinalis)、南欧丹参(Salvia Sclarea)、接骨草(Sambucus chinensis)、毛瓣无患子(Sapindus rarak(果实))、海黍子马尾藻(Sargassum muticum)、马唐麸皮油、草莓虎耳草(Saxifraga sarmentosa)、栅列藻属(Scenedesmus)、野甘草(Scoparis dulcis)、黄芩根(Scutellaria baicalensis root)、沙棘(Sea Buckthorn)、卧茎景天(Sedum sarmentosum bunge)、海草、卷柏(Selaginella tamariscina)、Serrisa japonica、刺田菁(Sesbania aculeata)、木田菁(Sesbania grandiflora(花))、赛葵(Siegesbeckia orientalis)、银桦树皮提取物(silver birch bark extract)、水飞蓟(Silybum marianum(果实))、荷荷巴(Simmondsia chinensis)、绒毛槐(Sophora tomentosa)、云杉针叶(spruce needles)、繁缕(Stellaria medica(L.)cry.)、乌蕨(Stenoloma chusana)、圆叶千金藤(Stephania rotunda)、Stephania solid、葵花籽、聚合草(Symphytum officinale)、万寿菊(Tagetes erecta Linn)、毗黎勒(Terminalia bellerica)、锡叶藤(Tetracera asiatica)、可可(Theobroma cacao)、嗜热栖热菌发酵物(Thermus thermophillus ferment)、嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)、崖柏属(Thuja)、桂叶山牵牛(Thunbergia laurifolia)、欧洲椴木(Tilia cordata wood)、宽叶椴树(Tilia platyphyllos)、Tiliacora triandra、番茄糖脂、杂三叶(Trifolium hybridum)、小麦胚芽(Triticum vulgare(小麦)胚芽)、姜黄根(Turmeric root)、黑儿茶(Uncaria gambir)、蔓越橘(Vaccinium macrocarpon(越橘(Cranberry)))、欧洲越橘果实/叶(Vaccinium myrtillus Fruit/Leaf)、夜香牛(Vernonia cinerea)、乌头叶豇豆(Vigna aconitifolia)、葡萄果实(Vitis vinifera(葡萄果实)果实)、地下沃安齐贾(Voandzeia substerranea)、胡桃、睡莲(Water Lily)、柳树(Willow(树皮))、南非醉茄(Withania somniferia)、育亨宾碱(yohimbine)、两面针(Zanthoxylum nitidium)、玉蜀黍仁(Zea mays(玉米)谷粒)、和卡萨蒙纳姜(Zingiber cassumunar Roxb)。
在上述生物/植物提取物列表中，在括号中或以其他方式表示的植物的部分代表非限制性实施例。应当理解，本发明涵盖来自前述植物和生物体的任何部分的提取物。此外，所指出的特定物种也仅仅是某些实施例的代表，并且在每种情况下，本发明包括来自该属内的任何物种的提取物。换句话说，例如，蜜茱萸的披露将被理解为包括来自蜜茱萸的提取物以及来自蜜茱萸属中的任何物种的提取物。
提取物可以通过溶剂提取、蒸汽蒸馏、或本领域已知的任何其他方法制备。在一些实施例中，本发明的至少一种局部用组合物包含通过蒸汽蒸馏前述植物和生物材料(每种被认为是不同的实施例)中任一项所获得的提取物。在一些实施例中，本发明的至少一种局部用组合物包含通过用水(例如，碱性、中性、或酸性)提取前述植物和生物材料(每种被认为是不同的实施例)中任一项所获得的提取物。提取水可进一步包括与水混溶的共溶剂，包括低级醇(例如，C1-6)，如甲醇、乙醇、异丙醇、丙醇、丁醇等(通常为乙醇)。在一些实施例中，本发明的至少一种局部用组合物包含通过用溶剂系统提取前述植物和生物材料(每种被认为是不同的实施例)中任一项所获得的提取物，该溶剂系统包括从约5％-95％(v/v)或10％-90％(v/v)或20-80％(v/v)或40-60％(v/v)水(例如，碱性、中性、或酸性)和约5％-95％(v/v)或10-90％(v/v)或20-80％(v/v)或40-60％(v/v)乙醇。在一些实施例中，本发明的至少一种局部用组合物包含通过用有机溶剂(例如，非极性、极性无质子性、或极性质子性)提取前述植物和生物材料(每种被认为是不同的实施例)中任一项所获得的提取物。合适的溶剂包括己烷和其他C1-12或C5-8烃、低级醇、C2-16醚(例如，乙醚)、C3-12酯(例如，乙酸乙酯)、C2-12(例如，丙酮、丁酮等)、二氧化碳(液体或超临界)等。生物提取物可以在真空或大气压下干燥以除去水和提取溶剂。生物提取物可以通过冻干干燥。生物提取物可以通过活性炭或木炭和/或通过过滤器和/或微过滤器以除去细菌和其他生物材料。
通常，重复本发明的处理方案以持续足以改进皮肤的健康和/或实现减少皮肤衰老迹象的所期望的益处(例如，减少皱纹和/或细纹的数量或严重程度，改进弹性，和/或减少下垂等)的一段时间。这可能需要至少每天一次处理(例如，局部施用组合物)，持续至少一周、或至少两周、或至少四周、或至少八周或更长时间。在一些实施例中，将组合物直接施用于皮肤的特定部位(即，直接到皱纹和/或细纹，眼睛下，疤上等)。在一些实施例中，第一和/或第二和/或第三组合物将以从约0.001至约100mg/cm2，更典型地从约0.01至约20mg/cm2，或从约0.1至约10mg/cm2的量施用于皮肤。
虽然本发明的组合物和方法被认为可用于处理(即，减少、改善、改进、缓解、阻止、减缓、补救和/或消除)衰老(自然衰老、激素衰老、和/或光衰老)的皮肤病学效果和/或环境应激，但它们也适用于处理皮肤的其他皮肤病学条件，包括但不限于过度的或不想要的色素沉着。可以处理身体的许多区域，包括但不限于：脸部、额头、唇部、头皮、颈部、手臂、手、腿、膝盖、脚、胸部、背部、腹股沟、臀部、大腿等。在一些实施例中，将组合物施用于脸部、唇部、胸部、手臂和/或手，特别是脸部。
化妆品上可接受的媒介物或载体可以处于乳液的形式。合适的乳液的非限制性实例包括油包水乳液，水包油乳液，水包硅酮乳液，硅酮包水乳液，水包蜡乳液，水-油-水三重乳液或具有奶油、凝胶或微乳液的外观的类似物。如在此所用的，术语“油”包括硅酮，除非另有说明。乳液可以包括乳化剂，如非离子、阴离子或两性表面活性剂，或胶凝剂，通常以按重量计从约0.001％至约5％的量。
化妆品上可接受的媒介物可以包括水；植物油；矿物油；酯油如棕榈酸辛酯，肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯；醚如二辛醚和二甲基异山梨醇；醇如乙醇和异丙醇；脂肪醇如鲸蜡醇、鲸蜡硬脂醇、硬脂醇和山嵛醇；异链烷烃如异辛烷、异十二烷(IDD)和异十六烷；硅油如环甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷交联聚合物、聚硅氧烷及其衍生物，优选有机改性衍生物，包括PDMS、二甲聚硅氧烷聚多元醇、二甲聚硅氧烷醇和氨基二甲基聚硅氧烷醇；烃油如矿物油、凡士林、异二十烷和聚烯烃，例如(氢化)聚异丁烯；多元醇如丙二醇，甘油，丁二醇，戊二醇，己二醇，辛乙二醇；蜡如蜂蜡、棕榈蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡；或上述的任何组合或混合物。包括精华液的水性媒介物可以包括与水混溶的一种或多种溶剂，包括低级醇，如乙醇、异丙醇等。媒介物可以包括按重量计从约25％至约99.9％的组合物。
在本发明的一个实施例中，组合物中任一中可以包括另外的皮肤活性物质，包括但不限于类视黄醇、植物成分、角质层分离剂、脱屑剂、角质形成细胞增殖增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白酶抑制剂、5-α还原酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗痤疮剂、抗氧化剂和高级糖基化终产物(AGE)抑制剂，仅举几例。这些各种成分的量是化妆品领域中通常使用以达到其预期目的的那些，并且范围通常单独地或总体地按组合物的重量计为从约0.001wt％至约20wt％。这些成分的性质及其量必需与本披露的组合物的功能相一致。
示例性的抗衰老组分包括但不限于：植物成分(例如，胶虫树(Butea frondosa)提取物、三药香料藤(Tiliacora triandra)提取物、马齿苋、Melicope elyarana等)；羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸)，水杨酸和水杨酸烷基酯；去角质剂(例如，乙醇酸、3,6,9-三噁十一烷二酸等)，雌激素合成酶刺激化合物(例如，咖啡因和衍生物)；能够抑制5α-还原酶活性的化合物(例如，亚麻酸、亚油酸、非那雄胺、及其混合物)；和阻隔功能增强剂(例如，神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯等)，仅举几例。
示例性类视黄醇包括但不限于：视黄酸(例如，全反式、或9-顺式、或13-顺式)，及其衍生物，视黄醛，视黄醇(维生素A)及其酯，如棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、和丙酸视黄酯及其盐。可具体提及的是视黄醇。当存在时，通常以如下量包括类视黄醇：按重量计从约0.0001％至约5％，更通常按重量计从约0.01％至约2.5％，或按重量计从约0.1％至约1.0％。根据该实施例的组合物通常将包括抗氧化剂，如抗坏血酸和/或BHT和/或螯合剂如EDTA或其盐(例如，EDTA二钠)。
在另一个实施例中，本发明的局部用组合物还可以包括以下各项中的一种或多种：皮肤渗透增强剂；柔润剂，如肉豆蔻酸异丙酯、凡士林、挥发性或非挥发性硅油(例如，甲基聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷)、酯油、矿物油和脂肪酸酯；保湿剂，如甘油、己二醇或辛乙二醇；皮肤丰满剂，如棕榈酰寡肽、胶原、胶原和/或糖胺聚糖(GAG)增强剂；防晒剂，如阿伏苯宗或甲氧肉桂酸辛酯；去角质剂；和抗氧化剂。
合适的酪氨酸酶抑制剂包括硫代二丙酸；对苯二酚；曲酸；和在本申请别处列出的其他物质。一些皮肤增亮剂或脱色剂作为酪氨酸酶的抑制剂起作用，所述酪氨酸酶是一种在被称为黑素体的细胞器内具有其催化活性结构域的酶。酪氨酸酶将包括酪氨酸在内的酚转化成邻醌，随后将其转化为黑素体内的黑色素。
合适的黑色素抑制剂包括烟酰胺丝氨酸蛋白酶抑制剂；和在本申请别处列出的其他物质。这些可以通过破坏黑素体从黑素细胞向角质形成细胞的转移而起作用。
合适的糖胺聚糖(GAG)增强剂包括例如植醇；萜醇；肽；PPAR调节剂；和/或植物成分；和/或在本申请别处列出的其他物质。糖胺聚糖(GAG)由身体产生，以保持组织中的结构完整性并保持体液平衡。GAG作为表皮细胞之间的天然增湿剂和润滑剂，抑制基质金属蛋白酶(MMP)的产生-由UV暴露或炎症激活的酶导致，其有助于胶原的分解，同时抑制新的胶原形成。局部GAG兴奋剂、GAG补充剂和/或MMP抑制剂可以帮助提供酶平衡的暂时恢复，以减缓或防止基质分解和随后的皱纹形成的开始。
合适的胶原增强剂包括类视黄醇；肽；植物成分；和在本申请别处列出的其他物质。胶原和弹性蛋白是真表皮连接(DEJ)的主要组分，即介导致密层(皮肤的表皮和真皮之间的基底膜区域)和真皮的下面结缔组织之间的紧密接触的专门结构。真表皮连接(DEJ)包括称为网脊(Rete ridge)的互锁手指状突起。表皮细胞从真皮的血管中获得营养素和氧气，因为表皮没有自己的血管。DEJ处的网脊增加了暴露于真皮的表皮的表面积，使得必需的营养素/氧气的摄取更有效，并且两层皮肤可以更强地结合并抵抗机械应激。DEJ随着衰老而变平，使皮肤更脆，并更容易切割。该过程还通过减少与真皮接触的表皮的表面积减少表皮可用的营养素/氧气的量，从而干扰皮肤的正常修复过程。结果，皮肤显示出衰老的迹象，如脆性、纹和皱纹、下垂、暗沉、变色、和色调不均匀、纹理粗糙等。真皮的主要结构成分也是胶原。在整个真皮层中胶原分子束包裹在一起，占皮肤干重的四分之三。前原胶蛋白是胶原的前体分子，在成纤维细胞、成骨细胞等中合成，并在细胞外切割形成胶原。胶原具有很强的拉伸强度，并且与软角蛋白一起负责皮肤的强度和弹性。随着衰老发生，胶原的产生减少，而由于胶原酶的过量生成(即分解胶原的蛋白酶)，加速了降解。胶原缺乏可能导致皮肤强度和弹性的降低，这进而可以导致衰老皮肤的皱纹、下垂和脆性。针对有关胶原的更详细背景，请参阅Lodish,et al.Molecular Cell Biology,W.H.FREEMAN,New York,NY 4.sup.th edition,2000[Lodish等人，分子细胞生物学，W.H.弗里曼出版社，纽约，纽约州，第4增补版，2000]。因此，预期胶原和/或前胶原产生的保留或刺激和/或胶原酶的生产减少将提供更健康和更强的皮肤，从而减少衰老皮肤的皱纹、下垂和脆性。
合适的屏障增强剂包括植醇和神经酰胺，如神经酰胺-2，甘油酯，胆固醇及其酯，α-和ω-羟基脂肪酸及其酯等)；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的抗炎剂包括硫代二丙酸；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的抗脂肪剂(在一个实施例中，细胞内甘油三酸酯抑制剂)包括毛喉鞘蕊花(Coleus forskohlii)；CPT-1调节剂；杏仁提取物；咖啡因；和在本申请别处列出的其他物质。脂肪团是块状不均匀的皮下脂肪，该皮下脂肪倾向于积聚在许多女性的臀部，大腿、和四肢上。它被认为是不好看的，因为它给皮肤下的组织一种“橘皮”或“干酪”样。压缩皮肤，如当坐着或交叉双腿时，产生具有脂肪层凸起和凹陷的“床垫状外观(mattress appearance)”。可以感觉到脂肪结节陷入硬化的结缔组织之内。脂肪团-影响的皮肤的组织学表明脂肪团是由增大的脂肪组织和脆弱皮肤结构和结缔组织隔的组合产生的。过多的脂肪积累增加脂肪细胞的体积，其膨胀进入弱化的真皮以产生表皮表面外观中特征性不规则。许多因素可引起脂肪团，包括例如遗传性、肠道、循环、淋巴、荷尔蒙、和生活方式因素。节食减少脂肪摄入，锻炼增加脂肪代谢并防止脂肪团积累，按摩和水疗刺激淋巴引流可有助于减少脂肪团的外观。尽管如此，这些用于对抗脂肪团或皮下脂肪的手段是有限的，并且仍然需要另外的方法。增大脂肪组织突起到真皮中是造成脂肪团出现的主要原因之一。改进脂肪团的方法之一是刺激脂肪分解并减少脂肪细胞或脂细胞中的脂肪和/或脂质的量。
合适的羟基酸及其衍生物包括乙醇酸钠；氧杂二酸；α-羟基酸；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的类视黄醇及其衍生物包括视黄醇；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的抗氧化剂包括硫代二丙酸；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的维生素包括烟酰胺；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的萜醇包括植醇；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的肽包括K-ava-K；KTFK；正乙酰酪氨酰胺；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的PPAR调节剂包括植醇和本申请其他地方列出的其他物质。
合适的植物成分包括马齿苋；三药香料藤；铁包金；和在本申请别处列出的其他物质。
合适的去角质剂包括例如α-羟基酸，β-羟基酸，氧杂酸，氧杂二酸及其衍生物，如其酯、酸酐及盐。合适的羟基酸包括例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种示例性的去角质剂是乙醇酸。当存在时，可以包含按组合物的重量计从约0.001％至约20％的去角质剂。
可用于本发明组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基官能团的化合物，如抗坏血酸及其衍生物/酯；β-胡萝卜素；儿茶素；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如，阿魏酸乙酯，阿魏酸钠)；没食子酸衍生物(例如，没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸；丹宁酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物，包括生育酚乙酸酯；尿酸；或其任何混合物。其他合适的抗氧化剂是具有还原或非还原形式的一种或多种硫醇官能团(-SH)的那些，如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的，如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他包含硫的无机盐和酸。抗氧化剂可以单独地或总体地占组合物的总重量的从约0.001％至约10％(w/w)，或从约0.01％至约5％(w/w)。
其他添加剂包括：维生素，如生育酚和抗坏血酸；维生素衍生物如抗坏血酸单棕榈酸酯、生育酚乙酸酯和维生素E棕榈酸酯；增稠剂，如羟烷基纤维素、羧甲基纤维素、卡波姆(carbomber)和植物树胶，如黄原胶；胶凝剂，如酯-终止的聚酯酰胺；结构化剂；金属螯合剂如EDTA或其盐；色素；着色剂；和pH调节剂(柠檬酸、乙醇胺、氢氧化钠等)。该组合物可以任选地包括本领域技术人员已知的其他组分，这些组分包括但不限于：成膜剂、增湿剂、矿物质、粘度和/或流变调节剂、抗痤疮剂、驱虫剂、皮肤清凉化合物、皮肤保护剂、润滑剂、香料、防腐剂、稳定剂及其混合物。除了上述之外，本发明的化妆品组合物可以包含用于处理皮肤病症的任何其他化合物。
此外，本披露内容考虑的组合物可以包括通常使用并且本领域技术人员已知的一种或多种相容的化妆品上可接受的辅剂，如着色剂、珍珠、chromalite、云母、颜料、染料、香料、柔润剂、保湿剂、防腐剂、维生素、螯合剂、增稠剂、麻醉剂、抗过敏剂、抗真菌剂、抗微生物剂、其他消炎剂、抗氧化剂、抗菌防腐剂、脱色剂、成膜剂、驱虫剂、药剂、光稳定剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、和植物成分。本披露的局部用组合物还可以包括皮肤渗透增强剂、表面平滑剂、皮肤丰满剂、光扩散剂、去角质促进剂和抗氧化剂。关于这些和其他合适的化妆品成分的细节可以在以下中找到：“国际化妆品成分词典和手册(International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook)”，第十版(2004)，由化妆品、化妆用具和香料协会(CTFA)出版，在第2177-2299页，将其以其全部内容通过引用结合在此。这些不同物质的量是在化妆品或药物领域中常规使用的那些，例如它们可以占组合物总重的从约0.01％至约20％。
可以包括防晒剂以保护皮肤免受紫外线的损害。在本披露的说明性实施例中，防晒剂通过使用单一防晒剂或防晒剂的组合来提供UVA和UVB两者的保护。在本发明组合物中可以使用的防晒剂中有阿伏苯宗、肉桂酸衍生物(如肉桂酸辛基甲氧基酯)、水杨酸辛酯、羟苯甲酮、氰双苯丙烯酸辛酯、二氧化钛、氧化锌、或其任何混合物。防晒剂能以组合物总重的从约1wt％至约30wt％存在。
在一个实施例中，该局部用组合物将具有从1至13的pH范围，其中在从2至12范围内的pH是典型的。在一些实施例中，该组合物具有范围从3.5至7或从7-10.5的pH。在一些实施例中，pH将在3-4、或4-5、或5-6、或6-7、或7-8、或8-9、或9-10、或10-11、或11-12的范围内。可以添加适合的pH调节剂(如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺)以使pH在所期望的范围内。
应当理解，前述任选的活性和非活性成分可以包括在根据本发明的一种或全部组合物中(例如，第一和第二组合物两者)。
本披露的另一个实施例涉及通过使用靶向递送系统，例如脂质体、注射剂、微球体(参见昂格尔(Unger)等人的美国专利号5,770,222)等递送所述组合物，这样使得组分和/或活性成分可以更容易地达到并影响施用区域的皮下层，例如面部或颈部、或皮肤的其他区域。
可以将组合物配制成各种产品形式，例如像洗剂、面霜、精华液、喷雾剂、气雾剂、饼状产品、软膏、精华、凝胶、膏状产品、贴片、笔状产品、小湿纸巾、面膜、棒状产品、泡沫、全效精华(elixir)，浓缩精华(concentrate)等，特别用于局部给予。组合物通常被配制成洗剂、面霜、软膏、或凝胶。第一和第二组合物也可以具有彼此不同的形式。
在本发明的某些实施例中，将组合物局部施用以改进人皮肤的外观和/或健康。人皮肤外观和/或健康的改进可以是皮肤任意特质或特征的改进，包括但不限于：
(a)处理、减轻、和/或预防细纹或皱纹；
(b)减小皮肤孔隙大小；
(c)改进皮肤厚度、饱满度、和/或紧致度；
(d)改进皮肤光滑度、柔软度和/或细嫩度；
(e)改进肤色、光泽度和/或透明度；
(f)改进前胶原、和/或胶原生产；
(g)改进弹性蛋白的维持和重塑；
(h)皮肤纹理的改进和/或促进再纹理化；
(i)改进皮肤屏障修复和/或功能；
(j)改进皮肤轮廓外观；
(k)恢复皮肤光泽和/或亮度；
(l)补充皮肤中必需营养素和/或成分；
(m)改进由于衰老和/或绝经而降低的皮肤外观；
(n)改进皮肤保湿；
(o)增加皮肤弹性和/或回弹性；
(p)处理、减少和/或预防皮肤下垂；
(q)改进皮肤紧致度；及
(r)减少色斑和/或斑驳皮肤；以及
(s)改善由光衍射或反射引起的皮肤光学特性。
在一些实施例中，组合物旨在处理皮肤中皱纹和/或细纹，包括抬头纹，“鱼尾纹”和眼睛或嘴部边缘的皱纹。在一些实施例中，将组合物直接施用于皱纹和/或细纹。处理可以降低给定皮肤区域中皱纹和细纹的严重程度(例如，深度)和/或可以减少给定皮肤区域中皱纹和/或细纹数量。在一些实施例中，组合物旨在处理可能由真皮弹性丧失造成的下垂皮肤。在该实施例中，组合物可以施用于颊部、下颊等的皮肤。
还考虑了本发明的方法是通过将组合物局部施用于对其有需要的个体的薄皮肤，用于处理薄皮肤。“薄皮肤”旨在包括由于自然衰老、绝经或光损伤而变薄的皮肤以及过早变薄的皮肤。在一些实施例中，处理用于男性中的薄皮肤，而其他实施例处理绝经前或绝经后女性中的薄皮肤，因为据信皮肤在男性和女性(并且特别是在不同生活阶段的女性)中随着年龄不同程度地变薄。
本发明的方法可以预防性地用于阻止衰老，包括在未显现出皮肤衰老迹象的个体中，最常见在25岁以下的个体中。一旦显现出，如在25岁以上的个体中常见的，该方法还可以逆转或处理衰老迹象，或用于减缓这些个体的皮肤病衰老进展。
在某些实施例中，在此所述的化妆品组合物可用于处理和/或预防皮肤和/或头发的色素沉着过度，例如使皮肤或毛发增亮。在一些实施例中，将组合物局部施用于皮肤或毛发，例如施用于色素沉着过度的皮肤或毛发的区域。色素沉着过度包括个体的皮肤或毛发的任何着色，其比个体所希望的更暗，并且由黑素细胞引起。这种不想要的色素沉着也可以称为变色。皮肤色素沉着过度区域包括分散或斑驳的色素沉着过度区域。离散的色素沉着过度区域可以是不同的、颜色较深的均匀区域，并且可能在皮肤上显示为褐斑或雀斑，包括通常称为色斑或“老年斑”的痕迹。皮肤斑驳的色素沉着过度区域可以是深色斑点，其在大小上大于分散色素沉着区域并且在形状上比分散色素沉着区域更不规则。色素沉着过度区域还包括晒黑的皮肤区域，例如因暴露于UV而晒黑的皮肤。色素沉着过度毛发包括颜色比期望的深的任意毛发色度。
处理色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤/毛发是指根除、减轻、改善或逆转与色素沉着过度相关的不想要的一个或多个特性，如在受影响区域产生可感觉到的皮肤或毛发增亮。在一个实施例中，在如下方面，增亮皮肤的色素沉着过度区域可能是所希望的：减轻老年斑；增亮晒黑；使肤色均匀或优化肤色，例如在斑驳的色素沉着过度区域中；处理黑斑和黄褐斑斑块、雀斑、烧伤后瘢痕和损伤后色素沉着过度。预防色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤是指向尚未受色素沉着过度影响的皮肤提供使其避免、延迟、预先阻止或最小化与皮肤色素沉着过度相关的一个或多个不想要的特性的益处，如减少最终形成的色素沉着过度的区域的暗色或大小。
在一个实施例中，将本发明的组合物施用于人皮肤以减少皮脂产生或改进受脂肪团影响的皮肤的外观和/或减少不希望的脂肪生成或增加脂肪分解。在本实施例中，萜醇和/或类视黄醇可以在化妆品上可接受的媒介物中配制(如在此所述)，并且可以包括一种或多种另外的试剂，如抗痤疮成分(例如，水杨酸、过氧化苯甲酰和其他过氧化物、硫、类视黄醇等)，在面部组合物的情况下，或在脂肪团处理的情况下，配制品可以包括适用于处理脂肪团的任何成分，包括但不限于毛喉鞘蕊花、紫苏油以及其他不饱和脂肪油和ω-3脂肪酸，如α-亚麻酸；共轭亚油酸(CLA)；咖啡因；茶碱；黄嘌呤；类视黄醇(例如，视黄醇)；表没食子儿茶素没食子酸酯；等。根据本发明的脂肪团处理组合物可以包含有效量的脂肪分解刺激剂、脂肪生成抑制剂、或脂肪形成抑制剂。脂肪团处理可以包含PPAR配体，其可以是任何PPAR同种型(如PPAR-α和/或PPAR-γ)的上调抑制剂。脂肪团处理可以包括CPT-1抑制剂，例如，杨桃的提取物。根据本发明的脂肪团处理通常将局部施用于患有脂肪团的皮肤(包括臀部和大腿皮肤)持续足以改进其外观的时间段，包括，例如每日处理，持续至少4周、至少8周、至少12周或更长时间。在一个实施例中，局部施用组合物以处理痤疮。
在一个实施例中，组合物旨在用作非治疗性处理。在另一个实施例中，根据联邦食品、药品和化妆品法案(US FD&C Act)，§201(i)，该组合物是旨在擦、倒、喷洒或喷雾、引入或以其他方式施用于人体的物品，用于清洁、美化、提高吸引力或改变外观。
在另一个实施例中，考虑了试剂盒和/或周期性或轮流护肤品处理的方法。该试剂盒可以包括：(i)多种局部用组合物中的第一种，其包括生理上可接受的媒介物；(ii)包括生理上可接受的媒介物的多种局部用组合物中的第二局部用组合物，所述第一局部用组合物与所述第二局部用组合物物理分离，和(iii)任选地，以任何顺序以交替方式施用所述第一和第二局部用组合物的书面说明书，使得第一组合物至少每天一次施用，持续从1-31天的第一时间段，并且所述第二组合物至少每天一次施用，持续从1-31天的第二时间段。
在一个实施例中，多个组合物各自作为单一成分包含在单独的容器中，其中多个单配方容器(例如，罐和分配器)被一起销售和/或包装在一起。
在另一个实施例中，多个组合物作为不同的物理层存在于同一容器内(例如，通过层的密度和/或混溶性分离)，其可以包装在罐、分配器和/或其他容器类型中。
在另一个实施例中，多种组合物包含在不同的小袋中，这些小袋本身可以包装在一起和/或一起销售，并且能以线性、呈矩阵、和/或径向排列。
在另一个实施例中，多种组合物包含在不同的吸塑包装(bliser pack)中，这些吸塑包装本身可以包装在一起和一起销售，并且能以线性、呈矩阵、和/或径向排列。
在另一个实施例中，多个组合物包含在相同包装内的不同储器中。
在另一个实施例中，多个储器各自分别包括单剂量的所述第一和第二局部用组合物。
在另一个实施例中，多个储器彼此不可分离。
在另一个实施例中，多个储器分别标记有多个不同的标识符(例如，颜色、符号、光、显示器、QR码等)。
在另一个实施例中，使用标识符(例如，颜色、符号、光、显示器、QR码等)来向用户指示从第一组合物到第二组合物切换使用和/或在给定的处理机会使用哪个组合物。在另一个实施例中，包装包含指示灯，其指示用户是否该用第一组合物或第二组合物。在另一个实施例中，第一和/或第二容器包含指示用户是否该用第一组合物或第二组合物的电子显示器。
在另一个实施例中，书面说明书通过参考多个标识符向用户指示在特定日期使用哪种处理模式。
在另一个实施例中，使用的处理模式的顺序是随机的或任意生成的。
在另一个实施例中，该方法或试剂盒进一步包括日历，该日历标识包括从1-31天的第一时间段，所述第一时间段标记有所述第一标识符，以及标识包括从1-31天的第二时间段，所述第二时间段被标记有所述第二标识符。在另一个实施例中，该方法或试剂盒进一步包括用于通过因特网访问日历的书面说明书(例如，QR码)，其中所述日历根据当天指示用户是否该用第一或第二组合物。在一个实施例中，日历将在每一天具有唯一标识组合物之一的指示符或符号，其可以例如包装在也由相同指示符或符号标识的容器或储器中。
在另一个实施例中，该方法或试剂盒进一步包括用于通过因特网访问数据的书面说明书(例如，QR码)，其中数据(例如，以算法或应用程序的形式，或以文本消息或其他数据通信的形式)向用户提供关于施用哪种处理模式的指令；并且其中数据可以通过智能电话应用程序、网站等访问。
在其他实施例中，提供了包括皮肤护理产品和服务器以及可选地远离服务器的计算机的系统。皮肤护理产品可以如在此所述，并且可以例如具有在相同的包装或容器内的不同储器中分离的两种不同的皮肤处理组合物(可以从所述包装或容器独立地分配)；并且具有用于区分所述皮肤处理组合物的指示符。服务器通常被配置为通过计算机网络从所述皮肤护理产品的用户接收皮肤处理方案开始的日期，并且被配置为通过计算机网络向所述用户在多个不同的日子发送多个通知，指示用户将所述第一或第二皮肤处理组合物中的哪一种局部施用于所述皮肤。皮肤护理产品可以进一步包括能够标识所述皮肤处理组合物的标识符(例如，字母数字代码、条形码、QR码等)，并且该服务器可以被配置为从用户接收除了开始日期之外的所述的标识符。基于标识符，服务器可以使用关于特定产品中的第一和第二组合物的信息和所述开始日期来计算所述第一和第二组合物的处理方案。例如，服务器可以指示基于标识符使用特定值持续第一时间段并且使用特定值持续第二时间段。服务器可以被配置为在多个不同的天通过计算机网络向所述用户发送多个通知，指示用户将第一或第二皮肤处理组合物中的哪一种局部施用于所述皮肤，其基于用户输入开始日期和第一和第二时间段的预定持续时间。该系统可以进一步包括远离服务器的计算机(例如，手机、电话、智能电话、平板电脑、可佩戴装置、手表、寻呼机、计算机、笔记本电脑等)，在用户的控制下，用于将开始日期发送到所述服务器并用于接收多个通知。
现在参考图6，流程图说明了方法和系统，其中用户，例如，经计算机(例如，智能电话、笔记本电脑、台式电脑等)发送开始日期，并且所述服务器在步骤100接收所述开始日期。发送和接收可以经网络，如因特网、无线网络、陆上通信线、卫星等发生。基于开始日期，服务器在步骤200使用预定的第一时间段(通常为从1-31天，或2-15天，或7天)确定第一处理模式的时间表。这可能需要将第一个时间段加到开始日期。该用户将在该第一段时间期间从该产品中施用第一组合物。在第一处理时间期间，服务器可以通知(例如，通过文本消息、电子邮件、社交媒体帖子、电话等)用户一次或多次(例如，每天)应在那天施用第一组合物。可替代地，服务器只有当是时候将处理改为第二种组合物时才通知用户，例如，在步骤300的第一处理期结束之前或结束时。服务器可以基于预定的或用户提供的输入的第一处理时间段，使用开始日期以确定第一处理方案的结束日期。例如，第一处理期可以是七天，其可以是在所述服务器上的预定指令，或者可以是由用户输入或选择的。在第一处理模式的结束日期之前，服务器可以再次基于在步骤400预定输入的或基于用户提供的输入的第二处理方案的所期望持续时间，来计算第二处理模式的开始和结束日期。这可能需要将第一时间段和第二时间段加到开始日期，或将第二时间段加到步骤200中所确定的值(即，第一处理时间表的结束)。服务器可以在第二处理方案结束之前或者结束时通知用户在步骤500的某一日期开始第一处理方案。服务器可以重复步骤200-500持续任何迭代次数，典型地超过四次。迭代次数基于预先确定的输入或基于用户提供的输入。在第二次或任何更多次的迭代中，服务器可以基于开始日期、第一和第二时间段的长度、以及迭代次数来重复步骤200-500。可替代地，服务器可以在任何先前的第一或第二时段期间发送任何第一或第二处理模式的通知。
在另一个实施例中，用户可以例如使用智能电话的照相机扫描或成像其经处理的体被，并将扫描或图像发送到服务器。服务器可以被配置为从互联网数据或应用程序产生关于进一步处理的定制指令，并且通过网络将这些指令发送到用户的计算机。
在另一个实施例中，第一和第二组合物包含在单个容器内的分开的储器中，其中该容器具有与包含第一组合物的储器流体连通以分散所述第一组合物的第一泵和与包含第二组合物的储器流体连通以分散所述第二组合物的第二泵，每个泵任选地设置在所述容器的相反两端上，并且每个泵任选地被一个可拆卸盖覆盖，使得用户从一端移除盖子，同时握住覆盖另一端的盖子。
现在参考图7和8，说明了一种包括容器12的护肤产品10，该容器12包括：包含第一皮肤处理组合物60的第一储器14和包含与所述第一皮肤处理组合物不同的第二皮肤处理组合物62的第二储器16，与该第一储器14流体连通用于分配所述第一皮肤处理组合物的第一泵26，以及与该第二储器16流体连通用于分配所述第二皮肤处理组合物的第二泵22。第一和第二泵可以相同或不同。用于个人护理品或化妆品的任何合适的泵被认为是合适的。图7示出了区分为第一组合物60和第二组合物62的储器14和16的内部内容的视图。参考图9-11，示出了产品10的截面图。如图所示，在该实施例中，泵送机构20和22包括管子21和23，用于从每个储器输送液体组合物并将其通过孔口26和28进行分配。弹簧25和27根据众所周知的设计驱动泵。挡板40将第一储器与第二储器分开。挡板40可以是与容器12一体的，使得两个储器不能彼此分离。可拆卸盖30和32在容器的每个相应的端部附接并且当置于容器上时覆盖泵20和22。参考图12A和12B，示出了护肤产品的实施例，其中容器的外部或其附着其上的标签带有区分第一和第二储器的字母数字指示符“1”和“2”。根据本实施例的产品，可以包括指示一周中的每一天的可见标识符50，例如，在附着于容器上的标签上所打印的。在图12B中，该产品具有由用户将其贴在处理方案开始的那周的适当的那天(例如，周一或“M”)上的圆形贴纸55，作为提醒在每周该特定的一天在第一和第二处理组合物之间进行交替。
在另一个实施例中，多个组合物可以包含在单个容器内的多个分开的储器中，其中该容器包含与包含第一组合物的储器流体连通以分散所述第一组合物的泵和与包含第二组合物的储器流体连通以分散所述第二组合物的泵，其中这些泵形成多侧肘节机构(例如，肘节泵)，使得肘节机构驱动以递送第一组合物将引导驱动机构以任选地递送第二组合物，同时防止肘节机构驱动以递送第一或任何其他组合物，直到驱动所引导的肘节以递送第二组合物。
在另一个实施例中，可以使用多个一次性的，任选地可再填充的小容器，每个小容器包括含有单位剂量的局部用组合物的储器和用于分配所述组合物的分配器，其中所述小容器中的至少一个包含第一局部用组合物并且所述小容器中的至少一个含有第二局部用组合物；其中多个小容器可直接地或间接地彼此可拆卸地附接，并且可以在分配其中包含的局部用组合物之前与所述多个小容器单独地分离。
在另一个实施例中，含有所述第一局部用组合物的小容器在视觉上与含有所述第二局部用组合物的小容器不同。
在另一个实施例中，分配器包括易破碎的塞子，该塞子被配置为当破裂时在所述小容器中暴露孔口。
在另一个实施例中，第一和第二组合物包含在单个容器内的分开的储器中，其中至少一种组合物处于透明凝胶形式，并且所述容器的壁的至少一部分是透明或半透明的，使得第一和/或第二组合物通过所述容器壁的所述部分可见，并且其中该容器具有用于说明所述透明凝胶组合物以指示何时应施加该组合物的指示符。
在另一个实施例中，多个组合物被包含在单个容器内的分开的储器中，并且其中旋转分配器被构造成根据旋转分配器的旋转程度通过公共开口分配第一组合物或第二组合物。
在另一个实施例中，使用试剂盒或方法，其包括：(i)一种或多种组合物，包括生理学上可接受的载体和有效量的护肤活性成分；(ii)至少一个装置，用于向皮肤赋予机械或电磁能量，和(iii)书面说明书，用于指示以任何顺序局部施用所述第一局部用组合物持续第一时间段并使用所述装置在相同皮肤区上域持续第二时间段，并且重复一次或多次。该装置可以发光；照射；递送无线电频率；递送热；递送电流；递送冷；提亮；去角质；赋予吸力；充氧；或以其他方式将适合的现象施加于皮肤。
实例
以下实例说明了本说明书的特定方面。该实例不应被视为起限定作用，因为该实例仅提供对实施例及其不同方面的特定理解和实施。在使用三药香料藤植物提取物的以下实例中的每个中，从水培生长的三药香料藤制备提取物，并用80/20(v/v)乙醇/水溶剂进行提取。
实例1
将人真皮成纤维细胞在补充有10％胎牛血清(FBS)和L-谷氨酰胺(1.5x 105个细胞/板)的DMEM培养基(可从康宁公司(Corning)，纽约州获得)的6孔板中生长过夜。在达到约75％细胞融合后，将细胞转移到没有FBS的DMEM培养基中，并孵育4-6小时。接下来，用0.0001％植醇或1μM视黄醇处理细胞。用单独的植醇或单独的视黄醇在没有FBS的DMEM培养基中进行处理持续16天。对于顺序处理，将细胞用0.0001％植醇处理持续6天，随后是用1μM视黄醇持续10天，或用1μM视黄醇持续6天，随后是用0.0001％植醇持续10天。每隔一天收集培养基，并以相同的方式用植醇或视黄醇重新处理细胞。处理后，使用HTRF人前原胶蛋白I试剂盒(可得自CISBIO公司)确定分泌到培养基中的胶原的量。
结果示于图1-2中。图1描绘了用单独的植醇或视黄醇处理的细胞中前原胶蛋白的水平。尽管持续处理，第13天后，针对植醇和视黄醇处理的细胞，前原胶蛋白产生都下降了。图2显示了未处理(“对照”)细胞、植醇处理的细胞、视黄醇处理的细胞、以及首先用视黄醇随后用植醇处理的细胞，以及首先用植醇随后用视黄醇处理的细胞的胶原产生。显而易见，与用单一活性物质处理的细胞相比，以顺序方式处理的细胞显示出增加的胶原产生。
实例2
轮流方案的临床疗效证实如下。
招募具有轻度至中度细纹和皱纹的受试者(年龄范围：24-59)用于研究。受试者被分配到两组：小室1接受包括如下的处理方案：局部施用α-羟基酸(AHA)配制品，每天一次，持续一周，随后局部施用视黄醇配制品至相同的脸部皮肤区域，每天一次，持续一周。这些处理以轮流方式持续总计12周。小室2中的受试者仅接受局部视黄醇处理每天一次，持续完整12周。所有受试者进行了两周预处理，在此期间他们没有接受AHA或视黄醇疗法。所有受试者在调节期间和整个12周试验期间每天施用防晒霜至脸部。
在本研究中使用的α-羟基酸(AHA)，例如，乙醇酸、和视黄醇配制品在下表1中给出。
表1.
在基线处和4、8、和12周之后，由皮肤科医师对施用区域进行评估并打分。
结果概述于下表2中。
表2.
*优于视黄醇处理的统计学上显著的(p≤0.05)改进(小室2)。
如表2所示，早在研究开始后的四周就注意到了与基线相比的改进，其中肤色、透明度、和分散色素沉着的减少都有明显的改进。在十二周为止，与视黄醇处理组(小室1)相比，发现轮流处理组(小室2)的细纹外观的统计学上显著降低。该结果令人惊讶，因为轮流组(小室1)接受了视黄醇组所接受的视黄醇总剂量的一半，并且AHA疗法通常不被认为能够实现如视黄醇那样的皱纹/细纹减少的量级。
实例3-10
人真皮成纤维细胞中的透明质酸(HA)评估
进行了一系列实验以评估活性成分的处理方案对人真皮成纤维细胞(HDF)中透明质酸(HA)的产生的影响。评估以下五种处理方案：(1)单独的活性成分A；(2)单独的活性成分B；(3)活性成分A+B的组合；(4)单独的活性成分A，随后是单独的活性成分B(“A/B”)；以及(5)单独的活性成分B，随后是单独的活性成分A(“B/A”)。针对处理方案(1)、(2)、和(3)，将活性成分给予至细胞持续连续10天。针对处理方案(4)和(5)(顺序方案)，将细胞用活性成分A或活性成分B处理持续5天，随后分别用活性成分B或活性成分A处理持续5天。
将人真皮成纤维细胞在补充有10％FBS和L-谷氨酰胺的DMEM培养基(可从康宁公司(Corning)，纽约州获得)的96孔板中生长。在达到约75％细胞融合后，将细胞转移到没有FBS的DMEM培养基中，并孵育4-6小时。将不同的孔分配到如上所述的处理方案(1)-(5)中的一个中，其中给每个处理方案分配六个孔(即，n＝6)。将所有活性成分制备成乳液并直接施用于HDF细胞。五种处理方案中的每一种中使用的具体活性成分在下表3中给出。处理后，收集细胞，并使用市售的HA测定(可从CORGENIX公司，科罗拉多州获得)测量从这些细胞分泌的透明质酸(HA)的量。
表3.
实例 活性物质A [A] 活性物质B [B] 3 三药香料藤 0.10％ 烟酰胺 0.10％ 4 视黄醇 1μM 毛喉鞘蕊花 0.001％ 5 乙醇酸 1mM 烟酰胺 0.1％ 6 KTFK 0.001％ 三药香料藤 0.1％ 7 乙醇酸 1mM 三药香料藤 0.1％ 8 乙醇酸 1mM 四肽4 0.10％ 9 乙醇酸钠 10μM 植醇 0.010％ 10 乙醇酸钠 10μM 视黄醇 1μM
结果概述于下表4中，并在图13-17中绘制为与对照(即，用相同的乳液但在不存在活性成分下处理的细胞)相比的百分比变化。
表4.
如表4和图13-17中所示，某些活性成分的顺序处理在刺激HA生产中是有效的。顺序处理导致实例3-6和10中的超过附加的改进。与当单独或同时使用这些活性成分时相比，实例3-5和10各自显示统计学上显著更多的HA产生。例如，实例3(参见图11)表明，烟酰胺随后三药香料藤提取物的顺序处理比在通过单独的三药香料藤、单独的烟酰胺处理，或同时施用三药香料藤和烟酰胺的情况下导致更高水平的HA产生。
实例11
用于轮流处理方案的全层3D皮肤模型中的HA的测量。
进行了一系列实验以评估乙醇酸和三药香料藤的处理方案对在全层3D皮肤培养物上的透明质酸(HA)产生的影响。评估了五种不同的处理方案：(1)单独的4％乙醇酸；(2)单独的0.2％三药香料藤；(3)4％乙醇酸+0.2％三药香料藤的组合；(4)单独的4％乙醇酸，随后是单独的0.2％三药香料藤；以及(5)单独的0.2％三药香料藤，随后是单独的4％乙醇酸。将乙醇酸局部施用于3D组织，并通过生长培养基施用三药香料藤。针对处理方案(1)、(2)、和(3)，将该一种或多种活性成分施用于细胞持续连续4天。针对处理方案(4)和(5)(顺序方案)，将细胞用乙醇酸或三药香料藤处理持续2天，随后分别用三药香料藤或乙醇酸处理持续2天。
遵循制造商的说明书培养人3D皮肤EFT400FT组织(MatTek公司，马萨诸塞州)。将每个处理方案施用于十二个3D皮肤样品。将不同的3D皮肤样品分配到如上所述的处理方案(1)-(5)中的一个，其中将十二个皮肤组织模型分配给每个处理方案(即，n＝12)。处理后，收集细胞，并使用市售的HA测定(可从CORGENIX公司，科罗拉多州获得)测量从细胞分泌的透明质酸的量。
表5.
结果示于下表5中，并在图18中绘制为与对照(即，用相同的乳液但在不存在活性成分下处理的模式)相比的百分比变化。用乙醇酸随后是三药香料藤提取物进行的顺序处理在刺激HA产生中是有效的。实例11(参见图16)表明，乙醇酸随后是三药香料藤的依次处理与在通过单独任一活性物质处理的情况下相比导致产生统计学上显著更高水平的HA。
实例12-13
人真皮成纤维细胞中的I型前胶原评估
进行了一系列实验以评估表6中所示活性成分的处理方案对人真皮成纤维细胞(HDF)中I型前胶原的产生的影响。评估了五种不同的处理方案：(1)单独的活性成分A；(2)单独的活性成分B；(3)活性成分A+B的组合；(4)单独的活性成分A，随后是单独的活性成分B；以及(5)单独的活性成分B，随后是单独的活性成分A。针对处理方案(1)、(2)、和(3)，将活性成分施用于细胞持续连续10天。针对处理方案(4)和(5)(顺序方案)，将细胞用活性成分A或B处理持续5天，随后分别用另一种活性成分B或A处理持续5天。
将人真皮成纤维细胞在补充有10％FBS和L-谷氨酰胺的DMEM培养基(可从康宁公司(Corning)，纽约州获得)的96孔板中生长。在达到约75％细胞融合后，将细胞转移到没有FBS的DMEM培养基中，并孵育4-6小时。将不同的孔分配到如上所述的处理方案(1)-(5)中的一个中，其中给每个处理方案分配六个孔。将所有活性成分制备成乳液并直接施用于HDF细胞。五种处理方案中的每一种中使用的具体活性成分在下表6中给出。在处理之后，使用市售的I型前胶原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(可从TAKARA公司，KR获得)进行从细胞产生的前胶原的量的测量。
表6.
结果示于下表7中，并在图19-20中绘制为与对照(即，用相同的乳液但在不存在活性成分下处理的细胞)相比的百分比变化。
表7.
如表7所示，与使用单独的视黄醇、单独的毛喉鞘蕊花、或同时施用视黄醇和毛喉鞘蕊花进行的处理相比，毛喉鞘蕊花提取物随后视黄醇在人真皮成纤维细胞中的顺序处理导致I型前胶原的产生的统计学上显著的改进。类似地，显而易见的是，植醇/视黄醇(A/B)和视黄醇/植醇(B/A)对HDF细胞的顺序处理比用任一种活性物质对细胞进行的处理产生统计学上显著更多的I型前胶原。视黄醇/植醇的顺序处理导致实例13中的超过加性的改进。
实例14-16
3D皮肤模型中的黑色素
进行了一系列实验以评估表8中所示活性成分的处理方案对3D模型中黑色素的产生的影响。评估了四种不同的处理方案：(1)单独的活性成分A；(2)单独的活性成分B；(3)活性成分A+B的组合；以及(4)单独的活性成分A，随后是单独的活性成分B，如表8详述。针对处理方案(1)、(2)、和(3)，将活性成分施用于细胞持续连续14天。针对处理方案(4)(顺序方案)，将细胞用活性成分A处理持续7天，随后用另一种活性成分B处理持续7天。
表8.
遵循制造商说明书培养人3D黑皮病MEL-B皮肤组织(可从MatTek，马萨诸塞州获得)。将不同的皮肤组织模型分配到如上所述的处理方案(1)-(4)中的一个中，其中给每个处理方案分配六个模型(即，n＝6)。将所有活性成分制备成乳液并直接施用于皮肤模型。四种处理方案中的每一种中使用的具体活性成分在表8中给出。处理后，收集皮肤组织模型，并使用SOLVABLE黑色素测定测量从细胞产生的黑色素的量。使用磷酸盐缓冲盐水和碳酸氢钠制备经处理的皮肤组织。将每个皮肤组织添加到500μl的0.5M SOLVABLE增溶剂(可得从帕卡德生物科学公司(Packard BioScience)获得)，并在95℃下孵育过夜。在490nm处测量每个皮肤组织样品的吸光度，并将吸光度与标准曲线进行比较，以指示每个皮肤组织模型中产生的黑色素的量和色素沉着。
表9.
测量所产生的黑色素含量的处理的结果示于表9中，为与对照(即，未处理的样品或用相同的乳液但在不存在活性成分下处理的样品)相比的百分比变化。
实例17
人真皮成纤维细胞响应于脉冲式处理方案的透明质酸评估
进行了一系列实验以评估表9中所示的活性成分的不同处理方案对人真皮成纤维细胞(HDF)细胞中透明质酸(HA)的产生的影响。评估两种不同的处理方案：(1)将活性成分A施用于细胞持续连续12天；和(2)将活性成分施用于细胞持续连续2天，随后使用不包含活性成分的培养基持续连续2天，重复直到处理施用了持续连续12天。
将人真皮成纤维细胞在补充有10％FBS和L-谷氨酰胺的DMEM培养基(可从康宁公司(Corning)，纽约州获得)的96孔板中生长。在达到约75％细胞融合后，将细胞转移到没有FBS的DMEM培养基中，并孵育4-6小时。将不同的孔分配到如上所述的处理方案(1)-(2)中的一个中，其中给每个处理方案分配六个孔。将所有活性成分制备成乳液并直接施用于HDF细胞。两种处理方案中的每一种中使用的具体活性成分在下表10中给出。处理后，收集细胞，并使用市售的HA测定(可从CORGENIX公司，科罗拉多州获得)测量从这些细胞分泌的透明质酸(HA)的量。
表10.
结果概述于表10中，作为与对照(即，用相同的乳液但在不存在活性成分下处理的细胞)相比的百分比变化。如表10所示，植醇和视黄醇的脉冲式处理与活性物质对HDF细胞的每天处理方案相比导致显著更多的透明质酸的产生。此外，尽管在整个处理持续时间内，与每天处理相比，在脉冲式处理中使用了一半的活性物质，但是用三药香料藤或乙醇酸进行的脉冲式处理的效力仅比每天处理的效果稍差一些。
由于在不脱离本发明的范围和精神的情况下，可以对上述主题进行各种改变，所以旨在将以上述描述中包含的或所附权利要求中限定的所有主题解释为本发明的描述和说明。根据以上传授内容，本发明的很多修改和变化都是可能的。因此，本说明书旨在包含落在所附权利要求的范围内的所有这样的替代方案、修改和变化。